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文檔簡介
1、文檔編碼 : CX5W4Z1G6L1 HE8E8T3L8G2 ZU5U10R4T2W5學習必備 精品學問點 選修一 學問點 填空 專題一傳統發酵技術的應用 課題 1 果酒和果醋的制作 1果酒制作的原理 (1)人類利用微生物發酵制作果酒,該過程用到的微生物是 , 它的代謝類型是 ,與異化作用有關的方程式有 生活狀態:進行發酵,產生大量 ; ( 2)果酒制作條件 傳統發酵技術所使用的酵母菌的來源是 酵母菌生長的; 最適溫度是 ; PH 呈 ; (3)紅色葡萄酒顯現顏色的緣由是:酒精發酵過程中,隨著 的提高,紅色 葡萄皮的 進入發酵液,使葡萄酒呈 色; (4)在 , 的發酵液中,酵母菌可以生長繁衍,
2、而絕大 多數其它微生物都因無法適應這一環境而受到抑制; 2果醋的制作原理 (1)果醋發酵菌種是 ,新陳代謝類型 ; (2)當氧氣和糖源充分時醋酸菌將糖分解成 ,當糖源不足時醋酸菌將 變為 再變成醋酸,其反應式 ; 3操作過程應留意的問題 (1)為防止發酵液被污染,發酵瓶要用 的空間; d消毒; (2)葡萄汁裝入發酵瓶時,要留出大約 (3)制作葡萄酒時將溫度嚴格把握在 ,時間把握在 左右,可通過 對發酵的情形進行準時的監測; (4)制葡萄醋的過程中,將溫度嚴格把握在 ,時間把握在 d,并注 意適時在 充氣; 4酒精的檢驗 (1)檢驗試劑: ; 條件下,反應顯現 ; (2)反應條件及現象:在 5.
3、 制作果酒,果醋的試驗流程 選擇葡萄 課題 2 腐乳的制作 果酒 果醋 1.制作原理 ( 1)經過微生物的發酵,豆腐中的蛋白質被分解成小分子的 , 和 ,脂肪 被分解成 和 ,因而更利于消化吸?。?, 等, ( 2)腐乳的發酵有多種微生物參加, 如 , 其中起主要作用的是 ;它是一種絲狀 ,常 菌種直接接種在 見 , , , 上; ( 3)現代的腐乳生產是在嚴格的 條件下, 將優良 第 1 頁,共 17 頁豆腐上,這樣可以防止其他菌種的 學習必備 精品學問點 ,保證產品的質量; 2. 腐乳制作的試驗流程: 讓豆腐長出 密封腌制; 3. 試驗留意事項 ( 1)在豆腐上長出毛霉時, 溫度把握在 ,
4、自然條件下毛霉的菌種來自空氣 中的 ; ( 2)將長滿毛霉的豆腐塊分層加鹽, 加鹽量要隨著擺放層數的加高而 , 近瓶口的表層要 ;加鹽的目的是使豆腐塊失水, 利于 ,同時也能 的生長;鹽的濃度過低, ;鹽的濃度過 高, ; ( 3)鹵湯中酒精的含量應把握在 左右,它能 微生物的生長,同 時也與豆腐乳特別的 形成有關;酒精含量過高, ;酒精含量過 低, ;香辛料可以調制腐乳的風味,同時也有 作用; ( 4)瓶口密封時,最好將瓶口 ,防止瓶口污染; 課題 3 制作泡菜并檢測亞硝酸鹽含量 1乳酸菌代謝類型為 ,在 情形狂下,將葡萄糖分解為乳 酸;在自然界中分布廣泛, 在 , , , 內都有分布; 常
5、見的乳酸菌有 和 兩種,其中 常用于生產酸奶; 2亞硝酸鹽為 ,易溶于 ,在食品生產中用作 ;一般不 會危害人體健康,但當人體攝入硝酸鹽總量達 g 時,會引起中毒;當攝入總量 達到 g 時,會引起死亡;在特定的條件下,如 , 和 的作用下,會轉變成致癌物質亞硝胺,亞硝胺對動物有致畸和致突變作用; 3泡菜制作大致流程:原料處理 裝壇 成品 ( 1)配制鹽水:清水和鹽的比例為 ,鹽水 時 后備用; ( 2)裝壇:蔬菜裝至 加入香辛料,裝至 時加鹽水,鹽水 要 ,蓋好壇蓋; 壇蓋邊沿水槽中 ,保證壇內 環 境; 和 ( 3)腌制過程種要留意把握腌制的 10%, , 過短,簡潔造 ; ;溫度過高,食鹽
6、用量不足 成 , ; 4測亞硝酸鹽含量的原理是 將顯色反應后的樣品與已知濃度的 出泡菜中亞硝酸鹽的含量; 測定步驟:配定溶液 進行比較,可以大致 制備樣品處理液 學習必備 精品學問點 專題學問歸納 果酒和果醋的制作原理 傳 果酒和果醋的制作 果酒和果醋的設計制作裝置 統 發 果酒和果醋的制作過程 酵 技 腐乳的制作 腐乳的制作原理 術 的 腐乳制作過程的把握條件 應 用 泡菜制作原理 制作泡菜并檢測亞硝酸鹽含量 泡菜發酵條件 亞硝酸鹽含量的測定 專題二 微生物的培育與應用 課題 1 微生物的試驗室培育 ; 四類養分物 的要求; 1依據培育基的物理性質可將培育基可以分為 和 2培育基一般都含有
7、質, , , , 另外仍需要中意微生物生長對 以及 3獲得純潔培育物的關鍵是 ; 4消毒是指 滅菌是指 5日常生活中常用的消毒方法是 ,此外, 人們也常使用化學藥劑進行消毒, 如用 , 等;常用的滅菌方法有 , , ,此 外,試驗室里仍用 或 進行消毒; 6制備牛肉膏蛋白胨固體培育基的方法步驟是 , , , , ; 7微生物接種的方法中最常用的是 和 ;平板劃線法 是指 ; 稀釋涂布平板法是指 ; 8菌種的保藏: ( 1)暫時保藏: 將菌種接種到試管的 ,在合適的溫度下培育, 長 成后,放入 冰箱中保藏,以后每 3 6 個月,轉移一次新的培育基; 缺點是:儲存時間 ,菌種簡潔被 或產生變異;
8、(2)長期儲存方法: 法,放在 冷凍箱中儲存; 課題 2 土壤中分解尿素的細菌的分別與計數 1尿素只有被 解尿 分解成 之后,才能被植物吸取利用;選擇分 素細菌的培育基特點: 惟一氮源,按物理性質歸類為 培育基; 2 PCR( )是一種在體外將 ;此項 技術的自動化,要求使用耐高溫的 DNA 聚合酶; 3 試驗室中微生物的選擇應用的原理是:人為供應有利于 生長的條件(包 括 等),同時抑制或阻擋其他微生物生長; 第 3 頁,共 17 頁學習必備 精品學問點 4選擇培育基是指 5常用來統計樣品中活菌數目的方法是 時,培育 基表面生長的一個菌落,來源于樣品稀釋液中的 ; ;即當樣品的稀釋度足夠高
9、;通過統計平板上的菌 落數,就能估量出樣品中大約含有多少活菌;為了保證結果精確,一般選擇菌落數在 的平板進行計數, 計數公式是 ;利用稀釋涂布平板法勝利統計 菌落數目的關鍵是 ;另外, 也是測定微生物數量的常用方法; 6一般來說,統計的菌落數往往比活菌的實際數目 ;這是由于 ;因此,統計結果一般用 7設置對比試驗的主要目的是 信度;對比試驗是 而不是活菌數來表示; ,提高試驗結果的可 ;中意該條件的稱 為 ,未中意該條件的稱為 , , ; 和 ,詳細 8試驗設計包括的內容有: 的試驗步驟以準時間支配等的綜合考慮和支配; 9不同種類的微生物,往往需要不同的培育 和培育 ;在 試驗過程中,一般每隔
10、 24 小時統計一次菌落數目,選取菌落數目穩固時的記錄作為結果, 這樣可以 ; ”之稱,同其10土壤有 他生物環境相比,土 “ 壤中微生物 , ; 11土壤中的微生物約 是細菌,細菌相宜在酸堿度接近 潮濕土 壤中生長; 土壤中微生物的數量不同, 分別不同微生物接受的 的稀釋度不同; 12一般來說, 在確定的培育條件下,同種微生物表現出穩固的菌落特點; 這些特點包 括菌落的 , , 和 等方面; 13在進行多組試驗過程中,應留意做好標記,其目的是 ; 14對所需的微生物進行初步選擇, 只是分別純化菌種的第一步, 要對分別的菌種進行 一步的鑒定,仍需要借助 的方法; 15在細菌分解尿素的化學反應中
11、,細菌合成的 將尿素分解成了 ;氨會 使培育基的堿性 ,PH ;因此,我們可以通過檢測培育基 變化來判定該 化學反應是否發生; 在以 為唯獨氮源的培育基中加入 指示劑; 培育某種細 菌后,假如 PH 上升,指示劑將變 ,說明該細菌能夠 ; 課題 3 分解纖維素的微生物的分別 1纖維素是 類物質, 是自然界中纖維素含量最高的自然產物, 此外,木材,作物秸稈等也富含纖維素; 2纖維素酶是一種 酶,一般認為它至少包括三種組分,即 , 和 ,前兩種酶使纖維素分解成纖維二糖, 第三種酶將纖維二糖分解成 ; 正是在這三種酶的協同作用下, 纖維素最終被水解成葡萄糖, 為微生物的生長供應養分, 同 樣,也可以
12、為人類所利用; 3選擇纖維素分解菌可以用 法,這種方法能夠通過 直接對 微生物進行選擇; 可以與像纖維素這樣的多糖物質形成 ,但并不 和水解后的 和 發生這種反應; 纖維素分解菌能產生 分解纖維 素,從而使菌落四周形成 ; 4分別分解纖維素的微生物的試驗流程圖如下: 梯度稀 釋 ; 5為確定得到的菌是否是纖維素分解菌, 仍學進行 的試驗; 纖維素 酶的發酵方法有 發酵和 發酵;測定方法一般是對纖維素酶分解濾紙等纖 維素后所產生的 進行定量測定; 第 4 頁,共 17 頁學習必備 精品學問點 專題學問歸納 培育基 培育基的類型 培育基的養分物質 防止雜菌污染的方法 無菌技術 試驗室常用的消毒方法
13、 試驗室常用的滅菌方法 微 制備牛肉膏蛋白 運算 生 稱量 物 溶化 的 胨固體培育基 滅菌 純化大腸桿菌 倒平板 實 平板劃線法 驗 稱釋涂布法 室 結果分析與評判 培 養 課題延長 微 生 土壤 選擇菌株 PCR 技術 試驗室中選擇微生物的原理 物 選擇培育基 中分 統計菌落數目 稀釋涂布平板法 的 顯微鏡直接計數法 解尿 設置對比 設置對比的目的 培 對比試驗的概念 養 素的 試驗設計 土壤取樣 樣品的稀釋 微生物的培與 細菌 育與觀 察無菌操作 應 的分 操作提示 做好標記 規劃時間 用 離與 結果分析與評判 纖維素酶的組成成分 計數 課題延長 纖維素與纖維素酶 纖維素酶分解纖維素的試
14、驗 剛果紅染料 選擇纖維素分解 纖維素分解菌的選擇 分解菌的依據 纖維素 試驗設計 土壤取樣 選擇培育 的微生 剛果紅染色法 操作提示 復習微生物技術 選物的 擇培育的操作方法 分別 結果分析與評判 課題延長 專題三 植物的組織培育技術 第 5 頁,共 17 頁學習必備 精品學問點 專題學問歸納 課題 1 月季的花藥培育 1有某種生物全套 的任何一個活細胞, 都具有發育成 的才能, 即每個 生物細胞都具有 條;但在生物體的生長發育過程中并不表現出來,這是由于在 件下,通過基因的 ,構成不同組織和器官; 2. 植物組織培育技術的應用有: 實現優良品種的 ;培育 作物;制作 種 子;培育作物 以及
15、細胞產物的 等; 3. 細胞分化:個體發育中細胞在 上顯現 差異的過程; 4. 愈傷組織是通過 形成的,其細胞排列 ,高度 呈 狀態的 細胞; 5. 植物組織培育的過程可簡潔表示為: (脫分化)愈)傷組織 ( ) (生長) 新個體 6. 材料:植物的種類,材料的 和 等都會影響試驗結果;菊花組織培育一般 選擇 作材料; 7. 養分:常用的培育基是 培育基,其中含有的大量元素是 ,微量元 素是 ,有機物有甘氨酸,煙酸,肌醇,維生素,蔗糖等; 8. 激素:在培育基中需要添加 , 和 等植物激素, 其 , 等都影響結果; 9. 環境條件: PH, , 等環境條件; 菊花組培所需 PH,溫度為 , ,
16、 光照條件為 為 ; 10. 配制各種母液: 將各種成分按配方比例配制成的濃縮液; 使用時依據母液的 運算用量,并加 稀釋; 11. 配制培育基:應加入的物質有瓊脂, 的母液,并用 ,大量元素,微量元素,有機物和植物激素 定容到 毫升;在菊花組織培育中,可以不添加 ,緣由是 菊花莖段組織培育比較簡潔; 12. 滅菌:實行的滅菌方法是 ; 13發酵操作 13.1 前期預備:用 消毒工作臺,點燃酒精燈;留意全部接種工作都必需在 酒精燈旁進行,器械使用前后都要用火焰灼燒 ; 接種操作:接種過程中插入外植體時 個外植 朝上,每個錐形瓶接種 體;外植體接種與細菌接種相像之處是 ; 第 6 頁,共 17
17、頁13.3 培育過程應當放在 學習必備 精品學問點 和 ; 中進行, 并定期進行消毒, 保持相宜的 移栽前應先打開培育瓶的 養 基;然后將幼苗移植到 行壯 苗;最終進行露天栽培; ,讓其在培育間生長幾日,然后用流水清洗根部培 等環境中生活一段時間, 進 離體細胞,組織,器官 (又叫 外植體 ) (脫分化)愈)傷組織 (再分化) 胚狀體 (生長) 新個體 課題 2 月季的花藥培育 1. 2. 3. 小孢子母細胞( 2n) ( )個精子 n ( )分裂 ( )分裂 ( )時期( n) ( )細胞( n) ( )細胞( n) 單核( )期( n) ( )細胞核( n) ( )細胞核( n) 單核(
18、)期( n) ( )分裂 雙核期 育被子植物花粉的發育要經受 , 和 等階段; 花粉是由花粉 母細胞經過 而形成的,因此花粉是 ; 在正常情形下,一個小孢子母細胞可以產生 個精子;在一枚花藥中可以產生 個花粉; 4. 5. 產生花粉植物的兩種途徑 花藥中的花粉 脫分化 ( ) 叢芽 誘導 生根 移栽 花藥中的花粉 脫分化 ( ) 叢芽 誘導花粉植株能否勝利及誘導勝利率的高低,受多種因素影響,其中影主要因素是: 和 等; 6. 材料的選擇: 從花藥來看,應當選擇(初花期,盛花期,晚花期)的花藥; 從花粉來看,應當選擇(四分體期,單核期,雙核期,萌發期)的花粉; 從花蕾來看,應當選擇(完全未開放,
19、略微開放,完全盛開)的花蕾; 7. 選擇花藥時一般通過 確定花粉發育時期, 此時需要對花粉細胞核進行染色, 最常 用的染色劑是 8. 和 ,它們分別可以將細胞核染成 色和 色; 在使用焙花青鉻釩溶液時,需要第一將花藥用 處理 20min;該試劑的配 制方法是將 按體積比為 的比例混合勻稱; 9. 消毒后的花蕾,要在 條件下除去花萼,花瓣;剝取花藥時,一是留意不要損耗花 第 7 頁,共 17 頁藥 , 原 因 是 學習必備 精品學問點 ; 二 是 要 徹 底 除 去 花 絲 , 原 因 是 ; 個花藥;花藥培育利用 10. 剝取的花藥要馬上接種到 上;每個培育瓶接種 的培育基是 培育基, pH,
20、溫度為 為 光照;在花藥培育基中,用量最高的激素是 , 幼苗形成之前(需要,不需要) ;在誘導叢芽或胚狀體培育基中, 用量最高的激素是 ;在誘導生根的培育基中, 用量最高的激素是 ; 11. 培育 20 30d 后,花藥開裂,長出 上進行分化培育成再生植株;后者要盡快 織形成的植株,經常會顯現 或釋放出胚狀體;前者仍要轉移到 并轉移到新的培育基上;通過愈傷組 的變化,因而需要鑒定和選擇; 概念: 植 菊 原理:細胞的全能性 基礎: 條件: 脫分化 再分化 植物組織培育的基本過程: 外植體 愈傷組織 胚狀體 幼苗 花 外植體的選擇 的 影響植物組織培育的因素: 養分,環境等 組 織 植物激素的用
21、法 培 養 溫度, pH,光照等 物 月 試驗操作: 制 備 MS 培育基 外植體消毒 接種 培育 移栽 栽培 組 織 被子植物花粉的發育: 花粉母細胞減數分裂小孢子母細胞四分體時期 培 單核期雙核期精子 養 產生花粉植株的兩種途徑: 季 花藥中的花粉 脫分化 胚狀體 分化 叢芽 誘導 生根 移栽 的 花 花藥中的花粉 脫分化 愈傷組織 再分化 藥 叢芽 培 主要因素:材料的選擇與培育基的組成 養 影響花藥培育的因素: 重要因素:選擇合適的花粉發育時期 影響因素: 親本植株的生長條件, 低溫處理和 接種密度等 材料的選?。捍_定花粉發育時期的方法 試驗操作: 材料的消毒: 接種和培育: 鑒定和選
22、擇: 第 8 頁,共 17 頁專題四 酶的爭辯與應用 學習必備 精品學問點 課題 1 果膠酶在果汁生產中的作用 1果膠是植物細胞壁以及胞間層的主要組成成分之一, 它是由 聚合而成的一 種高分子化合物,不溶于水;在果汁加工中,果膠不僅會影響出汁率,仍會使果汁渾濁;果 膠酶能夠分解 ,瓦解植物細胞的 及 ,使榨取果汁更簡潔, 而果膠分 解成可溶性的 ,也使得渾濁的果汁變得澄清; 果膠酶并不特指某一種酶, 而是分 解果膠的一類酶的總稱,包括 , 和 等; 果膠酶的來源: , , 和 均能產生果 膠酶;由于 廣泛的應用于 發酵生產的果膠酶是食品加工業中使用量最大的酶制劑之一,被 果汁加工業; 2酶的活
23、性是指 的才能; 酶活性的高低可以用在確定條件下, 酶所催化 的某一化學反應的 來表示; 在科學爭辯與工業生產中, 酶反應速度用單位時間內, 單位體積中 或 來表示; 3 , 和 等條件會影響酶的活性; 4.探究溫度和 pH 對酶活性的影響: 在一恒定溫度下, 通過設置 來確定酶 催化反應的最適 pH,在一恒定的 pH 下,通過設置 來確定沒催化反應 的最適溫度;在爭辯溫度和 pH 對唾液淀粉酶活性的影響時,通過用 檢測 反應后溶液是否變藍來判定酶是否有活性,本課題要求跟進一步,需要 測 定果膠酶的活性; 在測定果膠酶的活性時, 可通過測定 來判定果膠酶活性的 高低,獲得的蘋果汁越多,說明果膠
24、酶的活性越 ; 5. 探究果膠酶用量:生產果汁時,為了使果膠酶得到充分的 ,節省成本,需 要把握好酶的 ;該試驗是在探究果膠酶的 和 之后進行的,試驗 的變量不再是 或 ,而是 ;在這個試驗中,除了酶的用量外,影響果汁產 量的因素仍有 , , , ; 課題 2 探討加酶洗衣粉的洗劑成效 1 加 酶 洗 衣 粉 是 指 含 有 的 洗 衣 粉 , 目 前 常 用 的 酶 制 劑 有 四 類: , , 和 ;其 中,應用最廣泛廣泛,成效最明顯的是 和 ; 2堿性蛋白酶能將血漬, 奶漬等含有的大分子蛋白質水解成可溶性的 或小分子的 , 使污跡從衣物上脫落;脂肪酶,淀粉酶和纖維素酶也能分別將大分子的
25、, 和 水解為小分子物質,使洗衣粉具有更 的去污才能; 3加酶洗衣粉的洗滌成效: ( 1)影響因素:使用加酶洗衣粉時, 影響酶活性的因素有 , 和 等,為此科學家通過 生產出了能夠 , 和 的 酶,并制成酶制劑,使其與洗衣粉的其他成分隔離; ( 2)留意事項:衣物的洗滌,不僅要考 慮洗滌成效,仍要考慮衣物的 , 等因素; 4.試驗設計:試驗設計遵循的原就是 和 ;( 1)探究普 通洗衣粉和加酶洗衣粉對衣物污漬的洗滌成效的區分時,要把握 為自變量, 第 9 頁,共 17 頁學習必備 精品學問點 其他條件一樣,同時一般洗衣粉處理污漬物與加酶洗衣粉處理污漬物形成 實 驗;( 2)在探究加酶洗衣粉的最
26、適溫度時, 是自變量,不同試驗組之間 形成 ;( 3)在探究不同種類的加酶洗衣粉的洗滌成效時,變量 時 ,污漬應是完全相同的; 課題 3 酵母細胞的固定化 1高果糖漿的生產需要使用 ,它能將葡萄糖轉化成果糖; 這種酶的 好, 可以連續發揮作用; 但是, 酶溶解于葡萄糖溶液后, 就無法從糖漿中回收, 造成很大的鋪張; 2使用固定化酶技術,將這種酶固定在一種 上,再將這些酶顆 粒裝到一個 內,柱子底端裝上分布著很多小孔的 ;酶顆粒無法通過篩 板的小孔,而反應溶液卻可以自由出入;生產過程中,將葡萄糖溶液從反應柱的上端注入, 使葡萄糖溶液流過反應柱,與 接觸,轉化成果糖,從反應柱的下端流出; 反應柱能
27、連續使用半年,大大降低了生產成本,提高了果糖的產量和質量; 3固定化酶和固定化細胞是利用 或 方法將酶或細胞固定在 確定空間內的技術,包括 , 和 法;一般來說,酶 更適合接受 和 法固定, 而細胞多接受 法固定化; 這是 由于細胞個大,而酶分子很?。粋€大的難以被 或 ,而個小的酶 簡潔從 中漏出; 4 包 埋 法 法 固 定 化 細 胞 即 將 微 生 物 細 胞 包 埋 在 不 溶 于 水 的 中 ; 常 用 的 載 體 有 , , , 和 等; 5.配制海藻酸鈉溶液時要邊加熱邊攪拌;加熱時要用 ,或者 加 熱,反復幾次, 直到海藻酸鈉融解為止; 將融解好的海藻酸鈉溶液先冷卻至 ,再 與
28、緩 混合;混合時要充分 ,使其混合勻稱, 再轉移到 中, 慢的 到支配好的 溶液中,觀看是否有 形成; 6.將凝膠珠加入用于發酵的葡萄糖溶液后,發覺 產生,同時又 味 散發; 專題學問結構 . .D. | . 1.o. . . . 1.o. 1.-. .D. . | .| 2 .D.| . . .:. .pH;. . . .1.o. . . o.D. . .; . ;. : . ;. .D1. . . :. . . . .1 . . .| .y :.1. 2 . .1. . 1 . . .: .;. . o. ;. .1 . . .第 10 頁,共 17 頁專題 5學習必備 精品學問點 DNA
29、和蛋白質技術 課題 1DNA 的粗提取與鑒定 導學誘思 1提取 DNA 的方法 提取生物大分子的基本思路是 , 等在物理和化學性質 ; 對于 DNA 的粗提取而言,就是要利用 方面的差異,提取 DNA ,去除其他成分; 1)DNA 的溶解性 DNA 和蛋白質等其他成分在不同濃度的 中溶解度不同, 利用這一特點,選擇適當的鹽濃度就能使 以達到分別目的; 充分溶解,而使雜質沉淀,或者相反, 圖 5 1 是 DNA 在 NaCl 溶液中的溶解度曲線,請依據曲線圖, 摸索: 在什么濃度下, DNA 的溶解度最??? DNA 在 NaCl 溶液中的溶解度是如何變化的? 如何通過把握 NaCl 溶液的濃度使
30、 DNA 在鹽溶液中溶解或析出? 此外, DNA 不溶于 溶液, 但是細胞中的某些蛋白質就溶于酒精; 利用這一原 理,可以將 DNA 與蛋白質進一步的分別; 2) DNA 對酶,高溫存洗滌劑的耐受性 蛋白酶能水解 在 ,但是對 沒 有影響;大多數蛋白質不能忍耐 60 80oC 的高溫,而 DNA 以上才會變性;洗 滌劑能夠瓦解 ,但對 DNA 沒有影響; 會被染成 色, 3) DNA 的鑒定 在 條件下, DNA 遇 因此二苯胺可以作為鑒定 DNA 的試劑; 2試驗設計 1 ) 實 驗 材 料 的 選 取 凡 是 含 有 的 生 物 材 料 都 可 以 考 慮 , 但 是 使 用 的生物組織,
31、勝利的可能性更大;在下面的生物材料中選取適合的試驗材料: 魚卵,豬肝,菜花(花椰菜) 菠菜,在液體培育基的大腸桿菌 摸索: 哺乳動物的紅細胞的特點? ,香蕉,雞血,哺乳動物的紅細胞,獼猴桃,洋蔥,豌豆, 2)破裂細胞,獵取含 DNA的濾液 動物細胞的破裂比較簡潔 , 以雞血細胞為例,在 雞血細胞液中加入確定量的 ,同時用 攪拌, 過濾后收集濾液即可; 假如試驗材 料是植物細胞,需要先用 溶解細胞膜;例如,提取洋蔥的 DNA 時,在切碎的洋蔥 中加入確定的 和 ,進行充分的攪拌和研磨,過濾后收集研磨液; 摸索: 為什么加入蒸餾水能使雞血細胞破裂? 加入洗滌劑和食鹽的作用分別是什么? 第 11 頁
32、,共 17 頁學習必備 精品學問點 假如研磨不充分,會對試驗結果產生怎樣的影響 .此步驟獲得的濾液中可能含有哪些細胞成分? 3)去除濾液中的雜質 閱讀課本的三個方案, 摸索: 為什么反復地溶解與析出 DNA ,能夠去除雜質? 方案二與方案三的原理有什么不同? 的 4) DNA 的析出與鑒定 將處理后的溶液過濾 , 加入與濾液體積 ,冷卻 ,這就是粗提取的 DNA ;用玻璃棒 ,靜置 ,溶液中會顯現 攪拌,卷起絲狀物,并用濾紙吸取上面的水分; 取兩支 20ml 的試管, 各加入物質的量濃度為 的 NaCl 溶液 5ml ,將絲狀物放 入其中一支試管中,用玻璃棒攪拌,使絲狀物溶解;然后,向兩支試管
33、中各加入 4ml 的 ;混合勻稱后,將試管置于 中加熱 5min,待試管冷卻后,比較兩支 試管溶液顏色的變化,看看溶解有 DNA 的溶液是否變 ; 3操作提示 以血液為試驗材料時,每 100ml 血液中需要加入 3g ,防止 ; 加入洗滌劑后, 動作要 , ,否就簡潔產生大量的泡沫, 不利于后續步 驟地操作;加入酒精和用玻璃棒攪拌時,動作要 ,以免 ,導致 DNA 分子不能形成絮狀沉淀; 二苯胺試劑要 ,否就會影響鑒定的成效; 4結果分析與評判 課題 2多聚酶鏈式反應擴增 DNA片段 導學誘思 1 PCR 原理 填寫以下表格 參加的組分 在 DNA 復制中的作用 解旋酶 DNA 母鏈 合成子鏈
34、的原料 DNA 聚合酶 引物 DNA 的兩條鏈是反向平行的,通常將 DNA 的羥基末端稱為 ,而磷酸基團的末 端稱為 ; DNA 聚合酶不能 開頭合成 DNA ,而只能 ,因此, DNA 復制需要引物; DNA 的合成方向總是 ; 在 DNA 的復制過程中,復制的前提是 ;在體外可通 過把握 來實現;在 的溫度范疇內, DNA 的雙螺旋結構將解體,雙鏈分 第 12 頁,共 17 頁開,這個過程稱為 學習必備 精品學問點 原理,通過把握溫度來控 ; PCR 利用了 DNA 的 制雙鏈的解聚與結合; 由于 PCR 過程的溫度高, 導致 DNA 聚合酶失活, 后來 的 DNA 聚合酶的發覺和應用,大
35、大增加了 PCR 的效率; PCR 反應需要在確定的緩沖溶液中供應: , , , ,同時通過把握溫度使 DNA 復制在體外反復 進行; 2 PCR 的反應過程 PCR 一般要經受 循環,每次循環可以分為 , 和 三步; 從其次輪循環開頭, 上一次循環的產物也作為模板參加反應, 并且由 延長而成 的 DNA 單鏈會與 結合,進行 DNA 的延長,這樣, DNA 聚合酶只能 ,使這段固定長度的序列成指數擴增; 3試驗操作 在試驗室中,做 PCR 通常使用 量移液器, 按 PCR 反應體系的配方在 計好 PCR 儀的循環程序即可; 4操作提示 ,它是一種薄壁塑料管;詳細操作時,用微 中依次加入各組分
36、, ,再參照下表的設置設 為防止外源 DNA 等因素的污染, PCR 試驗中使用的 , , 以 及蒸餾水等在使用前必需進行 ; PCR 所用的緩沖液和酶應分裝成小份,并在 儲存;使用前,將所需試劑從冰箱拿出,放在冰塊上緩慢融解; 在微量離心管中添加 反應成分時,移液管上的槍頭要 ; 課題 3 血紅蛋白的提取和分別 【導學誘思】 1凝膠色譜法 凝膠色譜法也稱做 ,是依據 分別蛋白質的有效方法; 凝膠實際上是一些由 構成的多孔球體, 在小球體內部有很多貫穿的通道, 相 對分子質量不同的蛋白質分子通過凝膠時速度不同,相對分子質量較小的蛋白質 進 入凝膠內部的通道,路程 ,移動速度 ;而相對分子質量
37、的蛋白質 無法進入凝膠內部的通道,只能在 移動,路程 ,移動速度 ; 相對分子質量不同的蛋白質分子因此得以分別; 2緩沖溶液 緩沖溶液的作用是 溶解于水中配制而成的; 生物體內進行的各種生物化學 ; 緩沖溶液通常由 反應都是在確定的 pH 下進行的,例如:血漿的 pH 是 ,要在試驗條件下精確 模擬生物體內的過程,必需保持體外的 3電泳 pH 與體內的基本一樣; 電泳是指 ;很多重要的生物大分子, 如多肽,核酸等都具有可解離的基團,在確定的 pH 下,這些基團會帶上 ;在 電場的作用下, 這些帶電分子會向著與其所帶電荷 的電極移動; 電泳利用了待分別 樣品中各分子 以及分子本身的 , 的不同,
38、 使帶電分子產生 不同的 ,從而實現樣品中各種分子的分別; 兩種常用的電泳方法是 和 ,在測定蛋白質分子 量時通常使用 ;蛋白質在聚丙烯酰胺凝膠中的遷移 率取決于 以及 等因素; 第 13 頁,共 17 頁學習必備 精品學問點 4蛋白質的提取和分別 蛋白質的提取和分別一般分為四步: , , 和 ; 5樣品處理 血液由 和 組成,其中紅細胞最多;紅細胞具有 的特點;紅細胞中有一種特別重要的蛋白質 ,其作用是 ,血紅蛋白有 個肽鏈組成, 包括 ,其中每條肽 鏈圍繞一個 ,磁基團可攜帶 ;血紅蛋白因含有 顯現紅 色; 紅細胞的洗滌 洗滌紅細胞的目的是 ,采 集的血樣要準時接受 分別紅細胞, 然后用膠
39、頭吸管吸出上層透亮的 , 將下層暗紅色的 倒入燒杯, 再加入 ,緩慢攪拌 ,低速短時 間離心,如此重復洗滌三次,直至 ,說明紅細胞已洗滌潔凈; 血紅蛋白的釋放 在 和 作用下,紅細胞破裂釋放出血紅蛋白; 分別血紅蛋白溶液 將攪拌好的混合溶液離心后, 試管中的溶液分為 4 層;第一層為 無色透亮的 ,第 2 層為白色薄層固體,是 ,第 3 層是紅色透亮液體, 這是 ,第 4 層是其他雜質的暗紅色沉淀物;將試管中的液體用濾紙過濾,除 去之溶性沉淀層,于分液漏斗中靜置片刻后,分出下層的紅色透亮液體; 透析 取 1mL 的血紅蛋白溶液裝入 中,將透析袋放入盛有 300mL 的物質的 量的濃度為 20m
40、mol/L 的 中,透析 12h;透析可以去除樣品中 的雜 質,或用于更換樣品的 ; 6凝膠色譜操作 第一步要制作 ,其次步要 ,由于 ,所以裝 柱前需要依據色譜柱的內體積運算所需要的凝膠量; 在裝填凝膠柱時, 不得有 存在; ,降低分別成效;第三步是 由于氣泡會 ; 第 14 頁,共 17 頁學習必備 精品學問點 專題學問歸納 基礎學問:提取 DNA 的方法 試驗材料的選取 試驗設計 破裂細胞,獵取含 DNA 的濾液 去除濾液中的雜質 DNA 和蛋白質技術 DNA 的粗提取 操作提示 DNA 的析出與鑒定 與鑒定 以血液為材料要防止血液凝固 加入洗滌劑后,動作要輕緩;加入酒精 和用玻璃棒攪拌時,動作要輕緩 二苯胺試劑要現配現用 結果分析與評判 課題延長 PCR 原理 多聚酶鏈式反 基礎學問 PCR 的反應過程 試驗操作 應擴增 DNA 操作提示 片段 結果分析與評判 課題延長 凝膠色譜法 血紅蛋白的提 基礎學問 緩沖溶液 取和分別 電泳 樣品處理 試驗操作 凝膠色譜操作 SDS聚丙烯酰凝膠電泳 紅細胞的洗滌 試驗操作 色譜主填料的處理 凝膠色譜柱的裝填 蛋白質的分別 結果分析與評判 課題延長 第 15 頁,共 17 頁學習必備 精品學問點 專題六 植物有效成分的提取 課題 1
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