Q/JFD003—2018ICSG-25備案號：Q/JFD企浙江金帆達生化股份有限公司業標準Q/JFD003—2019草甘膦異丙胺鹽母藥glyphosateisopropylammoniumsalttechnicalconcentrates2019-05-21發布2019-06-01實施替代Q/JFD003—2016前言本標準依據FAO規格284/TC(2000/2001)《N－膦羧基甲基甘氨酸（草甘膦原藥）技術要求》、國家標準GB/T12686《草甘膦原藥》以及HG/T2467.1—2003《農藥原藥產品標準編寫規范》制定。本標準由浙江金帆達生化股份有限公司提出。本標準起草單位：浙江金帆達生化股份有限公司。本標準主要起草人：姜磊。草甘膦異丙胺鹽母藥1范圍本標準規定了草甘膦異丙胺鹽母藥的要求、試驗方法、以及標志、標簽、包裝、儲運、安全和驗收期。本標準適用于由草甘膦異丙胺鹽及其生產過程產生的雜質組成的草甘膦異丙胺鹽母藥。注1：草甘膦及相關雜質其他名稱、結構式和基本物化參數參見附錄A。2規范性引用文件下列文件對于本文件的應用是必不可少的。凡是注日期的引用文件，僅所注日期的版本適用于本文件。凡是不注日期的引用文件，其最新版本（包括所有的修改單）適用于本文件。GB/T601化學試劑標準滴定溶液的制備GB/T602化學試劑雜質測定用標準溶液的制備GB/T685化學試劑甲醛溶液GB/T1600農藥水分測定方法GB/T1601農藥pH值的測定方法GB/T1604商品農藥驗收規則GB/T1605商品農藥采樣方法GB3796農藥包裝通則GB/T6682分析實驗室用水規格及試驗方法GB/T8170數值修約規則與極限數值的表示和判定GB/T12686草甘膦原藥GB/T28136農藥水不溶物測定方法HG/T2467.1—2003《農藥原藥產品標準編寫規范》3要求3.1外觀本品應為穩定的均相液體，無可見的懸浮物和沉淀物。3.2技術指標草甘膦異丙胺鹽母藥還應符合表1要求。4試驗方法安全提示：使用本標準的人員應有實驗室工作的實踐經驗。本標準并未指出所有的安全問題。使用者有責任采取適當的安全和健康措施，并保證符合國家有關法規的規定。4.1一般規定本標準所用試劑和水在沒有注明其他要求時，均指分析純試劑和GB/T6682中規定的三級水。檢驗結果的判定按GB/T8170中的“修約值比較法”進行。4.2抽樣按照GB/T1605中“液體制劑采樣”方法進行。用隨機數表法確定抽樣的包裝件，最終抽樣量應不少于200mL。4.3鑒別試驗高效液相色譜法──本鑒別試驗可與草甘膦含量的測定同時進行。在相同的色譜操作條件下，試樣溶液主峰的保留時間與標樣溶液草甘膦色譜峰的保留時間，其相對差值應在1.5％以內。當用以上方法對有效成分鑒別有疑問時，可采用其他有效方法進行鑒別。4.4草甘膦、草甘膦異丙胺鹽質量分數的測定4.4.1高效液相色譜法（仲裁法）4.4.1.1方法提要試樣用流動相溶解，使用強陰離子交換柱（SAX）和紫外檢測器，以外標法對試樣中的草甘膦進行液相色譜分離和測定。4.4.1.2試劑和溶液甲醇：HPLC級或優級純；磷酸二氫鉀；水：經二次蒸餾；磷酸：85%，試劑級；草甘膦標樣：已知草甘膦質量分數，ω≥99.0%(稱量前在105℃干燥2h)。4.4.1.3儀器和設備高效液相色譜儀：具有可調波長紫外檢測器；色譜數據處理機；色譜柱：250mm×4.6mm（i.d.）強陰離子交換柱（SAX）；微量注射器：100μL；pH計：配有玻璃電極的pH計，用緩沖溶液在pH2.0標定；超聲波清洗器。4.4.1.4高效液相色譜操作條件流動相：溶解0.27g磷酸二氫鉀于970mL水中，加入30mL甲醇，混勻。使用在pH2.0標定過的pH計，用85%磷酸調節溶液pH至1.9。流動相在用之前必須過濾和脫氣；流量：1.5mL/min；柱溫：室溫；檢測波長：195nm；進樣體積：20μL；檢測器靈敏度：滿刻度0.2吸光度；保留時間(min)：草甘膦約5.0min。上述操作參數是典型的，可根據儀器特點對給定操作參數作適當調整，以期獲得最佳效果，典型的草甘膦標樣、草甘膦異丙胺鹽母藥高效液相色譜圖見下圖1、圖2。1──草甘膦。圖1草甘膦標樣高效液相色譜圖1──草甘膦。圖2草甘膦異丙胺鹽母藥高效液相色譜圖4.4.1.5測定步驟4.4.1.5.1標樣溶液的配制稱取草甘膦標樣約0.1g（精確至0.0001g），置于100mL容量瓶中，用流動相溶解并稀釋至刻度，搖勻。4.4.1.5.2試樣溶液的配制稱取約含草甘膦0.1g的試樣（精確至0.0001g），置于100mL容量瓶中，用流動相溶解并稀釋至刻度，搖勻。4.4.1.5.3測定在上述操作條件下，待儀器基線穩定后，連續注入數針標樣溶液，直至相鄰兩針的峰面積變化小于1.2%時，按照標樣溶液、試樣溶液、試樣溶液、標樣溶液的順序進行測定。4.4.1.6計算將測得的兩針試樣溶液以及試樣前后兩針標樣溶液中草甘膦峰面積值分別進行平均。試樣中草甘膦的質量分數ω1，數值以%表示，按式（1）計算：r2×m1×ωω1=——————————(1)r1×m2式中：ω1——草甘膦的質量分數，單位為百分數（%）r1——標樣溶液中草甘膦峰面積的平均值；r2——試樣溶液中草甘膦峰面積的平均值；m1——草甘膦標樣的質量的數值，單位為克（g）；m2——試樣的質量的數值，單位為克（g）；ω——標樣中草甘膦的質量分數的數值，單位為百分數（%）。4.4.1.7允許差兩次平行測定結果之差，應不大于1.0%，取其算術平均值作為測定結果。4.4.2紫外分光光度法4.4.2.1方法提要試樣溶于水后，在酸性介質中與亞硝酸鈉作用生成草甘膦亞硝基衍生物，該化合物在242nm處有最大吸收峰，通過測定吸光度可定量。4.4.2.2試劑和溶液硫酸溶液：φ（H2SO4）=50%；硝酸溶液：φ（HNO3）=50%；溴化鉀溶液：ρ（KBr）=250g/L；亞硝酸鈉溶液：ρ（NaNO2）=14g/L使用時現配；草甘膦標樣：已知草甘膦質量分數，ω≥99.0％(稱量前在105℃干燥2h)。4.4.2.3儀器和設備紫外分光光度計；石英比色皿：1cm；刻度吸量管：1mL，2mL，5mL；容量瓶：100mL，250mL。4.4.2.4測定步驟4.4.2.4.1空白溶液的配制用移液管移取7mL蒸餾水于100mL容量瓶中，依次加入0.5mL硫酸溶液、0.1mL溴化鉀溶液、0.5mL亞硝酸鈉溶液后，應立即將塞子塞緊，充分搖勻。放置20min。然后用水稀釋至刻度，搖勻，最后將塞子打開，放置15min。注1:亞硝基化反應溫度不能低于15℃。4.4.2.4.2標準溶液的配制稱取約0.18g草甘膦標準品（精確至0.0001g）。置于200mL燒杯中，加60mL水，緩緩加熱溶解，冷至室溫，定量轉移至250mL容量瓶中，稀釋至刻度，搖勻。此溶液使用時不得超過20d。用移液管移取2.0mL上述溶液于100mL容量瓶中，依次加入0.5mL硫酸溶液、0.1mL溴化鉀溶液、0.5mL亞硝酸鈉溶液后，應立即將塞子塞緊，充分搖勻。放置20min。然后用水稀釋至刻度，搖勻，最后將塞子打開，放置15min。4.4.2.4.3試樣溶液的配制稱取含草甘膦約0.18g試樣（精確至0.0001g），置于200mL燒杯中。加60mL水溶解，用快速濾紙過濾，仔細沖洗濾紙，將濾液接至250mL容量瓶中，冷至室溫，稀釋至刻度，搖勻。用移液管吸取2.0mL試樣溶液于100mL容量瓶中，依次加入0.5mL硫酸溶液、0.1mL溴化鉀溶液、0.5mL亞硝酸鈉溶液后，應立即將塞子塞緊，充分搖勻。放置20min。然后用水稀釋至刻度，搖勻，最后將塞子打開，放置15min。注2：試樣溶解后如有顏色，需做試樣空白；比色皿用完后用硝酸溶液洗滌4.4.2.5分析結果的計算草甘膦的質量分數ω2，數值以％表示，按式（2）計算：m1×A2×ωω2=────────(2)m2×A1式中：ω2──草甘膦的質量分數的數值，單位為百分數(％)；m1──標準的質量，單位為克（g）；A2──試樣溶液的吸光度；m1──試樣的質量，單位為克(g)；A1──標樣溶液的吸光度；ω──標樣溶液中草甘膦質量分數的數值，單位為百分數(％)。4.4.2.6允許差兩次平行測定結果之差，應不大于0.8％，取其算術平均值作為測定結果。4.4.3草甘膦異丙胺鹽質量分數的計算試樣以草甘膦異丙胺鹽計的質量分數ω3，數值以％表示，按式（3）計算：ω×228.18ω3=──────────(3)169.07式中：ω3──草甘膦異丙胺鹽的質量分數的數值，單位為百分數（％）；ω──試樣中草甘膦質量分數的數值，單位為百分數（％）；228.18──草甘膦異丙胺鹽摩爾質量數；169.07──草甘膦摩爾質量數。4.5異丙胺質量分數的測定4.5.1方法提要試樣用去離子水溶解，使用IonPacSCG1Separator色譜柱對試樣中的陽離子進行分離和測定，外標法定量。4.5.2設備與試劑離子色譜儀：帶有色譜工作站；微孔過濾器：0.22μm；C18型前處理柱：SPE-C18，300mg；甲基磺酸：≥99.5%，進口試劑；異丙胺：分析純，已知質量分數≥99.0%；水：去離子水導電率≥18.2MΩ·cm。4.5.3色譜條件色譜柱：IonPacSCG1Separator（250mm×4mm）；保護柱：RFICIonPacSCG1（50mm×4mm）；淋洗液：3mmol/L甲基磺酸水溶液；進樣量：25μL；柱溫：30℃；流速：1mL/min；保留時間（min）：異丙胺約11.5。典型的異丙胺標樣、草甘膦異丙胺鹽母藥離子色譜圖見圖3、圖4。1──異丙胺。圖3異丙胺標樣離子色譜圖1──異丙胺。圖4草甘膦異丙胺鹽母藥離子色譜圖4.5.44.5.3.4樣品測定4.5.4.1異丙胺離子標樣溶液的制備準確稱取異丙胺0.3g（精確至0.0001g）于250mL容量瓶中，用水溶解稀釋至刻度。移取1mL溶液至100mL容量瓶，此溶液的異丙胺濃度為20mg/L。分析前用0.22μm微孔過濾器過濾。4.5.4.2樣品溶液的制備稱取約0.4g樣品于250mL容量瓶，用去離子水溶解，稀釋至刻度，搖勻。移取1mL上述溶液至100mL容量瓶中，用去離子水稀釋至刻度，搖勻。分析前用C18型前處理柱加0.22μm微孔過濾器過濾。4.5.4.3測定在上述操作條件下，待儀器穩定后，連續注入數針標準溶液。計算各針相對響應值，待相鄰兩針的相對響應值小于1.5%時，按照標樣溶液、試樣溶液、試樣溶液、標樣溶液的順序進行測定。4.5.5計算將測得的兩針試樣溶液以及試樣前后兩針標樣溶液中異丙胺離子峰面積值，分別進行平均。試樣中異丙胺離子的質量分數ω4，數值以％表示，按式（4）計算：r2·m1·ωω4=——————————(4)r1·m2式中：ω4──異丙胺的質量分數，單位為百分數(％)；r1──標樣溶液中，異丙胺離子峰面積的平均值；r2──試樣溶液中，異丙胺離子峰面積的平均值；m1──異丙胺標樣質量的數值，單位為克(g)；m2──試樣質量的數值，單位為克(g)；ω──標樣中異丙胺質量分數的數值，單位為百分數(％)。4.5.6允許差兩次平行測定結果之差，應不大于0.5%，取其算術平均值作為測定結果。4.6甲醛質量分數的測定4.6.1方法提要試樣用水溶解，用乙酸銨和乙酰丙酮顯色，于波長412nm處進行分光光度測定。4.6.2試劑和溶液乙酰丙酮：重蒸餾；乙酸銨；冰乙酸；甲醛溶液：ω(甲醛)=0.37，按GB/T685的規定，測定甲醛溶液的質量分數；乙酰丙酮溶液：將25g乙酸銨，于100mL棕色容量瓶中，加水50mL水溶解，加3mL冰乙酸及0.5mL乙酰丙酮試劑，用水稀釋至刻度，搖勻；甲醛標準溶液：約10μg/mL。稱取約2.7g甲醛溶液（精確至0.0002g）,用水稀釋至1000mL，搖勻。用移液管移取10mL上述溶液，用水稀釋至1000mL，搖勻。4.6.3儀器和設備分光光度計；水浴；玻璃比色皿：1cm；具塞玻璃瓶：50mL。4.6.4測定步驟4.6.4.1標準曲線的繪制4.6.4.1.1空白溶液的配制用移液管依次吸取20mL水、4.0mL乙酰丙酮溶液于具塞玻璃瓶中，放入（40～60）℃的恒溫水浴中恒溫30min，取出冷卻至室溫，搖勻。4.6.4.1.2標準溶液的配制用移液管吸取1mL、2mL、5mL、10mL、20mL甲醛標準溶液分別置于5個100mL容量瓶中，用水稀釋至刻度，搖勻。分別用移液管依次吸取20mL上述溶液、4mL乙酰丙酮溶液于具塞玻璃瓶中，放入（40～60）℃的恒溫水浴中恒溫30min，取出冷卻至室溫，搖勻。4.6.4.1.3分光光度測定接通分光光度計的電源，啟開燈預熱20min。調整波長在412nm處，以空白溶液作參比，用玻璃比色皿進行吸光度測量。4.6.4.1.4繪制標準曲線以吸光度為縱坐標，相應的標準溶液樣的體積為橫坐標，確定各點連成直線。4.6.4.2甲醛的測定稱取1.0g試樣（精確至0.0001g），置于100mL容量瓶中，用水稀釋至刻度，蓋上塞子后用超聲波振蕩10min，使試樣溶解，取出冷卻至室溫，搖勻。分別用移液管依次吸取20mL上述溶液、4mL乙酰丙酮溶液于具塞玻璃瓶中，放入（40～60）℃的恒溫水浴中恒溫30min，取出冷卻至室溫，搖勻。以空白溶液作參比，于波長412nm處測定試樣溶液的吸光度，在標準曲線上查得相應的甲醛標準溶液的體積。4.6.5計算甲醛的質量分數ω5，數值以mg/kg表示，按式（5）計算：m1×ω×Vω5=──────────(5)100×m2式中：ω5──甲醛的質量分數，單位為毫克每千克（mg/kg）；m1──配制甲醛標準溶液所稱取中甲醛質量的數值，單位為克(g)；m2──試樣質量的數值，單位為克(g)；V──測得試樣吸光度所對應甲醛標樣溶液的體積，單位為亳升（mL）；ω──甲醛溶液質量分數的數值，單位為百分數（%）。4.7亞硝基草甘膦質量分數的測定4.7.1方法提要試樣用衍生化試劑衍生后，以乙腈+水為流動相，使用以C18為填料的不銹鋼柱和紫外可見檢測器（462nm），對試樣中的亞硝基草甘膦進行反相色譜分離和測定。本方法最低定量限0.1mg/kg。4.7.2試劑和溶液磺胺：分析純；N-（1-萘基）乙二胺二鹽酸鹽（NED）：分析純；48%HBr溶液；濃鹽酸；Brij30或性質相當的其它表面活性劑；乙腈：色譜純；水：新蒸二次蒸餾水；NED溶液：稱取約0.435gNED于100mL容量瓶中，加入40mL水使之溶解，加入50mL48%HBr，然后用水稀釋至100mL；磺胺溶液：在100mL容量瓶中，加入50mL水，再加入10mL濃HCl，加入1.0g磺胺和3.5mL30%Brij30，振搖使磺胺溶解。用水稀釋至100mL，搖勻；亞硝基草甘膦標樣：已知亞硝基草甘膦質量分數,ω≥98.0%。4.7.3儀器高效液相色譜儀：具有可變波長紫外可見檢測器；色譜數據處理機；色譜柱：250mm×4.6mm(i.d.)不銹鋼柱，內裝C185μm填充物（或同等效果的色譜柱）；過濾器：濾膜孔徑約0.45μm；定量進樣管：100μL；超聲波清洗器。4.7.4高效液相色譜操作條件流動相：Ψ（乙腈∶水）=40∶60；流速：1.0mL/min；檢測波長：462nm；進樣體積：100μL；保留時間（min）：亞硝基草甘膦7.5。上述操作參數是典型的，可根據不同儀器進行調整，以期獲得最佳效果，典型的衍生化后的亞硝基草甘膦標樣和草甘膦水劑樣品譜圖見圖5、圖6。1－亞硝基草甘膦圖5衍生化后亞硝基草甘膦標樣的高效液相色譜圖1－亞硝基草甘膦圖6衍生化后草甘膦水劑高效液相色譜圖4.7.5測定步驟4.7.5.1標樣的制備稱取0.01g亞硝基草甘膦標樣（精確至0.0001g），置于50mL容量瓶中，用水溶解并稀釋至刻度，搖勻（溶液Ⅰ）。用移液管吸取溶液Ⅰ5mL于50mL容量瓶中，用水稀釋至刻度，搖勻（溶液Ⅱ）。用移液管移取0.1mL溶液Ⅱ于比色管中，加入約3mL水，依次用移液管加入1mLNED溶液、5mL磺胺溶液，用水定容至10mL,搖勻，置于85℃水浴中進行衍生化反應25min，取出冷卻至室溫。4.7.5.2試樣的制備稱取1.0g試樣（精確至0.0001g），置于比色管中，加入約3mL水，依次用移液管加入1mLNED溶液、5mL磺胺溶液，用水定容至10mL,搖勻，置于85℃水浴中進行衍生化反應25min，冷卻至室溫。4.7.5.3測定在上述操作條件下，待儀器穩定后，連續注入數針標樣溶液，直至相鄰兩針亞硝基草甘膦衍生后峰面積相對變化小于10%后,按照標樣溶液、試樣溶液、試樣溶液、標樣溶液的順序進行測定。4.7.5.4計算試樣中亞硝基草甘膦的質量分數按式(6)計算：A2·m1·ω、ω6＝──────────×200(6)A1·m2式中：ω4——亞硝基草甘膦的質量分數，單位為毫克每千克（mg/kg）；A2——試樣溶液中，亞硝基草甘膦峰面積的平均值；m1——標樣的質量，單位為克（g)；ω——標樣中亞硝基草甘膦的質量分數，以％表示；A1——標樣溶液中，亞硝基草甘膦峰面積的平均值；m2——試樣的質量，單位為克（g)。4.7.6允許差兩次平行測定結果之相對差應不大于20%，取其算術平均值作為測定結果。4.8pH值的測定按GB/T1601進行。4.9水不溶物的測定稱取10g試樣（精確至0.0001g），按GB/T28136中的方法進行。4.10產品的檢驗和驗收應符合GB/T1604有關規定。5標志、標簽、包裝、儲運、安全和驗收期5.1標志、標簽、包裝草甘膦異丙胺鹽母藥的標志、標簽、和包裝，應符合GB3796的規定。草甘膦異丙胺鹽母藥應用清潔塑料桶裝或內塑鐵桶，每桶凈含量60kg（L）、200kg（L）。也可根據用戶要求或訂貨協議，采用其它形式的包裝，但需符合GB3796的有關規