1、第1章組織學緒論Introduction of Histology 組織學histology研討機體微細構造及其相關功能的科學研討程度：組織、細胞、亞細胞和分子 例：心臟研討內容開展簡史學習方法技術簡介組織學組織意義圖1-3 組織tissue構成：細胞群和細胞外基質 細胞：機體構造和功能的根本單位，成人約有1015 個、200 余種 細胞外基質：由細胞分泌構成類型：上皮組織、結締組織、肌組織和神經組織組織以不同的種類、數量和方式組合構成器官；假設干功能相關的器官構成系統研討內容開展簡史學習方法技術簡介組織學組織意義促進了生理學的提高是病理學的根底促進人類對本身的深化了解研討內容開展簡史學習方法

2、技術簡介組織學組織意義簡稱光鏡light microscope，LM 16 世紀末荷蘭人發明1665 年胡克命名“細胞 馬爾比基察看了脾、肺、腎、表皮；列文虎克發現紅細胞、精子、肌纖維；格拉夫發現卵泡1801 年比沙提出“組織概念光學顯微鏡細胞學說電子顯微鏡當代組織學研討內容開展簡史學習方法技術簡介提出：施萬、施萊登1838、1839內容：細胞是一切動、植物體的根本構造和功能單位；細胞內進展著復雜的化學反響；新細胞由原有細胞產生光學顯微鏡細胞學說電子顯微鏡當代組織學研討內容開展簡史學習方法技術簡介簡稱電鏡electron microscope, EM發明：1932 年 盧斯卡、科諾爾，使分辨率

3、提高到 0.2nm超薄切片術5080nm超微構造ultrastructure：即細胞膜、細胞器、染色體等亞細胞構造光學顯微鏡電子顯微鏡當代組織學研討內容開展簡史學習方法技術簡介細胞學說新儀器、新技術的發明和運用免疫組織化學技術、原位雜交技術將組織學引入分子程度組織工程學技術拓展了組織學的臨床運用前景光學顯微鏡電子顯微鏡當代組織學研討內容開展簡史學習方法技術簡介細胞學說審視角度 組織程度：層次順序、特征性構造和細胞 細胞程度：主要細胞的分布、構造特點含重要細胞的超微構造及功能形狀和構造相一致 構造是功能的根底，功能是構造的必然表現培育察看才干：注重實習課和圖像察看 培育空間思想才干：將二維圖形復

4、原為三維構像研討內容開展簡史學習方法技術簡介石蠟切片術paraffin sectioning：取材、固定、脫水、包埋、切片5 10 m 厚、染色蘇木精- 伊紅染色法hematoxylin-eosin staining， HE染色法：蘇木精為堿性染料，使染色質和核糖體著紫藍色；伊紅為酸性染料，使胞質和細胞外基質著紅色 嗜酸性acidophilia);嗜堿性(basophilia)特殊染色光鏡技術電鏡技術組織化學放射自顯影術圖像分析研討內容開展簡史學習方法技術簡介圖5、6細胞培育組織工程圖4透射電鏡術transmission electron microscopy, TEM 用于察看組織細胞的超微

5、構造 戊二醛、鋨酸雙重固定樹脂包埋超薄切片50 80nm 厚電子染色醋酸鈾、檸檬酸鉛 根據電子束在不同構造上被散射程度的差別表現為電子密度高黑或深灰色和電子密度低淺灰色光鏡技術電鏡技術組織化學放射自顯影術圖像分析研討內容開展簡史學習方法技術簡介細胞培育組織工程圖7掃描電鏡術scanning electron microscopy, SEM 用于察看組織細胞外表構造，具有真實的立體感，無需制備切片光鏡技術電鏡技術組織化學放射自顯影術圖像分析研討內容開展簡史學習方法技術簡介細胞培育組織工程圖8組織化學術histochemistry為運用化學、物理、生物化學、免疫學或分子生物學的原理和技術，與組織學

6、技術結合而產生，在組織切片顯示某種物質的存在和分布形狀分類： 普通組織化學術 免疫組織化學術 原位雜交術光鏡技術電鏡技術組織化學放射自顯影術圖像分析研討內容開展簡史學習方法技術簡介細胞培育組織工程 普通組織化學術：組織中的某種構呵斥分與所加試劑發生化學反響、并呈現某種顏色，在顯微鏡下可察看到糖類： PAS過碘酸希夫反響，顯示多糖和糖蛋白，呈紫紅色 糖 多醛 品紅硫酸復合物 希夫試劑，無色光鏡技術電鏡技術組織化學放射自顯影術圖像分析研討內容開展簡史學習方法技術簡介圖9細胞培育組織工程過碘酸紫紅色反響產物免疫組織化學immunohistochemistry根據抗原、抗體特異性結合原理，檢測組織切片

7、中的肽和蛋白質用標志的抗體與組織中的抗原結合，標志物可于顯微鏡下察看。標志物有熒光素熒光顯微鏡察看、辣根過氧化物酶光鏡或電鏡察看、膠體金多用于電鏡察看光鏡技術電鏡技術組織化學放射自顯影術圖像分析研討內容開展簡史學習方法技術簡介細胞培育組織工程圖10-13原位雜交術in situ hybridization即核酸分子雜交組織化學術，檢測基因DNA片段的有無、基因的表達活性mRNA原理：用帶標志物的知堿基順序的核酸探針與細胞內待測核酸按堿基配對原那么進展特異性原位結合雜交，并經過對標志物的顯示而獲知待測核酸的有無及相對量常用標志物有放射性核素和地高辛光鏡技術電鏡技術組織化學放射自顯影術圖像分析研討

8、內容開展簡史學習方法技術簡介圖14細胞培育組織工程 放射自顯影術autoradiography概念：經過活細胞對某種放射性物質的特異性攝入，以顯示該物質在組織和細胞內的分布、含量和代謝過程，以反映細胞的功能形狀運用舉例 用3H標志的胸腺嘧啶核苷研討DNA合成和細胞增殖形狀 用125I 察看甲狀腺濾泡內碘化部位光鏡技術電鏡技術組織化學放射自顯影術圖像分析研討內容開展簡史學習方法技術簡介圖15細胞培育組織工程圖像分析術image analysis又稱形狀計量術morphometry：運用數學和統計學原理對組織切片提供的平面圖像進展分析，從而獲得立體的組織細胞內有構成分的數量、體積、外表積等參數，從

9、量的角度顯示構造與功能的關系體視學stereology：根據延續的組織切片運用計算機進展三維重建，以獲得微細構造的立體模型光鏡技術電鏡技術組織化學放射自顯影術圖像分析研討內容開展簡史學習方法技術簡介細胞培育組織工程圖16細胞培育術cell culture 把從機體獲得的細胞在體外模擬體內的條件下進展培育；培育組織塊或器官那么稱組織培育術或器官培育術用于研討細胞、組織的代謝、增殖、分化、形狀和功能變化，各種理化因子對活細胞的影響培育條件：營養、生長因子、pH值、浸透壓、O2和CO2濃度、溫度，控制污染用相差顯微鏡察看光鏡技術電鏡技術組織化學放射自顯影術細胞培育組織工程圖像分析研討內容開展簡史學習

10、方法技術簡介圖17、18組織工程tissue engineering用細胞培育術在體外模擬構建機體組織或器官的技術正在構建的有皮膚、軟骨、骨、肌腱、骨骼肌、血管、角膜等；其中以組織工程皮膚較為勝利，已成為商品用于治療燒傷、皮膚靜脈性潰瘍等疾病光鏡技術電鏡技術組織化學放射自顯影術細胞培育組織工程圖像分析研討內容開展簡史學習方法技術簡介研討包括四個方面： 種子細胞，即增殖旺盛的細胞，多為干細胞 細胞外基質，可用生物資料如牛膠原和人工合成高分子資料 構建組織或器官，即把細胞置于細胞外基質中進展三維培育、并構成所需求的外形 將構建物移植機體的方法 光鏡技術電鏡技術組織化學放射自顯影術細胞培育組織工程圖

11、像分析研討內容開展簡史學習方法技術簡介圖19組織學、組織、嗜酸性、嗜堿性的概念組織學學習方法要點石蠟切片術和超薄切片術的根本原理HE染色法本章重點圖1 心臟左:器官 右:組織光鏡圖 上皮組織結締組織肌組織圖2 心臟 心肌細胞光鏡圖圖3 心臟 上:肌絲構造電鏡圖下:肌絲蛋白質構成 方式圖圖4 HE染色，垂體遠側部圖5 鍍銀染色，小腦皮質神經元圖6 醛復紅與偶氮焰紅染色，肥大細胞和彈性纖維圖7 透射電鏡圖，漿細胞圖8 掃描電鏡圖，血細胞圖9 PAS反響，小腸上皮杯狀細胞的黏原顆粒圖10 免疫組織化學原理方式圖圖11 免疫組織化學熒光素標志毛細血管內皮細胞呈vWF陽性 圖12 免疫組織化學辣根過氧化物酶標志胰島B細胞呈胰島素陽性圖13 免疫組織化學電鏡圖示上