1、會計學1淋巴細胞發育進展張毓淋巴細胞發育進展張毓TSCCD4 RTEDNPre-TCRDPTCRCD4CD8TCRTCRCD8CD4 SPTCRCD4CD4b b-selectionPositiveselectionNegative selectionFunctional maturationTCR-b b rearrangementTCR-a a rearrangementTCRCD8CD8 SPCD8 RTEDevelopment of ThymocytesDoublenegativeDoublepositiveSinglepositive胸腺胸腺T細胞發育過程及主要事件細胞發育過程及主要

2、事件Origin of Thymic Seeding CellsCLP：Lin-Sca-1+c-kit+IL-7R+TSC來源于來源于CLP嗎？嗎？Notch Signal and T-lineage Commitment受體受體: Notch 1-4；胸腺細胞表達；胸腺細胞表達Notch1-3；全部效應由；全部效應由Notch 1介導介導 配體：配體：Dll1，3，4， Jagged 1，2；胸腺上皮細胞表達全部配體；胸腺上皮細胞表達全部配體；Dll4 可能為生理性配體可能為生理性配體信號轉導：信號轉導：ADAM蛋白酶活性水解蛋白酶活性水解Notch胞外區，胞外區，presenilin依賴的

3、依賴的g g分分 泌酶進一步切割釋出胞內區（泌酶進一步切割釋出胞內區（Notch-IC）；）；Notch-IC入入 核，與核，與CSL（或（或RBPJ）結合，并招募共激活分子）結合，并招募共激活分子MamL， 發揮轉錄調控作用發揮轉錄調控作用 T系定向：系定向：始于始于DN1，完成于，完成于DN3；絕對依賴；絕對依賴Notch1信號信號Lineage Specification: abab vs gd gd T Cell始于始于DN2，完成于，完成于DN3gdgd選擇：類似選擇：類似b b選擇，上調選擇，上調CD27，CD5，但不上調，但不上調CD4，CD8TCR類型對分化方向的影響：類型對分

4、化方向的影響：RAG-deficient DN3轉染轉染TCRgdgd或或TCRb b本質可能為信號強度差別：配體依賴或張力性信號本質可能為信號強度差別：配體依賴或張力性信號Sox13對分化方向的影響：對分化方向的影響：基因缺陷導致基因缺陷導致gdgdT細胞發育障礙；過表達影響細胞發育障礙；過表達影響ababT細胞向細胞向DP階階段發育段發育Migration of Developing Thymocytes胸腺定植：胸腺定植：CCL25-CCR9皮質區向外：皮質區向外：SDF1-CXCR4CCL25-CCR9皮質區向內：皮質區向內：CCL25-CCR9？皮質到髓質皮質到髓質CCL19/CCL

5、21-CCR7遷出胸腺遷出胸腺S1P-S1P1細胞增殖：細胞增殖：DN1 10次次DN2 4次次Pre-DP 8次次Aire and Negative selection自身免疫性多內分泌腺病自身免疫性多內分泌腺病- -念珠菌病念珠菌病- -外胚層營養不良外胚層營養不良 APECED慢性皮膚粘膜白色念珠菌病慢性皮膚粘膜白色念珠菌病甲狀旁腺功能減退甲狀旁腺功能減退腎上腺功能不全腎上腺功能不全Autoimmune Regulator (Aire)Aire缺陷與自身免疫缺陷與自身免疫Aire驅動驅動TSA在髓質區胸腺在髓質區胸腺上皮細胞中表達上皮細胞中表達OVA-specific TCR/insul

6、in promoter-driven OVA雙轉雙轉基因鼠模型基因鼠模型Aire作用機制作用機制調控調控TSA表達表達促進促進mTEC凋亡凋亡并非所有并非所有TSA的胸腺表達都受的胸腺表達都受Aire調控，如調控，如C反應蛋白、谷氨酸脫羧酶反應蛋白、谷氨酸脫羧酶67等。等。a a胞襯蛋白、二硫化物異構酶胞襯蛋白、二硫化物異構酶A2等的表達并不依賴于等的表達并不依賴于Aire，但，但Aire缺陷鼠依然缺陷鼠依然表現出針對這些抗原的自身免疫應答。表現出針對這些抗原的自身免疫應答。Aire影響影響mTEC抗原加工提呈抗原加工提呈Aire參與參與SP T細胞發育調控細胞發育調控Aire參與外周免疫耐受

7、誘導參與外周免疫耐受誘導CD45-gp38-MHC II+EpCAM+細胞誘導細胞誘導T細胞凋亡細胞凋亡 Aire的其它功能？的其它功能？胸腺器官生成胸腺器官生成cTEC和和mTEC來自共同前體來自共同前體 K5-K8+ cTECK5-K8+K5+K8+K5+K8- mTECmTEC發育發育B淋巴細胞發育淋巴細胞發育CLPPre-pro-BPro-BPre-BSelf-Reactive BImmatureBMatureBT2T1Lin-c-kit+IL-7R+B220+CD19+CD43+CD43-Pre-BCR+IgM+IgD-IgMhiIgD-CD21-CD23-B220+CD19-IgM

8、loIgDhiCD21intCD23+IgMhiIgD+CD21+CD23+apoptosisE2A EBF1 Pax5ReceptoreditingDH to JHVH to DHJHVL to JLIg gene rearrangementsPlasmacellCD19loCD138+Pax5 Bcl-6Blimp-1 Xbp-1E2A:調控多種調控多種B系基因表達，缺陷導致系基因表達，缺陷導致B細胞發育阻滯于細胞發育阻滯于CLP階段階段EBF1：E2A的主要靶基因，同時受的主要靶基因，同時受IL-7/Stat5信號調控信號調控Pax5： 激活激活B系基因，如系基因，如CD19、Ig-a

9、a，同時抑制非，同時抑制非B系基因，如系基因，如Notch1。對誘導和維持。對誘導和維持B系定向至關重要系定向至關重要B細胞定向分化的轉錄調控細胞定向分化的轉錄調控E2APax5EBFIdIL-7/Stat5濾泡濾泡B細胞和邊緣帶細胞和邊緣帶B細胞分化細胞分化FO：IgM+IgDhiCD23+CD21intMZ： IgMhiIgD+CD23-CD21hiBCR信號強度：信號強度：Aiolos，負調控，負調控，FO增加增加CD21，正調控，正調控，MZ增加增加Notch2信號：信號：MZ B細胞缺失細胞缺失BAFF：T2，FO B細胞缺失細胞缺失陰性選擇中的一些問題陰性選擇中的一些問題Anerg

10、y的相對貢獻？的相對貢獻？受體編輯：受體編輯：25%非轉基因非轉基因B細胞細胞 僅發生在骨髓僅發生在骨髓如何避免有益如何避免有益BCR被清除？被清除？未成熟未成熟B與成熟與成熟B細胞對細胞對BCR交聯反應性差異交聯反應性差異BCR刺激后，未成熟刺激后，未成熟B細胞中細胞中PIP2水解和水解和PKCb b活化不充分活化不充分PKCb b持續活化令未成熟持續活化令未成熟B細胞獲得凋亡抗性細胞獲得凋亡抗性PKCb b功能阻斷使成熟功能阻斷使成熟B細胞對凋亡高度敏感細胞對凋亡高度敏感c-Rel缺陷鼠來源缺陷鼠來源B細胞受細胞受BCR刺激后出現凋亡刺激后出現凋亡CD40信號挽救信號挽救B細胞凋亡細胞凋亡

11、c-Myc過表達賦予未成熟過表達賦予未成熟B細胞凋亡抗性細胞凋亡抗性c-Myc過表達干擾轉基因鼠過表達干擾轉基因鼠B細胞陰性選擇細胞陰性選擇未成熟未成熟B細胞中，細胞中，BCR受抗原刺激后不能定位于脂筏。鑒于受抗原刺激后不能定位于脂筏。鑒于PIP2主要位于脂筏，主要位于脂筏，BCR定定位缺陷可能直接影響位缺陷可能直接影響PIP2水解。水解。BCR定位缺陷可能與胞膜中膽固醇含量低有關。定位缺陷可能與胞膜中膽固醇含量低有關。謝謝謝謝Aire and Negative selection自身免疫性多內分泌腺病自身免疫性多內分泌腺病- -念珠菌病念珠菌病- -外胚層營養不良外胚層營養不良 APECED

12、慢性皮膚粘膜白色念珠菌病慢性皮膚粘膜白色念珠菌病甲狀旁腺功能減退甲狀旁腺功能減退腎上腺功能不全腎上腺功能不全Autoimmune Regulator (Aire)并非所有并非所有TSA的胸腺表達都受的胸腺表達都受Aire調控，如調控，如C反應蛋白、谷氨酸脫羧酶反應蛋白、谷氨酸脫羧酶67等。等。a a胞襯蛋白、二硫化物異構酶胞襯蛋白、二硫化物異構酶A2等的表達并不依賴于等的表達并不依賴于Aire，但，但Aire缺陷鼠依然缺陷鼠依然表現出針對這些抗原的自身免疫應答。表現出針對這些抗原的自身免疫應答。Aire影響影響mTEC抗原加工提呈抗原加工提呈Aire參與參與SP T細胞發育調控細胞發育調控Ai

13、re參與外周免疫耐受誘導參與外周免疫耐受誘導CD45-gp38-MHC II+EpCAM+細胞誘導細胞誘導T細胞凋亡細胞凋亡 Aire的其它功能？的其它功能？未成熟未成熟B與成熟與成熟B細胞對細胞對BCR交聯反應性差異交聯反應性差異BCR刺激后，未成熟刺激后，未成熟B細胞中細胞中PIP2水解和水解和PKCb b活化不充分活化不充分PKCb b持續活化令未成熟持續活化令未成熟B細胞獲得凋亡抗性細胞獲得凋亡抗性PKCb b功能阻斷使成熟功能阻斷使成熟B細胞對凋亡高度敏感細胞對凋亡高度敏感c-Rel缺陷鼠來源缺陷鼠來源B細胞受細胞受BCR刺激后出現凋亡刺激后出現凋亡CD40信號挽救信號挽救B細胞凋亡細胞凋亡c-Myc過表