他達拉非片異構體研究情況他達拉非片【受理號分別為20mg（6類）：CYHS1400663、5mg（3.1類）：CXHL1401144、5mg（3.4類）：CXHL1402090、5mg（6類）：CXHL1401952】擬定質量標準草案中有關物質項下要求分離度溶液中他達拉非峰與堿破壞得到的異構體分離度不得小于3。經過一系列研究，表明其中堿破壞得到的異構體即為雜質A（降解雜質，見圖1），該異構體即USP36、EP8.0收載的雜質A，其與主成分（見圖2）的相對保留時間約為1.18。圖1：雜質A圖2：他達拉非有關物質方法學研究中專屬性進行了異構體(雜質A)定位、系統適用性試驗（堿破壞條件主成分與降解雜質分離度）、堿破壞試驗考察。后續穩定性試驗中同步考察系統適用性并監測異構體（雜質A）含量，結果顯示經加速、長期6個月，3批樣品異構體（雜質A）均未檢出（具體結果見附表1～4）。同時有關物質方法學研究中采用加標方式對異構體（雜質A）進行了研究，詳見CTD格式資料3.2.P.5.3.4第67～77頁。簡要結果見表1，部分圖譜見附圖1～5。表1：有關物質方法學驗證中雜質A結果概要項目驗證結果專屬性（1）破壞得到的非對映異構體（雜質A）與主峰分離度大于3，符合要求；（2）破壞性試驗：在220nm波長下，制劑強堿破壞降解情況與原料藥相似，主要降解雜質為非對映異構體（雜質A），含量為11.85%。濾膜吸附加標供試品溶液分別濾去1、2、3、4ml后雜質A含量絕對誤差為0.01%，在±0.1％以內，濾膜吸附影響小。溶液穩定性加標供試品溶液52小時雜質A的絕對誤差為0.02%，在±0.1％以內，表明52小時內樣品溶液穩定。檢測限取溶液穩定性項下制劑+雜質對照0h樣品雜質A的濃度、峰面積、S/N結果計算得異構體（雜質A）檢測限為0.018μg/ml,相當于主成分濃度0.007%。耐用性不同流速在不同流動相比例【乙腈-水-三氟乙酸（40：60：0.01）、（35：65：0.01）、（30：70：0.01）】，不同色譜柱品牌（Agilent、Ecosil、Welch），不同流速（0.8ml/min、1.0ml/min、1.2ml/min）色譜條件下，加標供試品溶液雜質A含量的絕對誤差最大為0.04%，在±0.1％以內，該方法耐用性良好。不同流動相比例不同色譜柱附圖1：雜質A定位圖附圖2：分離度溶液圖附圖3：制劑堿破壞試驗圖附圖4：穩定性0月分離度試驗圖附圖5：穩定性6月分離度試驗圖有關物質方法學圖譜見CTD附件3-質量研究圖譜集（有關物質）。其中雜質A圖譜見圖3.2.14-1～3.2.14-2、分離度溶液圖譜見圖3.2.13-1～3.2.13-2、堿破壞試驗制劑圖譜見圖3.2.18-1～3.2.18-2。穩定性研究分離度溶液圖譜見CTD附件5-制劑穩定性研究圖譜集圖①/②(0月圖5.2、加速1月圖5.129、加速2月圖5.162、加速長期3月圖5.223)、加速長期6月圖譜集②/②圖5.235。

附表1：他達拉非片（20mg）加速試驗數據考察項目異構體A（%）有關物質（%）總雜（%）RRT1.14RRT0.27RRT0.34RRT0.37RRT0.40RRT0.43限度要求不得過0.2%不得過0.3%130901批0月未檢出0.0110.0096未檢出未檢出未檢出0.0211月未檢出未檢出未檢出未檢出未檢出0.0170.0172月未檢出未檢出0.015未檢出0.0063未檢出0.0213月未檢出未檢出未檢出未檢出0.0150.0230.0376月未檢出未檢出0.025未檢出0.016未檢出0.040130902批0月未檢出0.00840.0080未檢出未檢出未檢出0.0161月未檢出未檢出未檢出未檢出未檢出0.0130.0132月未檢出未檢出0.013未檢出未檢出0.00660.0203月未檢出未檢出未檢出未檢出0.0140.0190.0326月未檢出未檢出0.021未檢出0.015未檢出0.036130903批0月未檢出0.00650.0084未檢出未檢出未檢出0.0151月未檢出未檢出未檢出未檢出未檢出0.0150.0152月未檢出未檢出0.014未檢出未檢出0.00450.0183月未檢出未檢出未檢出未檢出0.0150.0200.0346月未檢出未檢出0.024未檢出0.019未檢出0.043

附表2：他達拉非片（20mg）長期試驗數據考察項目異構體A（%）有關物質（%）總雜（%）RRT1.14RRT0.27RRT0.34RRT0.37RRT0.40RRT0.43限度要求不得過0.2%不得過0.3%130901批0月未檢出0.0110.0096未檢出未檢出未檢出0.0213月未檢出未檢出未檢出未檢出0.00980.0170.0276月未檢出未檢出0.017未檢出未檢出未檢出0.0179月未檢出未檢出0.020未檢出未檢出未檢出0.02012月未檢出未檢出0.019未檢出0.011未檢出0.03018月未檢出未檢出0.0240.013未檢出未檢出0.037130902批0月未檢出0.00840.0080未檢出未檢出未檢出0.0163月未檢出未檢出未檢出未檢出0.0100.0130.0226月未檢出未檢出0.015未檢出未檢出未檢出0.0159月未檢出未檢出0.016未檢出未檢出未檢出0.01612月未檢出未檢出0.017未檢出0.011未檢出0.02818月未檢出未檢出0.0190.012未檢出未檢出0.032130903批0月未檢出0.00650.0084未檢出未檢出未檢出0.0153月未檢出未檢出未檢出未檢出0.0200.0140.0346月未檢出未檢出0.016未檢出未檢出未檢出0.0169月未檢出未檢出0.015未檢出未檢出未檢出0.01512月未檢出未檢出0.020未檢出0.011未檢出0.03118月未檢出未檢出0.0190.014未檢出未檢出0.032

附表3：他達拉非片5mg加速試驗數據考察項目異構體A有關物質（%）總雜（%）RRT1.14RRT0.35RRT0.37RRT0.40RRT0.44限度要求不得過0.2%不得過0.3%140201批0月未檢出0.019未檢出未檢出未檢出0.0191月未檢出0.020未檢出未檢出未檢出0.0202月未檢出未檢出0.0110.008未檢出0.0193月未檢出0.0200.0070.013未檢出0.0416月未檢出0.0230.0100.0190.0080.060140202批0月未檢出0.021未檢出未檢出未檢出0.0211月未檢出0.022未檢出未檢出未檢出0.0222月未檢出0.0170.0130.009未檢出0.0383月未檢出0.0250.0110.017未檢出0.0536月未檢出0.0280.0100.0200.0060.064140203批0月未檢出0.019未檢出未檢出未檢出0.0191月未檢出0.021未檢出未檢出未檢出0.0212月未檢出0.0180.0110.011未檢出0.0403月未檢出0.0190.0110.012未檢出0.0426月未檢出0.0260.0100.0160.0100.063

附表4：他達拉非片5mg長期試驗數據考察項目異構體A有關物質（%）總雜（%）RRT1.14RRT0.35RRT0.37RRT0.40RRT0.44限度要求不得過0.2%不得過0.3%140201批0月未檢出0.019未檢出未檢出未檢出0.0193月未檢出0.0180.0080.008未檢出0.0336月未檢出0.0180.0100.0120.0030.0439月未檢出0.0220.0100.013未檢出0.04512月未檢出0.0220.011未檢出未檢出0.03318月未檢出0.0240.012未檢出未檢出0.036140202批0月未檢出0.021未檢出未檢出未檢出0.0213月未檢出0.0200.0080.012未檢出0.0396月未檢出0.0210.0130.0120.0040.0519月未檢出0.0280.0110.017未檢出0.05512月未檢出0.0250.012未檢出未檢出0.03718月未檢出0.0290.013未