1、 SR-Life Sciences Institute, USA 一過性感染 持續性感染 宮頸病變 HPV疫苗 治療藥物 第26屆2010加拿大蒙特利爾第27屆2011德國柏林第28屆2012波多黎各圣胡安第29屆2014美國西雅圖第30屆2015葡萄牙里斯本第31屆2017南非開普敦世界上最權威的HPV與宮頸癌研究學術組織（1982 美國特拉華)International Papillomavirus Conference & Clinical Workshop國際HPV學術會議暨臨床研討會 SR-Life Sciences Institute, SR-Life Sciences Insti

2、tute, USA 一過性感染 持續性感染 宮頸病變 HPV疫苗 治療藥物 第31屆國際HPV學術大會 2017 2/283/4，南非開普敦 SR-Life Sciences Institute, SR-Life Sciences Institute, USA 高危型HPV感染有效管理的困惑與探索 一、為什么國際會議首提治療藥物的研制？二、什么是高危型HPV感染的必要條件？三、“一過性感染”與“持續性感染”形成的機制？四、“持續性感染”難以自我清除，E6/E7是“靶點”五、“預防性疫苗“與”治療藥物“是一對孿兄弟六、高危HPV感染有效管理，如何把握好“度”？七、“分子靶向多重抗HPV核心技術”

3、與“瑞貝生” SR-Life Sciences Institute, SR-Life Sciences Institute, USA 高危型HPV感染有效管理的困惑與探索 生命科學，是一門實驗性科學循證 SR-Life Sciences Institute, SR-Life Sciences Institute, USA 宿主特異 性傳播 雙受體 不進入血液 一、為什么“第31屆國際HPV學術會議” 首提“治療藥物的研制”？ SR-Life Sciences Institute, SR-Life Sciences Institute, USA 高危型HPV感染有效管理的缺口及研發戰略 細胞學篩

4、查hrHPV篩查hrHPV預防性疫苗GAP 治療藥物缺口GAPhrHPV治療性疫苗缺口高危HPV感染有效管理的“GAP”（缺口） SR-Life Sciences Institute, SR-Life Sciences Institute, USA 高危型HPV感染有效管理的缺口及研發戰略 第31屆國際HPV學術會議藥物研制專題會議8位世界頂級科學家主持會議 2017年2月28日 南非 開普敦缺口1：預防性疫苗對hrHPV檢測陽性患者無治療作用，特別是持續性感染患者，由于未能及時清除高危HPV感染，甚至導致癌變。缺口2：（1）15種高危HPV病毒，疫苗預防保護的亞型有限:（2）臨床發現，高危H

5、PV感染轉陰后，還會被同一亞型再次感染，顯示人體對HPV感染的免疫保護能力有限。 SR-Life Sciences Institute, SR-Life Sciences Institute, USA 宿主特異 性傳播 雙受體 不進入血液 二、什么是高危型HPV感染的必要條件? SR-Life Sciences Institute, SR-Life Sciences Institute, USA宿主特異 性傳播 雙受體 不進入血液 1、高危型HPV感染的二個必要條件(1)高危型HPV游離態病毒；(2)宮頸黏膜創傷（含機械創傷和感染創傷）。 SR-Life Sciences Institute,

6、 SR-Life Sciences Institute, USA宿主特異 性傳播 雙受體 不進入血液 2、高危型HPV感染的主要途徑為性傳播男傳女：1 傳 3女傳男：3 傳 1母女垂直傳播 血液傳播 性傳播 醫源性傳播 密切接觸傳播產道HPV病毒經嬰兒口腔感染密切接觸病毒感染黏膜調查顯示，80%多的婦女一生中會感染高危型HPV，其中一部分會自愈，稱為“一過性感染”，還有約20-30%的感染患者很難自我清除，稱為“持續性感染”，這部分高危HPV持續性感染患者即為宮頸癌發生的高風險人群。 SR-Life Sciences Institute, SR-Life Sciences Institute,

7、 USA宿主特異 性傳播 雙受體 不進入血液 HPV病毒進入細胞過程模式圖 ：第一受體：基底膜HSPG ；第二受體（細胞受體）未定。A、病毒結合至基底膜上的硫酸乙酰肝素蛋白多糖受體 B、暴露L2易感位點，被前體蛋白轉化酶（弗林蛋白酶或PC5/6）切除C、L1的未暴露區與未知的第二受體結合 3、高危型HPV感染宿主細胞過程 （雙受體，不進入血液） SR-Life Sciences Institute, SR-Life Sciences Institute, USA 一過性感染 持續性感染 整合性感染 宮頸病變 三、“一過性感染”與“持續性感染” 形成的機制？ SR-Life Sciences I

8、nstitute, SR-Life Sciences Institute, USA一過性感染 持續性感染 整合性感染 宮頸病變宮頸基底細胞層由2種細胞構成：1）基底干細胞 （The Stem Cell） 基底干細胞具有無限的分裂復制潛力，其每次分裂生成的2個細胞，一個仍為干細胞，以保持和維持干細胞組織；另一個為TA細胞。 EPU Model( Epidermal Proliferative Unit)干細胞TA細胞 1、基底細胞分裂復制模式2）TA細胞 （The Transit Amplifying Cells） TA細胞經過2次分裂后，作為不再分裂的女兒細胞，逐步上移，形成粘膜復層鱗狀上皮。

9、 SR-Life Sciences Institute, SR-Life Sciences Institute, USA一過性感染 持續性感染 整合性感染 宮頸病變決定“一過性感染”與“持續性感染”的關鍵因素2、高危型HPV“一過性感染”若hrHPV感染TA細胞，導致一過性感染。 感染HPV的TA細胞，經過2輪分裂后，作為不再分裂的女兒細胞，逐步上移，形成粘膜鱗狀上皮,病毒隨死亡脫落細胞自我清除。 SR-Life Sciences Institute, SR-Life Sciences Institute, USA一過性感染 持續性感染 整合性感染 宮頸病變決定“一過性感染”與“持續性感染”的

10、關鍵因素3、高危型HPV“持續性感染”若hrHPV感染基底干細胞，導致持續性感染。高危型HPV基因組以兩種狀態存在于被感染的干細胞內：1）附加體方式（無癥狀感染、活動性感染），2）與宿主細胞基因組整合狀態，引發癌變。無癥狀感染非整合狀態附加體活動性感染HPV大量復制高級宮頸上皮內瘤變低級宮頸上皮內瘤變高級宮頸上皮內瘤變 SR-Life Sciences Institute, SR-Life Sciences Institute, USA一過性感染 持續性感染 整合性感染 宮頸病變4、高危型HPV“整合性感染”（Integrated Infection）hrHPV 基因組宿主細胞基因組基因整合（

11、隨機）E2插入滅活，E6/E7表達失控HPV 基因與宿主細胞基因組整合鑲嵌在人基因組中的E6/E7基因過量表達E6/E7蛋白與P53/RB蛋白結合，使其失活，細胞分化失控，致癌變。E6E7 SR-Life Sciences Institute, SR-Life Sciences Institute, USA一過性感染 持續性感染 整合性感染 宮頸病變高危HPV持續性感染很難自我清除干細胞TA細胞 SR-Life Sciences Institute, SR-Life Sciences Institute, USA宿主特異 性傳播 雙受體 不進入血液 Cervical Cancer 角質層 透明

12、層顆粒層 棘細胞層基底層 真皮28-56天5、迄今臨床上還沒有準確判定“一過性感染” 或“持續性感染”診斷技術宮頸復層鱗狀上皮結構及細胞上移周期在6個月-1年時限內，高危HPV檢測2次陽性患者Ref. 北京協和醫院數據 空白對照組自我轉陰率18%瑞貝生一個周期轉陰率62%0.618 SR-Life Sciences Institute, SR-Life Sciences Institute, USA 一過性感染 持續性感染 宮頸病變 HPV疫苗 治療藥物 四、“持續性感染”難以自我清除， E6/E7基因是治療靶點 SR-Life Sciences Institute, SR-Life Scie

13、nces Institute, USA 一過性感染 持續性感染 宮頸病變 HPV疫苗 治療藥物 高危型HPV感染基底干細胞后，病毒基因組在被感染干細胞中以附加體、或以與宿主細胞基因組整合的狀態存在，很難自我清除。2017“第31屆國際HPV學術會議”根據大量的基礎研究，明確了其治療藥物研制的靶點是“E6/E7”基因第31屆國際HPV學術會議藥物研制專題會議8位世界頂級科學家主持會議 2017年2月28日 南非 開普敦早期啟動晚期啟動 SR-Life Sciences Institute, SR-Life Sciences Institute, USA 疫苗給未感染高危HPV的女性提供保護，藥物

14、為已感染病毒的患者予以清除 五、高危型HPV預防疫苗與治療藥物 是一對孿兄弟 SR-Life Sciences Institute, SR-Life Sciences Institute, USA疫苗給未感染高危HPV的女性提供保護，藥物為已感染病毒的患者予以清除 “預防性疫苗”與“治療藥物”是高危HPV感染管理的一對“孿兄弟” 預防性疫苗專注為未感染高危HPV的女性提供保護 治療藥物為已感染高危HPV患者提供治療手段 SR-Life Sciences Institute, 中國森瑞譜生命科學藥業 SR-Life Sciences Institute, Inc.,USA疫苗給未感染高危HPV的

15、女性提供保護，藥物為已感染病毒的患者予以清除 中國森瑞譜生命科學藥業 SR-Life Sciences Institute, Inc.,USA 中國森瑞譜生命科學藥業 SR-Life Sciences Institute, USA目前美國FDA批準上市的抗病毒藥物與疫苗疫苗單純皰疹病毒 中國森瑞譜生命科學藥業 SR-Life Sciences Institute, USA預防感染為先主，治療感染在期待，篩查實施是基礎，CIN管理很很重要六、高危型HPV有效管理，如何掌握好 “度”？ SR-Life Sciences Institute, SR-Life Sciences Institute,

16、USA 一過性感染 持續性感染 宮頸病變 HPV疫苗 治療藥物 根據國際研究進展和中國國情，著名婦產科專家郎景和院士在2017年第三屆CSCCP大會上，提出對高危HPV感染有效管理的四大關鍵：1、預防感染為先主，2、治療感染在期待，3、篩查實施是基礎，4、CIN管理很重要。為現階段我國宮頸癌防治工程的發展指明了方向。 著名婦產科專家郎景和院士 SR-Life Sciences Institute, SR-Life Sciences Institute, USA預防感染為先主，治療感染在期待，篩查實施是基礎，CIN管理很重要 （-）P16（+）從病的角度看 癌前病變一過性感染持續性感染 整合性感

17、染癌變CINICINIICINIII 從傳染病角度看癌變mR NADNA 高危HPV感染三節點“感染，整合，癌變” SR-Life Sciences Institute, SR-Life Sciences Institute, USA 一過性感染 持續性感染 宮頸病變 HPV疫苗 hrHPV治療藥物 七、“分子靶向多重抗病毒技術”與“瑞貝生” SR-Life Sciences Institute, SR-Life Sciences Institute, USA 一過性感染 持續性感染 宮頸病變 HPV疫苗 治療藥物 2000年，美國森瑞生命科學研究所（SR Life Sciences Inst

18、itute）正式立項，專攻抗高危型HPV感染藥物的研究。美國國立衛生研究院(National Institutes of Health，NIH ）美國森瑞生命科學研究所SR Life Sciences Institute 項目核心研發團隊 SR-Life Sciences Institute, SR-Life Sciences Institute, USA 一過性感染 持續性感染 宮頸病變 HPV疫苗 治療藥物 團隊學術帶頭人：張春發博士(1)日本東京農業大學（TUA）病毒分子生物學博士，國際HPV學會會員。(2)美國國立衛生研究院（NIH）醫學病毒分子生物學博士后、研究員。(3)熱帶生物技術

19、國家重點實驗室（1999-2005年）主任，研究員，博士生導師, 美國森瑞生命科學研究所所長。(4)國家有突出貢獻中青年專家。(5)國務院特殊貢獻專家津貼獲得者。(6)國家發明三等獎5項，科技進步獎2項。(7)被The Intrenational Whos Who of Intellectuals（國際著名知識分子名人錄）收錄。(8)被Whos Who in The World（世界名人錄）收錄。(9)在世界上首次創建了“ApNPV 核型多角體病毒表達載體系統”，并獲國家發明專利。 (10)帶領團隊在國際上創新研發了防治宮頸癌新藥“REBACIN”，徹底改變了高危型HPV感染無藥可醫的局面，并

20、獲得4項國家發明專利授權。 SR-Life Sciences Institute, SR-Life Sciences Institute, USA 一過性感染 持續性感染 宮頸病變 HPV疫苗 治療藥物 學術帶頭人：徐森根博士 (1)中科院上海生理所博士。(2)英國劍橋大學博士后。(3)日本東京帝國大學客座教授。(4)美國國立衛生研究院（NIH）資深研究員。(5)美國生物物理學會會員，醫學生物物理學專家。(6)2005年被英國劍橋國際傳記中心選為“二十一世紀2000名杰出科學家”。(7)1995年被英國劍橋國際傳記中心選為 “杰出成就者”。(8)1986年獲得了日本推動科學協會頒發的“外國科學

21、家獎”。(9)1984年獲得了英國劍橋M. F. Perutz 基金會頒發的“訪問學者獎”。(10)1982年獲得了中國科學院頒發的“研究成就獎”。（美籍華人） SR-Life Sciences Institute, SR-Life Sciences Institute, USA 一過性感染 持續性感染 宮頸病變 HPV疫苗 治療藥物 (1)美國生化與分子生物學學會會員。(2)日本東京農業大學分子生物學博士。(3)美國國立衛生研究院（NIH）博士后，研究員。(4)在美國國家衛生研究院工作期間，連續兩年獲得美國國家衛生研究院杰出博士后獎。(5)2003年10月，榮獲美國國立衛生研究院（NIH）個

22、人成就獎，是此次獲此殊榮的惟一亞裔科學家。其所從事的研究項目具有國際領先水平。 學術帶頭人：張穎博士 、王桂玉博士 (1) 美國西北大學生物系分子生物和細胞生物專業訪問學者。(2) 美國國立衛生研究院（NIH）博士后。(3)多年來一直從事生化與分子生物學領域的研究，在國內外學術雜志上發表了多篇研究論文和專著，指導博士、碩士研究生多名，具有堅實的生命科學藥物研發基礎和豐富的研發經驗。（美籍華人） SR-Life Sciences Institute, SR-Life Sciences Institute, USA 一過性感染 持續性感染 宮頸病變 HPV疫苗 治療藥物 (1)“熱帶生物技術國家重

23、點實驗室”分子生物學專業博士。(2)“海南省蛋白質工程藥物重點實驗室”主任。(3)專業基礎堅實，思路清晰，分析和解決問題能力強。 (4)在國內核心期刊發表多篇學術論文。(5)技術專長：生命藥學、醫藥分子生物學、生物技術制藥及其相關技術研發。(1)德國馬格德堡大學醫學院博士。(2)美國喬治華盛頓大學醫學中心博士后。(3)美國加州大學舊金山分校研究員。(4)美國德州大學奧斯丁分校研究員。(5)長期從事醫藥分子生物學的研究，在國際學術雜志上發表20多篇論文，利用分子生物學的先進技術，從事生命科學藥物研發。 學術帶頭人：鄧柳紅博士、吳代飛博士 （美籍華人） SR-Life Sciences Insti

24、tute, SR-Life Sciences Institute, USA 一過性感染 持續性感染 宮頸病變 HPV疫苗 hrHPV治療藥物 2、直接殺滅游離態病毒 1、瞄準“靶點”1、抑制E6/E7基因 SR-Life Sciences Institute, SR-Life Sciences Institute, USA 一過性感染 持續性感染 宮頸病變 HPV疫苗 治療藥物 2、建立“核心技術”“分子靶向多重抗HPV核心技術”4激活局部細胞免疫,清除高危型HPV潛伏性感染1抑制E6/E7基因表達,清除高危型HPV持續性 感染封閉病毒受體,修復黏膜3殺滅游離態HPV病毒粒子2殺滅游離態HPV

25、 病毒 SR-Life Sciences Institute, SR-Life Sciences Institute, USA 一過性感染 持續性感染 宮頸病變 HPV疫苗 hrHPV治療藥物 瑞貝生 5支裝瑞貝生 2支裝 2、研發專利產品“瑞貝生” SR-Life Sciences Institute, SR-Life Sciences Institute, USA 一過性感染 持續性感染 宮頸病變 HPV疫苗 hrHPV治療藥物 3、委托中國最權威第三方做藥效學驗證 中國疾病預防與控制中心病毒病預防控制所 SR-Life Sciences Institute, SR-Life Scienc

26、es Institute, USA 一過性感染 持續性感染 宮頸病變 HPV疫苗 hrHPV治療藥物 REBACIN10.25 g/ml20.07 g/ml30.02 g/ml40.01 g/ml5Mock M100bp DNA Ladder 1 2 3 4 5 M M 1 2 3 4 5Expression of HPV18_E7Expression of HPV18_E6 1 2 3 4 M M 1 2 3 4 5Expression of HPV16_E6Expression of HPV16_E7TC-1 CellsHela Cells 1）抑制 HPV E6/E7基因表達（a. 體外

27、實驗） 體外實驗結果，REBACIN（瑞貝生）對 HPV16 E6及E7基因（TC-1 細胞）和HPV18 E6及E7基因（ HELA細胞）的表達具有抑制作用，數據呈量效關系。 SR-Life Sciences Institute, SR-Life Sciences Institute, USA 一過性感染 持續性感染 宮頸病變 HPV疫苗 hrHPV治療藥物 We further examined the suppressive effect of REBACIN on the growth of tumor induced by HPV16 and HPV18 infection in a

28、 mouse model. TC-1 or Hela cells pre-treated with different doses of REBACIN were used to induce tumor in mouse followed by a 28-day regimen that includes three sequential subcutaneous injections of REBACIN at various doses. The isolated tumors were weighted and compared with the one without treatme

29、nt. Treatment GroupREBACIN Dose# of Mice UsedTumor Weight (gram)Repression (%)P Value10.25 g/ml250.28 0.0591.84%0.0520.07 g/ml250.69 0.0779.88%0.0530.02 g/ml251.03 0.0269.97%0.0540.01 g/ml251.68 0.2651.02%0.055Control253.43 0.26 1 2 3 4 ControlREBACIN Dose# of Mice Shown as RepresentativeREBACIN （瑞貝

30、生）抑制HPV16 感染引發的SCID 小老鼠腫瘤高達 91.84% (p0.05). 1）抑制 HPV E6/E7基因表達（b. 動物體內實驗）抑制HPV16/18E6/E7所致SCID小鼠腫瘤的生長 SR-Life Sciences Institute, SR-Life Sciences Institute, USA 一過性感染 持續性感染 宮頸病變 HPV疫苗 hrHPV治療藥物 AVF抗病毒因子抗病毒的機制是：脫去病毒DNA特定結構的腺嘌呤，致使病毒特異蛋白質合成受到阻礙，最終導致侵入的病毒由于不能利用宿主細胞的蛋白質合成系統合成自己所需的蛋白質而隨之消亡.AVF因子分子結構及電泳和H

31、PLC圖譜AVF因子抑制特異蛋白合成 2）直接殺滅HPV姊妹病毒（a. 體外實驗） SR-Life Sciences Institute, SR-Life Sciences Institute, USA 一過性感染 持續性感染 宮頸病變 HPV疫苗 hrHPV治療藥物 Cervical Cancer Viral Suppression (%)0%20%40%60%80%100%0.7g/kg1.4g/kgAciclovirTreatmentTotal MiceViral Positive MiceTIC50 (g/kg)BeforeAfterREBACIN (g/kg)1.4303071.12

32、0.7303018Aciclovir30309由于HPV病毒迄今還不能體外培養，特以HPV姊妹病毒HSV作抗病毒實驗：1、REBACIN（瑞貝生）對受試小鼠病毒性（HSV-II）陰道炎抑制率為93.3%，陽性對照藥物阿昔洛韋為73.3%，病毒陰性對照為0。2、REBACIN對受試病毒有顯著的抗病毒作用，其對HSV-II感染治療率為76.6%，陽性對照藥物阿昔洛韋為70%，病毒陰性對照治療率為0。數據3次重復一致，呈典型量效關系。Viral positive rates before vs. after treatment 2）直接殺滅HPV姊妹病毒（b. 動物體內實驗） SR-Life Sci

33、ences Institute, SR-Life Sciences Institute, USA 一過性感染 持續性感染 宮頸病變 HPV疫苗 治療藥物 1、抑制 hrHPVE6/E7 基因（1）體外細胞實驗結果，能有效抑制HPV16型和18型病毒致癌因子E6/E7的表達；（2）動物試驗結果，對HPV16和HPV18病毒E6/E7致癌基因表達所致SCID小鼠腫瘤生長的抑制率分別為91.84%和83.75% (p0.05)。 中國疾病預與防控制中心病毒病預防控制所藥效學研究結論 2、直接殺滅游離態hrHPV姊妹病毒 對小鼠病毒性（HSV-II）陰道炎的抑制率為93.3%，清除率為76.6% （陽

34、性對照阿昔洛韋的抑制率為73.3%，清除率為70%）； SR-Life Sciences Institute, SR-Life Sciences Institute, USA 一過性感染 持續性感染 宮頸病變 HPV疫苗 治療藥物 SR-Life Sciences Institute, SR-Life Sciences Institute, USA 一過性感染 持續性感染 宮頸病變 HPV疫苗 治療藥物 4、臨床驗證清除高危HPV病毒持續性感染 經北京協和醫院等國內頂級婦科醫院對清除“高危HPV持續性感染”臨床觀察，結果基本一致： 1）使用“瑞貝生”一個周期（3個月），有效率85%，轉陰率62%，使用2個周期，有效率達95以上，轉陰率70%以上。 2）空白對照組，自我轉陰率為18-19%。 SR-Life Sciences Institute, SR-Life S