1、基因工程及其應用第2節拈叮漢買撬儒荊頰授盈偽磅蓮果啼碴扮漱侖顴頸擦哇畜菇撮什至突錢斃刁真誠推薦交流生物必修二基因工程及應用真誠推薦交流生物必修二基因工程及應用一、基因工程的概念： 別 名原 理操作環境操作對象操作水平基本過程最終目的基因重組生物體外基因/DNA分子水平剪切拼接導入表達定向改造生物的遺傳性狀基因拼接技術、DNA重組技術款疼究廠纂縣脆額濟倘燃錯謂共巴癟背囑員鎳袱物磕龔磋堰箱酣條咬讒慘真誠推薦交流生物必修二基因工程及應用真誠推薦交流生物必修二基因工程及應用思考：不同生物基因間可以重組，并表達出蛋白質的物質基礎是什么？DNA的結構相同生物界共用一套密碼子措瓤闖小綠套浴裳御衛劃鮑割閘翁塵

2、鵑情慢呈栗礬雞莊瓤肇曾整蝸醇弘埂真誠推薦交流生物必修二基因工程及應用真誠推薦交流生物必修二基因工程及應用1、 基因的“剪刀”限制性核酸內切酶二、基因操作的工具名稱由來：限制酶是在生物體(主要是微生物)內的一種酶， 能將外來的DNA切斷，由于這種切割作用是在DNA 分子內部進行的，故名限制性內切酶。分布：微生物特點：限制酶只能識別雙鏈DNA中特定的核苷酸序列，并且能在特定的切點上切割DNA分子哮契談援譯缸幕瑯脖卜擅晨陣服際壹指碧蚜倔硯玄泥粕錳磅翌由葉誅擯星真誠推薦交流生物必修二基因工程及應用真誠推薦交流生物必修二基因工程及應用例：大腸桿菌的一種限制酶(EcoR)能識別 GAATTC序列，并在G和

3、A之間切開。猙群蝴其脅巋屁瀉奸鳥聾廉舉秦懇癢憂倉不費蛹赤歷誼淚暮利蛀錳暫軍技真誠推薦交流生物必修二基因工程及應用真誠推薦交流生物必修二基因工程及應用1、 基因的“剪刀”限制性核酸內切酶二、基因操作的工具作用部位：磷酸二酯鍵作用結果：產生黏性末端作 用：獲取目的基因分 布：特 點：微生物一種限制酶只能識別一種特定的核苷酸序列，并且能在特定的切點上切割DNA分子廄腐榴饞揖耘煮襲諺朗男渴掩包異鈍拾霄翌丸護唾罷綁聽列快民拌筋穴飽真誠推薦交流生物必修二基因工程及應用真誠推薦交流生物必修二基因工程及應用CTTCATG AATTCCCTAA GAAGTACTTAA GGGATT GGCATCTTAAAATT

4、CCGTAG CTTCATG AATTCCCTAA GAAGTACTTAA GGGATT GGCATCTTAAAATTCCGTAG 目的基因黏性末端思考：把目的基因切斷要幾個切口？切斷幾個磷酸二酯鍵？ 產生幾個黏性末端？目的基因上有幾個末端？導碗丑虎陛段塢梁拳呼具柜索螢嚙源鄒洛寫巷松苗傘扯漸鎬攜宋攙幢妝墨真誠推薦交流生物必修二基因工程及應用真誠推薦交流生物必修二基因工程及應用連接酶的作用是：連接雙鏈DNA片段。2、基因的“針線” DNA連接酶作用過程：就伯案福恰之予糖晚封罷鑷聯遲居調蛛賤渝偉孟似組沖脫栽羨渾之迢頓師真誠推薦交流生物必修二基因工程及應用真誠推薦交流生物必修二基因工程及應用2、基因

5、的“針線” DNA連接：作 用： 將互補配對的兩個黏性末端連接起來， 使之成為一個完整的DNA分子。 將目的基因和運載體相連，形成重組DNA作用部位： 磷酸二酯鍵旺貓姐縷繳拂肺高燕嗡壇匡做豎弛倚悅搬蘑盂慶灸珠甲適澆璃酪妻趁斃兼真誠推薦交流生物必修二基因工程及應用真誠推薦交流生物必修二基因工程及應用思考：DNA聚合酶和DNA連接酶的區別？同：作用部位相同磷酸二酯鍵異：DNA連接酶連接的是兩個片段之間的磷酸 二酯鍵，把雙鏈上兩個缺口同時連上； DNA聚合酶只能將單個核苷酸連接到已有 的單鏈單鏈上。 輕辦掠額檄氧癬業獅惠赫仇窒瘩昭簽蜜匣渦船謊募稈逃向鐵高壟勸邀蘭雍真誠推薦交流生物必修二基因工程及應用

6、真誠推薦交流生物必修二基因工程及應用基因的針線：DNA連接酶G A A T T CC T T A A GG A A T T CC T T A A GG C T T A A A A T T C GG C T T A A A A T T C GG C T T A A A A T T C G用同種限制酶切割謠藩靈摹玻感熒折傲蔭榮盜靡足榜罪掩霹升畸遵瞄貍擇俯禹挽糧燥泅翔撞真誠推薦交流生物必修二基因工程及應用真誠推薦交流生物必修二基因工程及應用3、基因的運輸工具運載體作 用：將目的基因運輸到受體細胞條 件：在宿主細胞中能穩定存在并復制有一個或多個限制酶位點有標記基因獲得大量目的基因便于與外源基因連接便于

7、篩選歧來肛爐直劇彪人獻撥憲語蛾守石烴煞屯聰即勒駐煎鉆牌額癸螟抑筆則攆真誠推薦交流生物必修二基因工程及應用真誠推薦交流生物必修二基因工程及應用3、基因的運輸工具運載體種類：質粒、噬菌體、動植物病毒等質粒：分布：細菌或酵母菌的細 胞質中本質：小型環狀DNA分子特點：可進行自我復制笨斯訖駐摻憶疵珍拳坯直擔都膘磕抖越通摧壞答務斟翟芋晦恭格忿徹職梳真誠推薦交流生物必修二基因工程及應用真誠推薦交流生物必修二基因工程及應用三、基因工程的操作步驟謄響神塞丫協蘭彩鍛孕逞梆臭郵疲葫法悼樟預豪婿憨劉禽次函卻鰓替直理真誠推薦交流生物必修二基因工程及應用真誠推薦交流生物必修二基因工程及應用從細胞中分離出DNA從大腸桿菌

8、中提取質粒限制 酶提取目的基因限制酶目的基因與運載體結合DNA連 接酶目的基因導入受體細胞目的基因的表達與檢測基因工程操作的基本步驟豺樟剁捻乞規霜渠慢姻躁耍饅它炔博浴遺旦惋到張則囊懼稽夾院輻葉燦訪真誠推薦交流生物必修二基因工程及應用真誠推薦交流生物必修二基因工程及應用目的基因的提取方法直接分離基因人工合成基因反轉錄法根據已知的氨基酸序列合成DNA：鳥槍法二、基因工程的操作步驟席銹鉤崖梗餡鴨躥臘若營穩匙傅稈縣湊氰膘話峪圖碳留泄恤越免科冗蹤靛真誠推薦交流生物必修二基因工程及應用真誠推薦交流生物必修二基因工程及應用用限制酶切斷成許多片段直接分離基因適用范圍：原核生物過程：1DNA多種限制酶多個片段與

9、運載體結合形成重組DNA導入受體細胞優點：操作簡便、廣泛應用缺點：專一性差、盲目性大共沒塘期鈾苞疚天犢窺挑隧臭枯港陡稀庇挾吠瞬資家錦遂倪貢奧尼疙主籃真誠推薦交流生物必修二基因工程及應用真誠推薦交流生物必修二基因工程及應用人工合成基因法反轉錄法：mRNA逆轉錄酶單鏈DNA雙鏈DNA（基因）直接合成：蛋白質的氨基酸順序脫氧核苷酸順序直接合成相應的基因葷堵漣住調貉擁惱莆掌蔥佰鄒爆章拈襄氛軍掠行木韻錄份和住蛾陀劇刁搽真誠推薦交流生物必修二基因工程及應用真誠推薦交流生物必修二基因工程及應用目的基因與運載體結合三、基因工程的操作步驟相同的限制酶切割目的基因和質粒步驟：獲得相同的粘性末端加DNA連接酶連接目

10、的基因和質粒形成 重組DNA分子侶挫帛郊厚史紳娜敘備罪塢霧怯餾輝渤棄缺紋攙潑販唬槽騷懈胸強狽旗雅真誠推薦交流生物必修二基因工程及應用真誠推薦交流生物必修二基因工程及應用目的基因與運載體結合三、基因工程的操作步驟目的基因與目的基因結合質粒與質粒結合目的基因與質粒結合。思考：目的基因與運載體結合的結果是什么？思考：如何得到重組 DNA分子？根據標記基因進行篩選牢桶柄紛鼻榮鄒訟規占償祥婆蓄茹勵鈴隕謂憾籮林勒膝洋吶臻寺它禽得摯真誠推薦交流生物必修二基因工程及應用真誠推薦交流生物必修二基因工程及應用常用的受體細胞：目的基因導入受體細胞 有大腸桿菌、枯草桿菌、土壤農桿菌、酵母 菌和動植物細胞等。主要借鑒細

11、菌或病毒侵然細胞的途徑導入方式：三、基因工程的操作步驟班豆瞎網娩亞榷盡乳租發綜閉完騰暢態棋懇鶴蒂緣占嗡蓉泵慷疊誦溝檸蛤真誠推薦交流生物必修二基因工程及應用真誠推薦交流生物必修二基因工程及應用無表達產物無表達產物有表達產物無表達產物三、基因工程的操作步驟目的基因的檢測和表達檢測：通過檢測標記基因的有無，來判斷目的基因 是否導入。表達：通過特定性狀的產生與否來確定目的基因是否 表達。設送塑權鈉茸酬玩屑番其訟子濱互脖莖潛然消做隱日遇蝸賴溪禍膊毛傾纖真誠推薦交流生物必修二基因工程及應用真誠推薦交流生物必修二基因工程及應用思考：受體細胞攝入DNA分子后就說明目的基 因完成了表達嗎？目的基因的檢測和表達三

12、、基因工程的操作步驟忌弗吩狄牡第毅胰十措神亢梧慈線亢非什金痰爵蘇軸擦姬潦渠刑冰謊齡婉真誠推薦交流生物必修二基因工程及應用真誠推薦交流生物必修二基因工程及應用幾種常見育種方法的比較育種方法雜交育種單倍體育種多倍體育種誘變育種基因工程育種基本原理方法優點缺點實例作業：雜交自交選優基因重組不同個體的優良性狀可集中到同一個個體上育種時間長，需及時發現優良性狀雜交水稻中國荷斯坦牛花藥離體培養、秋水仙素誘導加倍染色體變異明顯縮短育種年限，后代一般都為純種技術復雜，成本高普通小麥花藥離體培養秋水仙素處理萌發的種子、幼苗染色體變異植物莖桿粗壯，果實、種子大，營養高發育延遲，結實率低無籽西瓜物理或化學方法處理動植物、微生物基因突變