1、審評四部審評七室陳俊春高晨燕EMEA自2002年對生物利用度和生物等效性研究指導原則（以下簡稱EMEA指導原則）修訂后，于2006年7月發布了生物利用度和生物等效性研究指導原則問答（以下簡稱EMEA指導原則問答）對該原則的一些重要部分作出解釋。以下就其問答全文結合我國的化學人體生物利用度和生物等效性研究技術指導原則（以下簡稱我國指導原則）與EMEA指導原則做一簡介。1. 、生物等效判定時對Cmax的要求EMEA指導原則的生物利用度等效評價要求Cmax比值的90%置信區間在-范圍內。特殊情況下，如藥物治療窗窄，則可接受的區間范圍應更窄。僅在特定情況下，才可接受更寬的區間范圍，如；而且該區間應事先

2、確定，即在試驗設計時應考慮到接受大于常規區間范圍的情況，事后擴大原方案中確定的可接受區間的做法不可取；并應證明該范圍對于病人更換時在安全和有效性方面的合理性。EMEA指導原則在此提及的增加Cmax比值（非AUC）可接受區間范圍的情況并不多見，并且僅擴大了一點?，仍窄于我國指導原則中規定的范圍。擴大時僅限于以下情況：1）該藥物安全性和有效性的PK/PD相關性資料足以顯示Cmax可接受區間的擴大不會顯著影響其臨床藥效。2）如PK/PD資料不充分，臨床安全性和有效性資料可以作為替代，但這些資料僅限于該研究藥物。3）藥物在個體內的生物利用度具有高變異性。EMEA和我國的指導原則都對高變異性藥物做了定義

3、（即：個體內變異系數大于30%），但是要評價其個體內變異性需要設計重復試驗。2. 關于離群值EMEA指導原則要求試驗方案中應詳細說明判定生物學上不合理的離群值方法。數據或個體的排除僅限于違反方案的情況，如嘔吐、腹瀉，分析失敗等。這些情況應在所有受試者中排查，而與藥代動力學參數數值大小或其偏離的程度無關。不能僅因統計分析或藥代動力學的原因排除數據，因為無法區分影響因素和藥代動力學影響因素。藥代動力學數據只能因非的原因被排除，并且因事先在方案中說明或至少在處理數據前說明，事后離群值的排除通常不被認可。特殊原因可于事后排除數據，但應慎重考慮。在這種情況下，申辦者應說明僅離群值有該情況而其它受試者以同

4、樣標準篩查后無該導致偏差的情況。申辦者應同時提供包括和不包括離群值時兩種結果。我國在化學藥物和臨床試驗的生物統計學技術指導原則一文中對離群值問題的處理提供了相應類似建議。3. 對90置信區間范圍的要求要確立生物等效，EMEA指導原則要求90%置信區間應在可接受的范圍內（大多數情況是-）,包括邊界。因此當藥代動力學參數90%置信區間的一側落在或上，我們仍可下等效的結論。但是得出生物等效的結論應基于對藥代動力學試驗全方位的科學評價，而非僅僅滿足可接受的范圍要求。我國指導原則中等效的判定則不包括邊界，并且Cmax的要求擴大為一，AUC則與之相似（-）。4. 藥代動力學數據的統計處理EMEA指導原則要

5、求，AUC和Cmax應在對數轉換后使用多因素方差分析（AN0VA）進行，其原因是：AUC和Cmax數據通常為非正態分布。對數轉換后糾正其偏態后可進行參數檢驗。而且藥代動力學數據的真實分布由于樣本量小而無法確定，因此不推薦根據正態性檢驗結果選擇分析方法。將數據對數轉換后行ANOVA是原則。非參數檢驗或其它靈敏的統計方法的分析結果還是可以接受的。這些分析可保證試驗結論不易犯統計分析的假設錯誤。建議對Tmax原始數據使用非參數檢驗。以上與我國指導原則要求基本一致。5. 替代常規血藥濃度（藥物代謝物和尿樣數據）的情況根據EMEA指導原則，可用代謝物數據來評價生物等效的情況僅限于以下情況：1）生物基質中

6、活性物質濃度太低以至于無法準確檢測，并導致顯著變異時。此時，申辦者應提供令人信服的證據說明母體化合物的檢測不可靠，才能使用代謝物數據。盡管如此，值得指出重要的一點是代謝物的Cmax在評價藥物吸收速度方面的差異不及母體化合物的Cmax敏感。因此，當吸收速度在臨床上有重要意義時，盡可能檢測母體化合物的Cmax，甚至可以用較高的。同時，申辦者應提供證明通過檢測代謝物的暴露程度可以反映母體化合物的暴露程度后，代謝物的檢測才能替代母體化合物的檢測。2）當代謝物活性是體內活性物質總活性的主要部分并且其藥代動力學特征是非線性時。此時，先要評價代謝物的作用，應比較它和母體化合物的AUCs與非臨床或臨床藥效學資

7、料。PK/PD模型會有助于該評價。如果代謝物活性是體內活性物質總活性的主要部分并且其藥代動力學特征是非線性的，就有必要同時母體化合物和活性代謝物的血藥濃度并且對他們單獨評價。由此得到母體化合物和活性代謝物結果的任何差異都應基于他們的活性和AUCs進行討論。如果有Cmax的差異，通常優先考慮使用母體化合物的結果。把母體化合物和它的代謝物的血藥濃度或藥代動力學數據合并計算來評價生物等效是不可取的。原則上，判定生物等效時，可用評價母體化合物時的可接受范圍（包括擴大的Cmax可接受范圍）來評價代謝物的數據。但是，如上所述，代謝物的Cmax在評價吸收速度方面的差異不及母體化合物的Cmax敏感。因此，用代

8、謝物來替代母體化合物評價生物等效通常不可取。當代謝物構成主要或全部的治療作用，并且可證明擴大的可接受范圍不會導致任何安全性或有效性問題時（但是要證明這一點比母體化合物難），可以接受代謝物擴大的Cmax可接受范圍。EMEA指導原則認為：在評價主要從腎排泄藥物的吸收程度時，尿樣的藥代動力學數據有一定優勢，但用于估計吸收速度應予以確證。如果藥物是線性消除而且主要以原形藥物從腎排泄，可以用尿樣的藥代動力學數據來評價藥物吸收的程度。但是，用尿樣的藥代動力學數據來估計吸收速度應仔細予以確證。如果可以檢測到可靠的血藥Cmax，可結合尿樣數據估計藥物吸收的程度來評價生物等效性。我國指導原則中也有類似建議：1）

9、當受試藥不能用血藥濃度測定方法進行生物利用度時，若該藥原形或活性代謝物主要由尿排泄（大于給藥劑量的70%），可以考慮尿藥法測定，但該方法不能反映藥物吸收速度，誤差因素較多，一般不提倡采用；2）當藥物在體內迅速代謝無法測定生物樣品中原形藥物，也可采用測定生物樣品中主要代謝物濃度的方法，進行生物利用度和生物等效性試驗。6. 規格的選擇根據EMEA指導原則，如果一項新的申請涉及活性物質的多個規格，可只進行一個規格的生物等效性試驗。前提是滿足五個條件：1）產品都是同一廠家按同樣工藝生產。2）在治療劑量范圍呈線性藥代動力學特征。3）不同規格的組成成分都一致。4）活性物質和輔料比例相同。5）受試規格和其它

10、規格在同等條件下溶解性近似。其中第2條規定：在治療劑量范圍呈非線性藥代動力學特征時，應選擇能最敏感地評價兩個差別的規格。這種情況下，非線性藥代動力學數據應反映原則中所說的藥物非線性吸收速度。總的來說，在評價具有非線性藥代動力學特征藥物的生物等效性時，重要的是研究的劑量而非研究制劑的規格。特殊情況是當生物利用度取決于活性成分的溶解度時，此時生物等效性試驗應包括最大制劑規格。當獲準進行高給藥試驗時，通常應給予推薦的最高常規劑量。如該劑量無法用于志愿者，則需要在病人中實施。如只能給予志愿者可接受的最高劑量，申辦者應說明該情況，并討論在該劑量得出的生物等效結論如何外推到推薦的最高常規劑量。當無法證明藥

11、物的吸收或消除是線性時，或證實其為非線性，除非申辦者有其它證據，受試和參比制劑生物等效的建立應基于最低劑量和最高劑量同時等效。該方法是評價具有劑量依賴藥代動力學特征物質的吸收速度和程度差異最敏感的方法。在另一方面，當生物等效性試驗選擇了一個劑量時，該劑量的選擇取決于非線性的原因。如在單規格給藥試驗中：1）最高劑量在單劑量或多劑量遞增給藥后AUC或Cmax的增加的比例大于劑量增加比例。此時，如果藥物有蓄積（穩態濃度高于單次給藥后濃度）需要進行額外的穩態試驗。2）最低劑量（或線性范圍內的劑量）遞增給藥后AUC或Cmax的增加的比例低于劑量增加比例，如：該現象是由于吸收的飽和。當一個具有非線性藥代動

12、力學特征物質的生物利用度取決于活性物質的溶解度時，導致遞增給藥后AUC的增加的比例小于增加比例，生物等效性判定應包括最低劑量和最高劑量（可能超過推薦的初始劑量）以及最大制劑規格。值得一提的是當藥物具有線性特征但是溶解度小或差時，同樣需要進行最高劑量和最大制劑規格的試驗。我國指導原則中對規格的選擇要求未予以細化。7. 生物等效性試驗進食的標準化EMEA指導原則認為：如果參比制劑的中包括有關于進食的建議涉及食物藥物相互作用，則試驗也應做相應設計。但是制劑說明書中和進食相關的建議并不足以從法規角度作出生物等效性試驗是否妥當的判定。可取的是，當制劑的說明書建議藥物在進食時服用時，應考慮以下情況：1）制

13、劑說明書中進食的建議是基于藥代動力學特性的考慮，如提高生物利用度，此時通常需要在進食情況下開展生物等效性試驗。2）說明書中進食的建議是基于減少或提高耐受性的考慮，盡管建議在進食情況下開展生物利用度試驗，也可以接受空腹狀態下的生物等效性試驗結果。3）制劑說明書的建議是空腹和進食都可以，此時最好在空腹狀態下進行生物等效性試驗，因為此時藥代動力學差異的表現更為敏感。應描述食物的構成并考慮其影響，因為清淡的食物有時候更接近于臨床狀態，特別是進食時藥代動力學差異的表現較不敏感。但是，對于釋放特性改進的制劑，需要進食高脂飲食。對于和常規速釋制劑不同的制劑（如釋放、溶解或吸收特性改進的制劑），包括不屬于有延長或延遲釋放特點的釋放特性改進制劑，其生物等效性試驗也有必要在空腹和進食兩種狀態下進行。我國指導原則中對進食的要求，一般是常規建議服藥時空腹，在考慮到進食對口服藥物制劑藥代動力學影響時，建議的試驗餐應是高脂、高熱量的配方。總的來看，EMEA指導原則問答一文就修訂后的指導原則中一些重要部分做了詳細解釋，有助于申辦者更好地理解和把握EMEA指導原則精神；并在一定程度上也可供我國的生物