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文檔簡(jiǎn)介
1、第一章 微生物緒論常見(jiàn)考點(diǎn)第一章緒論一、微生物的分類(lèi)及命名1、微生物的分類(lèi)等級(jí)為界、門(mén)、綱、目、科、屬、種,種是最基本的分類(lèi)單位。目前國(guó)際上普遍采用的分類(lèi)系統(tǒng)是伯杰分類(lèi)系統(tǒng)。2、根據(jù)微生物的大小、結(jié)構(gòu)和組成不同,分為三大類(lèi)型:(1)非細(xì)胞型微生物:此類(lèi)微生物無(wú)細(xì)胞結(jié)構(gòu),由一種核酸和蛋白衣殼組成,必須寄生在活細(xì)胞內(nèi)才能生長(zhǎng)繁殖。如病毒、類(lèi)病毒和朊病毒(又稱(chēng)朊粒)。(2)原核細(xì)胞型微生物:此類(lèi)微生物由單細(xì)胞組成,細(xì)胞核分化程度低,無(wú)核膜、核仁,染色體為裸露的DNA分子,缺乏完整的細(xì)胞器。如細(xì)菌、支原體、衣原體、立克次體和螺旋體。(3)真核細(xì)胞型微生物:此類(lèi)微生物細(xì)胞核分化程度高,有核膜、核仁、完整
2、的細(xì)胞器。如真菌、單細(xì)胞藻類(lèi)。3、每種細(xì)菌DNA中的G(鳥(niǎo)嘌呤)+C(胞嘧啶)含量摩爾百分比有一定范圍,變化不大,DNA(G+C)mol%可以作為細(xì)菌分類(lèi)的一個(gè)重要依據(jù)。4、微生物命名由屬名和種名組成,中文命名種名在前,屬名在后。拉丁文則相反。如:Mycobacterium tuberculosis中文名: 種名 + 屬名例: 結(jié)核分枝桿菌二、微生物的發(fā)展1、荷蘭人列文虎克發(fā)明了顯微鏡,人類(lèi)第一次觀察到微生物。2、法國(guó)科學(xué)家巴斯德被稱(chēng)為“微生物學(xué)之父”。3、1929年,弗萊明發(fā)現(xiàn)了青霉素。1940年Florey和Chain將青霉素分離提純,應(yīng)用于臨床。5、德國(guó)醫(yī)生郭霍證明了微生物是傳染病的致病
3、因子。第二章 細(xì)菌的基本性狀常見(jiàn)考點(diǎn)一、細(xì)菌的形態(tài)與結(jié)構(gòu)(一)細(xì)菌的大小和形態(tài)1、細(xì)菌個(gè)體微小,通常以微米作為測(cè)量單位。2、細(xì)菌的基本形態(tài)有三類(lèi):球菌、桿菌、螺形菌。(二)細(xì)菌的基本結(jié)構(gòu)1、細(xì)菌的基本結(jié)構(gòu)由外向內(nèi)依次是細(xì)胞壁、細(xì)胞膜、細(xì)胞質(zhì)和核質(zhì)。2、根據(jù)細(xì)胞壁的化學(xué)組成與結(jié)構(gòu)不同,用革蘭染色將細(xì)菌分為G和G兩大類(lèi)。3、磷壁酸是革蘭陽(yáng)性菌細(xì)胞壁特有的結(jié)構(gòu),壁磷壁酸為革蘭陽(yáng)性菌的重要表面抗原,膜磷壁酸為黏附因子。4、外膜層是革蘭陰性菌特細(xì)胞壁的特殊成分,從外向內(nèi)依次是脂多糖、脂質(zhì)雙層、脂蛋白。其中脂多糖是革蘭陰性菌內(nèi)毒素,脂質(zhì)A是內(nèi)毒素的主要毒性部分。5、由于革蘭陰性菌和革蘭陽(yáng)性菌細(xì)胞壁組成成分
4、的不同,兩者對(duì)藥物的敏感性也不一樣。革蘭陽(yáng)性菌細(xì)胞壁有五肽交聯(lián)橋,是青霉素作用的部位。6、中介體:又稱(chēng)中間體,是細(xì)胞膜內(nèi)陷折疊而成的管狀囊狀結(jié)構(gòu)。其功能類(lèi)似真核細(xì)胞的線粒體,故有人稱(chēng)之為類(lèi)線粒體。7、質(zhì)粒:是細(xì)菌染色體(核質(zhì))以外的遺傳物質(zhì),為雙鏈閉環(huán)DNA分子,攜帶遺傳信息,控制細(xì)菌某些特定的遺傳性狀。F質(zhì)粒控制性菌毛的產(chǎn)生、R質(zhì)粒與細(xì)菌的耐藥性有關(guān)。(二)細(xì)菌的特殊結(jié)構(gòu)1、鞭毛:細(xì)菌的運(yùn)動(dòng)器官,是由細(xì)胞質(zhì)伸出的蛋白性絲狀物。2、菌毛:主要出現(xiàn)在革蘭陰性菌中。分為性菌毛和普通菌毛。僅少數(shù)革蘭陰性細(xì)菌具有性菌毛,較普通菌毛少,只有14根,比普通菌毛長(zhǎng)且粗,呈中空管狀,是兩菌之間傳遞遺傳物質(zhì)的通
5、道。帶有性菌毛的細(xì)菌稱(chēng)為F+菌或雄性菌,無(wú)菌毛的細(xì)菌稱(chēng)為F-菌或雌性菌。細(xì)菌的耐藥性及某些毒力因子均可通過(guò)這種方式轉(zhuǎn)移。3、莢膜:通常在機(jī)體內(nèi)和營(yíng)養(yǎng)物質(zhì)豐富的環(huán)境中形成,在細(xì)胞壁外包繞的一層界限分明,且不易被洗脫的黏稠性物質(zhì)。4、芽胞:主要為革蘭陽(yáng)性桿菌在一定條件下細(xì)胞質(zhì)、核質(zhì)濃縮脫水而形成的一個(gè)遮光性很強(qiáng)、具有多層膜狀結(jié)構(gòu)、通透性很低的圓形或卵圓形小體。細(xì)菌L型即為細(xì)菌細(xì)胞壁缺陷型。在人工誘導(dǎo)(少量青霉素、頭孢菌素存在)或自然情況下,細(xì)菌L型在體內(nèi)或體外均可產(chǎn)生。細(xì)菌L型在含血清的高滲低瓊脂培養(yǎng)基中能緩慢生長(zhǎng),可形成“油煎蛋”樣菌落(典型L型細(xì)菌):菌落較小,中心致密并深陷人瓊脂中;四周較薄
6、,由透明的顆粒組成,在低倍鏡下觀察菌落呈“油煎蛋”狀。細(xì)菌L型保留了親代的遺傳特性,可返祖,可致病。二、細(xì)菌的生理1、細(xì)菌的基本化學(xué)組成:水、無(wú)機(jī)鹽、蛋白質(zhì)、糖類(lèi)、脂類(lèi)、核酸(細(xì)菌含有RNA和DNA兩種核酸)。2、細(xì)菌有帶電現(xiàn)象,革蘭陽(yáng)性菌的等電點(diǎn)約為pH23,革蘭陰性菌的等電點(diǎn)約為pH45。(一)細(xì)菌的生長(zhǎng)繁殖、控制、遺傳及變異1、細(xì)菌根據(jù)營(yíng)養(yǎng)類(lèi)型的不同,分為自養(yǎng)菌(以無(wú)機(jī)物作為原料)和異養(yǎng)菌,異氧菌又根據(jù)所需營(yíng)養(yǎng)物質(zhì)的不同分為腐生菌(以無(wú)生命的有機(jī)物作為原料)和寄生菌(以宿主體內(nèi)的有機(jī)物作為原料)。2、細(xì)菌生長(zhǎng)繁殖的主要條件有:(1)充足的營(yíng)養(yǎng)物質(zhì):水、碳源、氮源、無(wú)機(jī)鹽、生長(zhǎng)因子。(2)
7、合適的pH:大多數(shù)細(xì)菌的最適pH為7.27.6,有個(gè)別例外,結(jié)核分支桿菌在pH6.46.8、霍亂弧菌在pH8.49.2的環(huán)境中生長(zhǎng)最好。(3)合適的溫度: 3537(4)必要的氣體根據(jù)細(xì)菌對(duì)氧氣需求不一,分為:需氧菌:必須在有氧(空氣)的情況下才能生長(zhǎng)。微需氧菌:在5%6%的低氧環(huán)境中才能生長(zhǎng)。厭氧菌:必須在無(wú)氧的環(huán)境中才能生長(zhǎng)。兼性厭氧菌:在有氧和無(wú)氧環(huán)境中均能生長(zhǎng)。3、細(xì)菌生長(zhǎng)繁殖的規(guī)律(1)細(xì)菌一般一無(wú)性二分裂的方式繁殖。(2)大多數(shù)細(xì)菌2030分鐘繁殖一代,結(jié)核需要1820小時(shí)才繁殖一代。(3)細(xì)菌的生長(zhǎng)曲線分為四個(gè)時(shí)期:遲緩期:適應(yīng)階段,此階段細(xì)菌幾乎不繁殖。一般約14小時(shí)。對(duì)數(shù)期:
8、細(xì)菌的形態(tài)、染色性、生理活性都較典型,可以用來(lái)觀察細(xì)菌的大小、形態(tài)、染色性、對(duì)抗菌藥物的敏感性等。一般約818小時(shí)。穩(wěn)定期:細(xì)菌繁殖數(shù)與死亡數(shù)大致平衡。衰亡期:細(xì)菌死亡逐漸增多,死菌數(shù)超過(guò)活菌數(shù)。4、細(xì)菌合成代謝的產(chǎn)物主要有:熱原質(zhì)、毒素(革蘭陽(yáng)性菌合成外毒素、革蘭陰性菌合成內(nèi)毒素)、侵襲性酶類(lèi)、色素、抗生素、細(xì)菌素、維生素。我國(guó)規(guī)定生活飲用水的標(biāo)準(zhǔn)是:1ml水中的細(xì)菌總數(shù)不超過(guò)100cfu;100ml水中不得檢出大腸埃希菌。5、細(xì)菌的控制:(1)消毒:殺死物體上的病原微生物但不一定殺死細(xì)菌芽胞的方法。(2)滅菌:殺滅物體上所有的微生物,包括細(xì)菌芽孢。(3)防腐:防止或抑制微生物生長(zhǎng)繁殖的方法
9、。(4)無(wú)菌和無(wú)菌操作:無(wú)菌是指沒(méi)有活的微生物存在。防止微生物進(jìn)入機(jī)體或者其他操作對(duì)象的方法稱(chēng)為無(wú)菌操作。(5)高壓蒸汽滅菌法的壓力為103.4kPa,溫度為121.3,維持15-30分鐘。檢測(cè)高壓蒸汽滅菌效果的細(xì)菌是嗜熱枯草芽孢桿菌。(6)用于牛奶等物品的消毒方法是巴氏消毒法。(7)紫外線殺菌的主要機(jī)制是干擾DNA的復(fù)制。6、正常情況下,人體與外界相同的器官都有細(xì)菌,機(jī)體的胃、骨骼、肌肉、血液、腦等無(wú)菌。濫用抗生素會(huì)導(dǎo)致菌群失調(diào)而發(fā)生一系列的病理反應(yīng)。7、細(xì)菌常見(jiàn)的變異現(xiàn)象:(1)形態(tài)與結(jié)構(gòu)變異:如細(xì)菌L型。莢膜變異,從有到無(wú);鞭毛變異(H-O變異),從有到無(wú);芽胞變異,從有到無(wú)。(2)菌落
10、變異:S-R變異,細(xì)菌菌落光滑型與粗造型之間的變異。(3)毒力變異:包括毒力加強(qiáng)和毒力減弱。(4)抗原變異(5)耐藥性變異:細(xì)菌對(duì)某種藥物從敏感變?yōu)椴幻舾小#?)酶活性變異 (7)生化特性的變異8、細(xì)菌的R質(zhì)粒是耐藥質(zhì)粒,可通過(guò)細(xì)菌間的接合或通過(guò)噬菌體進(jìn)行傳遞。9、細(xì)菌基因轉(zhuǎn)移與重組的方式有轉(zhuǎn)化、接合、轉(zhuǎn)導(dǎo)、溶原性轉(zhuǎn)換、原生質(zhì)融合等。(1)轉(zhuǎn)化:是受體菌直接攝取供體菌提供的游離DNA片段整合重組,使受體菌的性狀發(fā)生變異的過(guò)程。(2)轉(zhuǎn)導(dǎo):是以噬菌體為媒介,將供體菌的基因轉(zhuǎn)移到受體菌內(nèi),導(dǎo)致受體菌基因改變的過(guò)程。(3)接合:受體菌和供體菌直接接觸,供體菌通過(guò)性菌毛將所帶有的F質(zhì)粒或類(lèi)似遺傳物質(zhì)轉(zhuǎn)
11、移至受體菌的過(guò)程。(4)溶原性轉(zhuǎn)換:是噬菌體的DNA與細(xì)菌染色體重組,使宿主菌遺傳結(jié)構(gòu)發(fā)生改變而引起的遺傳型變異。(5)原生質(zhì)體融合:兩種經(jīng)過(guò)處理失去細(xì)胞壁的原生質(zhì)體混和可發(fā)生融合,融合后的雙倍體細(xì)胞可發(fā)生細(xì)菌染色體間的重組。10、細(xì)菌的主要遺傳物質(zhì)是染色體,為一條環(huán)狀閉合的雙螺旋DNA。質(zhì)粒也是細(xì)菌的遺傳物質(zhì)。但不是主要遺傳物質(zhì)。第三章 微生物致病性與感染常見(jiàn)考點(diǎn)1、病原微生物能否致病與病原體的毒力、數(shù)量、侵入么戶、機(jī)體的免疫力、環(huán)境因素等密切相關(guān)。2、細(xì)菌分泌的侵襲性酶類(lèi)主要有:(1)透明質(zhì)酸酶:分解結(jié)締組織的透明質(zhì)酸,易于細(xì)菌擴(kuò)散。(2)膠原酶:分解細(xì)胞外基質(zhì)的膠原蛋白。(3)神經(jīng)氨酸酶
12、:分解腸黏膜上皮細(xì)胞的細(xì)胞間質(zhì)。(4)磷脂酶:可水解細(xì)胞膜的磷脂,破壞組織細(xì)胞。(5)卵磷脂酶:分解細(xì)胞膜的卵磷脂。(6)激酶:將血纖維蛋白酶原激活為纖維蛋白酶,以分解纖維蛋白,防止形成血凝塊。(7)凝固酶:使血漿發(fā)生凝固,保護(hù)細(xì)菌不被吞噬細(xì)胞吞噬和殺滅。(8)IgA蛋白酶:與細(xì)菌的黏附有關(guān)。3、細(xì)菌毒素根據(jù)來(lái)源、性質(zhì)和作用特點(diǎn)不同分為外毒素和內(nèi)毒素。(1)外毒素的特性:主要是革蘭陽(yáng)性菌產(chǎn)生;具有菌種特異性;毒性作用強(qiáng);毒性作用有組織選擇性;具有良好的免疫原性:外毒素經(jīng)過(guò)0.4%的甲醛處理可失去毒性但仍保持免疫原性變?yōu)轭?lèi)毒素,可刺激幾天產(chǎn)生抗毒素;不耐熱;都是蛋白質(zhì),易被酸及蛋白水解酶滅活。(
13、2)內(nèi)毒素的特性:主要是革蘭陰性菌產(chǎn)生;化學(xué)性質(zhì)是脂多糖;抵抗力強(qiáng),耐熱、耐酸、耐堿、耐強(qiáng)氧化劑;細(xì)菌死亡溶解后釋放;毒性及免疫原性均較外毒素弱,不能用甲醛處理成類(lèi)毒素。4、內(nèi)毒素的主要生物學(xué)活性有致熱作用、白細(xì)胞增多、感染性休克、DIC等。5、細(xì)菌全身感染在臨床上常見(jiàn)以下幾種情況:(1)毒血癥:致病菌不進(jìn)入血液循環(huán),但其產(chǎn)生的外毒素入血。(2)菌血癥:致病菌侵入血流,但不在其生長(zhǎng)繁殖。(3)敗血癥:致病菌侵入血流,在其中大量繁殖并產(chǎn)生毒性物質(zhì)。(4)膿毒血癥:化膿性細(xì)菌侵入血流,并在其大量繁殖。(5)內(nèi)毒素血癥:革蘭陰性細(xì)菌侵入血流,并在其大量繁殖,崩解后釋放大量?jī)?nèi)毒素。第四章 細(xì)菌檢驗(yàn)技術(shù)
14、常見(jiàn)考點(diǎn)一、細(xì)菌染色標(biāo)本鏡檢染色標(biāo)本檢查的基本程序是涂片、干燥、固定、染色、鏡檢。(一)革蘭染色1、革蘭染色為兩種染料先后進(jìn)行染色,為復(fù)染色法。2、染液:結(jié)晶紫、盧戈碘液、95%乙醇、稀釋苯酚復(fù)紅液或沙黃。3、染色步驟:初染1min(結(jié)晶紫)流水沖洗媒染1min(盧戈碘液)流水沖洗脫色20-30s(95%乙醇)流水沖洗復(fù)染0.5-1min(稀釋苯酚復(fù)紅液或沙黃)流水沖洗干燥鏡檢4、意義:鑒別細(xì)菌、指導(dǎo)用藥、指導(dǎo)臨床治療。5、結(jié)果判定:染紫色為革蘭陽(yáng)性,染紅色為革蘭陰性。(二)抗酸染色1、抗酸染色也是兩種染料先后染色,也是復(fù)染色法。2、染液:苯酚復(fù)紅、3%鹽酸酒精、呂氏堿性亞甲藍(lán)3、染色步驟:初
15、染58min(苯酚復(fù)紅加熱)流水沖洗脫色(3%鹽酸酒精)流水沖洗復(fù)染1min(呂氏亞甲藍(lán))流水沖洗干燥鏡檢4、注意事項(xiàng):苯酚加熱冒氣即可,切勿煮沸或煮干;脫色要脫到無(wú)紅色染液脫下為止。痰標(biāo)本需要經(jīng)過(guò)酸或堿處理后,使痰液化后接種。5、臨床意義:一般用于分枝桿菌屬的檢查,如結(jié)核分枝桿菌、麻風(fēng)桿菌等。6、結(jié)果判定:染成紅色為抗酸菌,染成藍(lán)色為非抗酸菌。二、細(xì)菌不染色標(biāo)本鏡檢壓滴法、懸滴法、暗視野聚光法均用于觀察細(xì)菌動(dòng)力。暗視野聚光法使用暗視野顯微鏡可觀察螺旋體及其動(dòng)力。三、細(xì)菌接種與培養(yǎng)技術(shù)1、液體培養(yǎng)基是在肉浸液中加入1%蛋白胨和0.5%NaCl,調(diào)pH至7.4,蛋白胨的作用為提供細(xì)菌生長(zhǎng)繁殖所需
16、的氮源。2、半固體培養(yǎng)基是在液體培養(yǎng)基中加入0.2%0.5的瓊脂。3、固體培養(yǎng)基是在液體培養(yǎng)基中加入2%3%的瓊脂。4、細(xì)菌L型的培養(yǎng)基必須采用高滲(3%5%NaC l、10%20%蔗糖等)低瓊脂培養(yǎng)基。5、制備好的培養(yǎng)基放于4活冷暗處一般可以保存一周,最多不超過(guò)2周。6、平板劃線接種法一般用于含有多種細(xì)菌的標(biāo)本,利用此接種法可以得到單個(gè)菌落,分為分區(qū)劃線法和連續(xù)劃線法。7、分區(qū)劃線法下一區(qū)應(yīng)與上一區(qū)接觸34次,此方法多用于含菌量多的標(biāo)本,如糞便、濃汁、痰液等標(biāo)本。連續(xù)劃線法多用于含菌量少的標(biāo)本。8、斜面接種法主要用于純種增菌及保留菌種或生化反應(yīng)。9、穿刺接種法可用于觀察細(xì)菌動(dòng)力,有鞭毛的細(xì)菌
17、可沿穿刺線擴(kuò)散生長(zhǎng)。10、液體接種法多用于普通肉湯、蛋白胨水等液體培養(yǎng)基接種。11、細(xì)菌在液體培養(yǎng)基上的生長(zhǎng)現(xiàn)象有三種,分別是:混濁(大多數(shù)細(xì)菌);沉淀(鏈狀生長(zhǎng)的細(xì)菌,如鏈球菌、炭疽芽孢桿菌等);菌膜(專(zhuān)性需氧菌,如銅綠假單胞菌等)。12、血瓊脂上的溶血現(xiàn)象:溶血:又叫草綠色溶血,菌落周?chē)囵B(yǎng)基變?yōu)榫G色環(huán)狀。溶血:又稱(chēng)完全溶血,菌落周?chē)纬梢粋€(gè)完全清晰透明的環(huán)。溶血:即不溶血,菌落周?chē)呐囵B(yǎng)基沒(méi)有變化;紅細(xì)胞沒(méi)有溶解或無(wú)缺損。雙環(huán):上層溶血環(huán),內(nèi)層為溶血,外層為溶血。如產(chǎn)氣莢膜梭菌。13、傾注平板法用于水、牛乳、飲料及尿液等液體標(biāo)本的細(xì)菌計(jì)數(shù)。14、常用的厭氧培養(yǎng)法有:皰肉培養(yǎng)基法;焦性沒(méi)
18、食子酸法;厭氧罐法;氣袋法;厭氧手套箱法,氣體噴射法。15、最常用的營(yíng)養(yǎng)培養(yǎng)基:血平板和巧克力平板。16、鑒別培養(yǎng)基:如糖發(fā)酵管、三糖鐵培養(yǎng)基、枸櫞酸鹽培養(yǎng)基、克氏雙糖鐵瓊脂(KIA)、伊紅-美藍(lán)瓊脂和動(dòng)力-吲哚-尿素(MIU)等培養(yǎng)基。17、選擇培養(yǎng)基:在培養(yǎng)基中加入某種化學(xué)成分或抗生素以抑制某些細(xì)菌的生長(zhǎng),而有助于需要的細(xì)菌生長(zhǎng),此培養(yǎng)基稱(chēng)為選擇培養(yǎng)基。如SS瓊脂,其中的膽鹽能抑制革蘭陽(yáng)性菌,因而使沙門(mén)菌、志賀菌容易得到分離。18、增菌培養(yǎng)基:如乙型溶血性鏈球菌、肺炎鏈球菌的生長(zhǎng)需含血液或血清的培養(yǎng)基;霍亂弧菌的增菌常用堿性蛋白胨水。19、特殊培養(yǎng)基:包括厭氧培養(yǎng)基和細(xì)菌L型培養(yǎng)基。巰基乙
19、醇酸鈉是特殊培養(yǎng)基。厭氧培養(yǎng)基如皰肉培養(yǎng)基;細(xì)菌L型培養(yǎng)基是針對(duì)細(xì)胞壁缺陷的細(xì)菌L型,由于胞內(nèi)滲透壓較高,培養(yǎng)基必須采用高滲低瓊脂培養(yǎng)基。20、細(xì)菌血液培養(yǎng)使用的抗凝劑為聚苯乙烯磺酸鈉(SPS)。四、細(xì)菌生化鑒定技術(shù)(一)碳水化合物代謝試驗(yàn)1、碳水化合物代謝試驗(yàn)包括:糖(醇、苷)類(lèi)發(fā)酵試驗(yàn)、葡萄糖氧化/發(fā)酵試驗(yàn)、甲基紅試驗(yàn)(MR)、V-P試驗(yàn)、-半乳糖苷酶試驗(yàn)(ONPG)、七葉苷水解試驗(yàn)。2、甲基紅試驗(yàn)的原理是細(xì)菌發(fā)酵葡萄糖產(chǎn)酸,使培養(yǎng)基pH下降至4.5以下,加入甲基指示劑變紅為試驗(yàn)陽(yáng)性。3、V-P試驗(yàn)出現(xiàn)紅色為陽(yáng)性,ONPG出現(xiàn)黃色為陽(yáng)性,七葉苷水解試驗(yàn)出現(xiàn)黑色為陽(yáng)性。V-P試驗(yàn)常與甲基紅試
20、驗(yàn)一起使用,因?yàn)榍罢哧?yáng)性的細(xì)菌,后者通常為陰性。4、七葉苷水解試驗(yàn)主要用于D族鏈球菌與其他鏈球菌的鑒別,前者為陽(yáng)性(黑色)。(二)蛋白質(zhì)和氨基酸代謝試驗(yàn)1、蛋白質(zhì)和氨基酸代謝試驗(yàn)包括:靛基質(zhì)(吲哚)試驗(yàn)、硫化氫試驗(yàn)、尿素酶試驗(yàn)、苯丙氨酸脫氨酶試驗(yàn)、氨基酸脫羧酶試驗(yàn)。2、吲哚試驗(yàn)是由于細(xì)菌有色氨酸酶,可以分解色氨酸而產(chǎn)生吲哚,與對(duì)二甲基苯甲醛反應(yīng)生成紅色化合物,本試驗(yàn)呈現(xiàn)紅色為陽(yáng)性。3、硫化氫試驗(yàn)是細(xì)菌能分解含硫氨基酸,產(chǎn)生的H2S與Fe2+反應(yīng)呈黑色為陽(yáng)性。主要用于腸桿菌科中屬及種的鑒別。如沙門(mén)菌屬、愛(ài)德華菌屬、亞利桑那菌屬、枸櫞酸桿菌屬、變形桿菌屬細(xì)菌,絕大多數(shù)硫化氫陽(yáng)性,其他菌屬陰性。沙門(mén)
21、菌屬中也有硫化氫陰性菌種。4、尿素酶試驗(yàn)是細(xì)菌分解尿素生成氨,使培養(yǎng)基呈堿性,指示劑變紅為陽(yáng)性。5、苯丙氨酸脫氨酶的陽(yáng)性結(jié)果為綠色,氨基酸脫羧酶的陽(yáng)性結(jié)果為培養(yǎng)基從黃色變?yōu)樽仙#ㄈ┨荚蠢迷囼?yàn)1、碳源利用試驗(yàn)包括枸櫞酸鹽利用試驗(yàn)和丙二酸鹽利用試驗(yàn)。2、枸櫞酸鹽利用試驗(yàn)的陽(yáng)性結(jié)果為深藍(lán)色,陰性為綠色。3、丙二酸鹽利用試驗(yàn)的陽(yáng)性結(jié)果為深藍(lán)色。4、枸櫞酸鹽利用試驗(yàn)在腸桿菌科中埃希菌屬、志賀菌屬、愛(ài)德華菌屬和耶爾森菌屬均為陰性,沙門(mén)菌屬、克雷伯菌屬通常為陽(yáng)性。(四)酶類(lèi)試驗(yàn)1、觸酶試驗(yàn):細(xì)菌能催化過(guò)氧化氫生成水和氧氣,出現(xiàn)氣泡為陽(yáng)性。2、氧化酶試驗(yàn):某些細(xì)菌具有細(xì)胞色素氧化酶,能將二甲基對(duì)苯二胺或
22、四甲基對(duì)苯二胺氧化成紅色的化合物,出現(xiàn)紅色為陽(yáng)性。3、凝固酶試驗(yàn):主要用于金黃色葡萄球菌的鑒定。4、DNA酶試驗(yàn):細(xì)菌產(chǎn)生DNA酶分解DNA,是菌落周?chē)霈F(xiàn)透明環(huán)。葡萄球菌、沙雷菌、變形桿菌均為陽(yáng)性。5、硝酸鹽還原試驗(yàn):出現(xiàn)紅色為陽(yáng)性。若加入試劑后無(wú)顏色反應(yīng),可能是:硝酸鹽沒(méi)有被還原,試驗(yàn)陰性;硝酸鹽被還原為氨和氮等其他產(chǎn)物而導(dǎo)致假陰性結(jié)果,這時(shí)應(yīng)在試管內(nèi)加入少許鋅粉(還原劑),如出現(xiàn)紅色則表明試驗(yàn)確實(shí)為陰性。若仍不產(chǎn)生紅色,表示試驗(yàn)為假陰性。(五)其他及藥敏鑒定試驗(yàn)1、CAMP試驗(yàn):B群鏈球菌能產(chǎn)生CAMP因子,可促進(jìn)葡萄球菌的-溶血素溶解紅細(xì)胞的活性,因此在兩菌(B群鏈球菌和葡萄球菌)的交
23、界處溶血力增加,出現(xiàn)箭頭狀或矢形(半月形)的溶血區(qū)。在鏈球菌中,只有B群鏈球菌CAMP試驗(yàn)陽(yáng)性,故可作為特異性鑒定。2、膽汁溶菌試驗(yàn):膽汁或膽鹽可溶解肺炎鏈球菌,可能是由于膽汁降低細(xì)胞膜表面的張力,使細(xì)胞膜破損或使菌體裂解;或者是由于膽汁加速了肺炎鏈球菌本身自溶過(guò)程,促使細(xì)菌發(fā)生自溶。3、O/129抑菌試驗(yàn):O/129抑菌試驗(yàn)為藥敏試驗(yàn),0129(二氨基喋啶)對(duì)弧菌屬細(xì)菌有抑制作用,而對(duì)氣單胞菌屬細(xì)菌無(wú)抑制作用。4、桿菌肽試驗(yàn):A群鏈球菌對(duì)桿菌肽幾乎全部敏感,而其他群鏈球菌絕大多數(shù)對(duì)其耐藥。5、奧普托欣(Optochin)試驗(yàn):幾乎所有肺炎鏈球菌對(duì)奧普托欣試驗(yàn)敏感,而奧普托欣試驗(yàn)對(duì)其他鏈球菌則
24、無(wú)抑制作用。五、細(xì)菌毒力鑒定內(nèi)毒素常采用鱟試驗(yàn)內(nèi)毒素激活鱟試劑中凝固酶原轉(zhuǎn)變?yōu)槟堂福痰鞍自赡痰鞍住M舛舅爻S皿w內(nèi)及體外毒力試驗(yàn)檢測(cè),也用ELISA法測(cè)定。第五章 細(xì)菌對(duì)抗菌藥物的敏感試驗(yàn)一、臨床常用抗菌藥物(一)-內(nèi)酰胺類(lèi)1、常見(jiàn)藥物主要是青霉素類(lèi)、頭孢菌素類(lèi)和單環(huán)-內(nèi)酰胺類(lèi)(氨曲南和卡蘆莫南)。2、作用機(jī)制:-內(nèi)酰胺類(lèi)抗生素的作用機(jī)制相似,均是與青霉素結(jié)合蛋白(PBP)結(jié)合,抑制細(xì)菌細(xì)胞壁合成,致使細(xì)菌死亡。(二)氨基糖苷類(lèi)1、作用機(jī)制:依靠離子的附作用,吸附在菌體表面,造成膜的損傷;和細(xì)菌核糖體30S小亞基發(fā)生不可逆結(jié)合,抑制mRNA的轉(zhuǎn)錄和蛋白質(zhì)的合成,造成遺傳密碼的錯(cuò)讀,產(chǎn)
25、生無(wú)意義的蛋白質(zhì)。2、種類(lèi):鏈霉菌屬:如鏈霉素、卡那霉素、妥布霉素、核糖霉素、巴龍霉素、新霉素;小單胞菌屬:如慶大霉素、福提霉素;半合成氨基苷類(lèi):阿米卡星、奈替米星、地貝卡星等,氨基苷類(lèi)抗菌藥物對(duì)需氧G-桿菌有較強(qiáng)的抗菌活性,對(duì)G+球菌有一定的活性。(三)喹諾酮類(lèi)1、作用機(jī)制:通過(guò)外膜孔蛋白和磷脂滲透進(jìn)入細(xì)菌細(xì)胞;作用于DNA旋轉(zhuǎn)酶,干擾細(xì)菌DNA復(fù)制、修復(fù)和重組。2、種類(lèi):第一代:為窄譜抗菌藥物,對(duì)G+球菌無(wú)作用;主要作用于大腸埃希菌,且迅速出現(xiàn)耐藥,較少應(yīng)用于臨床。第二代:對(duì)G-和G+細(xì)菌均有作用;比較這類(lèi)藥的抗菌活性強(qiáng)度依次為環(huán)丙沙星、氧氟沙星、羅美沙星、氟羅沙星、培氟沙星、諾氟沙星;第
26、三代:對(duì)G+菌作用高于第二代的48倍,對(duì)厭氧菌亦有作用;司帕沙星、妥舒沙星、左氧氟沙星、加替沙星、格帕沙星、莫西沙星等。(四)大環(huán)內(nèi)酯類(lèi)1、作用機(jī)制:可逆結(jié)合細(xì)菌核糖體50S大亞基的23S單位,抑制細(xì)菌蛋白質(zhì)合成和肽鏈延伸;2、種類(lèi):國(guó)內(nèi)常用有紅霉素、吉他霉素、麥迪霉素、乙酰螺旋霉素。新一代大環(huán)內(nèi)酯類(lèi)有克拉霉素、羅紅霉素、地紅霉素、氟紅霉素、阿奇霉素和乙酰麥迪霉素。(五)其他抗菌藥物磺胺類(lèi):競(jìng)爭(zhēng)性第與二氫葉酸合成酶結(jié)合,阻止核酸形成。四環(huán)素類(lèi):阻止酰胺基轉(zhuǎn)移酶RNA與mRNA核糖體的受體位點(diǎn)結(jié)合。分為短效(土霉素、四環(huán)素)、中效(地美環(huán)素、美他環(huán)素)和長(zhǎng)效(多西環(huán)素、米諾環(huán)素)。氯霉素類(lèi)、林克
27、霉素類(lèi):能與細(xì)菌核蛋白體50S亞基結(jié)合,使蛋白質(zhì)合成呈可逆性抑制。糖肽類(lèi):屬于殺菌劑,能與一個(gè)或多個(gè)肽聚糖合成中間產(chǎn)物形成復(fù)合物,阻斷肽聚糖合成,阻止細(xì)胞壁合成。包括萬(wàn)古霉素、去甲萬(wàn)古霉素、替考拉寧、多粘菌素、桿菌肽等。大環(huán)內(nèi)酯類(lèi)的抗生素是抑菌劑。二、抗菌藥物敏感試驗(yàn)方法細(xì)菌多抗菌藥物的敏感分為三種現(xiàn)象:敏感(S)、耐藥(R)、中介(I)。(一)擴(kuò)散法(K-B法)1、目前常用的方法,是一種半定量的方法。采用的接種方法是平板涂布法。2、抑菌圈的大小可以反映待檢菌對(duì)測(cè)定藥物的敏感程度,與該藥對(duì)待檢菌的最低抑菌濃度(MIC)呈負(fù)相關(guān),即抑菌圈愈大,MIC愈小。3、含藥紙片貼于含菌瓊脂表面時(shí)應(yīng)注意:各
28、紙片中心距離不小于24mm,紙片距平板內(nèi)緣應(yīng)大于15mm;一旦碰觸培養(yǎng)基就不可再動(dòng);平板最好單獨(dú)平放,不超過(guò)兩個(gè)疊放。4、采用標(biāo)準(zhǔn)菌株是進(jìn)行質(zhì)控的主要措施。金黃色葡萄球菌ATCC25923,大腸埃希菌ATCC25922,銅綠假單胞菌ATCC27853,糞腸球菌ATCC29212或ATCC33186。5、紙片擴(kuò)散法的培養(yǎng)基要求其pH值為7.27.4,過(guò)高或過(guò)低的pH值會(huì)影響藥物效能。堿性可擴(kuò)大氨基糖苷類(lèi)藥物的抑菌圈,酸性可擴(kuò)大四環(huán)素類(lèi)藥物的抑菌圈。其他高頻考點(diǎn)1、MBC為最低殺菌濃度。2、體外聯(lián)合藥物敏感試驗(yàn)的FIC(部分抑菌濃度指數(shù)):FIC指數(shù)0.5 協(xié)同作用;FIC指數(shù)0.51相加作用;F
29、IC指數(shù)12 無(wú)關(guān)作用;FIC指數(shù)2 拮抗作用。3、抗結(jié)核分枝桿菌的首選一線藥物是異煙肼、利福平。4、產(chǎn)ESBL菌株臨床上用-內(nèi)酰胺類(lèi)抗生素(青霉素類(lèi)、頭孢菌素類(lèi)及氨曲南)治療無(wú)效。5、耐甲氧西林金葡菌(MRSA)用-內(nèi)酰胺類(lèi)抗生素治療無(wú)效。6、產(chǎn)AmpC酶菌株對(duì)-內(nèi)酰胺類(lèi)抗生素(青霉素類(lèi)、頭孢菌素類(lèi)及氨曲南)及含酶抑制劑復(fù)合制劑耐藥。治療有效的藥物主要有碳青霉烯類(lèi)(亞胺培南)和第四代頭(頭孢吡肟、頭孢匹羅)以及某些喹酮類(lèi)和氨基糖苷類(lèi)抗生素。7、藥敏試驗(yàn)時(shí),采用的菌液濃度為0.5麥?zhǔn)媳葷岫龋喈?dāng)于1.5108/ml含菌量。第六章 各菌屬特征匯總葡萄球菌屬1、葡萄球均屬是一類(lèi)觸酶試驗(yàn)陽(yáng)性的革蘭陽(yáng)
30、性(G)球菌,無(wú)鞭毛和芽胞,某些菌株能形成莢膜。包括金黃色、表皮、腐生、溶血葡萄球菌。2、葡萄球菌觸和鏈球菌鑒別用觸酶試驗(yàn),葡萄球菌觸酶陽(yáng)性,鏈球菌是陰性。3、葡萄球菌的致病性用凝固酶試驗(yàn),致病性葡萄糖球菌為陽(yáng)性,還可以分解甘露醇產(chǎn)酸,耐熱DNA酶陽(yáng)性。主要見(jiàn)于金黃色葡萄球菌。4、葡萄球菌的細(xì)胞壁上有葡萄球菌A蛋白(SPA),可以與人類(lèi)IgG的Fc段結(jié)合,可進(jìn)行協(xié)同凝集試驗(yàn)。5、葡萄球菌抵抗力強(qiáng),耐熱、耐干燥、耐高鹽,是抵抗力最強(qiáng)的無(wú)芽胞細(xì)菌。6、耐甲氧西林的金葡菌(MRSA),耐甲氧西林的表葡菌(MRSE),耐萬(wàn)古霉素的金黃色葡萄球菌(VRSA),耐萬(wàn)古霉素的表皮葡萄球菌(VRSE),MRS
31、A的首選抗生素為萬(wàn)古霉素。7、表皮葡萄球菌為醫(yī)院感染的重要病原菌,它是導(dǎo)致血培養(yǎng)污染的常見(jiàn)細(xì)菌之一。8、腐生葡萄球菌是導(dǎo)致尿路感染的常見(jiàn)病原菌之一。看到凝固酶、耐熱DNA酶陽(yáng)性,就選金黃色葡萄糖球菌。鏈球菌屬1、鏈球菌屬是一大群觸酶試驗(yàn)陰性、在液體培養(yǎng)基上呈鏈狀排列的革蘭陽(yáng)性(G)球菌,但在陳舊培養(yǎng)基或被吞噬細(xì)胞吞噬后常呈革蘭陰性(G)。無(wú)鞭毛、無(wú)芽胞。2、肺炎鏈球菌矛頭狀排列,由于其能產(chǎn)生自溶酶,菌落呈臍窩狀,鑒別試驗(yàn):奧普托欣試驗(yàn)(Optochin),陽(yáng)性、膽汁溶菌試驗(yàn)陽(yáng)性、莢膜腫脹試驗(yàn)陽(yáng)性、草綠色溶血圈。本菌是社區(qū)獲得性肺炎的最常見(jiàn)病原菌。3、A群鏈球菌用桿菌肽試驗(yàn)鑒別,為陽(yáng)性。可產(chǎn)生溶
32、血素和紅疹毒素,前者在血平板上形成-溶血環(huán),后者引起猩紅熱。對(duì)人類(lèi)有致病性的90%屬A群。4、B群鏈球菌可以水解馬尿酸和CAMP試驗(yàn)陽(yáng)性。5、D群鏈球菌七葉苷試驗(yàn)陽(yáng)性。6、草綠色鏈球菌是引起亞急性心內(nèi)膜炎最常見(jiàn)的病原菌。7、鏈球菌感染引起的變態(tài)反應(yīng)疾病為風(fēng)濕熱、腎小球腎炎,為。8、化膿性鏈球菌產(chǎn)生的酶有脫氧核糖核酸酶(鏈道酶)、透明質(zhì)酸酶(擴(kuò)散因子)、鏈激酶(溶解纖維蛋白酶)。因?yàn)橛羞@幾種酶的的產(chǎn)生,化膿性鏈球菌感染的病灶范圍廣、膿液稀薄、邊界不清。9、根據(jù)溶血現(xiàn)象的不同,將鏈球菌分為甲型溶血性鏈球菌(溶血)、乙型溶血性鏈球菌(溶血)、丙型溶血性鏈球菌(溶血)。腸球菌屬1、腸球菌屬是腸道的正常
33、棲居菌。G+,成雙或短鏈狀排列的卵圓形球菌,無(wú)芽胞,無(wú)莢膜,部分腸球菌有稀疏鞭毛。2、腸球菌能在高鹽(6.5%NaCl)、高堿(pH9.6)、40%膽汁培養(yǎng)基上和1045環(huán)境下生長(zhǎng);奈瑟菌屬1、G-,呈腎形,坦面相對(duì),雙球菌,存在于中性粒細(xì)胞內(nèi)(或胞外),無(wú)鞭毛,無(wú)芽胞,有菌毛。專(zhuān)性需氧,氧化酶陽(yáng)性。2、在血瓊脂平板、巧克力瓊脂或EPV瓊脂,置5%10%C02環(huán)境中,35培養(yǎng)1824h后可見(jiàn)圓形、灰褐色、濕潤(rùn)、光滑、邊緣整齊、直徑12mm的小菌落。3、淋病奈瑟菌和腦膜炎奈瑟菌用麥芽糖發(fā)酵試驗(yàn)區(qū)別,前者不發(fā)酵乳糖,后者發(fā)酵乳糖。4、奈瑟菌屬初次分離需要5%-10%二氧化碳。營(yíng)養(yǎng)要求高,要用巧克力
34、平板。5、腦膜炎奈瑟菌定植于鼻咽部,引起流腦,少數(shù)還可引起敗血癥。6、淋病奈瑟菌人類(lèi)是唯一宿主。懷疑奈瑟菌感染,標(biāo)本需保溫保濕送檢。卡他布蘭漢菌:氧化酶和觸酶陽(yáng)性,產(chǎn)DNA酶,大部分菌株還原硝酸鹽和亞硝酸鹽,營(yíng)養(yǎng)要求不高,在普通培養(yǎng)基上1820即可生長(zhǎng),借此可與奈瑟菌屬相鑒別。腸桿菌科1、腸桿菌科共同特征:革蘭氏陰性桿菌、氧化酶陰性、觸酶和硝酸鹽還原試驗(yàn)為陽(yáng)性。2、腸桿菌中志賀、克雷伯、鼠疫耶爾菌屬、EIEC沒(méi)有鞭毛,也就是說(shuō)它們的動(dòng)力陰性。3、O抗原和H抗原是腸桿菌科分群及分型的依據(jù),4、乳糖發(fā)酵是區(qū)別致病性與非致病性,致病性不發(fā)酵乳糖,非致病性發(fā)酵乳糖。埃希菌屬1、G-,短桿菌,多數(shù)有周鞭
35、毛,有菌毛,有莢膜或微莢膜。兼性厭氧菌。2、大腸埃希菌在EMB平板上是帶有金屬光澤呈藍(lán)紫色的菌落,麥康凱和SS瓊脂上呈粉紅色菌落。雙糖鐵發(fā)酵管(KIA)產(chǎn)酸產(chǎn)氣,IMViC試驗(yàn)結(jié)果。5、大腸埃希菌腸道外感染以尿系統(tǒng)感染為主,常見(jiàn)腎盂腎炎。腸道內(nèi)感染:(1)產(chǎn)毒素性(ETEC):主要引起旅游者腹瀉、嬰兒腹瀉。(2)腸致病性(EPEC):嬰兒腹瀉。(3)腸侵襲性(EIEC):類(lèi)似志賀菌腸炎的癥狀。里急后重。(4)腸出血性(EHEC):常見(jiàn)血清型O157:H7,引起出血性腸炎,主要見(jiàn)于嬰幼兒,還可引起溶血性尿毒癥。(5)腸粘附性(EaggEC):嬰兒急性水樣腹瀉。志賀菌屬1、G-,短小桿菌,無(wú)莢膜,
36、無(wú)芽胞,無(wú)鞭毛,有菌毛。需氧或兼性厭氧。2、志賀菌屬是細(xì)菌性痢疾最常見(jiàn)的病原菌,中國(guó)最常見(jiàn)的是福氏(B群)和宋氏(D群)。3、志賀菌屬用SS培養(yǎng)基或中國(guó)藍(lán)(麥康凱)平板,菌落為紅色或粉紅色。4、由于志賀菌沒(méi)有鞭毛,所以它沒(méi)有H抗原,有O抗原、K抗原。5、志賀菌引起的腹瀉常為里急后重。沙門(mén)菌屬1、G-,直桿菌,無(wú)芽胞,無(wú)莢膜,周鞭毛(除雞沙門(mén)菌),多數(shù)有菌毛。2、SS瓊脂和麥康凱瓊脂培養(yǎng)基:約24mm的透明或半透明菌落,對(duì)膽鹽耐受。產(chǎn)H2S者在SS瓊脂上形成黑色中心菌落。3、傷寒沙門(mén)菌的抗原主要包括菌體(O)抗原、鞭毛(H)抗原和表面(Vi)抗原。4、傷寒沙門(mén)菌檢測(cè)用肥達(dá)試驗(yàn):用已知的傷寒沙門(mén)菌
37、O、H抗原,副傷寒甲、乙H抗原稀釋后與被檢血清作定量凝集試驗(yàn),以檢測(cè)患者血清中抗體的含量,來(lái)判斷機(jī)體是否受沙門(mén)菌感染而導(dǎo)致腸熱癥并判別沙門(mén)菌的種類(lèi)。5、菌體(O)抗原刺激機(jī)體產(chǎn)生的抗體以IgM為主,H抗原則以IgG為主。6、傷寒沙門(mén)菌感染1周取血液標(biāo)本,23周取糞便,3周以后取尿液。7、所致疾病:腸熱癥,即傷寒與副傷寒病、食物中毒、慢性腸炎、敗血癥、沙門(mén)菌的局部感染如頸部、腰部等。變形桿菌屬1、G-,桿菌,多形,有周鞭毛,無(wú)芽胞、無(wú)莢膜。2、營(yíng)養(yǎng)要求不高,在普通培養(yǎng)基上呈遷徙生長(zhǎng)。苯丙氨酸脫氨酶試驗(yàn)陽(yáng)性使其重要的生化鑒別反應(yīng)。3、變形桿菌X19、X2、Xk等類(lèi)型的O抗原與立克次體有共同抗原成分
38、,可發(fā)生外斐反應(yīng)。 耶爾森菌屬4、普通變性桿菌引起食物中毒,奇異變性桿菌引起嬰幼兒腸炎1、鼠疫耶爾森菌是鼠疫的病原菌,我國(guó)將其列為甲類(lèi)傳染病。2、鼠疫耶爾森菌為G-,桿菌,球桿狀,兩極濃染,有莢膜,無(wú)鞭毛,無(wú)芽胞。3、鼠疫耶爾森菌在血平板上菌落柔軟、黏稠,在液體培養(yǎng)基中,開(kāi)始為渾濁生長(zhǎng),24小時(shí)后為沉淀生長(zhǎng),48小時(shí)后形成菌膜,搖動(dòng)后呈鐘乳石狀下沉。半固體穿刺呈縱樹(shù)狀生長(zhǎng)。4、小腸結(jié)腸耶爾森菌2225培養(yǎng)有周鞭毛,呈翻滾螺旋運(yùn)動(dòng);35時(shí)培養(yǎng)該菌無(wú)動(dòng)力,最適生長(zhǎng)溫度為2028。5、小腸結(jié)腸耶爾森菌是人畜共患病原菌。弧菌屬1、弧菌科氧化酶都是陽(yáng)性,動(dòng)力陽(yáng)性的G-細(xì)菌。包括弧菌屬、氣單胞菌屬、鄰單胞
39、菌屬等。2、霍亂弧菌根據(jù)生物學(xué)特性上的差異,分為古典生物型和Eltor生物型兩個(gè)生物型,兩個(gè)生物型的抗原同屬O1群霍亂弧菌。3、O1群霍亂弧菌根據(jù)菌體抗原含有A、B、C 3種抗原因子的不同,又可將其分為小川型、稻葉型和彥島型,以小川型和稻葉型為常見(jiàn)流行型。4、霍亂運(yùn)動(dòng)呈穿梭狀或流星狀,排列呈魚(yú)群狀,在亞碲酸鉀培養(yǎng)基上是褐色菌落,培養(yǎng)基是堿性蛋白胨水。主要致病物質(zhì)是霍亂腸毒素,患者大便呈米泔樣便。5、霍亂弧菌的鑒別培養(yǎng)用硫代硫酸鹽-檸檬酸鹽-膽鹽-蔗糖瓊脂平板(TCBS)。6、霍亂弧菌在堿性蛋白胨水上生長(zhǎng)迅速,最適pH為8.49.2。7、霍亂弧菌的O1群、O139群引起霍亂,O2O138群只引起
40、人類(lèi)胃腸炎,稱(chēng)之為非O1群霍亂弧菌。8、霍亂弧菌的生物分型9、霍亂弧菌采集的標(biāo)本若不能及時(shí)在堿性蛋白胨水中增菌,應(yīng)置于文-臘二氏保存液活卡-布運(yùn)送培養(yǎng)基中由專(zhuān)人運(yùn)送。10、副溶血性弧菌是一種嗜鹽菌,常存在與海水及海類(lèi)產(chǎn)品中,是沿海地區(qū)食物中毒最常見(jiàn)的病原菌。11、副溶血性弧菌與霍亂區(qū)別用蔗糖發(fā)酵試驗(yàn),前者不發(fā)酵蔗糖,在TCBS上呈藍(lán)綠色菌落,后者呈黃色菌落。12、副溶血性弧菌能使人或兔的紅細(xì)胞發(fā)生溶血,對(duì)馬紅細(xì)胞不溶血,稱(chēng)為神奈川現(xiàn)象。其他菌屬主要特征及高頻考點(diǎn)1、肺炎克雷伯菌動(dòng)力和鳥(niǎo)氨酸脫羧酶陰性、黏液狀菌落用接種環(huán)可拉絲是主要特征。2、小結(jié):志賀菌IMViC(-+-),大腸埃希菌IMViC
41、(+-),產(chǎn)氣腸桿菌IMViC(-+)。3、氣單胞菌屬運(yùn)動(dòng)活潑,在血平板上形成大而扁平的溶血性菌落。嗜水氣單胞菌、豚鼠氣單胞菌可發(fā)酵阿拉伯糖。4、鄰單胞菌屬引起水樣腹瀉,與志賀菌類(lèi)似,也是引起食物中毒。5、假單胞菌屬、產(chǎn)檢桿菌屬、不動(dòng)桿菌屬等不能發(fā)酵葡萄糖,均為非發(fā)酵革蘭陰性桿菌。6、銅綠假單胞菌為專(zhuān)性需氧菌,在普通培養(yǎng)基上菌落有生姜味,可產(chǎn)生水溶性的綠色素,在血平板上產(chǎn)生透明溶血環(huán)。該菌42可生長(zhǎng),可通過(guò)該試驗(yàn)區(qū)分其他假單胞菌。7、銅綠假單胞菌可引起泌尿道、皮膚、呼吸道、燒傷創(chuàng)面感染等,還可以導(dǎo)致菌血癥、敗血癥、心內(nèi)膜炎、囊性纖維變性及嬰幼兒嚴(yán)重腹瀉等。8、不動(dòng)桿菌屬有三陰特征,即氧化酶、動(dòng)
42、力、硝酸鹽還原試驗(yàn)均為陰性。9、流感嗜血桿菌能產(chǎn)生自溶酶,生長(zhǎng)需要、因子。培養(yǎng)有特殊要求,營(yíng)養(yǎng)要求高,初次分離需要5%10%CO2,用巧克力平板。有金黃色葡萄糖球菌(可產(chǎn)生、因子)時(shí)候,會(huì)出現(xiàn)衛(wèi)星生長(zhǎng)現(xiàn)象。嗜血桿菌的菌落呈露滴狀。副流感嗜血桿菌的形態(tài)、菌落與流感嗜血桿菌相似,也能產(chǎn)生衛(wèi)星現(xiàn)象,在生長(zhǎng)過(guò)程中只需要V因子而不需要X因子。10、軍團(tuán)菌屬培養(yǎng)要求特殊,培養(yǎng)基中必須含有半胱氨酸和鐵,培養(yǎng)基用活性炭-酵母浸液瓊脂培養(yǎng)基(BCYE)。傳播途徑為空氣。12、布魯菌屬是人畜共患病原菌,包括羊、牛、豬、狗、綿羊布魯菌等。引起布病。如果在做題看到有什么草原養(yǎng)羊、羊接觸史的話,就選布魯菌感染。13、彎
43、曲菌屬,不分解糖類(lèi),氧化酶陽(yáng)性,分離培養(yǎng)時(shí),培養(yǎng)基中需含有大量抗生素,初次分離,須在5%O2、10%CO2、85%N2的氣體環(huán)境中生長(zhǎng)。14、幽門(mén)螺桿菌呈海鷗狀彎曲,脲酶強(qiáng)陽(yáng)性(快速分解尿素)是特征,標(biāo)本采集部位是胃,十二指腸。15、白喉棒狀桿菌特異性標(biāo)志是異染顆粒,在亞碲酸鉀培養(yǎng)基上是黑色菌落,培養(yǎng)基選用呂氏血清斜面和亞碲酸鉀,致病物質(zhì)是白喉外毒素。16、產(chǎn)單核李斯特菌的主要特征是:4冷增菌,半固體培養(yǎng)基上呈倒傘形,濕片中呈翻筋斗運(yùn)動(dòng)。17、紅斑丹毒絲菌在明膠穿刺培養(yǎng),22出現(xiàn)“試管刷”狀生長(zhǎng)。18、炭疽芽孢桿菌為致病菌中最大的革蘭陽(yáng)性大桿菌,兩端平截,培養(yǎng)后呈長(zhǎng)鏈如竹節(jié)狀,有明顯的莢膜,在
44、普通培養(yǎng)基說(shuō)形成灰色、扁平的粗糙型菌落,邊緣呈卷發(fā)狀。19、炭疽芽孢桿菌在每毫升含有0.050.5U青霉素的培養(yǎng)基中,可發(fā)生形態(tài)變異,形成大而均勻的圓球狀并相連如串珠狀,稱(chēng)為串珠試驗(yàn)。20、蠟樣芽胞桿菌在營(yíng)養(yǎng)培養(yǎng)基上形成類(lèi)似蠟狀菌落而得名。典型特征是菌落粗糙似毛玻璃樣。21、蠟樣芽胞桿菌引起的食物中毒必須達(dá)到一定的感染量即食物中毒含菌量達(dá)106/g以上。22、結(jié)核分枝桿菌,用羅氏培養(yǎng)基,抗酸染色陽(yáng)性為紅色,生長(zhǎng)緩慢,18小時(shí)一代,25周形成菌落。最適pH值為6.56.8,在羅氏培養(yǎng)基上形成乳白色或米黃色、干燥顆粒樣菌落。23、結(jié)核分枝桿菌不產(chǎn)生內(nèi)毒素和外毒素,無(wú)莢膜和侵襲性酶類(lèi)。致病物質(zhì)主要有
45、蛋白質(zhì)、脂質(zhì)(索狀因子、磷脂、硫酸腦苷脂、蠟質(zhì)D)。結(jié)核桿菌感染肺部后在痰中可檢測(cè)出干酪樣小塊。24、熱觸酶試驗(yàn)鑒別結(jié)核分枝桿菌和非典型分枝桿菌,前者陰性,后者大多陽(yáng)性。25、預(yù)防結(jié)核的疫苗為卡介苗(BCG),是減毒活疫苗,結(jié)核菌素試驗(yàn)是IV變態(tài)反應(yīng)。26、懷疑結(jié)核分枝桿菌感染,初步鑒定用抗酸染色。抗酸染色分級(jí)報(bào)告標(biāo)準(zhǔn):連續(xù)觀察300個(gè)視野未發(fā)現(xiàn)抗酸桿菌;:12條/300視野;1:19抗酸桿菌條/100個(gè)視野;2:19條抗酸桿菌/10視野;3:19條抗酸桿菌/每視野;4:10條抗酸桿菌/每視野。27、麻風(fēng)分枝桿菌,典型的胞內(nèi)寄生,所在細(xì)胞呈泡沫狀,稱(chēng)為麻風(fēng)細(xì)胞。犰狳對(duì)本菌高度敏感,為本菌的良好
46、動(dòng)物模型。抗酸染色為陽(yáng)性桿菌。28、厭氧菌屬,特征是在無(wú)氧條件下才能生長(zhǎng),懷疑厭氧菌感染用皰肉培養(yǎng)基培養(yǎng)。29、破傷風(fēng)梭菌,嚴(yán)格厭氧,有周鞭毛、無(wú)莢膜。芽胞呈正圓形,寬于菌體,位于菌體頂端,細(xì)菌呈鼓槌狀。本菌的致病物質(zhì)主要是外毒素,包括破傷風(fēng)痙攣毒素和破傷風(fēng)溶血毒素,引起強(qiáng)直性痙攣。30、產(chǎn)氣莢膜梭菌可以引起氣性壞疽,在牛乳培養(yǎng)基中是洶涌發(fā)酵生長(zhǎng)是其主要特征。31、肉毒梭菌引起食物中毒,致病物質(zhì)是肉毒毒素,是已知最劇烈的神經(jīng)外毒素。懷疑食物中毒,從患者血清中檢出毒素是最直接、有效的方法。32、艱難梭菌可以引起腹瀉和假膜性腸炎。33、衣原體,細(xì)胞內(nèi)專(zhuān)性寄生。有獨(dú)特的發(fā)育周期:原體有高度感染性,無(wú)
47、繁殖能力;始體(網(wǎng)狀體),有繁殖能力,沒(méi)有感染性。每個(gè)發(fā)育周期是4072h。34、沙眼衣原體培養(yǎng)用McCoy細(xì)胞,鸚鵡熱衣原體和肺炎衣原體用Hela-299細(xì)胞培養(yǎng)。35、沙眼衣原體引起四種疾病:沙眼;包涵體結(jié)膜炎,致盲的主要因素是包涵體結(jié)膜炎;泌尿生殖道感染,非淋菌性生殖道感染的主要病原,男性尿道炎的常見(jiàn)病因。性淋巴肉芽腫:又稱(chēng)第四性病。36、鸚鵡熱衣原體,氣溶膠傳播,引起非典型肺炎(人畜共患病原體)。37、肺炎衣原體,呼吸道傳播,主要引起肺炎。38、支原體,無(wú)細(xì)胞壁,能在人工培養(yǎng)基上生長(zhǎng),能通過(guò)細(xì)菌濾器,是最小的原核細(xì)胞型微生物,典型特征是菌落為“荷包蛋”樣。治療藥物首選紅霉素。39、肺炎
48、支原體通過(guò)呼吸道傳播,引起原發(fā)性非典型肺炎。40、解脲支原體通過(guò)性傳播,引起非淋菌性尿道炎。41、立克次體,細(xì)胞內(nèi)寄生,頭痛,發(fā)熱,皮疹以及中樞神經(jīng)是本病特征。立克次體一個(gè)重要試驗(yàn)是外斐試驗(yàn),是非特異性凝集試驗(yàn)。42、立克次體不能人工培養(yǎng),檢測(cè)是利用變性桿菌的公共抗原檢測(cè)(共同抗原),OX19對(duì)應(yīng)流行性斑疹傷寒,鼠型斑疹傷寒。OX2對(duì)應(yīng)斑點(diǎn)熱,OXK對(duì)應(yīng)恙蟲(chóng)病。43、鉤端螺旋體通過(guò)疫水傳播,是典型的人畜共患病,鼠和豬是最常見(jiàn)的儲(chǔ)存宿主和傳染源,是一種自然疫源性疾病。治療藥物首選青霉素。44、梅毒螺旋體為密螺旋體,用鍍銀染色。45、梅毒三期分型,一期硬下疳,二期梅毒疹,三期梅毒瘤46、早期梅毒傳
49、染性強(qiáng),破壞力小,晚期破壞力大,傳染性小47、梅毒通過(guò)性傳播,輸血傳播,垂直傳播48、梅毒檢查非特異性試驗(yàn)用牛心類(lèi)脂質(zhì)。WHO推薦用VDRL(性病研究實(shí)驗(yàn)室試驗(yàn)),RPR(快速血漿反應(yīng)素試驗(yàn))做篩查,確診試驗(yàn)是TPPA。49、放線菌患者病灶有硫磺顆粒,菌體呈菊花狀,菌落由R型轉(zhuǎn)變?yōu)镾型。50、諾卡菌屬主要有星型諾卡和巴西諾卡致病,星型諾卡菌落表面無(wú)白色菌絲,巴西諾卡表面有白色菌絲,諾卡菌屬抗酸染色是弱陽(yáng)性,諾卡菌為革蘭氏陽(yáng)性桿菌,有細(xì)長(zhǎng)的菌絲,菌絲末端不膨大。色素小顆粒壓碎染色鏡檢,可見(jiàn)顆粒呈菊花狀。不同種類(lèi)可產(chǎn)生不同色素,如橙紅、粉紅、黃、黃綠、紫以及其他顏色。巴西諾卡菌七葉苷、黃嘌呤、肌醇
50、、甘露醇均為陽(yáng)性。星型不分解黃嘌呤。真菌常見(jiàn)考點(diǎn)1、真菌檢測(cè)的標(biāo)本如皮屑、指甲、頭發(fā)等,需要用10%KOH處理。2、真菌培養(yǎng)一般選用沙氏培養(yǎng)基。3、白假絲酵母菌鑒別要點(diǎn):芽管形成試驗(yàn)();厚膜孢子形成試驗(yàn)();脲酶試驗(yàn)();不能形成假菌絲;革蘭陽(yáng)性。4、新型隱球菌鑒別要點(diǎn):墨汁染色,在黑色背景下可見(jiàn)到透亮菌體和寬厚莢膜;沙保弱培養(yǎng)基上可生成酵母型菌落;脲酶試驗(yàn)()。5、艾滋病人最易合并感染的真菌是卡氏肺孢子菌。6、黃曲霉菌產(chǎn)生的黃曲霉毒素可以致癌。病毒常見(jiàn)考點(diǎn)1、病毒是非細(xì)胞型微生物,基本結(jié)構(gòu)是核心、衣殼。2、流感病毒是有包膜的RNA病毒,包膜上的血凝素(HA)和神經(jīng)氨酸酶(NA)是重要的表面
51、抗原,其中HA極易發(fā)生變異。此病毒的命名方式HXNX(X為型號(hào),比如H1N1、H2N2等)。3、麻疹病毒是單股的有包膜的RNA病毒,可以引起病毒血癥,發(fā)病2天后口腔黏膜出現(xiàn)白色外繞紅暈的黏膜斑(早期診斷有重要意義),之后患者皮膚相繼出現(xiàn)紅色版丘疹。常見(jiàn)并發(fā)癥為肺炎。4、腮腺炎病毒是有包膜的RNA病毒,感染后可引起一側(cè)或雙側(cè)腮腺腫大,青春期感染者,男性易并發(fā)睪丸炎。5、甲型肝炎病毒(HAV)是無(wú)包膜的RNA病毒。傳播途徑是糞-口傳播,引起甲肝,還可以引起病毒血癥。產(chǎn)生的甲肝抗體為IgM,ELISA檢測(cè)用捕獲法。6、乙型肝炎病毒(HBV)是DNA病毒,引起乙肝,嚴(yán)重可發(fā)展為肝癌。常見(jiàn)考點(diǎn):HBV的大球型顆粒(Dane)有感染性;乙肝兩對(duì)半:HBsAg、抗-HBs、HBeAg、抗-HBe、抗-HBc;大三陽(yáng)指HBsAg、HBeAg、抗-HBc均為陽(yáng)性,此種模式為急性乙肝,傳染性極強(qiáng);小三陽(yáng)指HBsAg、抗-HBe、抗-HBc,此種模式感染趨向恢復(fù)期;乙肝的保護(hù)性抗體指抗-HBs;HBeAg陽(yáng)性表示乙肝的傳染性極強(qiáng);抗-HBs、抗-HBs、抗-HBc三者陽(yáng)性表示處于既往感染恢復(fù)期;HBV陽(yáng)性,肝功能正常,此種人為無(wú)癥狀的乙肝攜帶者;乙肝的傳播方式:血液、母嬰、性傳播;ELISA檢測(cè)HBsAg、抗-HBs、HBeAg一
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