1、食品衛(wèi)生微生物學(xué)指標(biāo) 食品衛(wèi)生標(biāo)準(zhǔn)是檢驗(yàn)食品衛(wèi)生狀況的依據(jù)，包括感官指標(biāo)理化指標(biāo)微生物指標(biāo)指通過(guò)目視、鼻聞、手摸和口嘗檢查各種食品外觀的指標(biāo)，一般包括色澤、氣味、口味和組織狀態(tài)等。指食品在原料、生產(chǎn)、加工過(guò)程中帶入的有害物質(zhì)以及由于霉變和腐敗變質(zhì)而產(chǎn)生的有毒有害物質(zhì)。目前實(shí)際應(yīng)用的指標(biāo)菌可以分為以下三種：一、一般衛(wèi)生狀況指標(biāo)菌，包括菌落總數(shù)、霉菌和酵母菌總數(shù)；二、糞便污染指標(biāo)菌，包括大腸菌群、腸球菌、產(chǎn)氣莢膜梭菌、霍亂弧菌等；三、其他指標(biāo)菌，包括金黃色葡萄球菌、鏈球菌、沙門(mén)菌、志賀氏菌、銅綠假單胞菌等。 食品衛(wèi)生標(biāo)準(zhǔn)中的微生物指標(biāo)菌落總數(shù)菌落總數(shù)食品檢樣經(jīng)過(guò)處理，在一定條件下（如培養(yǎng)基、培養(yǎng)溫

2、度和培養(yǎng)時(shí)間等）培養(yǎng)后，所得每g（mL）檢樣中形成的微生物菌落總數(shù)。1.1菌落總數(shù)概念和其所指示的衛(wèi)生意義菌落總數(shù)所指示的食品衛(wèi)生意義 ：它可以作為食品被污染程度的標(biāo)志，一般食品中菌落總數(shù)越多，則表明該食品污染程度越深。它可以用來(lái)預(yù)測(cè)食品存放的期限或程度。1.2菌落總數(shù)的常規(guī)檢驗(yàn)方法-樣品的稀釋-傾注平皿-培養(yǎng)48（24）小時(shí)-計(jì)數(shù)-報(bào)告稀釋平板菌落計(jì)數(shù)法(Plate Counter)操作步驟培養(yǎng)溫度一般為37（水產(chǎn)品的培養(yǎng)溫度，由于其生活環(huán)境水溫較低，故多采用30）培養(yǎng)時(shí)間一般為48h，有些方法只要求24h的培養(yǎng)即可計(jì)數(shù)培養(yǎng)箱應(yīng)保持一定的濕度，瓊脂平板培養(yǎng)48h后，培養(yǎng)基失重不應(yīng)超過(guò)15 在

3、某些場(chǎng)合，為了防止食品顆粒與菌落混淆不清，可在營(yíng)養(yǎng)瓊脂中加入氯化三苯四氮唑（TTC），培養(yǎng)后菌落呈紅色，易于分別 培養(yǎng)條件9mL25g或25mL225mL無(wú)菌生理鹽水1mL10-110-210-310-610-7稀釋平板菌落計(jì)數(shù)法 計(jì)數(shù)原則到達(dá)規(guī)定培養(yǎng)時(shí)間，應(yīng)立即計(jì)數(shù)。如果不能立即計(jì)數(shù)，應(yīng)將平板放置于04，但不得超過(guò)24h。中國(guó)國(guó)家標(biāo)準(zhǔn)GB計(jì)數(shù)時(shí)應(yīng)選取菌落數(shù)在30300cfu/g的平板（SN檢驗(yàn)檢疫行業(yè)標(biāo)準(zhǔn)要求為25250cfu/g）。選取菌落數(shù)在30 CFU300 CFU 之間、無(wú)蔓延菌落生長(zhǎng)的平板計(jì)數(shù)菌落總數(shù)。低于30 CFU 的平板記錄具體菌落數(shù)，大于300 CFU 的可記錄為多不可計(jì)。

4、每個(gè)稀釋度的菌落數(shù)應(yīng)采用兩個(gè)平板的平均數(shù)。其中一個(gè)平板有較大片狀菌落生長(zhǎng)時(shí)，則不宜采用，而應(yīng)以無(wú)片狀菌落生長(zhǎng)的平板作為該稀釋度的菌落數(shù)；若片狀菌落不到平板的一半，而其余一半中菌落分布又很均勻，即可計(jì)算半個(gè)平板后乘以2，代表一個(gè)平板菌落數(shù)。當(dāng)平板上出現(xiàn)菌落間無(wú)明顯界線(xiàn)的鏈狀生長(zhǎng)時(shí)，則將每條單鏈作為一個(gè)菌落計(jì)數(shù)。若所有稀釋度的平板上菌落數(shù)均大于300 CFU，則對(duì)稀釋度最高的平板進(jìn)行計(jì)數(shù)，其他平板可記錄為多不可計(jì)，結(jié)果按平均菌落數(shù)乘以最高稀釋倍數(shù)計(jì)算。若所有稀釋度的平板菌落數(shù)均小于30 CFU，則應(yīng)按稀釋度最低的平均菌落數(shù)乘以稀釋倍數(shù)計(jì)算。若所有稀釋度（包括液體樣品原液）平板均無(wú)菌落生長(zhǎng)，則以小于

5、1 乘以最低稀釋倍數(shù)計(jì)算。若所有稀釋度的平板菌落數(shù)均不在30 CFU300 CFU 之間，其中一部分小于30 CFU 或大于300CFU 時(shí)，則以最接近30 CFU 或300 CFU 的平均菌落數(shù)乘以稀釋倍數(shù)計(jì)算。菌落總數(shù)的計(jì)算方法若只有一個(gè)稀釋度平板上的菌落數(shù)在適宜計(jì)數(shù)范圍內(nèi)，計(jì)算兩個(gè)平板菌落數(shù)的平均值，再將平均值乘以相應(yīng)稀釋倍數(shù)，作為每g（mL）樣品中菌落總數(shù)結(jié)果。若有兩個(gè)連續(xù)稀釋度的平板菌落數(shù)在適宜計(jì)數(shù)范圍內(nèi)時(shí)，按公式（1）計(jì)算：N= C (n1+0.1n2)d（1）式中：N樣品中菌落數(shù)；C平板（含適宜范圍菌落數(shù)的平板）菌落數(shù)之和；n1第一稀釋度（低稀釋倍數(shù)）平板個(gè)數(shù)；n2第二稀釋度（高

6、稀釋倍數(shù)）平板個(gè)數(shù)；d稀釋因子（第一稀釋度）。菌落總數(shù)的報(bào)告菌落數(shù)小于100 CFU 時(shí)，按“四舍五入”原則修約，以整數(shù)報(bào)告。菌落數(shù)大于或等于100 CFU 時(shí)，第3 位數(shù)字采用“四舍五入”原則修約后，取前2 位數(shù)字，后面用0 代替位數(shù)；也可用10 的指數(shù)形式來(lái)表示，按“四舍五入”原則修約后，采用兩位有效數(shù)字。若所有平板上為蔓延菌落而無(wú)法計(jì)數(shù)，則報(bào)告菌落蔓延。若空白對(duì)照上有菌落生長(zhǎng)，則此次檢測(cè)結(jié)果無(wú)效。稱(chēng)重取樣以CFU/g 為單位報(bào)告，體積取樣以CFU/mL 為單位報(bào)告。平板計(jì)數(shù)瓊脂（plate count agar，PCA）培養(yǎng)基胰蛋白胨 5.0 g； 酵母浸膏 2.5 g；葡萄糖 1.0

7、g； 瓊 脂 15.0 g；蒸餾水 1000 mL； pH 7.00.2；121 高壓滅菌15 min。方法優(yōu)點(diǎn)方法簡(jiǎn)便，較精確，重復(fù)性好。菌落總數(shù)的其它檢驗(yàn)方法 涂布平板法點(diǎn)滴平板法螺旋平板法：螺旋平板法是由一臺(tái)機(jī)器完成的。 涂布平板法是將營(yíng)養(yǎng)瓊脂制成平板、經(jīng)5012小時(shí)或351820小時(shí)干燥后，在上面滴加檢樣稀釋液0.2ml，用“L”棒涂布于整個(gè)平板的表現(xiàn)，放置約10分鐘，將平板翻轉(zhuǎn)，放至36+1溫箱內(nèi)培養(yǎng)242小時(shí)，（水產(chǎn)品用30C培養(yǎng)482小時(shí))取出，進(jìn)行菌落計(jì)數(shù)，然后乘以5(由02ml換算為1ml)，再乘以樣品稀釋液的倍數(shù)，即得每克或每升檢樣所含菌落數(shù)。涂布法優(yōu)缺點(diǎn)比常規(guī)檢驗(yàn)法效果好

8、。因?yàn)榫渖L(zhǎng)在表面，便于識(shí)別和檢查其形態(tài)，雖檢樣中含有食品顆粒，也不會(huì)發(fā)生混淆但是本法取樣量比常規(guī)檢驗(yàn)法少。代表性會(huì)受到一定影響。點(diǎn)滴平板法 與涂布平板法相似。不同的是點(diǎn)滴平板法只是用標(biāo)定好的微量吸管或注射器針頭按滴(使每滴相當(dāng)于0025m1)將檢樣稀釋液滴加于瓊脂平板上固定的區(qū)域(預(yù)先在乎板背面用標(biāo)記筆劃成四個(gè)區(qū)域)每個(gè)區(qū)域滴1滴，每個(gè)稀釋度滴兩個(gè)區(qū)域，作為平行試驗(yàn)。滴加后，將平板放平約10分鐘，然后翻轉(zhuǎn)平板，如涂布平板法+樣移入溫箱中，培養(yǎng)68小時(shí)后進(jìn)行計(jì)數(shù)，將所得菌落數(shù)乘以40(由0025m1換算為1ml)，再乘以樣品的稀釋倍數(shù)，即得每克或每毫升檢樣所含菌落數(shù)。螺旋平板儀糞便污染指示菌

9、類(lèi)理想的指示菌應(yīng)具備的性能必須與糞便或病原菌有密切關(guān)系。它們正常寄居場(chǎng)所應(yīng)是人或動(dòng)物的腸道，在正常情況下不應(yīng)在一般檢樣中存在。在普通培養(yǎng)基上易生長(zhǎng)，用簡(jiǎn)單的操作方法即能快速和準(zhǔn)確地測(cè)定出數(shù)量。它們與腸道致病菌應(yīng)有相同的對(duì)外界不良因素的抵抗力。大腸菌群糞便污染指示菌之一-大腸菌群(coliforms)具有某些特性的一組與糞便污染有關(guān)的細(xì)菌，指一群能發(fā)酵乳糖產(chǎn)酸產(chǎn)氣，需氧的或兼性厭氧的革蘭氏陰性無(wú)芽孢的桿菌。包括埃希氏菌屬、檸檬酸菌屬、腸桿菌屬和克雷伯氏菌屬等的一些菌種。分布廣泛：土壤、人和動(dòng)物腸道。在一定培養(yǎng)條件下能發(fā)酵乳糖、產(chǎn)酸產(chǎn)氣的需氧和兼性厭氧革蘭氏陰性無(wú)芽胞桿菌。大腸菌群coliform

10、s大腸菌群數(shù)量的表示方法有兩種：1）大腸菌群MPN大腸菌群MPN是采用一定的方法，應(yīng)用統(tǒng)計(jì)學(xué)的原理所測(cè)定和計(jì)算出的一種最近似數(shù)值；2）大腸菌群值。大腸菌群值是指在食品中檢出一個(gè)大腸菌群細(xì)菌時(shí)所需要的最少樣品量。故大腸菌群值越大，表示食品中所含的大腸菌群細(xì)菌的數(shù)量越少，食品的衛(wèi)生質(zhì)量也就越好：在這兩種表示方法中，目前國(guó)內(nèi)外普遍采用大腸菌群MPN，而大腸菌群值逐漸趨于不用。大腸菌群值MPN指每100g或100ml食品檢樣中大腸菌群最可能數(shù)（most probable number）。大腸菌群值所指示的衛(wèi)生意義：1.它可作為糞便污染食品的指示菌。2.它可作為腸道致病菌污染食品可能性的指示菌。樣品稀釋

11、初發(fā)酵試驗(yàn)復(fù)發(fā)酵試驗(yàn)大腸菌群MPN計(jì)數(shù)法：國(guó)家標(biāo)準(zhǔn)法不產(chǎn)氣產(chǎn)氣不產(chǎn)氣10 倍系列稀釋選擇適宜3 個(gè)連續(xù)稀釋度的樣品勻液，接種LST 肉湯管檢 樣25 g(mL)樣品+225 mL 稀釋液，均質(zhì)產(chǎn)氣BGLB 肉湯大腸菌群陰性大腸菌群陽(yáng)性查MPN 表報(bào)告結(jié)果36 1 48 h 2h36 1 48 h 2h圖 大腸菌群MPN計(jì)數(shù)法檢驗(yàn)程序樣品稀釋平板計(jì)數(shù)證實(shí)試驗(yàn)大腸菌群平板計(jì)數(shù)法：國(guó)家標(biāo)準(zhǔn)法圖 大腸菌群平板計(jì)數(shù)法檢驗(yàn)程序計(jì)數(shù)典型和可疑菌落10 倍系列稀釋選擇適宜3 個(gè)連續(xù)稀釋度的樣品勻液，接種VRBA 平板檢 樣25 g(mL)樣品+225 mL 稀釋液，均質(zhì)BGLB肉湯報(bào)告結(jié)果36 1 36 1

12、18 h 24h24h 48h選取菌落數(shù)在15 CFU150 CFU 之間的平板，分別計(jì)數(shù)平板上出現(xiàn)的典型和可疑大腸菌群菌落。典型菌落為紫紅色，菌落周?chē)屑t色的膽鹽沉淀環(huán)，菌落直徑為0.5 mm 或更大。大腸菌群在VRBA上的菌落特征證實(shí)試驗(yàn)從VRBA 平板上挑取10 個(gè)不同類(lèi)型的典型和可疑菌落，分別移種于BGLB 肉湯管內(nèi)，36 1 培養(yǎng)24 h48 h，觀察產(chǎn)氣情況。凡BGLB 肉湯管產(chǎn)氣，即可報(bào)告為大腸菌群陽(yáng)性。大腸菌群平板計(jì)數(shù)的報(bào)告經(jīng)最后證實(shí)為大腸菌群陽(yáng)性的試管比例乘以計(jì)數(shù)的平板菌落數(shù)，再乘以稀釋倍數(shù)，即為每g（mL）樣品中大腸菌群數(shù)。例：10-4樣品稀釋液1 mL，在VRBA平板上有

13、100個(gè)典型和可疑菌落，挑取其中10個(gè)接種BGLB肉湯管，證實(shí)有6個(gè)陽(yáng)性管，則該樣品的大腸菌群數(shù)為：1006/10104/g（mL）=6.0105CFU/g（mL）。糞便污染指示菌之二-糞大腸菌群（faecal coliforms）或耐熱大腸菌群首先由Eijkman提出，指的是在高溫下發(fā)酵乳糖，是總大腸菌群的亞群，同時(shí)也稱(chēng)為耐熱大腸菌群。大腸菌群包括：糞（便）大腸菌群和非糞（便）大腸菌群。糞大腸菌群（faecal coliforms）或耐熱大腸菌群糞大腸菌群定義在44.5 條件下發(fā)酵乳糖產(chǎn)酸產(chǎn)氣，革蘭氏陰性兼性厭氧的小桿菌。包含絕大部分大腸桿菌，少數(shù)腸桿菌和克雷伯氏菌屬的某些品系。 糞大腸菌群

14、的檢測(cè)，除水、貝類(lèi)、貝類(lèi)養(yǎng)殖水在44.5進(jìn)行，其他所有食品都在45.5進(jìn)行。糞便污染指示菌之三-大腸桿菌是人類(lèi)和大多數(shù)溫血?jiǎng)游锬c道中的正常茵群條件致病菌大腸桿菌，學(xué)名為大腸埃希氏菌（ Escherichia coli，E.coli ）大腸桿菌指革蘭氏陰性無(wú)芽孢桿菌、乳糖發(fā)酵產(chǎn)酸產(chǎn)氣、IMViC試驗(yàn)（靛基質(zhì)、MR、V-P、檸檬酸鹽試驗(yàn)）為+-或-+-的細(xì)菌。與人類(lèi)有關(guān)的大腸桿菌統(tǒng)稱(chēng)為致瀉性大腸桿菌，包括五種：腸毒素性大腸桿菌（ETEC）、致病性大腸桿菌（EPEC）、出血性大腸桿菌（EHEC）、侵襲性大腸桿菌（EIEC）、黏附性大腸桿菌（EAEC）。檢 樣 LST肉湯 LST肉湯管陽(yáng)性 （疑似大腸

15、菌群） EC肉湯 EC肉湯產(chǎn)氣管為陽(yáng)性（糞大腸菌群） 查MPN表，報(bào)告糞大腸菌群MPN/g 陽(yáng)性管再培養(yǎng)24hBGLB肉湯管陽(yáng)性 （證實(shí)大腸菌群） 按BGLB肉湯產(chǎn)氣管數(shù)，查MPN表，報(bào)告大腸菌群MPN/g 37，48h37，48h44，24h大腸菌群、糞大腸菌群和大腸桿菌的檢測(cè)黑色菌落移種營(yíng)養(yǎng)瓊脂斜面LST肉湯 IMViC生化試驗(yàn) 革蘭氏染色 產(chǎn)酸產(chǎn)氣 +-/-+- 無(wú)芽胞G-桿菌大腸桿菌 按EC肉湯產(chǎn)氣管數(shù)，查MPN表，報(bào)告大腸桿菌MPN/g EMB平板分離 37，24h大腸菌群、糞大腸菌群和大腸桿菌的檢測(cè)中心黑色或紫紅色，有或無(wú)綠色金屬光澤ISO(International Organi

16、zation for Standardization )國(guó)際標(biāo)準(zhǔn)化組織菌落總數(shù)和大腸菌群MPN的其他測(cè)定方法疏水網(wǎng)膜法（膜過(guò)濾法）TTC（2、3、5、氯化三苯四氮唑）顯色法DC(去氧膽酸鈉)半固體法紙片法等 膜過(guò)濾法最適合于檢測(cè)水樣品，也可用于含微量顆粒少的液體食品。我國(guó)飲用水衛(wèi)生標(biāo)準(zhǔn)： 3個(gè)大腸菌群/1L飲水 100個(gè)細(xì)菌總數(shù)/1ml飲水膜過(guò)濾膜過(guò)濾測(cè)定微生物數(shù)TTC（2、3、5、氯化三苯四氮唑）顯色法在計(jì)數(shù)瓊脂中加入適量的TTC(0.5% TTC 1ML加到100ML瓊脂中),細(xì)菌菌落長(zhǎng)成紅顏色,對(duì)去除食品本底顆粒物干擾非常有意義.酵母菌在TTC上的菌落特征 DC(去氧膽酸鈉)半固體法 （

17、1）選擇三個(gè)稀釋度的樣品液，每個(gè)稀釋度分別取1ml放入滅菌試管中。 (2)將溶化并冷至50左右的DC半固體培養(yǎng)基加入上述試管中，每管3m1。立即混合)，凝固后于37培養(yǎng)1824小時(shí)。(3)判定標(biāo)準(zhǔn)和記錄：a培養(yǎng)基變桔紅色，有氣泡產(chǎn)生或瓊脂崩裂。記錄為；b培養(yǎng)基為桔紅色，或有桔紅色菌落，無(wú)氣泡和瓊脂崩裂現(xiàn)象，記錄為十；c培養(yǎng)基為綠色，有黃色菌落，無(wú)氣泡和瓊脂崩裂現(xiàn)象，記錄為；d培養(yǎng)基為綠色，記錄為。(4)判定為a、d反應(yīng)結(jié)果；記錄陽(yáng)性管數(shù)，查MPN表并報(bào)告之。若為b、c反應(yīng)結(jié)果，可挑大腸菌群可疑菌落接種乳糖復(fù)發(fā)酵管，根據(jù)產(chǎn)酸產(chǎn)氣管數(shù)查MPN表，并報(bào)告之。糞便污染指示菌之四-腸球菌（Enteroc

18、occus）是鏈球菌屬中的一個(gè)血清學(xué)群（D型群）（Lancefield應(yīng)用鏈球菌細(xì)胞壁中多糖類(lèi)半抗原，將鏈球菌分成ABCD-十九個(gè)血清群） 腸球菌分類(lèi)1989年，依據(jù)Facklam和Collins的分類(lèi)，腸球菌屬內(nèi)包括十二個(gè)種及一個(gè)變異株，它們是：糞腸球菌（E.faecalis） 屎腸球菌（E.faecium) 鳥(niǎo)腸球菌(E.avium) 酪黃腸球菌(E.casseliflavus) 堅(jiān)忍腸球菌(E.durans) 雞腸球菌E.galinarum) 芒地腸球菌(E.mundii) 惡臭腸球菌(E.maladoratum) 希拉腸球菌(E.hirae) 孤立腸球菌（E.solitarius） 棉

19、子糖腸球菌(E.raffinosus) 假鳥(niǎo)腸球菌(E.pseudoavium) 糞腸球變異株(E.faecalis var)。糞腸球菌為該屬中最常見(jiàn)的即為代表種。 自然界分布廣，存活力持久腸球菌普遍存在于自然界，一般棲居在各種溫血和冷血?jiǎng)游锏那荒c，甚至昆蟲(chóng)體內(nèi)，也是健康人體的上呼吸道，口腔或腸道的常居菌。本菌可以引起心內(nèi)膜炎，膽囊炎，腦膜炎，尿路感染及傷口感染等多種疾病。在人類(lèi)糞便中的數(shù)量?jī)H次于大腸菌群，每克成人的糞便中約含108個(gè)。 腸球菌分布腸球菌生物學(xué)性狀 腸球菌屬的細(xì)菌為革蘭氏陽(yáng)性球菌，多數(shù)菌種成雙或呈短鏈狀排列；一般無(wú)芽胞，無(wú)莢膜，少數(shù)菌種有鞭毛，陳舊培養(yǎng)物或在厭氧狀態(tài)下有時(shí)呈革蘭

20、氏陰性。 最適生長(zhǎng)溫度37，最適pH為4.7-7.6，屬內(nèi)各菌種均能在.5%氯化鈉肉湯,pH9.6葡萄糖肉湯及生長(zhǎng)，個(gè)別菌種在50時(shí)生長(zhǎng)快。 抵抗力強(qiáng)及耐受性強(qiáng) ，生長(zhǎng)營(yíng)養(yǎng)要求不高 目前該菌多作為生活飲用水，管道水和一些水質(zhì)的指示菌。衛(wèi)生學(xué)家認(rèn)為，腸球菌類(lèi)似于大腸菌群的生態(tài)活動(dòng)，但其對(duì)惡劣的外環(huán)境和冷凍條件具有較強(qiáng)的抵抗力，作為監(jiān)測(cè)水質(zhì)衛(wèi)生，環(huán)境衛(wèi)生質(zhì)量的污染指標(biāo)更具有衛(wèi)生學(xué)意義。 腸球菌抵抗性 致病菌三、致病菌（病原菌）根據(jù)不同食品的特點(diǎn)選定一定的病原菌作為檢驗(yàn)的重點(diǎn)對(duì)象。例如蛋粉、冷凍禽類(lèi)、肉類(lèi)食品等常規(guī)定沙門(mén)氏菌是必須檢驗(yàn)的重要項(xiàng)目；酸度不高的罐藏食品，肉毒桿菌是必須檢驗(yàn)的對(duì)象；酸牛奶則

21、規(guī)定腸道致病菌和致病性球菌（鏈球菌和葡萄球菌）是檢測(cè)重點(diǎn)。食品中常見(jiàn)的致病性微生物 能引起人類(lèi)疾病和食物中毒的致病性微生物：沙門(mén)氏菌、葡萄球菌、鏈球菌、副溶血性弧菌，口蹄疫病毒等 能產(chǎn)生毒素并引起食物中毒的微生物：肉毒梭菌、葡萄球菌和產(chǎn)氣莢膜桿菌，也包括一些真菌，都會(huì)產(chǎn)生毒素。月桂基硫酸鹽胰蛋白胨 （LST）肉湯月桂基硫酸鹽胰蛋白胨肉湯是 GB 標(biāo)準(zhǔn)、 SN 標(biāo)準(zhǔn)、 APHA 和 ISO 推薦的培養(yǎng)基，用于食品和水中大腸菌群的選擇性增菌和近似計(jì)數(shù)。 成方 (g/L) :胰蛋白胨 20.0; 氯化鈉 5.0; 乳糖 5.0; 磷酸氫二鉀 (K2HPO4) 2.75 ;磷酸二氫鉀 (KH2PO4) 2.75; 月桂基硫酸鈉 0.1;pH 6.8 0.2。此配方可以進(jìn)行改良或增加營(yíng)養(yǎng)成份以獲得最佳的結(jié)果。 煌綠乳糖膽鹽（BGLB）肉湯蛋白胨 10.0g乳糖 10.0g牛膽粉溶液（oxgall或oxbile） 200ml0.1%煌綠水溶液 13.3ml蒸餾水 800mLpH 7.20.1EC 肉湯是由 Hajna and Perry 改進(jìn)， GB 標(biāo)準(zhǔn) 和 SN 標(biāo)準(zhǔn)推薦的培