1、1第四章第四章 遺傳的分子基礎(chǔ)遺傳的分子基礎(chǔ)4.24.2 DNADNA的提取和鑒定的提取和鑒定21. 1. 了解了解DNADNA的物理化學(xué)性質(zhì)，理解的物理化學(xué)性質(zhì)，理解DNADNA粗粗提取以及提取以及DNADNA鑒定的原理。鑒定的原理。2. 2. 嘗試對(duì)植物或動(dòng)物組織中的嘗試對(duì)植物或動(dòng)物組織中的DNADNA進(jìn)行進(jìn)行粗提取及鑒定。粗提取及鑒定。3. 3. 培養(yǎng)實(shí)事求是的科學(xué)態(tài)度和探索精神。培養(yǎng)實(shí)事求是的科學(xué)態(tài)度和探索精神。31.DNA1.DNA粗提取的選材，思路和鑒定原理粗提取的選材，思路和鑒定原理 是什么？是什么？2.DNA2.DNA與蛋白質(zhì)的性質(zhì)差異如何？與蛋白質(zhì)的性質(zhì)差異如何？3.3.破碎

2、動(dòng)物細(xì)胞和植物細(xì)胞的方法有何破碎動(dòng)物細(xì)胞和植物細(xì)胞的方法有何 不同？不同？4.4.根據(jù)根據(jù)DNADNA在在NaClNaCl溶液中的溶解度不同如溶液中的溶解度不同如 何控制其溶解和析出？何控制其溶解和析出？5.DNA5.DNA粗提取和鑒定的步驟是什么？粗提取和鑒定的步驟是什么？ 認(rèn)真閱讀教學(xué)案認(rèn)真閱讀教學(xué)案, ,思考以下問(wèn)題：思考以下問(wèn)題： 4 NaCl 1 1DNA和蛋白質(zhì)等其他成分在不同濃度的_溶液中溶解度不同，利用這一特點(diǎn)，選擇適當(dāng)?shù)柠}濃度就能使DNADNA充分溶解，而使雜質(zhì)沉淀，或者相反，以達(dá)到分離目的。此外，DNA不溶于_溶液，但是細(xì)胞中的某些蛋白質(zhì)則溶于_。利用這一原理，可以將DNA

3、與蛋白質(zhì)進(jìn)一步的分離。2 2蛋白酶能水解_，但是對(duì)_沒(méi)有影響。大多數(shù)蛋白質(zhì)不能忍受6080oC的高溫，而DNA在_才會(huì)變性。洗滌劑能夠瓦解_，但對(duì)DNA沒(méi)有影響。3 3在_條件下，DNA遇_會(huì)被染成_色，因此二苯胺可以作為鑒定DNA的試劑。酒精酒精蛋白質(zhì)DNA80oC以上細(xì)胞膜沸水浴二苯胺藍(lán)54.24.2 DNADNA的提取和鑒定的提取和鑒定DNADNA從哪從哪 提取？提取？怎樣將怎樣將DNADNA與與細(xì)胞中的其他細(xì)胞中的其他物質(zhì)分離？物質(zhì)分離？怎樣鑒定怎樣鑒定我們提取我們提取的的DNADNA？6【實(shí)驗(yàn)原理實(shí)驗(yàn)原理】1.DNA1.DNA在在NaClNaCl溶液中的溶解度，是隨著溶液中的溶解度，

4、是隨著NaClNaCl的濃度的變化而改變的。當(dāng)?shù)臐舛鹊淖兓淖兊摹．?dāng)NaClNaCl的物質(zhì)的的物質(zhì)的量濃度為量濃度為0.14 mol0.14 molL L時(shí)時(shí),DNA,DNA的溶解度的溶解度最最低低。利用這一原理，可以使溶解在。利用這一原理，可以使溶解在NaClNaCl溶溶液中的液中的DNADNA析出析出。2.2.DNADNA不溶于不溶于酒精酒精溶液溶液，但是細(xì)胞中的某些但是細(xì)胞中的某些物質(zhì)則可以溶于酒精溶液。利用這一原理，物質(zhì)則可以溶于酒精溶液。利用這一原理，可以可以進(jìn)一步進(jìn)一步提取出含雜質(zhì)較少的提取出含雜質(zhì)較少的DNADNA。3.3.酸性條件下，酸性條件下，DNADNA遇遇二苯胺（沸水浴

5、）二苯胺（沸水浴）會(huì)會(huì)染成染成藍(lán)藍(lán)色色，因此，因此，二苯胺可二苯胺可以作為以作為鑒定鑒定DNADNA的試劑的試劑。2mol/L0.015mol/L7【實(shí)驗(yàn)材料實(shí)驗(yàn)材料】1 1、雞血細(xì)胞液（、雞血細(xì)胞液（510ml510ml）；）；2 2、體積分?jǐn)?shù)為、體積分?jǐn)?shù)為95%95%的冷酒精溶液（實(shí)驗(yàn)前置于冰箱的冷酒精溶液（實(shí)驗(yàn)前置于冰箱內(nèi)冷卻內(nèi)冷卻24h24h）；）；3 3、蒸餾水；、蒸餾水；4 4、質(zhì)量濃度為、質(zhì)量濃度為0 0g/mlg/ml的檸檬酸鈉溶液；的檸檬酸鈉溶液； （抗凝劑）（抗凝劑）5 5、物質(zhì)的量濃度分別為、物質(zhì)的量濃度分別為2mol/L2mol/L和和0 0015mol/L015mol

6、/L的的NaClNaCl溶液；溶液；6 6、二苯胺試劑。、二苯胺試劑。8【實(shí)驗(yàn)過(guò)程實(shí)驗(yàn)過(guò)程】制備雞制備雞血細(xì)胞血細(xì)胞液液過(guò)濾含有過(guò)濾含有DNADNA的的氯氯化鈉溶液化鈉溶液 提取含雜提取含雜質(zhì)較少的質(zhì)較少的DNA DNA DNADNA的的鑒定鑒定 析出含析出含DNADNA的的粘稠物粘稠物 濾取含濾取含DNADNA的黏的黏稠物稠物 再再溶解溶解DNADNA的黏的黏稠物稠物 提取雞血提取雞血細(xì)胞的核細(xì)胞的核物質(zhì)物質(zhì) 溶解濾溶解濾液中的液中的DNA DNA 9課前制備：雞血細(xì)胞液課前制備：雞血細(xì)胞液101112步驟步驟1.1314步驟步驟2.2 mol2 molL L15步驟步驟3.16步驟步驟4.

7、步驟步驟5.17步驟步驟6.步驟步驟7.1819步驟步驟8. 202122【實(shí)驗(yàn)總結(jié)實(shí)驗(yàn)總結(jié)】23 2425【思維拓展思維拓展】植物細(xì)胞需要植物細(xì)胞需要加入一定的加入一定的洗滌劑洗滌劑和和食鹽食鹽。實(shí)例：實(shí)例：提取洋蔥提取洋蔥DNADNA時(shí)，在時(shí)，在切碎的洋蔥中加入一定切碎的洋蔥中加入一定的洗滌劑和食鹽，進(jìn)行的洗滌劑和食鹽，進(jìn)行充分的攪拌和研磨，過(guò)充分的攪拌和研磨，過(guò)濾后收集研磨液濾后收集研磨液26B B1在蛋白質(zhì)和DNA的混合液中，要想得到較純的DNA，可采用的方法有( )。 向混合液中加入足量的蒸餾水 向混合液中加入DNA水解酶 向混合液中加入冷的95的酒精 向混合液中加入蛋白質(zhì)酶 A B C D272在“DNA的粗提取和鑒定”實(shí)驗(yàn)中有三次過(guò)濾：(1)過(guò)濾用蒸餾水稀釋過(guò)的雞血細(xì)胞液；(2)過(guò)濾含黏稠物的014 molL NaCI液；(3)過(guò)濾溶解有DNA的2 molL NaC溶液。以上三次過(guò)濾分別為了獲