PAGE --腸道病毒的分類與檢測摘要腸道病毒可引發多種感染，并且發病以綜合癥出現，一種綜合癥可有不同病毒所引起，同一種病毒可以導致不同綜合癥是腸道病毒感染的普遍現象。目前除脊髓灰質炎外，尚無疫苗可供預防，是當前嚴重影響人類健康的重要病原之一。腸道病毒主要經糞一口或呼吸道傳播，所以對腸道病毒感染作出準確、及時的診斷是非常必要的。腸道病毒（Enterovirus）是小RNA病毒科，有67個血清型。人類腸道病毒包括：脊髓灰質炎病毒（Poliovirus）、柯薩奇病毒（Coxsackievirus）、埃可病毒（Echo）、甲型肝炎病毒以及新型病毒。目前常用的檢測腸道病毒的方法有病毒分離培養、血清學鑒定、分子生物學方法，近年來，一些新型方法也使得腸道病毒的檢測快速化與準確化。關鍵詞腸道病毒/診斷/分類1腸道病毒形態特點腸道病毒是球形、無包膜、核衣殼20面體立體對稱。腸病毒屬\o"醫學百科：病毒粒子"病毒粒子在酸性pH下\o"醫學百科：穩定"穩定，在病毒制品中可觀察到空衣殼，有時可觀察到少量（1%）的重顆粒。\o"醫學百科：基因"基因組\o"醫學百科：編碼"編碼單一的VPg蛋白，但不編碼L蛋白。不同腸道病毒及腸道病毒與鼻病毒間整個\o"醫學百科：核苷酸"核苷酸序列一致性大于50%，一種腸道病毒不同株之間整個核苷酸序列的一致性大于75%。病毒主要在腸道\o"醫學百科：細胞"細胞中\o"醫學百科：復制"復制，也能在\o"醫學百科：神經"神經、\o"醫學百科：肌肉"肌肉和其它一些\o"醫學百科：組織"組織中復制。大多數病毒\o"醫學百科：感染"感染無明顯癥狀，病毒感染的臨床癥狀包括輕微\o"醫學百科：腦膜炎"腦膜炎、腦炎、肌炎、\o"醫學百科：心肌炎"心肌炎和\o"醫學百科：結締組織"結締組織炎。耐酸和脂溶劑，不易被胃酸和膽汁滅活，在污水和糞便中活數月。腸道病毒的分類脊髓灰質炎病毒此病癥的典型臨床經過六個階段（\o"醫學百科：潛伏期"潛伏期、前驅期、\o"醫學百科：癱瘓"癱瘓\o"醫學百科：前期"前期、癱瘓期、恢復期和殘留\o"醫學百科：麻痹"麻痹）。\o"醫學百科：感染"感染期間\o"醫學百科：患者"患者表現為低熱及\o"醫學百科：咽痛"咽痛、\o"醫學百科：咳嗽"咳嗽、\o"醫學百科：腹瀉"腹瀉、不安、嗜睡、\o"醫學百科：多汗"多汗、\o"醫學百科：腦膜"腦膜\o"醫學百科：刺激"刺激癥、\o"醫學百科：肌肉"肌肉\o"醫學百科：疼痛"疼痛、\o"醫學百科：皮膚感覺"皮膚感覺過敏，突發急性弛緩性麻痹等癥狀，最后多遺留下終生殘疾。脊髓灰質炎病毒通過患者的糞便或\o"醫學百科：口腔"口腔分泌物傳染。人類是脊髓灰質炎病毒的唯一宿主，長期攜帶\o"醫學百科：病毒"病毒的情況（例如無癥狀，但仍持續排出病毒長達6個月以上）很罕見。服用脊髓灰質炎疫苗（現在我國使用I、II、III型混合糖丸疫苗，是由減毒的脊髓灰質炎病毒制成的）是預防本病的主要措施。消滅脊髓灰質炎最\o"醫學百科：根本"根本的手段是提高人群\o"醫學百科：免疫"免疫水平，\o"醫學百科：斷絕"斷絕脊髓灰質炎野毒株在人群中的\o"醫學百科：傳播"傳播。脊髓灰質炎病毒分為三個血清型；兩種不同抗原：D抗原和C抗原。D（dense，致密）抗原：具有病毒RNA，為完整的病毒顆粒，又稱N（native）抗原；C（coreless，無核心）抗原：不含RNA，是D顆粒經56℃滅活，RNA釋放后形成的無核酸空心衣殼，故又稱H（heated）抗原；不同型別病毒C抗原可發生交叉反應，但D抗原無交叉反應；傳播方式主要是糞-口傳播，所致疾病是脊髓灰質炎。中毒機理：糞－口途徑傳播為主—上呼吸道，咽喉，腸道為侵入門戶—先在局部粘膜和淋巴結中增殖—入血，形成第一次病毒血癥—帶有受體的靶組織（脊髓前角細胞、背根神經節細胞、運動神經細胞等）—在靶細胞中再次增殖后形成第二次病毒血癥及臨床癥狀。檢測方法第一是微生物學檢查，檢測方法：病毒分離檢查：取咽漱液、糞便等樣本，細胞培養出現CPE；血清學診斷：中和試驗；病毒核酸測定。第二是防治:口服減毒活疫苗或者注射滅活疫苗.2.2柯薩奇病毒柯薩奇病毒[2]對乳鼠的敏感性很高，根據它們\o"醫學百科：感染"感染乳鼠產生的病灶，柯薩奇病毒可以分為a、b兩組。a組有23型\o"醫學百科：病毒"病毒，b組有6型病毒。A組病毒：誘發新生乳鼠彌漫性骨胳肌炎，導致馳緩性麻痹。B組病毒：誘發新生乳鼠局灶性骨胳肌炎，導致痙攣性麻痹。通過型特異性\o"醫學百科：抗原"抗原，\o"醫學百科：經中"經中和試驗。Elisa\o"醫學百科：方法"方法等可以對各型進行鑒定。所有的b組及a組的第9型有共同的組特異性抗原，在b組內病毒之間有交叉\o"醫學百科：反應"反應，但是a組病毒沒有共同的組特異性抗原。a組某些型別的型特異性抗原可在37℃引起人類O型\o"醫學百科：紅細胞"紅細胞\o"醫學百科：凝集反應"凝集反應。柯薩奇病毒A型感染潛伏期1-3天，上呼吸道感染，起病急，流涕、咳嗽、咽痛、發燒，全身不適。典型癥狀為皰疹性咽峽炎，即在鼻咽部、會厭、舌和軟腭部出現小皰疹，粘膜紅腫，淋巴濾泡增生、滲出，扁桃體腫大，伴吞咽困難，食欲下降。據調查（R0binson，1958）伴有口咽部皰疹和皮疹的急性熱病中，79%為柯薩克A型病毒所致。檢測方法：1.病人體液（腦脊液、皰疹液、心包液、胸水等）分離出病毒即可確診。）2．恢復期血清出現抗體，或雙份血清抗體效價增高4倍以上。2.3埃可病毒埃可病毒(ECHO)（ECHO-viruses）病毒即腸性細胞致病性人類孤獨型病毒（entericcytopatho-genichumanorphanvirus）。只對人類有感染性，多發于夏、秋季，絕大多數是隱性感染。ECHO病毒分為30多個型（1-34型，其中8、10、28、34型已歸入其他病毒）。各型致病力和致病類型也不同，如ECHO6、19型致病力較強，它類似于柯薩奇病毒B型引起急性胸痛和心肌病。主要經口-糞途徑傳播，也可通過咽喉分泌物排除病毒經呼吸道傳播。病毒進入人體在咽部機腸粘膜細胞增殖后，侵入血流，形成病毒血癥。ECHO病毒感染的臨床表現類似于風疹，第一孕季感染雖可累及胎兒，但很少引起畸形。發病年齡2.5～33歲，常見的癥狀為上呼吸道感染、發燒、非化膿性腦膜炎和皮疹。皮疹為斑丘疹或麻疹樣皮疹，持續1～3天自然消退。可從大便、咽分泌物和腦脊液中分離出病毒。防治：埃可病毒疹尚無特殊療法。皮疹對癥處理。對易感的嬰幼兒可注射丙\o"醫學百科：球蛋白"球蛋白3～6ml，\o"醫學百科：脊髓灰質炎"脊髓灰質炎減毒\o"醫學百科：疫苗"疫苗可干擾本病毒的感染。ECHO-3，4，6，9，11型減毒活疫苗正在研制中。目前尚未有特效治療，主要采用對癥和支持療法。\o"醫學百科：靜脈"靜脈注射\o"醫學百科：人血丙種球蛋白"人血丙種球蛋白對新生兒嚴重感染可能有效，\o"醫學百科：嬰幼兒腹瀉"嬰幼兒腹瀉也有導致脫水及\o"醫學百科：酸中毒"酸中毒的可能，須酌情給予\o"醫學百科：輸液"輸液治療。2.4甲型肝炎病毒臨床上表現為急性起病，主要表現為乏力、食欲減退、及肝功能異常，部分病例可出現黃疸。甲型肝炎病毒主要通過糞口途徑傳播，傳染源多為病人。甲型肝炎的潛伏期為15-45天，病毒常在患者轉氨酸升高前的5-6天就存在與患者的血液和糞便中。發病2-3周后，隨著血清中特異性抗體的產生，血液和糞便的傳染性也隨之消失。從感染者的糞便中排出，通過不同的途徑污染了食物和用具，又經過口侵入人體。這就是甲肝病毒的傳播方式。2.5新型病毒新型病毒指在1969年以后鑒定的除脊髓灰質炎病毒、柯薩奇病毒、埃可病毒以外的幾種小RNA病毒，主要包括68-71共四個血清型。其中68型分離自下呼吸道感染者，69型分離自健康人肛門拭子，70型分離自急性出血性結膜炎患者，71型分離自無菌性腦膜炎患者的糞便和腦脊液。EV70主要引起流行性出血性結膜炎；EV71感染主要引起手足口病，還可引起中樞神經系統和脊髓灰質炎樣麻痹等多種神經系統疾病。3檢測方法3.1病毒分離培養利用組織培養技術從感染部位或傳染源分離出病毒并鑒定其特異性血清型是病毒性疾病診斷的標準。病人標本是最常采集的標本。病毒培養對縮短抗生素治療和住院期有積極作用，但是病毒的分離鑒定繁瑣、費力、耗時，一般一周才能觀察到細胞病理反應，而且許多腸道病毒不能進行細胞培養，或者可以培養但不出現細胞病理效應。3.2血清學鑒定[2]分離病毒和利用組合血清中和試驗是對病毒定型的重要方法。腸道病毒的血清學鑒定中，多選用組合血清。此方法檢測中不適用于早期診斷，可作為回顧性診斷；且由于腸道病毒血清型眾多，臨床使用檢測價值有限，而多為流行病學采用。3.3分子生物學診斷3.3.1P由于各型病毒具有共同基因組序列，也可檢出幾乎所有血清型。PCR檢測材料用量少、快速、靈敏度高且具有特異性，并可通過設計不同的引物進行病毒分型，用于檢測相當寬的腸道病毒血清型。盧亦愚[3]等人發明了用腸道病毒核酸熒光定量RT-PCR檢測試劑盒及檢測方法，靈敏度高，非常適用于如手足口病等有腸道病毒感染引起突發疫情的實驗室早期診斷，該方法具有高特異性。3.3.2核酸雜交技術[4