1、家畜生理學實驗血液生理之紅細胞指導教師：趙懷平（高級實驗師）1一、實驗目的了解紅細胞比容及其測定，紅細胞計數原理并掌握計數方法，學會用比色法測定血紅蛋白含量的方法并掌握其原理。2二、實驗原理血液是一種液體組織、它也是組織和細胞之間進行物質交換的媒介，輸送各種營養物質及代謝物質，維持內環境的相對恒定。因此血量與血液成份的相對穩定，是生命活動正常進行的基本條件。因此當組織和細胞出現問題時先首就會反映到血液中。在臨床診斷過程中往往將血液學檢測作為重要方法，也是體檢的重要檢測項目。正因為血液學檢測相對操作簡單、易于操作往往將血液學檢測統稱為血常規。我們將經過抗凝處理的血液置于比容管中經3000轉分鐘離

2、心30分鐘，由于血細胞密度較大在離心力作用下會下沉并被壓緊，可見到血液分為三層，上層為淡黃色的液體為血漿，中間有一薄層灰白色的物質，為白細胞和血小板。 下層為深紅色的是紅細胞，這個實驗稱為、紅細胞壓積pcv它表示每100毫升血液中、紅細胞、白細胞和血小板、血漿。各占百分比，這就是血液的組成。血液主要由血漿、紅細胞、白細胞和血小板、等物質組成，其結構和功能十分復雜。在作血液學檢測過程中，往往有互補過程、例如；在做紅細胞壓積如果指標正常，做紅細胞計數指標低于正常，那么動物可能患有大分子性貧血。如果在做紅細胞壓積指標低于正常，而做紅細胞計數指標正常時，那么動物可能患有小分子性貧血。我們所做的實驗項目

3、，只是血液學檢測實驗項目中的一少部份。3三、實驗材料本次實驗應用的血液為家兔血液。本次實驗應用的方法為試管法。在吸取血液 、和液體時主要應用移液器來完成 。4四、實驗項目1. 血液的組成2. 紅細胞壓積 pcv3. 紅細胞計數 RBC4. 血紅蛋白測定 Hb5. 白細胞沉降率的測定 5五、實驗方法1、紅細胞比容的測定采抗凝的兔血。用帶穿刺針頭的注射器，抽取制備好的抗凝血，將針頭插入溫氏管底部，慢慢將血液注入其中，使血液準確的裝到10刻度處。離心3000轉每分鐘，離心半小時。取出并讀數，讀數時以紅細胞所占的容積為準不包括白細胞和血小板沉積所形成的灰白色沉淀。62、血紅蛋白的測定將稀鹽酸加入測定管

4、至刻度“2”或“10%”處，并將測定管放入比色箱中。用吸管血液到20立方毫米處，再將吸管插入裝有稀鹽酸的測定管中，再反復吸幾次吸管，使吸管壁上的血液全部沉入測定管當中。在吹吸時防止氣泡產生，靜置十分鐘。比色：用蒸餾水逐滴加入測定管中，每次加入用玻璃棒將拌或搖勻，再插入比色箱中進行比色。這樣測定管中的顏色逐漸變淡，直至與比色箱的顏色一致。讀數：讀出其中液體凹面的刻度。73、紅細胞計數吸血及血液的稀釋：吸血及血液的稀釋均在紅細胞吸管中進行。推片及充液：在推片和充液前，先在顯微鏡下檢查計數板和蓋玻片是否清潔，若不干凈則清潔后使用。推片是指用手指將蓋玻片固定在計數板的正中間計數室邊緣，然后大拇指將其緩

5、慢的推行，使蓋玻片貼在計數室兩側的槽上，充液是指將稀釋好的血液搖勻后，先棄去吸管內的前兩滴，然后用半滴放到計數室和蓋玻片的間隙，同毛吸作用使血液進入計數室內。計數：稀釋的血液進入計數室后，靜置23分鐘后，在低倍顯微鏡下找中央大方格，然后在高倍鏡下數4個角上的小方格和中央小方格中紅細胞數目。結果計算：N指細胞總數稀釋200倍：x=N1010稀釋100倍：x=N51058六、結果分析1、血液的組成血液由血細胞（紅細胞、白細胞、血小板）和血漿組成。離體后血液自然凝固，分離的淡黃色透明液體稱為血清。血液加抗凝劑后分離出來的淡黃色液體稱為血漿。血清與血漿差別是：血清缺少某些凝血因子，如凝血因子（纖維蛋白

6、原）、（凝血酶原）、等。全血適用于臨床血液學檢查，如血細胞計數、分類和形態學檢查等。血漿適用于血漿生理性和病理性化學成分的測定，特別是內分泌激素測定；血漿除鈣離子外，含有其他全部凝血因子，也適用于血栓與止血的檢查。血清適用于臨床化學和臨床免疫學檢查。92、紅細胞比容指紅細胞在全血中所占的容積百分比。正常值:37%50%，女低于男。臨床意義 血細胞比容測定的臨床意義基本同紅細胞計數或血紅蛋白測定，常用作貧血診斷和分類的指標。還可用于臨床決定病人是否需要補液的實驗檢查依據。 紅細胞比容升高，見于劇烈運動或情緒激動的正常人，以及大面積燒傷等各種有脫水癥狀的病人。 紅細胞比容減少，見于正常孕婦、各種貧

7、血病人，以及應用干擾素、青霉素、吲跺美辛（消炎痛）、維生素A等藥物。 103、紅細胞計數. 生理變化(1) 初生兒較成年為高；老年人比青壯年者稍低。(2) 超力型人的紅細胞數較正力型和無力型者高，兩種體質極端的紅細胞之差可達20%。(3) 妊娠時期血漿量增多而多有稀血癥。此外，居住高山因缺氧可引起生理性紅細胞增多。. 病理變化(1) 增高見于真性紅細胞增多癥；嚴重脫水、嚴重燒傷及休克；先天性心臟病（法樂氏四聯癥），慢性獲得性心臟病；慢性肺臟疾病（肺氣腫、嚴重的支氣管性哮喘、纖維性肺結核等）；異常血紅素（高鐵血紅蛋白血癥、硫化血紅蛋白血癥等）；其他：腫瘤（腎臟腫瘤、腎上腺瘤、腎母細胞瘤、腦瘤、肝

8、癌、子宮纖維肉瘤、前列腺癌、胃癌、肺癌、嗜鉻細胞瘤）；腎臟病（腎盂積水、多囊腎、腎動脈狹窄）；皮質醇增多癥及脾結核等。11(2) 減低見于大細胞型貧血：平均紅細胞容積（MCV）和平均紅細胞血紅蛋白（MCH）增加，平均紅細胞血紅蛋白濃度（MCHC）正常或降低。如維生素B12。及葉酸缺乏之貧血；某些溶血性貧血，肝疾患所致的貧血及內分泌疾患如甲狀腺機能低下所致的貧血等。正常細胞型貧血：此種貧血之MCV、MCH及 MCHC均正常。如急性失血后貧血、溶血性貧血、再生障礙性貧血及其他骨髓病所致之貧血。單純小細胞型貧血；此種貧血之 MCV和 MCH均減少，但MCHC正常。如慢性感染、慢性腎疾患等。小細胞低色

9、素性貧血：此種貧血MCV、MCH及MCHC均降低、如缺鐵性貧血，地中海貧血及維生素B缺乏所致之貧血。124、血紅蛋白（Hb）測定臨床意義血紅蛋白測定的臨床意義與紅細胞計數大致相同，但血紅蛋白能更好地反映貧血程度。各種影響紅細胞計數的因素也同時影響血紅蛋白，但被影響的程度在比例上不一定相稱。如在小細胞性貧血時，血紅蛋白減少的程度常較紅細胞數嚴重；在大細胞性貧血時，紅細胞減少程度常較血紅蛋白嚴重。注 凡在單位體積的血液中，紅細胞數、血紅蛋白或紅細胞比積低于正常數值，稱為貧血。綜合國內調查資料，中國人正常與貧血的分界標準為：男性，紅細胞少于400萬，血紅蛋白低于12g；女性，紅細胞少于350萬，血紅蛋白低于10.5g，即稱貧血。13六、紅細胞沉降率（ESR）測定臨床意義ESR的變化主要同血漿中球蛋白，如2和球蛋白，尤其是與纖維蛋白原的含量多少有關，如果球蛋白與纖維蛋白原含量多于正常，血沉就增快，所以變化無特異性。但對任何一種血沉增速的疾病，在病程內定期觀察血沉的動態變化，可以幫助推斷病變的發展情況。增高見于：生理性：妊娠后3個月到產后1個月，小兒和50歲以上的老人。病