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文檔簡介
1、第三章填空題1. 反應溶劑直接影響化學反應的 反應速度 、反應方向 、反應深度 、產品構型 等。 2. 水、乙醇、乙酸、乙二胺等屬于 質子溶劑,乙醚、二氯甲烷、丙酮、吡啶等屬于非質子溶劑,甲苯、正己烷、環己烷等屬于 惰性 溶劑。 選擇題1. 可逆反應屬于( A ) A. 復雜反應 B. 平行反應 C. 基元反應 D. 簡單反應 3. 在溶劑的作用描述中,不正確的是( B ) A.使反應分子能夠分布均勻、增加分子間碰撞和接觸的機會、有利于傳熱和散熱。 B.溶劑必須是易揮發的 C.溶劑必須是惰性的,不能與反應物或生成物反應 D.溶劑直接影響化學反應的反應速度、反應方向、反應深度、產品構型等 簡答題
2、單分子反應,雙分子反應,一級反應,二級反應之間的關系? 答:在某基元反應過程中若只有一分子參與反應則稱為單分子反應。多數的一級反應為單分子反應。當相同或不同的兩分子碰撞時相互作用而產生的反應稱為雙子反應,即為二級反應。化學合成藥物工藝研究的主要內容是什么? 答:化學合成藥物工藝研究的主要內容有7個:配料比、溶劑、溫度和壓力、催化劑、反應時間及其監控、后處理、產品的純化和檢驗。第四章1.簡述天然提取法制備手性藥物的一般步驟? 答:酶法分析 酶催化的還原反應 酶催化的氧化反映 酶催化的不對稱合成反應 酶催化的轉氨基化作用2.什么是手性藥物,其構型與活性的特點是什么? 答:具有藥理活性的手性化合物就
3、是手性藥物。 兩個對映體具有相同的藥理作用。 兩個對映體中的一個有藥理活性,另一個則無明顯作用。 兩個對映體的藥理作用不同,上市后用于不同的適應癥。 在消旋體中增加一種對映體的比例可調整臨床療效。 兩個對映體中的一個有治療價值,另一個則有不良作用。第五章 選擇題1、氯霉素抗菌譜廣,而最主要的不良反應是(D)A、二重感染 B、胃腸道反應 C、對肝臟嚴重損害 D、對造血系統的毒性 E、影響骨、牙生長2、與氯霉素特點不符的是(A)A、口服難吸收 B、易透過血腦屏障 C、適用于傷寒的治療 D、骨髓毒性明顯 E、對早產兒
4、、新生兒可引起灰嬰綜合癥3、氯霉素的下述不良反應中,哪項是與劑量和療程無關的嚴重反應?(A)A、不可逆的再生障礙性貧血 B、灰嬰綜合征 C、可逆的各類血細胞減少 D、溶血性貧血 E、出血現象4、可能拮抗氯霉素抗菌作用的藥物是(C)A、磺胺類B、慶大霉素C、紅霉素D、四環素E、多黏菌素填空題1、氯霉素有 2 個手性中心, 4 個光學異構體.2、利用氯霉素生產工藝中 副產物 可以生產除草劑-殺草銨.鄰硝基乙苯簡答題1、對硝其溴代苯乙酮的制備中水含量有何影響?為什么?答:水分存在時與溴化氫反應,誘導其延長或基本不起反應,因此對硝基苯乙酮溴代反應時,水分存在不利
5、于反應,必段嚴格控制溶劑的水份第六章 選擇題:1. 具有明顯抗癌作用的紫杉醇來源于。(B)A松屬植物 B紅豆杉屬植物 C三尖杉屬植物 D銀杏屬植物2、 水解得到的紫杉醇粗品可以用(A)方法進行純化:A柱色譜、重結晶 B過濾 C蒸餾 D 滲析3、 紫杉醇難溶于(A)A水 B甲醇 C二氯甲烷D乙腈4、 紫杉醇有獨特的抗癌機制,其作用的靶點是(D)和細胞周期中至關重要的微管蛋白。A減數分裂 B 無絲分裂 C 減數分裂與有絲分裂 D有絲分裂5、 下列與紫杉醇有相同作用機制的是AA多烯紫杉醇 B氯霉素 C青霉素D頭孢菌素6、 不同的側鏈原料出發,可以有多條半合成紫杉醇的路線,其中,以()為最優。A-內酰
6、胺型側鏈前體為原料B雙鏈不對稱氧化法C醛醇反應法D順式肉桂酸乙酯為原料7、 紫杉醇有復雜的化學結構,屬于AA三環二萜類化合物B二環三萜類C三環三萜類D二環二萜類8、 在紫杉醇的制備過程中,由于溶劑四氫呋喃很容易吸收水分,故將四元環溶入時必須在(C)保護下操作。A乙醇B鹽酸 C惰性氣體D氮氣9、 半合成的紫杉醇的側鏈大致分為A非手性側鏈B手性側鏈C側鏈前體物D。ABC10、 對于-內酰胺側鏈合成的過程,環加成的產物為(C)A單一順式結構體B單一反式結構體C單一順式或反式結構體D不單一順式結構體2、 填空題1、 紫杉醇難溶于 水、易溶于 甲醇、二氯甲烷 和 乙腈 等有機溶劑。 2、 紫杉醇的生產工
7、藝路線主要有 天然提取工藝路線 和 生物合成工藝。3、 紫杉醇具有獨特的抗癌作用,其作用靶點是 有絲分裂和細胞周期 中至關重要的微管蛋白。4、 紫杉醇是紅豆杉的次生代謝產物,主要存在紅豆杉屬植物的 樹皮 和 針葉 中。5、 紫杉醇分子由一個二萜母環和一個苯基異絲氨酸側鏈組成,因此半合成紫杉醇原料分為 母環和 側鏈 兩部分。6、 半合成紫杉醇的側鏈大致分為 非手性側鏈 、 手性側鏈 和 側鏈前體物 三大類。7、 合成手性紫杉醇側鏈的方法有很多,其中最具代表性的方法有 雙鍵不對稱氧化法 和 醛醇反應法 兩種。8、 半合成紫杉醇時使用的手性側鏈是 2R,3S-苯基異絲氨酸衍生物。簡答題:1、紫杉醇半
8、合成路線的策略是什么? 答:研究發現,紅豆杉植物中除紫杉醇外,還有大量母環結構與紫杉醇類似的化合物,其中,最重要的是巴卡亭III和10-去乙酰基巴卡亭III(10-DAB).紫杉醇的半合成過程的基本策略,就是以天然存在的紫杉醇母環結構類似物巴卡亭III和10-DAB為基本原料,在其C-13位接上化學合成的側鏈,以此制備紫杉醇的方法。2、 簡述紫杉醇的作用機制: 答:紫杉醇屬有絲分裂中的微管抑制劑,紫杉醇具有聚合和穩定細胞內微管的作用,致使快速分裂的腫瘤細胞在有絲分裂階段被牢牢固定,使微管不再分開,可阻斷細胞于細胞周期之G2與M期,使癌細胞復制受阻斷而死亡3、 簡述紫杉醇分離純化工藝過程:由石油
9、醚固-液萃取、堿洗、己烷沉淀、一次層析、一次結晶、溴加成、二次層析和二次結晶8道工序構成。第七章選擇題1關于頭孢菌素C的說法錯誤的是 DA頭孢菌素C分子中存在兩個羧基,一個氨基 B在中性或偏酸性環境中顯酸性,帶負電荷C頭孢菌素C鈉鹽含2個結晶水 D難溶于水,易溶于有機溶劑2、 發酵培養基成分除了碳源和氮源,還需要硫源。頭孢菌素C的產量與(A)的量成正比A蛋氨酸與硫酸鹽B絲氨酸與硫酸鹽C蛋氨酸與碳酸鹽D谷氨酸與硫酸鹽3、 頂頭孢菌素在深層培養條件下有(B)種類型:A菌絲型、萌芽型、節孢子型B菌絲型、節孢子型、萌芽型和分生孢子型C節孢子型、萌芽型和分生孢子型D球形、萌芽型、分生孢子型和節孢子型4、
10、 由7-ACA半合成頭孢菌素發展迅速,主要有幾個位點:DA1 B2 C3 D45、7-氨基頭孢烷酸的生產過程:AA酯化-氯化-醚化-水解 B氯化-醚化-水解-酯化C醚化-水解-酯化-氯化 D水解-酯化-氯化-醚化6、 微生物的酶酰化路線的生產工藝,多采用(A)技術A固相酶B液相酶C氣相酶D液相梅與固相酶7、 頭孢氨為白色粉末,不溶于DA水B乙醇C氯仿D B和C8、7-氨基頭孢烷酸的工藝流程廣泛利用的是BA酶水解法B化學裂解法 CA和B D發酵9、 下面不屬于半合成抗生素的是BA頭孢菌素B青霉素C舒巴坦D阿奇霉素10、 頭孢菌素與青霉素比較,過敏反應發生率AA較低 B較高 C一樣高 D一樣低填空
11、題1、 頭孢菌素分子中,可供改造的部位有四個。即7-酰胺基部分、7-氫原子、環中的硫原子和3-位取代基。2、 頭孢菌素與青霉素是兩類-內酰胺類抗生素,-內酰胺環是該類抗生素發揮生物活性的必須基團,可以開環、發生酰化作用,干擾細菌的轉肽酶,阻斷其交聯反應,使細菌不能合成細胞壁而破裂死亡,最終抑制細菌生長。3、 頭孢菌素具有高效、光譜、低毒、耐酶等優點。4、 半合成頭孢菌素類與本合成青霉素的生產工藝路線類似,主要有 微生物酰化法、化學酰化法和 以工業生產的廉價青霉素為原料的青霉素擴環法三種。5、 頭孢菌素的合成主要是化學酰化法,大多數都是7位和3位側鏈同時改造的產物,。6、 頂孢頭孢菌在深層培養條
12、件下有四種類型: 菌絲型、 萌芽型、 節孢子型 和 分生孢子型。7、 頭孢菌素的生產在國內主要有三條工藝路線, 苯甘氨酰氯與7-ADCA縮合法、 苯甘氨酸無水酰化法和 微生物酶酰化法。8、 苯甘氨酸無水酰化路線的生產工藝的原理是,以 甘氨酸 為原料,進行 二次酰基化;將7-ADCA與三甲基氯硅烷反應得到二硅烷基化的產物9、 頭孢菌素類化學酰化路線中3位取代:3位側鏈最有效的改造途徑是 以親核取代基取代7-ADCA上的乙酰氧基。10、 頭孢菌素C分子中存在 兩個羧基和一個氨基,在中性和偏酸性的環境里呈現 酸性, 帶負電荷。簡答題1、半合成頭孢菌素主要結構改造的位置?化學酰化法和微生物酶酰化各有什
13、么優缺點? 答:可何改造的部位有四個,即7酰氨基部分,7氫原子,環中的硫原子和3位取代基;采用化學酰化法酰化具有專屬性強,副反就少,反應條件溫和,產品純度高等優點。 2、7ADCA有幾條生產路線?有哪些不同? 答:有兩條,用頭孢菌素C為原料通過兩種方法酶水解法和化學裂解法得到7ACA,然后再脫乙酰基,便可得到7ADCA。 酶水解法難度大,應用有一定局限性。而化學裂解法雖然操作較為復雜,對生產設備要求高,但工藝較為穩定和成熟。 3、在半合成制備頭孢菌素過程中,哪些步驟采用化學合成?哪些步驟采用生物合成? 答:在化學酰化路線中,7位的酰化和3位的取代采用化學合成。在酶化法生產路線中,酶進行水解,采
14、用生物合成。 4、 苯甘氨酰氯與7ADCA綜合法中加入對甲苯磺酸的作用? 答:加入對甲苯硝酸的作用是7ADCA酯從反應系中分離出來。 5、 微生物酶酰化法生產頭孢氨芐是否可以工業化? 答: 可以工業化,酶酰化法專屬性強,副反應少,反應條件溫和,產品純度高,隨著酶活力與工藝的改進,酶酰化法將進一步發展并逐步工業化第八章填空題1. 氫化可的松又稱 皮質醇。2. Oppenauer氧化反應常用的氧化劑為 環己酮 ,催化劑為 異丙醇鋁。3. 氫化可的松半合成工藝中最大的副產物是 表氫可的松,可轉化為 可的松、氟氫可的松 等加以利用。4氫化可的松屬于甾體化合物,具有環戊烷并
15、多氫菲母核。5、孕甾二烯-3-醇-20-酮-3-醋酸酯的制備三個步驟:將薯芋皂素經 裂解, 氧化 和 水解 得 雙烯醇酮醋酸酯6、 合成氫化可的松的原料有 薯蕷皂素、 劍麻皂素、 番麻皂素、 豆甾醇、 膽甾醇(寫4個)等。我國主要以薯蕷皂素為半合成的起始原料。 選擇題1. 在我國合成氫化可的松的主要原料為( A )A. 薯蕷皂素 B.膽甾醇 C. 豆甾醇 D. 劍麻皂素2. 關于Oppenauer 氧化敘述錯誤的是( D )A. 其氧化劑可為環己酮 B. 其催化劑為異丙醇鋁C. 其可逆反應為Meerwei
16、n-Ponndorf還原 D. 不需要無水條件下操作3. 氫化可的松半合成工藝中最大的副產物是( B )A. 可的松 B.表氫可的松 C. 氟氫可的松 D.醋酸可的松4. Oppenauer 氧化中的催化劑是( A )A. 異丙醇鋁 B. 氫氧化鋁 C. 環己酮 D. 丙酮5. Oppenauer 氧化中的氧化劑是(C )A. 異丙醇鋁 B. 叔丁醇鋁 C. 環己酮 D. 丙醛簡答題1. 氫化可的松制備過程中為什么先抽真空后加熱?答:因
17、為空氣中含有水,醋酐遇水容易水解,如果不抽真空,則醋酐會與空氣中的水發生反應,抽去空氣后,再加熱,則醋酐就在無水環境下進行得到好的產物。2、17-羥基黃體酮的制備過程中為什么要嫁醋酸銨-吡啶溶液?答:吡啶是為了保護C3,C20酮基,4位雙鍵不被氧化。醋酸是為了除去反應中產生的溴化氫,保持催化劑鎳的活性。3. 在制備氫化可的松過程中,哪些步驟采用化學合成,哪些為生物法?答:化學合成:(1)5,16 孕甾二烯3B20二酮3醋酸酯的制備(2)16a17a環氧黃體酮的制備(3) 17a羥基黃體酮的制備(4)孕甾烯17a,2121二醇3,,2二酮醋酸酯的制備生物法:最后一步(5)最終產物氫化可的松的制備
18、4、制備氫化可的松哪步采用oppenaner氧化反應,機理是什么?答 第二步制備環氧黃體酮時采用oppenaner氧化反應;機理:環氧化物上的醇羥基易被氧化為酮,具有很強的專一性。5、制備氫化可的松中可能產生“三廢”是什么?答:溴化氫,Ni ,H2O等易燃易爆化學試劑第十一章選擇題 1 目前分離的1000多種抗生素,約2/3產自( B ) A、真菌B、放線菌C、細菌D、病毒2 能夠用沙土管保存的菌種是( C ) A、大腸桿菌B、酵母菌C、青霉菌D、乳酸桿
19、菌3、3 青霉素很容易發生分解,這主要跟它的結構中的( B)部位有關 A,苯乙酸; B,內酰胺環; C,五元環; D,羧基4 下列不屬于氨基糖苷類抗生素的是( D ) A,鏈霉素;B,卡那霉素;C,紅霉素;D,青霉素5 微生物產生的乙醇、丁醇等小分子物質在一定條件下也能殺菌、抑菌,但并不被看作抗生素,因為其不符合抗生素一般具有的( C)特點。 A,天然性; B,小分子;C,高活性(低微濃度); D,次級代謝產物
20、60;6 下列屬于半合成抗生素的是(A ) A,氨芐青霉素;B,四環素;C,卡那霉素;D,鏈霉素 7 下列哪個抗生素應用化學合成法生產( A )。 A. 氯霉素 B.青霉素 C.鏈霉素 D.四環素 8 具有兩性性質,可用等電點沉淀的抗生素是( B )。 A. 青霉素 B.四環素 C.紅霉素 D.鏈霉素9 30.下列哪個抗生素能抑制細胞壁合成( B )。A.紅霉素 B.青霉素 C.鏈霉素 D.魚素 10.(A )是青霉素發酵生產中使用的前體物質。A.苯乙酸 B.苯 C.乙酸 D.甲酸填空題1 微生物是抗生素的主要來源,其中以 放線菌
21、; 菌產生的最多, 真菌 菌次之, 細菌 菌又次之。2 抗生素的生產途徑包括 微生物發酵生產、化學全合成和半合成生產。3 1959年,Batchelor獲得了青霉素母核,開辟了半合成抗生素的時期,青霉素的母核為 6-氨基青霉烷酸(6-APA) ,青霉素G的側鏈為 苯乙酸 4 青霉素G的漢語名稱為 芐青霉素 ,其結構可以看作由3個“酸”構成,即 苯乙酸 、 半胱氨酸 和 纈氨酸 5 青霉素為代表的內酰胺類抗生素的作用機制主要是通過抑制 肽聚糖
22、轉肽酶及D-丙氨酸羧肽酶 的活性而阻礙了 肽聚糖 的交聯與合成,從而抑制了干擾了細菌的 細胞壁 合成。6 最早發現產生青霉素的微生物是屬于青霉菌類中的 音符型青霉菌 ,而目前生產上用于生產青霉素的菌種則屬于 產黃青霉 ,且大多經過誘變育種,大大提高了青霉素產量。7 從抗菌效力的發揮特點來講,內酰胺類抗生素屬于在細菌的 繁殖 期發揮 殺 菌作用的抗生素,其對革蘭氏陽性菌和陰性菌的作用效果有很大不同,即對革蘭氏 陽性 菌效果更佳。8 影響青霉素發酵產率的因素 至少三點 基質濃度、
23、前體濃度、pH的影響、溫度的影響、溶氧、菌體濃度 9 紅霉素的發酵生產需要添加的前體物質為 丙醇 。10 紅霉素發酵采用的菌種為 紅色糖多孢菌 ,發酵后主要采用 萃取和大孔樹脂吸附 工藝來提取。11 大環內酯類抗生素的結構是以 大環內酯基團 為母體,以 苷
24、0; 鍵和1-3分子的 糖衍生物 相連接的一類抗生素物質。 12 四環素發酵生產使用的菌種是產生金霉素的 金色鏈霉菌 和 卡諾菌 。13 四環素類抗生素是以 氫化四并苯 為母核的一類有機化合物。14 在四環素生產過程中, 無機磷 對發酵至關重要,是從生長轉型到生產的最關鍵影響因素,生長階段需要 高磷 ,而生產階段需要 低磷 。15 氨基糖苷類抗生素的代表性例子是 鏈霉素 ,其分子結構由 鏈霉胍 、 鏈霉糖
25、和 N-甲基葡萄糖胺 三部分以苷鍵連接而成。 16 工業上用于生產鏈霉素的菌種是 灰色鏈霉菌 三、簡答題1 抗生素發酵生產工藝的共性技術需求是什么?有什么特點? 答:發酵過程普遍流加一種碳源,氮源,如葡萄糖和硫酸銨,ph值通過流加氨水進行調節,很多抗生素在發酵中后期流入前體,對提高產量非常有益。抗生素發酵絕大多數為好氧培養,必須連續通入大量無菌空氣。全過程大功率攪拌。發酵液得預處手里,一般加絮凝劑沉淀蛋白,過濾去除菌絲體發酵濾液的提取常用溶劑萃取法,離子交換樹脂法,沉淀法,吸附法等提純濃縮,然后結晶干燥
26、得純品2 醫用抗生素應具備哪些要求?答:(1)難使病原菌產生耐藥性:病原菌為了求生存而發揮其適應功能,產生能破壞抗生素的酶,或改變胞漿膜的通透性等; (2)較大的差異毒力:所謂“毒力差異”是指藥物對病原和宿主組織的毒力差異; (3)最小抑菌濃度要低 ; (4)抗菌譜要廣。3 -內酰胺類抗生素的作用機制。臨床應用的-內酰胺類抗生素主要有哪些? 答:機制:通過抑制肽聚糖轉肽酶及D-丙氨酸羧肽酶的活性抑制肽聚糖的合成,從而干擾細胞壁合成。這種干擾是不可逆的,且殺菌濃度和抑菌濃度很接近。由于動物細胞沒有細胞壁,更不含肽聚糖結構,
27、因而對動物細胞沒有影響。 臨床主要有青霉素、頭孢菌素。 4 如何根據青霉素生產菌特性進行發酵的過程控制?答:青霉菌在深層培養條件下,經歷7個不同的時期,每個時期的菌體形態特征與生產能力有對應關系。在規定時間取樣,通過顯微鏡檢查形態變化,用于過程控制。1-4期為菌絲生長期,3期的菌體適宜為種子。4-5期為生產期,生產能力最強,通過工程措施,延長次期,獲得高產。在第6期到來前結束發酵。5 紅霉素提取的工藝過程。 答:發酵液 過濾 調pH丁(戊)酯萃取 萃取液 調pH緩沖
28、液萃取 丁(戊)酯二次萃取 萃取液 加丙酮結晶 重結晶 干燥得成品6 四環素提取的工藝過程。 答:發酵液過濾調pH9.0左右加氯化鈣加草酸溶液溶解沉淀過濾得濾液調pH4.6到4.8之間四環素析出草酸水溶液活性炭脫色調pH4.0成品7 請簡述鏈霉素的發酵生產與提取工藝包括哪些步驟。答:發酵生產:斜面孢子培養、搖瓶種子培養、二級或三級種子罐擴大培養、發酵培養及提取精制等 提取工藝:發酵液(過濾)原液(吸附)飽和樹脂洗脫洗脫液脫色、中和、精制精制液脫色、濃縮成品濃縮液(1、無菌過濾水針劑)(2、
29、無菌過濾,干燥粉針劑)四、問答題1 青霉素發酵生產工藝過程是什么?發酵控制原理及其關鍵控制點是什么? 答:發酵工藝過程,1.生產孢子的制備。2.種子罐培養工藝。3.發酵罐培養工藝 控制原理:發酵過程需連續流加葡萄糖,硫酸銨以及前提物質苯乙酸鹽,補糖率是最關鍵的控制指標:不同時期分段控制。在青霉素的生產中,及時調節各個因素減少對產量的影響,如培養基,補充碳源,氮源,無機鹽流加控制,添加前體等;控制適宜的溫度和ph,溶解氧以及菌體濃度。最后要注意消沫,影響呼吸代謝2 青霉素提煉工藝中采用了哪些單元操作,為什么?答:青霉素不穩定,發酵液預處理、提取和精制過程要條件溫和、快速,防止
30、降解。提煉工藝包括如下單元操作:(1)預處理與過濾:在于濃縮青霉素,除去大部分雜質,改變發酵液的流變學特征,便于后續的分離純化過程。(2)萃取:其原理是青霉素游離酸易溶于有機溶劑,而青霉素易溶于水。(3)脫色:萃取液中添加活性炭,除去色素,熱源,過濾,除去活性炭。(4)結晶:青霉素鉀鹽在乙酸丁酯中溶解度很小,在乙酸丁酯萃取液中加入乙酸鉀-乙醇溶液,青霉素鉀鹽口直接結晶析出。3 比較分析鏈霉素,紅霉素,四環素發酵工藝控制的異同及其原理。 答:鏈霉素的發酵工藝過程;1.生產菌種特性 2.種子制備 3.發酵培養
31、鏈霉素高度好氧,對溫度敏感,鏈霉菌菌絲過長的最適ph為6.5-7.0,鏈霉素的發酵周期約7-8d,必須補料葡萄糖,硫酸銨和氨水,提高發酵產量。 紅霉素;1.紅霉素生產菌體 2.種子制備 3.發酵培養 紅霉素生產菌對溫度敏感,最適ph為6.7-6.9,發酵周期約150-160h,必須中間補料。還原糖控制在1.2-1.6,每隔6h加入葡萄糖。及時補充氮源。 四環素;1.生產菌體 2.種子制備
32、60; 3.發酵培養工藝 溫度對四環素的生產產量影響和改變生物合成途徑的影響較大,菌體生長最適ph為6.2-6.8,而四環素合成最適ph為5.8-6.0,發酵過程對溶解氧敏感,應該采取措施,增加溶解氧水平。第十二章選擇題1.下列屬于極性氨基酸的是(B)。A、苯丙氨酸 B、組氨酸 C、色氨酸 D、脯氨酸2、以下屬于氨基酸生產工藝的是(ABCD)。A、微生物發酵工藝 B、酶法轉化工藝 C、化學合成工藝 D、蛋白質水解工藝3、關于利用發酵工程生產谷氨酸的生產實例的敘述中,錯誤的是(B)。A、常用的谷氨酸產生菌有好氧性的谷
33、氨酸棒狀桿菌、黃色短桿菌等。B、生產用的培養基通常是由豆餅的水解液、玉米漿、尿素、磷酸二氫鉀、氧化鉀、硫酸鎂、生物素等配制而成的液體培養基,從培養基的成分上分析,該培養基為合成培養基。C、發酵工程中應通過發酵罐上面連接的通氣、攪拌、接種、加料、冷卻、PH檢測等裝置嚴格控制發酵條件。D、提取出來的谷氨酸用適量的NaCO3溶液中和后,再經過過濾、濃縮、離心分離等步驟,便制成了味精。4、氨基酸發酵過程中若發生噬菌體感染時會出現一些明顯的變化,主要表現(D)。A、發酵液光密度值急劇下降 B、發酵液泡沫增多、粘度增大,甚至呈膠狀 C、C源、N源以及氧的消耗減慢甚至停滯,排氣中CO2含量迅速下降 D、以上
34、說法都對5、從代謝控制育種的角度出發,下列關于選育高產谷氨酸菌株途徑中可行的是(C)。A、選育以琥珀酸或蘋果酸為唯一碳源的菌株B、選育不分解利用谷氨酸的突變株C、A和BD、以上均不可行6、以下是對氨基酸工業的描述,其中說法正確的是(D)A、氨基酸的生產最早是采用水解蛋白質的方法B、中國谷氨酸的生產量居世界第一C、除纈氨酸、亮氨酸、異亮氨酸國內不能實現產業化生產外,其他氨基酸均已完全實現國產化D、以上說法都正確填空題1、氨基酸是在羧酸中a-碳上的一個原子被氨基 取代而成的一類化合物。2、氨基酸根據R基團的化學結構不同可分為脂肪族氨基酸、芳香族氨基酸、雜環氨基酸;根據R基團的極性可把氨基酸分為極性
35、和非極性氨基酸。3、氨基酸一般溶于水、稀酸稀堿,不溶于乙醚、氯仿等有機溶劑,常用乙醇沉淀氨基酸。4、谷氨酸生產菌主要是棒狀桿菌屬、短桿菌屬、小短桿菌屬和節桿菌屬中的細菌 5、目前國內谷氨酸提取工藝主要有:等電點法、離子交換法等。6、賴氨酸發酵培養基有碳源、氮源、生長因子、無機鹽和微量元素組成。7、賴氨酸的分離純化采用離子交換樹脂吸附工藝。8、谷氨酸等電點為PH3.22,其溶解度受溫度影響較大(較大或較小)。9、國內谷氨酸生產的碳源原料主要有淀粉糖和糖蜜兩類,國內谷氨酸產生菌多數為生物素缺陷型。10、天冬氨酸族氨基酸生物合成共同途徑上的第一個關鍵酶是天冬氨酸激酶,在E.coli中,此酶有3種同工
36、酶組成。簡答題1、目前常用的氨基酸生產工藝有哪些,并簡要說明各工藝的特點。(1) ,微生物發酵工藝:借助微生物具有自身合成氨基酸的能力,通過發酵培養生產氨基酸。大多采用營養缺陷兼結構類似物抗性突變株,還有采用基因工程菌進行生產。(2) ,酶法轉化工藝:利用酶的立體專一性反應,催化底物生產有活性的氨基酸。具有工藝簡便,轉化率高,副產物少,容易精制等特點。適用于發酵或化學合成難以生產的氨基酸。(3) ,化學合成工藝:通過有機化學合成途徑生產氨基酸,其優點是不受氨基酸品種的限制,理論上可生產天然氨基酸和非天然氨基酸。(4) ,蛋白質水解工藝:以毛發、血粉等原料蛋白質,通過酸、堿或酶水解形成多種氨基酸
37、的混合物,再經過分離純化制備各種氨基酸。2、簡要介紹賴氨酸的分離純化工藝的特點。賴氨酸的分離純化采用離子交換樹脂吸附工藝。賴氨酸是堿性氨基酸,在酸性溶液中以陽離子形式存在,能強烈被陽離子樹脂吸附。常用銨型強酸性陽離子交換樹脂,可選擇性吸附堿性氨基酸,同時氨水洗脫后,樹脂不必再生.第十三章選擇題1.下列哪項不屬于維生素范疇?(B)A硫胺素 B、生長素 C、核黃素 D、抗壞血酸2.下列哪項不是主要維生素的生產方式?(A)A轉基因技術 B、化學合成 C、天然提取 D、微生物發酵3.下列哪項不是屬于萊氏法化學合成的工藝路線?(A)A利用D-葡萄糖為原料,經過催化氫化生成L-山梨醇BL-山梨醇在酸性溶液
38、中丙酮化C用高錳酸鉀在堿性溶液中將雙丙酮-L-山梨糖氧化為雙丙酮-L-古龍酸D2-酮基-L古龍酸內酯化和烯醇化直接生成抗壞血酸4.兩步發酵生產維生素C可以分為三步,下列哪個步驟不屬于兩步發酵生產維生素C?(C)A發酵 B、轉化 C、純化 D、提取5.下列哪項不屬于兩步發酵生產工藝過程?(B)AD-山梨醇的化學合成B將D-山梨醇轉化為2-酮基-L古龍酸C、2-酮基-L古龍酸的分離純化D、堿轉化法催化2-酮基-L古龍酸生成維生素C6.維生素A2的生物活性為維生素A1 的(B) A70% B40% C90% D10% E50%7.促進凝血酶原合成的是( E ) A. 維生素A B.維生素C C. 維
39、生素D D. 維生素E E. 維生素K8.維生素K3中常加的穩定劑是(E) A.氫氧化鈉 B.硫酸鈉 C.硫酸氫鈉 D.亞硫酸氫鈉 E.焦亞硫酸氫鈉9.氯化4-甲基-3-(2-甲基-4-氨基-5-嘧啶基)甲基-5-(2-羥基乙基)噻唑鹽酸鹽是(D) A維生素A B維生素D C維生素E D維生素B1 E維生素K310.缺乏維生素C易患以下哪種疾病(C) A.惡性貧血 B.口角炎 C.抗壞血病 D.夜盲癥填空題1根據溶解性,把維生素分為水溶性和脂溶性兩類,水溶性維生素包括()和(),維生素在體內的主要作用是()和()其衍生物以輔酶或輔基形式參與酶反應,脂溶性維生素包括()等,在食物中與脂肪共存。2
40、.人體內不能合成維生素,缺乏它會導致疾病發生,出現相應缺乏癥,其它的種類有()、()、()脂肪族,脂環族等,主要維生素生產方式有三種分別是()()和()。3.()又稱L-抗壞血酸,它的生理功能是(),它含有()個手性碳原子,4種旋光異構體,是目前世界上產銷量最大,應用最廣的維生素產品,它的制備的兩種方法是()和()。4.兩步發酵工藝逐漸在國內生產企業普遍采用,兩步發酵生產維生素C可以分為()、()和()三大步驟。5.維生素B2廣泛存在于動植物中,但含量低,無法分離提取制備,從1935年出現許多合成方法,維生素B2的工業發酵一般為()對發酵液的要求是()能產生維生素B2的微生物有()()和()。
41、答案:1.(B族維生素),( 維生素C),( 調節酶活性), (代謝活性), (維生素A 、D、E、K)。2(.多羥基不飽和內酯衍生物), (芳香族),( 雜環族), (微生物發酵) , (化學合成), 9(天然提取)3.(維生素C), (抗氧化,促進膠原蛋白合成和黏多糖合成),(2 ), (酸轉化),(堿轉化)4.(發酵),(提取),(轉化),5.(二級發酵),(先沉淀再氧化進行分離純化),(細菌),(真菌),(霉菌)6.維生素的生產方式(微生物發酵)、(化學合成)、(天然提取)7.(抗壞血酸)可參與體內氧化還原反應,是體內一種重要的抗氧化劑,在保護(DNA)、(蛋白質)和(膜結構免道損傷)
42、起著重要的作用,可使(三價鐵)還原為(二價鐵)促進鐵的吸收。8.影響維生素c穩定性的因素有很多,舉例說明(溫度、Ph、酶、金屬離子)9.兩步發酵生產維生素C包括(發酵)、(提取)、(轉化)10.維生素的種類包括脂溶性和水溶性,脂溶性包括(維生素A、D、E)水溶性包括(B族維生素)(尼克酸)(泛酸)(葉酸)等。簡答題1.從分子水平和個體水平簡要說明維生素的生理功能?答:(1)分子水平方面-維生素在體內的作用主要是調節酶活性和代謝活性,以輔酶或輔基的形式參與反應。 (2)個體水平方面-人體內不能合成維生素,缺乏它會導致疾病的發生,出現相應的缺乏癥。2.現行的維生素c生產工藝過程有哪兩種?請指出哪一
43、種更具有優勢并作簡要分析?答:現行的維生素c生產工藝過程有:萊氏化學合成法和兩步發酵法。其中兩步發酵法更具有優勢。原因如下:(1)以生物氧化代替化學氧化簡化了生產工藝。(2)省略了丙酮化反應步驟,節省了丙酮、硫酸等大量化工原料和其防爆設備,節約了成本,有利于安全生產。(3)三廢和污染較小。(4)提高了生產能力。3.簡要說明,兩步發酵生產工藝過程中的兩步發酵?(從菌種及反應過程進行說明。)答:第一步發酵運用黑醋酸桿菌,從D山梨醇到L山梨糖只是把c2位的羥基氧化為羰基,其他集團保持不變。第二步發酵采用氧化葡萄糖酸桿菌和巨大芽孢桿菌混合培養,從L-山梨糖到2-酮基L-古龍酸將c1位羥基氧化為羧基。第
44、十四章填空題1、表達載體基本特征(自主復制性)、(不相容性)、(轉移性)、(選擇標記)、(多克隆位點)。2、在大腸桿菌中,外源基因表達產物的主要形式為(可溶性蛋白)和(不溶性蛋白)。3、基因工程菌的構建包括(目標基因的獲得)、(最佳表達載體的構建)、(工程菌構建)三個主要環節。4、基因工程技術中常用的載有(質粒)、(噬菌體)、(噬菌粒)、(黏粒)。5、克隆真核基因常用的方法是(逆轉錄法)和(化學合成法)。選擇題 1、真核基因的獲得可采取下列哪種方法(D)A、直接從生物體中提取后再化學合成B、直接從生物體提取C、直接從生物體中提取后在進行PCR擴增D、逆轉錄法2.大腸桿菌表達真核基因時對其蛋白質
45、產物(D) A、能進行翻譯后修飾,故對蛋白質產物能進行糖基化 B、能進行翻譯后修飾,故對蛋白質產物不能進行糖基化 C、不能進行翻譯后修飾,故對蛋白質產物能進行糖基化 D、不能進行翻譯后修飾,故對蛋白質產物不能進行糖基化3、基因工程大腸桿菌與宿主菌的培養基的本質區別在于,前者必須加入(A) A、抗生素 B、氨基酸 C、前體 D、激素4、目前生產生用于表達外源基因的動物細胞,均為(A)A、傳代細胞系 B、原代細胞 C、二倍體細胞系 D、雜交瘤細胞5、基因工程的單元操作順序是(B)A、酶切、轉化、連接、篩選B、酶切、連接、轉化、篩選D、 連接、轉化、酶切、篩選D、酶切、連接、篩選、轉化簡答題1、大腸
46、桿菌表達系統與酵母表達系統的異同? 相同點:易操作,繁殖快、成本低、易于工業化生產、 不同點:1、大腸桿菌表達系統轉錄信號與酵母系統不同,與核糖體的結合位點不同 2、大腸桿菌中表達不存在翻譯后修飾作用,故對蛋白質產物不能糖基化;酵母 菌具有原核細菌無法比擬的真核蛋白翻譯后加工系統。 3、大腸桿菌表達系統由于分泌能力不足,真核蛋白質常形成不溶性的包涵體,表達產物必須在下游處理過程中經過變性和復性處理才能恢復其生物活性;酵母菌具有真核生物表達系統基因表達調控和蛋白質修飾功能,避免了產物活性低、包涵體變性復性等問題。第十五章填空題1.干擾素是機體免疫細胞產生的一類(結構類似)、(功能接近)的生物調節
47、蛋白。2.干擾素的生物活性包括(廣譜抗病毒活性)、(直接抗腫瘤活性)和(免疫調節活性)。3.在正常情況下,免疫產生(保護性排斥性)反應,對機體有利;在異常情況下,免疫也會產生()反應,對機體造成損傷。4.干擾素表達載體的構建過程中,將表達載體導入(假單胞桿菌干擾素)中,篩選得到(工程菌)。簡答題1、 簡述干擾素及其功能。抗體受到病毒感染時,免疫細胞產生的一組結構類似、功能接近的細胞因子稱為干擾素;用于干擾病毒在細胞內增殖。2、 簡述在原核工程菌中生產重組干擾素包括哪些環節。工程菌構建;發酵培養;包涵體;復性;重組人干擾素。3、 簡述重組人干擾素-2b的分離工藝過程。(1)、菌體裂解。一定pH條
48、件下,表面活性劑或強離子劑可使細胞裂解;(2)、預處理。加絮凝劑進行絮凝,加凝聚劑進行沉淀,離心;(3)、初級分離。鹽析、離心、收集沉淀保存。第十六章選擇題1、胰島素是有那個細胞團合成分泌的(A)A、胰島B細胞B、胰島A細胞C、腎上腺細胞C、甲狀腺分泌細胞2、胰島素的作用(B)A、促進脂肪的消耗B、促進葡萄糖轉化為其他物質C、促進其他物質向葡萄糖轉化D、促進非糖物質的消耗3、下列哪一項不是國內的重組人胰島素的提取工藝共同點(D)A、粗制提取B、色譜分離C、重結晶D、凝膠電泳4、下列哪一項不是的重組人胰島素的質量控制工藝(B)A、特異性鑒別B、紙層析法鑒定C、效價測定D、人胰島素原鑒定5、下列哪
49、一項不是重組人生長激素的臨床引用(B)A、治療侏儒癥兒童及生長激素缺乏癥B、促使葡萄糖向糖元的轉化C、調節心腎功能D、用于延緩衰老改善運動能力填空題1、胰島素原是由N端 、C端A鏈和中間連接的C肽組成,C肽有助于形成構象和 。2、胰島素原要經過型內蛋白酶切除 和B鏈的連接,型內蛋白酶切除C肽與 的連接,生成成熟的胰島素分泌到細胞外,進入 3、A鏈具有 氨基酸殘基,B鏈有30 個按激素那殘基, 對二硫鍵,2對位鏈間二硫鍵。4、目前臨床上應用的重組人胰島素制劑主要有三種類型 、 和 5、前肽序列是 的前序列,其作用是引導新合成的微小胰島素原通過正確的分途徑,即從細胞 到 ,隨后分泌到胞質外。6、胰
50、島素制劑中可加入 或 作為防腐劑,應對其進行限量檢查,限度為80%110%。7、生長激素是由動物腦 前葉外側的特異分泌細胞分泌的一種促進生長的蛋白質激素。8、通常所說的人生長激素一般都是指 生長激素,由 個氨基酸殘基組成, 無(填“有”或“無”)糖基化。 菌種 種子培養9、下列流程是大腸桿菌發酵工藝流程圖,填補空缺過程:生長激素S-100色譜DWAE色譜Phenyl色譜G-25色譜離心填空題答案1.B鏈二硫鍵 2.血液循環A鏈C肽3.2134.中效速效長效5.酵母交配因子內質網高爾基體6.苯酚或間甲酚7.垂體8.22ku1919.發酵培養粗提簡答題1.簡述重組人生長激素工藝流程:基因工程大腸桿
51、菌的培養基因工程大腸桿菌的發酵工藝重組人生長激素的分離工藝重組人生長激素的純化工藝重組人生長激素制劑的質量控制。2.簡述重組DNA技術上產的重組人胰島素在臨床運用上的優點 供應充分 消除了動物胰島組織中存在病原體而導致疾病意外傳播的危險。 經濟適用3.簡述用酵母表達人胰島素的工藝優缺點。優點:表達產物二硫鍵的結構與位置正確,不需要復性加工處理;缺點:表達量低,發酵時間長。4.簡述重組人生長激素生產流程與傳統的包含體技術相比的優點。1使生長激素以天然的結構直接分泌到菌體之外的培養液中,避免了重折疊;2收率高3受菌體蛋白污染少純度高 4更安全問答題1、常用的重組人胰島素制劑有哪些?分別舉例。 經動
52、物胰腺提取或純:豬、牛胰島素粗體后經凝膠過濾處理后的胰島素,再用離子交換色譜進行純化,以進一步降低胰島素原的含量并去除部分雜質。 半合成人胰島素:以豬胰島素為原料進行修飾得到的人胰島素。 生物合成人胰島素:用重組DNA技術生產的人胰島素,又稱重組人胰島素,為中性可溶性單組分人胰島素。 胰島素類似物:通過重組DNA技術,對人胰島素氨基酸序列進行修飾生成的可模擬正常胰島素分泌和作用的一類物質。2、簡述胰島素和胰高血糖素的作用機制。胰島素是降血糖,胰高血糖素是升血糖。其中降血糖原理是當血糖高的的時候,通過胰島B細胞分泌胰島素,來促進細胞對葡萄糖的吸收和分解。和葡萄糖的向糖原和非糖物質轉化。胰高血糖素
53、則是當血糖低的時候,通過胰島A細胞分泌增加體內蛋白質糖原等非糖物質轉化分解為葡萄糖,進而增加血糖。他們是拮抗作用。其整個過程是神經體液調解。血糖高了或者低了,都能反饋給垂體和下丘腦。就是反饋調節了。填空題1、在動物細胞培養中,_和_是提供能量和合成代謝的前體,且在不同培養條件下,兩者代謝的能量以_和_的形式提供。2、根據細胞的傳代次數和壽命,細胞系可分為_、和_或_。3、動物細胞的表達載體:_、_。4、動物細胞培養基的種類有_、_、_。5、氨基酸可通過_或_途徑轉變為糖或脂肪酸,間接提供能量。6、根據細胞的生長特性和對基質的依賴性,可將細胞分為_細胞和_細胞。7、目前用于制藥的動物細胞有4類,
54、分別是_、_、_、_。8、為了防止微生物污染,可在培養基中添加_,以避免輕度污染。對于支原體污染,常用_、_處理培養物。選擇題1、下列哪項描述不屬于永久細胞系的特點()A、細胞形狀規則B、沒有接觸抑制現象C、有異常染色體D、可以連續培養2、下列哪種細胞的G0期相對較短()A、淋巴細胞B、腺細胞C、肝細胞D、結締組織細胞3、下列哪項不屬于昆蟲表達系統的優點()A、安全易飼養B、高量表達C、高效表達D、外源基因的表達在轉染的晚期4、下列哪項屬于正常血漿的滲透壓:_。5、在雜交瘤培養中,血清的加入對培養非常有效,一般為_的胎牛血清。A. 5%10%B.8%15%C.10%20%D.12%20%6下列
55、哪一個不屬于兼性細胞()細胞細胞淋巴細胞細胞7理想的微載體具備的性能()質地較硬,耐高溫,透明性,密度較低質地柔軟,不耐高溫,透明性,密度較高質地柔軟,耐高溫,透明性,密度較低質地柔軟,耐高溫,不透明性,密度較低8.下面哪種方法不能用于對凋亡細胞的檢測()A.透射電鏡觀察B.HE染色C.臺盼藍染色D.熒光顯微鏡觀察9.以下哪種不能用于測定細胞活性()A.苯胺黑B.結晶紫C.醋酸洋紅D.臺盼藍10.卡那霉素的作用對象是()A.真菌B.支原體C.G+、G-細菌D.G-細菌簡答題1、簡述動物細胞培養基的主要成分及其作用。2、動物細胞的大規模培養的技術包括哪些?并簡要說明。3、細胞培養到一定時間為何要
56、進行傳代?能一直傳代下去嗎?闡述其機理。答案:一、 填空題:1、葡萄糖、谷氨酰胺、ATP、NADPH2、有限細胞系、無限細胞系、連續細胞系3、病毒載體、質粒載體4、天然培養基合成培養基無血清培養基5、生糖生酮6、貼壁依賴性、非貼壁依賴性7、原代細胞系、二倍體細胞系、異倍體細胞系、融合或重組的工程細胞系8、抗生素卡那霉素金霉素二、單選題:15 CCDCC 610 CCCCC三、簡答題:1、動物細胞培養基的成分主要有糖類、氨基酸、維生素與無機鹽、激素及附加成分。作用:糖類提供細胞生長的碳源和能源。分解后釋放出能量ATP。氨基酸可通過生糖或生酮途徑轉變為糖或脂肪酸,間接提供能量。維生素既不是細胞的物質基礎,也不是能量物質,對代謝和生長起調節和控制作用。無機鹽是細胞代謝所需酶的輔基,同時保持細胞的滲透壓和緩沖PH的變化。激素對細胞的生長有刺激作用。
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