1、試驗室生物安全與個人防護丹東市疾病預防控制中心微生物試驗室郭佳馥4月28日第1頁第1頁主要內容一、試驗室生物安全二、個人防護第2頁第2頁一、試驗室生物安全（一）中國試驗室生物安全相關法律法規 1、國家法律：中華人民共和國刑法修正案 中華人民共和國主席令（第51號）.6.29中華人民共和國傳染病防治法 中華人民共和國主席令（第17號）.12.1第3頁第3頁2、國務院條例病原微生物試驗室生物安全管理條例 中華人民共和國國務院令（第424號）.11.12突發公共衛生事件應急條例 中華人民共和國國務院令（第376號）.5.9醫療廢物管理條例 中華人民共和國國務院令（第380號）.6.6第4頁第4頁3、

2、部門規章可感染人類高致病性病原微生物菌（毒）種或樣本運送管理要求 中華人民共和國衛生部令（第45號）.2.1人間傳染病原微生物名目 中華人民共和國衛生部文獻（衛科教發15號）.2.1人間傳染高致病性病原微生物試驗室和試驗活動生物安全審批管理辦法 中華人民共和國衛生部令（第50號）.8.1病原微生物試驗室安全環境管理辦法 國家環境保護總局令（第32號）.5.1醫療衛生機構醫療廢物管理辦法 中華人民共和國衛生部令（第35號）.10.15第5頁第5頁醫療廢物管理行政處分辦法 中華人民共和國衛生部、環境保護總局令（第21號）.6.1醫療廢物分類目錄 中華人民共和國衛生部、環境保護總局（衛醫發287號）

3、.10.10醫療廢物專用包裝物、容器原則和警示標識要求 環境保護總局（環發188號）.11.20醫療廢物集中處置技術規范 環境保護總局（環發206號）.12.26人間傳染病原微生物菌（毒）種保藏機構管理辦法 中華人民共和國衛生部令（第68號）.7.18第6頁第6頁4、國家原則及行業原則試驗室生物安全通用要求 中華人民共和國國家原則（GB19489-）.12.26生物安全試驗室建筑技術規范 中華人民共和國國家原則（GB50346-）.9.1微生物和生物醫學試驗室生物安全通用準則 中華人民共和國衛生行業原則（WS233-）.8.1生物安全柜 中華人民共和國醫藥行業原則（YY0569-）.6.1生物

4、安全柜 中華人民共和國建筑工業行業原則（JG170-）.6.1第7頁第7頁(二)、試驗室生物安全 試驗室不也許完全沒有風險。應考慮試驗過程中涉及所有原因，盡量減少風險。 1.充足保障工作人員避免所操作生物因子 危害，確保其不受試驗對象侵染 2.確保危險生物因子不向試驗室外擴散, 確保周圍環境不受其污染第8頁第8頁 國務院公布病原微生物試驗室生物安全管理條例中要求，依據試驗室對病原微生物生物安全防護水平不同，將試驗室分為一級、二級、三級和四級。一級、二級試驗室不得從事高致病性病原微生物試驗活動，三級、四級試驗室從事高致病性病原微生物試驗活動。第9頁第9頁BSL-1 、BSL-2試驗室設施和設備要

5、求 依據試驗室生物安全通用要求GB19489-要求， BSL-1試驗室原則條款有：試驗室門應有可視窗并可鎖閉，門鎖及門啟動方向應不阻礙室內人員逃生。每個試驗室應設洗手池，宜設置在靠近出口處。在試驗室門口處應設掛衣裝置，個人便裝與試驗室工作服分開設置。試驗室墻壁、天花板和地面應宜清潔、不滲水、耐化學品和消毒滅菌劑腐蝕。地面應平整、防滑，不應鋪設地毯。試驗室臺柜和座椅應穩固，邊角應圓滑。試驗室臺柜和其擺放應便于清潔，試驗臺面防水，耐腐蝕、耐熱和堅固。第10頁第10頁試驗室應有足夠空間和臺面擺放試驗設備和物品。依據工作性質和流程合理擺放試驗室設備、臺柜、物品等，避免互相干擾、交叉污染，并應不阻礙逃生

6、和搶救。試驗室能夠利用自然通風。假如應用機械通風，應避免交叉污染。理解：機械通風應單向風流動，空調不與其它房間交叉假如有可啟動窗戶，應安裝紗窗。試驗室內應避免不必要反光和強光。若操作刺激和腐蝕性物質，應在30m內設洗眼裝置，必要時設緊急噴淋裝置。若操作有毒、刺激性、放射性揮發物質，應在風險評估基礎上，配備適當負壓排風柜。若使用高毒性、放射性等物質，應配備相應安全設施、設備和個體防護裝備，應符合國家和地方相關要求和要求。第11頁第11頁若使用高壓氣體，應有安全辦法，應符合國家、地方相關要求和要求。應設緊急照明裝置。應有足夠電力供應。應有足夠電源插座，避免多臺設備使用共同電源插座供水和排水管道系統

7、應不滲漏，下水應有防回流設計。應配備使用應急器材，如消防器材，救急器材等。應配備合用通訊設備。必要時應配備適當消毒滅菌設備。第12頁第12頁BSL-2試驗室設施和設備要求BSL-2試驗室在符合BSL-1試驗室要求基礎上，滿足下列7條。試驗室主入口門、放置生物安全柜試驗室間門應可自動關閉；試驗室主入口門應有進入控制辦法。試驗室工作區域外應有存儲備用物品條件。應在試驗室工作區配備洗眼裝置設施。應在試驗室或其所在建筑物內配備高壓蒸汽滅菌器或其它適當消毒滅菌設備，所配備消毒滅菌設備應以風險評估為依據。理解：高壓蒸汽滅菌器可多個試驗室公用，應靠近BSL-2應在操作病原微生物樣本試驗間內配備生物安全柜。第

8、13頁第13頁應按照產品設計要求安裝和使用生物安全柜，假如安全柜排風在室內循環，室內應具備通風換氣條件；假如需要使用管道排風生物安全柜，應通過獨立于建筑物其它公共通風系統管道排出。應有可靠電力供應。必要時，主要設備如培養箱、生物安全柜、冰箱等設備應配備備用電源。BSL-2試驗室設施和設備要求第14頁第14頁HIV相關檢測生物安全級別1. HIV抗體檢測（包括初篩和確證試驗）、抗原檢 測和相關免疫學檢測應在符合二級生物安全試驗室（BSL-2）要求艾滋病檢測試驗室中進行。2. HIV分離培養、濃縮、中和試驗、細胞培養及研究工作及其它需要應用活病毒研究試驗，應在三級生物安全試驗室（BSL-3）中進行

9、。3. HIV核酸提取和檢測應在符合二級生物安全試驗室（BSL-2）要求艾滋病檢測試驗室中進行。4. HIV病毒株應保留在符合三級生物安全試驗室（BSL-3）要求艾滋病檢測試驗室； HIV陽性樣品（血清、血漿、全血和其它組織（液）、核酸提取物）應保留在符合二級生物安全試驗室（BSL-2）要求艾滋病檢測試驗室。第15頁第15頁二、個人防護個人防護裝備工作人員自我防護第16頁第16頁（一）個人防護裝備所涉及防護部位 ： 裝備涉及： 1、眼睛 1、 眼鏡（安全鏡、護目鏡） 2、頭面部 2、口罩、帽子 3、軀體 3、防護衣 4、手 4、手套 5、足 5、鞋套 第17頁第17頁艾滋病傳播主要路徑性 接

10、觸血液接觸母嬰傳播 血液傳播路徑:試驗室人員含有感染HIV危險性第18頁第18頁什么是HIV職業暴露？ HIV職業暴露是工作人員，如試驗室技術人員、醫生、護士、護理員、警察、監獄管理人員等，在從事艾滋病防治工作中，意外地被HIV感染者或艾滋病人血液、體液污染了破損皮膚或非胃腸道粘膜，或被含有HIV血液、體液污染了針頭及其它稅器刺破皮膚，而造成有被HIV感染也許性情況。第19頁第19頁職 業 暴 露 主要方 式皮膚針刺傷或銳器切割傷；粘膜或破損皮膚（如皸裂、皮膚炎癥等）接觸感染性材料；皮膚即使完整無破損，但大面積或長時間（幾分鐘或更長）接觸感染性材料第20頁第20頁HIV對環境抵抗力 HIV對外

11、界環境中物理和化學原因抵抗力均較低,比乙型肝炎病毒(HBV)抵抗力低得多.因此,對HBV消毒和滅活辦法對HIV均可使用。對熱抵抗力對化學品抵抗力對紫外線抵抗力 第21頁第21頁對熱抵抗力在室溫(22-27)液體環境下可存活15天以上.在54-56 時病毒活性約每20分鐘下降1個對數TCID50(細胞半數感染單位)56 30分鐘可使HIV在體外對人T淋巴細胞失去感染性通過60 3小時或80 30分鐘作用,不能檢出感染性病毒,對逆轉錄病毒滅活,WHO推薦100 20分鐘在-70 不加保護劑冷凍保留,其感染性可喪失.但若在 - 70 保留于35%山梨醇或50%胎牛血清(FBS)中可存活3個月以上第2

12、2頁第22頁對化學品抵抗力HIV不耐酸, pH3.0時病毒滴度在10分鐘下降4個對數.HIV較耐堿, pH高達9.0時,病毒滴度下降甚微HIV對消毒劑、去污劑等化學原因敏感: 0.2%次氯酸鈉 0.1%家用漂白粉 0.3%雙氧水 75%酒精 0.5%來蘇兒等5分鐘可滅活HIV第23頁第23頁對紫外線抵抗力 對紫外線或射線不敏感，紫外線、射線不能滅活HIV。第24頁第24頁（二）工作人員自我防護WHO推薦普遍性防護原則認為，在為病人提供醫療服務時，無論是病人還是病人血液和體液，也無論他們是陽性還是陰性，都應當作為具有潛在性傳染性加以防護。第25頁第25頁檢查人員自我防護主要內容手套1、 手套應在

13、試驗室工作時使用。2、在接觸感染性物質 （血液、體液、分泌液、滲出液、以及接觸粘膜和非完整皮膚時），必須使用適當手套以保護工作人員避免受到污染物濺出或生物污染事故所造成損害。3、手套被污染，應該盡也許早脫下，消毒后丟棄。4、手套應按所從事操作性質符合舒適、靈活、握牢、耐磨、耐扎和耐撕要求，并應對所包括危險提供足夠防護。5、對試驗室工作人員進行手套選擇、使用前及使用后配戴及摘 除等培訓。 6、一次性手套不得重復使用。7、一次性手套必須先消毒后丟棄。第26頁第26頁檢查人員自我防護主要內容口罩和防護眼鏡當處理血液、體液、分泌物、排泄物等有也許濺出時，應戴口罩和防護眼鏡。 安全鏡 護目鏡 第27頁第

14、27頁檢查人員自我防護主要內容防護服（試驗服、隔離衣、連體衣、圍裙以及正壓防護服）1、在試驗室中工作人員應當始終或連續穿上防護服2、清潔防護服應放置在專用存儲處3、污染防護服應放置在有標志防漏消毒袋中4、每隔適當時間應更換防護服以確保清潔 5、當防護服已被危險材料污染后應馬上更換6、離開試驗室區域之前應脫去防護服。第28頁第28頁檢查人員自我防護主要內容鞋套當試驗室中存在物理、化學和生物危險因 子情況下，穿適當鞋子和鞋套或靴套。 能夠預防試驗人員足部（鞋襪）避免受到 損傷。BSL-2和BSL-3試驗室要堅持穿鞋套或靴套。第29頁第29頁第30頁第30頁檢查人員自我防護主要內容銳器 試驗用過一次

15、性槍頭應將其直接放入堅固、不能穿透容器內，待試驗結束之后一并焚燒處理。第31頁第31頁試驗室人員防護要點試驗室檢測工作過程中要嚴格執行試驗室安全操作規程，并實施普遍性防護辦法；試驗室應備有必要消毒劑和消毒設備；把全部標本都應看作潛在HIV傳染源；病人標本應放在固定容器里，避免污染到容器外，假如潑灑出來，應盡快用消毒劑進行處理；標本運輸均應放入有蓋容器內；離心、攪拌、超聲、吸吹標本時會產生大量氣溶膠，這些操作應在超凈工作臺中進行；盡也許避免使用銳器，假如確實需要使用銳器，提議在使用銳器前更換兩副新手套，并小心操作，避免戳傷；操作時如有標本、檢測試劑外濺時應及時消毒；工作結束后，在收檢和消毒工作臺

16、面時應小心避免被利器損傷。第32頁第32頁總結碰到手部皮膚有開放性傷口及其它不適于工作情況，應暫停工作。皮膚微小傷口、擦傷、皸裂等，應用防水敷料嚴密覆蓋。應為每一名在艾滋病試驗室工作人員提供充足防護服、一次性乳膠手套、口罩、帽子和鞋套。應將清潔防護服和其它個人防護用具置于試驗室清潔區內專用處存儲。試驗室應設應急沖洗眼睛裝置。第33頁第33頁總結工作人員上崗前必須通過HIV抗體和乙型肝炎病毒、丙型肝炎病毒等肝炎病毒標志物檢測，應接種乙肝疫苗。應每年對工作人員采血檢測HIV抗體，血清應長期保留。進試驗室工作前要摘除首飾，修剪長帶刺指甲，以免刺破手套。嚴禁在試驗室內進食、飲水、吸煙和化妝。試驗操作時應穿適當防護服（白大衣、隔離衣或一次性工作服）、戴手套和口罩、鞋套。如接觸物傳染性大，應戴雙層手套；含有HIV樣品有也許噴濺時，應戴防護眼鏡、防水（如塑料）圍裙。工作完畢，先脫去手套，再脫去防護服，用肥皂和流動水洗手。穿