1、12原子吸收光譜法原子吸收光譜法分子吸收光譜法分子吸收光譜法紫外紫外-可見(jiàn)吸收可見(jiàn)吸收紅外吸收紅外吸收核磁共振核磁共振（第十章）（第十章）3 吸收光譜法也叫吸收光譜法也叫吸光光度法吸光光度法或或分光光度法分光光度法。是基。是基于物質(zhì)對(duì)光的選擇性吸收而建立起來(lái)的分析方法。具于物質(zhì)對(duì)光的選擇性吸收而建立起來(lái)的分析方法。具有靈敏、準(zhǔn)確、快速及選擇性好等優(yōu)點(diǎn)。有靈敏、準(zhǔn)確、快速及選擇性好等優(yōu)點(diǎn)。含鐵量為含鐵量為0.001%的試樣的試樣, 若若1.60010-3 mol/LK2Cr2O7 溶液滴定溶液滴定, 每克試樣僅消耗約每克試樣僅消耗約0.02 mL標(biāo)準(zhǔn)溶標(biāo)準(zhǔn)溶液液, 顯然不能用滴定的方法來(lái)測(cè)定微量

2、的鐵顯然不能用滴定的方法來(lái)測(cè)定微量的鐵, 而比色分而比色分析可得到準(zhǔn)確的結(jié)果。析可得到準(zhǔn)確的結(jié)果。8.1 吸收光譜吸收光譜8.1 8.1 吸收光譜吸收光譜8.1 8.1 吸收光譜吸收光譜 物質(zhì)為什么會(huì)有顏色？物質(zhì)為什么會(huì)有顏色？ 物質(zhì)是如何發(fā)光的？物質(zhì)是如何發(fā)光的？ 為什么物質(zhì)顏色都不一樣？為什么物質(zhì)顏色都不一樣？日光譜日光譜E =h 紫外紫外 紅外紅外H2 +氫原子光譜氫原子光譜特征特征: 不連續(xù)的、線狀的不連續(xù)的、線狀的氫原子光譜實(shí)驗(yàn)氫原子光譜實(shí)驗(yàn)特征特征: 連續(xù)的連續(xù)的8.1 8.1 吸收光譜吸收光譜molkJnE/13122能級(jí)躍遷能級(jí)躍遷hE 8.1 8.1 吸收光譜吸收光譜88.1

3、.3 溶液的顏色和物質(zhì)對(duì)光的選擇性吸收溶液的顏色和物質(zhì)對(duì)光的選擇性吸收8.1 8.1 吸收光譜吸收光譜9I0ItLI0 入射光強(qiáng)度入射光強(qiáng)度It 透射光強(qiáng)度透射光強(qiáng)度L 液層厚度液層厚度(光程光程)C 溶液濃度溶液濃度朗伯定律：朗伯定律：LKIIAt10lg比耳定律：比耳定律：CKIIAt20lg朗伯朗伯-比耳定律：比耳定律：CLIIAt0lg 吸光系數(shù)吸光系數(shù)0IITt8.1 8.1 吸收光譜吸收光譜8.1.4 吸收光譜及其表示方法吸收光譜及其表示方法CT 溶液的透光率溶液的透光率A 吸光度吸光度K 比例常數(shù)比例常數(shù)10L cm 為單位為單位 C mol/L 為單位為單位 L/mol cm吸

4、光系數(shù)的單位是吸光系數(shù)的單位是L/mol cm 摩爾吸光系數(shù)摩爾吸光系數(shù)。P333習(xí)題習(xí)題4LAMC00.25/90. 1molgM/100 . 12 . 100.250 . 11058. 190. 1238.1 8.1 吸收光譜吸收光譜A = C L11關(guān)于關(guān)于 的幾點(diǎn)討論的幾點(diǎn)討論: A = CLu 是光程為是光程為1 cm, 濃度為濃度為1 mol/L時(shí)的吸光度。時(shí)的吸光度。L/mol cm u 是物質(zhì)吸光能力的量度。可估量定量方法的是物質(zhì)吸光能力的量度。可估量定量方法的靈敏度靈敏度。 105屬高屬高 靈敏度，測(cè)定的濃度范圍可達(dá)靈敏度，測(cè)定的濃度范圍可達(dá) 106 105 mol/L 。u

5、 和和L在一定條件下是定值，上式可寫(xiě)成在一定條件下是定值，上式可寫(xiě)成 AKC （8.6） 以以A為縱坐標(biāo)、為縱坐標(biāo)、C為橫坐標(biāo)作圖，得一通過(guò)原點(diǎn)的直線，為橫坐標(biāo)作圖，得一通過(guò)原點(diǎn)的直線， 叫作叫作標(biāo)準(zhǔn)曲線或工作曲線標(biāo)準(zhǔn)曲線或工作曲線。8.1.5 朗伯朗伯-比耳定律比耳定律的適用范圍的適用范圍 P282 P333 習(xí)題習(xí)題28.1 8.1 吸收光譜吸收光譜12注意：注意：q A與與C應(yīng)為直線關(guān)系，實(shí)際測(cè)定時(shí)往往并不知道吸應(yīng)為直線關(guān)系，實(shí)際測(cè)定時(shí)往往并不知道吸 光物質(zhì)的光物質(zhì)的真實(shí)濃度真實(shí)濃度，而以吸光物質(zhì)的，而以吸光物質(zhì)的總濃度總濃度代替，代替， 所以有時(shí)會(huì)出現(xiàn)偏離直線的情況。濃度大時(shí)易出現(xiàn)所以

6、有時(shí)會(huì)出現(xiàn)偏離直線的情況。濃度大時(shí)易出現(xiàn) 偏離。偏離。 AC負(fù)偏離負(fù)偏離正偏離正偏離CLIIAt0lgq 朗伯朗伯-比耳定律僅適合比耳定律僅適合單單 色光色光，而目前儀器所提供，而目前儀器所提供 的單色光是通過(guò)分光器來(lái)的單色光是通過(guò)分光器來(lái) 完成的。完成的。8.1 8.1 吸收光譜吸收光譜138.2 比色法比色法和和分光光度法分光光度法（1）目視比色法）目視比色法 P285 用用眼睛眼睛觀察溶液顏色的深淺來(lái)確定溶液中某種物觀察溶液顏色的深淺來(lái)確定溶液中某種物質(zhì)的含量。其原理：質(zhì)的含量。其原理：根據(jù)：根據(jù)：A = CL 同一物質(zhì)在相同條例下顯色時(shí)：同一物質(zhì)在相同條例下顯色時(shí)：8.2.1 比色法比

7、色法 目視比色法目視比色法 、光電比色法、光電比色法 LCLCAA樣品標(biāo)樣品標(biāo)LCLCAA樣品標(biāo)樣品標(biāo) 8. 2 8. 2 比色法和分光光度法比色法和分光光度法14 C1 C2 C3 C4 C5CX = ？?jī)?yōu)缺點(diǎn)：優(yōu)缺點(diǎn)：P286 8. 2 8. 2 比色法和分光光度法比色法和分光光度法 目視比色方法：目視比色方法： 1. 配制標(biāo)準(zhǔn)系列配制標(biāo)準(zhǔn)系列。C1 C5 （標(biāo)準(zhǔn)色階法）（標(biāo)準(zhǔn)色階法） 2. 把樣品與標(biāo)準(zhǔn)系列進(jìn)行比較把樣品與標(biāo)準(zhǔn)系列進(jìn)行比較。15（2）光電比色法光電比色法 P286ACC樣品樣品A樣品樣品 8. 2 8. 2 比色法和分光光度法比色法和分光光度法 光電比色是用儀器來(lái)測(cè)定標(biāo)準(zhǔn)

8、系列的吸光度光電比色是用儀器來(lái)測(cè)定標(biāo)準(zhǔn)系列的吸光度, 根根據(jù)據(jù)A= CL繪制標(biāo)準(zhǔn)曲線繪制標(biāo)準(zhǔn)曲線 , 然后根據(jù)被測(cè)試樣的吸光然后根據(jù)被測(cè)試樣的吸光度度, 從從標(biāo)準(zhǔn)曲線標(biāo)準(zhǔn)曲線上查找其濃度。上查找其濃度。16 C1 C2 C3 C4 C5 CxA1A2A3A4 C1 C2 C3 C4 C5AxCx 8. 2 8. 2 比色法和分光光度法比色法和分光光度法17光電比色計(jì)光電比色計(jì)的工作原理：的工作原理：(混合光混合光)(單色光單色光) I0 ItCLIIAt0lg 8. 2 8. 2 比色法和分光光度法比色法和分光光度法光源光源濾光片濾光片比色池比色池光電池光電池檢流計(jì)檢流計(jì)18優(yōu)點(diǎn)優(yōu)點(diǎn): 1.

9、用用光電管或光電池光電管或光電池來(lái)代替人的眼睛來(lái)代替人的眼睛, 消除了人的主觀消除了人的主觀誤差誤差, 提高了分析的準(zhǔn)確度。提高了分析的準(zhǔn)確度。2. 標(biāo)準(zhǔn)曲線可長(zhǎng)期保存，目視比色的標(biāo)準(zhǔn)系列不易長(zhǎng)標(biāo)準(zhǔn)曲線可長(zhǎng)期保存，目視比色的標(biāo)準(zhǔn)系列不易長(zhǎng)期保存。期保存。缺點(diǎn)缺點(diǎn): 只限于只限于可見(jiàn)光區(qū)可見(jiàn)光區(qū)。1. 用用濾光片濾光片將復(fù)合光變成單色光，其純度不夠。將復(fù)合光變成單色光，其純度不夠。 8. 2 8. 2 比色法和分光光度法比色法和分光光度法198.2.2 分光光度法分光光度法 P287 分光光度法與光電比色法的基本原理相同分光光度法與光電比色法的基本原理相同 , 所不所不同的是光電比色是用同的是光

10、電比色是用濾光片濾光片獲得單色光獲得單色光 , 而分光光度而分光光度法采用法采用棱鏡或光柵棱鏡或光柵等等分光器分光器獲得單色光獲得單色光, 分光器比濾分光器比濾光片獲得的單色光純度要高的多光片獲得的單色光純度要高的多 , 所以結(jié)果更準(zhǔn)確。所以結(jié)果更準(zhǔn)確。另外，分光光度法可擴(kuò)展到另外，分光光度法可擴(kuò)展到紫外和紅外光區(qū)紫外和紅外光區(qū)的測(cè)定。的測(cè)定。 8. 2 8. 2 比色法和分光光度法比色法和分光光度法20 光源光源 單色器單色器 比色池比色池 光電管光電管 檢流計(jì)檢流計(jì)(混合光混合光)(單色光單色光) I0 It 光源光源 濾光片濾光片 比色池比色池 光電池光電池 檢流計(jì)檢流計(jì)(混合光混合光)

11、(單色光單色光) I0 It 光源光源 濾光片濾光片 比色池比色池 光電池光電池 檢流計(jì)檢流計(jì)(混合光混合光)(單色光單色光) I0 ItCLIIAt0lg光電比色計(jì)光電比色計(jì)分光光度計(jì)分光光度計(jì)21思考題：思考題：1、分光光度計(jì)的主要部件及作用。、分光光度計(jì)的主要部件及作用。P2902、光電比色計(jì)和分光光度計(jì)的主要區(qū)別。、光電比色計(jì)和分光光度計(jì)的主要區(qū)別。3、摩爾吸光系數(shù)、摩爾吸光系數(shù)是指光程為是指光程為 _，溶液的濃度，溶液的濃度 為為 _時(shí)的吸光度，其值的大小反映了溶液時(shí)的吸光度，其值的大小反映了溶液 _ 。 8. 2 8. 2 比色法和分光光度法比色法和分光光度法1cm1mol/L吸光

12、能力的的強(qiáng)弱吸光能力的的強(qiáng)弱228.3 顯色反應(yīng)及其影響因素顯色反應(yīng)及其影響因素8.3.1 顯色反應(yīng)的選擇顯色反應(yīng)的選擇 P292(3) 生成的有色物質(zhì)組成恒定生成的有色物質(zhì)組成恒定, 化學(xué)性質(zhì)穩(wěn)定。化學(xué)性質(zhì)穩(wěn)定。(4) 顯色劑在測(cè)定波長(zhǎng)處無(wú)明顯吸收。顯色劑在測(cè)定波長(zhǎng)處無(wú)明顯吸收。(1) 選擇性好選擇性好: 不與干擾離子反應(yīng)。不與干擾離子反應(yīng)。M + R = MR (待測(cè)組分待測(cè)組分) (顯色劑顯色劑) (有色絡(luò)合物有色絡(luò)合物) 8.3 8.3 顯色反應(yīng)及其影響因素顯色反應(yīng)及其影響因素(2) 靈敏度高靈敏度高 A = C L 若在若在 104 - 105 可測(cè)萬(wàn)分之一的含量。可測(cè)萬(wàn)分之一的含量

13、。238.3.2 顯色劑顯色劑 P295 無(wú)機(jī)顯色劑多為無(wú)機(jī)顯色劑多為單齒配位體單齒配位體，形成的配合物組成，形成的配合物組成不恒定。不恒定。有機(jī)顯色劑有機(jī)顯色劑大多為多齒配位體，與金屬離子大多為多齒配位體，與金屬離子形成穩(wěn)定的螯合物，所以實(shí)際測(cè)定中常用有機(jī)顯色劑。形成穩(wěn)定的螯合物，所以實(shí)際測(cè)定中常用有機(jī)顯色劑。 8.3 8.3 顯色反應(yīng)及其影響因素顯色反應(yīng)及其影響因素248.3.4 影響顯色反應(yīng)的因素影響顯色反應(yīng)的因素P298 8.3 8.3 顯色反應(yīng)及其影響因素顯色反應(yīng)及其影響因素u 顯色劑的用量顯色劑的用量u 酸度酸度u 溫度溫度u 時(shí)間時(shí)間u 干擾的消除。干擾的消除。25（1）顯色劑的

14、用量）顯色劑的用量: M + R = MR (待測(cè)組分待測(cè)組分) (顯色劑顯色劑) (有色絡(luò)合物有色絡(luò)合物) 固定固定M的濃度，改變的濃度，改變R的濃度的濃度CR，測(cè)吸光度，測(cè)吸光度A 。即：作繪制即：作繪制 A CR 曲線曲線，見(jiàn)圖，見(jiàn)圖8.13，一般可有三種，一般可有三種情況：情況： 8.3 8.3 顯色反應(yīng)及其影響因素顯色反應(yīng)及其影響因素26ACR a bACR 8.3 8.3 顯色反應(yīng)及其影響因素顯色反應(yīng)及其影響因素ACRa bP441 實(shí)驗(yàn)實(shí)驗(yàn)1427(2) H+濃度的影響濃度的影響 8.3 8.3 顯色反應(yīng)及其影響因素顯色反應(yīng)及其影響因素為什么要控制溶液的酸度？為什么要控制溶液的酸

15、度？ 吡啶偶氮間苯二酚與金屬形成紅色絡(luò)合物吡啶偶氮間苯二酚與金屬形成紅色絡(luò)合物, 所以反所以反應(yīng)條件應(yīng)控制在應(yīng)條件應(yīng)控制在酸性或弱堿性下酸性或弱堿性下進(jìn)行測(cè)定。進(jìn)行測(cè)定。 大多數(shù)顯色劑是有機(jī)弱酸，酸度決定其電離平衡：大多數(shù)顯色劑是有機(jī)弱酸，酸度決定其電離平衡：Mo5+ + 5HSCN = Mo(SCN)5 + 5H+橙紅橙紅 H+對(duì)顯色劑本身的顏色有影響對(duì)顯色劑本身的顏色有影響(吡啶偶氮間苯二酚吡啶偶氮間苯二酚)H2R = H+ + HR- = H+ + R-黃色黃色pH=6.9橙色橙色pH=12.4紅色紅色28pHAOab 此外酸度對(duì)此外酸度對(duì)被測(cè)離子是否發(fā)生水解被測(cè)離子是否發(fā)生水解也有影響

16、，所也有影響，所以測(cè)定時(shí)以測(cè)定時(shí)H+濃度不能太小。濃度不能太小。酸度的影響可通過(guò)繪制酸度的影響可通過(guò)繪制A-pH曲線來(lái)觀察曲線來(lái)觀察: P438 實(shí)驗(yàn)實(shí)驗(yàn) 8.3 8.3 顯色反應(yīng)及其影響因素顯色反應(yīng)及其影響因素（3）顯色溫度）顯色溫度可通過(guò)實(shí)驗(yàn)找出各自適宜的溫度范圍，最好選擇室溫可通過(guò)實(shí)驗(yàn)找出各自適宜的溫度范圍，最好選擇室溫29（4）顯色時(shí)間）顯色時(shí)間 顯色時(shí)間影響顯色反應(yīng)，通常有以下四種情況：顯色時(shí)間影響顯色反應(yīng)，通常有以下四種情況：AAATTATT 8.3 8.3 顯色反應(yīng)及其影響因素顯色反應(yīng)及其影響因素30（5）溶劑溶劑 P301 有些配合物在不同的溶劑中穩(wěn)定性不一樣例：有些配合物在不

17、同的溶劑中穩(wěn)定性不一樣例： Fe(SCN)2+在水溶液中在水溶液中l(wèi)gK穩(wěn)穩(wěn) = 2.30 在在90%乙醇中乙醇中l(wèi)gK穩(wěn)穩(wěn) = 4.70（6）溶液中）溶液中共存離子共存離子的影響的影響 P301 8.3 8.3 顯色反應(yīng)及其影響因素顯色反應(yīng)及其影響因素 共存離子如本身有顏色或與顯色劑有顯色反應(yīng)，共存離子如本身有顏色或與顯色劑有顯色反應(yīng)，都將干擾測(cè)定。一般可選用絡(luò)合、氧化還原、控制酸都將干擾測(cè)定。一般可選用絡(luò)合、氧化還原、控制酸度、沉淀分離、萃取分離、選擇適宜的波長(zhǎng)等方法消度、沉淀分離、萃取分離、選擇適宜的波長(zhǎng)等方法消除干擾。除干擾。31（7）入射光波長(zhǎng)的選擇）入射光波長(zhǎng)的選擇 8.3 8.3

18、 顯色反應(yīng)及其影響因素顯色反應(yīng)及其影響因素 光源光源 單色器單色器 比色池比色池 光電管光電管 檢流計(jì)檢流計(jì)(混合光混合光)(單色光單色光) I0 It如何選擇入射光波長(zhǎng)？如何選擇入射光波長(zhǎng)？32 將可見(jiàn)光區(qū)將可見(jiàn)光區(qū)不同不同波長(zhǎng)的光透過(guò)某一固定濃度固定波長(zhǎng)的光透過(guò)某一固定濃度固定液層厚度的有色溶液液層厚度的有色溶液, 而后測(cè)其吸光度，以而后測(cè)其吸光度，以波長(zhǎng)波長(zhǎng)()為為橫坐標(biāo)，橫坐標(biāo)，吸光度吸光度(A)為縱坐標(biāo)作圖。從圖中可找出為縱坐標(biāo)作圖。從圖中可找出最最大吸收波長(zhǎng)大吸收波長(zhǎng)。 8.3 8.3 顯色反應(yīng)及其影響因素顯色反應(yīng)及其影響因素吸收曲線吸收曲線的繪制的繪制3300.040.080.1

19、20.16450500550600650A吸收曲線吸收曲線C1C2C1和和C2為同一物質(zhì)不同濃度為同一物質(zhì)不同濃度 8.3 8.3 顯色反應(yīng)及其影響因素顯色反應(yīng)及其影響因素34實(shí)驗(yàn)實(shí)驗(yàn)13 吸收曲線的繪制吸收曲線的繪制 P438實(shí)驗(yàn)步驟實(shí)驗(yàn)步驟: P4391、為什么加入為什么加入鹽酸羥胺鹽酸羥胺、鄰二氮菲鄰二氮菲、緩沖溶液緩沖溶液？ 8.3 8.3 顯色反應(yīng)及其影響因素顯色反應(yīng)及其影響因素352、測(cè)吸光度：、測(cè)吸光度： 在在420 560 nm 范圍內(nèi)找出最大吸收波長(zhǎng)，范圍內(nèi)找出最大吸收波長(zhǎng)，每換一每換一次波長(zhǎng)都要調(diào)零點(diǎn)次波長(zhǎng)都要調(diào)零點(diǎn)。722S 分光光度計(jì)分光光度計(jì)波長(zhǎng)范圍波長(zhǎng)范圍: 300

20、 nm1000 nm 8.3 8.3 顯色反應(yīng)及其影響因素顯色反應(yīng)及其影響因素363、作圖：、作圖：A0.1000.2000.3000.400400600C吸收曲線吸收曲線 8.3 8.3 顯色反應(yīng)及其影響因素顯色反應(yīng)及其影響因素37（8） 參比溶液的選擇（外加）參比溶液的選擇（外加）原則原則: 光束通過(guò)比色皿時(shí)由于發(fā)生反射、吸收和透射及溶劑、光束通過(guò)比色皿時(shí)由于發(fā)生反射、吸收和透射及溶劑、試劑對(duì)光的吸收都會(huì)使透光強(qiáng)度減弱，為了使光強(qiáng)度的減弱試劑對(duì)光的吸收都會(huì)使透光強(qiáng)度減弱，為了使光強(qiáng)度的減弱只與被測(cè)物質(zhì)的濃度有關(guān)，必須對(duì)上述影響進(jìn)行校正，即用只與被測(cè)物質(zhì)的濃度有關(guān)，必須對(duì)上述影響進(jìn)行校正，即

21、用參比溶液校正，參比溶液校正，A參比參比= 0 8.3 8.3 顯色反應(yīng)及其影響因素顯色反應(yīng)及其影響因素 A = CL根據(jù)根據(jù)CMRA38q 如果僅是被測(cè)物質(zhì)與顯色劑的反應(yīng)有顏色，如果僅是被測(cè)物質(zhì)與顯色劑的反應(yīng)有顏色， 待測(cè)樣品和顯色劑均無(wú)色，可用蒸餾水作待測(cè)樣品和顯色劑均無(wú)色，可用蒸餾水作 參比溶液。參比溶液。q 如果顯色劑或其它試劑略有顏色，應(yīng)用顯色劑和如果顯色劑或其它試劑略有顏色，應(yīng)用顯色劑和 其它試劑其它試劑(不加入被測(cè)樣品不加入被測(cè)樣品)作參比溶液。作參比溶液。M + R = MR (待測(cè)組分待測(cè)組分) (顯色劑顯色劑) (有色絡(luò)合物有色絡(luò)合物)CMRA 8.3 8.3 顯色反應(yīng)及其

22、影響因素顯色反應(yīng)及其影響因素39q 如果顯色劑無(wú)色，而被測(cè)樣品中存在其它有色離如果顯色劑無(wú)色，而被測(cè)樣品中存在其它有色離 子，但不與顯色劑反應(yīng)，可用被測(cè)樣品作參比。子，但不與顯色劑反應(yīng)，可用被測(cè)樣品作參比。q 如果顯色劑和被測(cè)樣品均有顏色，則采取退色參如果顯色劑和被測(cè)樣品均有顏色，則采取退色參 比，加入掩蔽劑，以掩蔽被測(cè)組分，使它不再與比，加入掩蔽劑，以掩蔽被測(cè)組分，使它不再與 顯色劑作用，再按測(cè)定程序加入其它試劑作為參顯色劑作用，再按測(cè)定程序加入其它試劑作為參 比溶液。比溶液。CMRA原則：必須使吸原則：必須使吸光度真正反映待光度真正反映待測(cè)物質(zhì)的濃度。測(cè)物質(zhì)的濃度。使標(biāo)準(zhǔn)曲線過(guò)原使標(biāo)準(zhǔn)曲線

23、過(guò)原點(diǎn)。點(diǎn)。 8.3 8.3 顯色反應(yīng)及其影響因素顯色反應(yīng)及其影響因素40（9） 吸光度讀數(shù)范圍的選擇吸光度讀數(shù)范圍的選擇 （外加）（外加）吸光度吸光度A透光率透光率T%00.10.20.30.40.50.60.81.01.510090 80 70 60 50透光率透光率T% 50 40透光率透光率T% 30 20 10 0不同不同T(或或A) 時(shí)的濃度相對(duì)誤差時(shí)的濃度相對(duì)誤差透光度透光度 T%吸光度吸光度A濃度相對(duì)濃度相對(duì) 誤差誤差 90 80 70 60 50 0.046 0.097 0.155 0.222 0.301()5.3 2.8 2.0 1.63 1.44透光度透光度 T% 吸光度

24、吸光度A濃度相對(duì)濃度相對(duì) 誤差誤差 40 30 20 10 0.399 0.523 0.699 1.000 1.36 1.38 1.55 2.17 A = CL 8.3 8.3 顯色反應(yīng)及其影響因素顯色反應(yīng)及其影響因素418.4 吸收光譜法定量的基本方法吸收光譜法定量的基本方法8.4.1 絕對(duì)法絕對(duì)法根據(jù)根據(jù)LAC缺點(diǎn)：缺點(diǎn)：無(wú)法消除無(wú)法消除A有時(shí)偏離朗伯有時(shí)偏離朗伯比爾定律。比爾定律。AC負(fù)偏離負(fù)偏離正偏離正偏離 A = 428.4.2 標(biāo)準(zhǔn)對(duì)照法標(biāo)準(zhǔn)對(duì)照法在測(cè)定樣品的同時(shí)測(cè)定已知濃度的標(biāo)準(zhǔn)樣品的在測(cè)定樣品的同時(shí)測(cè)定已知濃度的標(biāo)準(zhǔn)樣品的ALCLCAA標(biāo)樣樣品標(biāo)樣樣品標(biāo)樣標(biāo)樣樣品樣品CAAC缺

25、點(diǎn)：缺點(diǎn)：僅一份標(biāo)樣其可信程度不高，也無(wú)法消除僅一份標(biāo)樣其可信程度不高，也無(wú)法消除A 有時(shí)偏離朗伯有時(shí)偏離朗伯比爾定律。比爾定律。標(biāo)樣標(biāo)樣樣品樣品438.4.4 標(biāo)準(zhǔn)標(biāo)準(zhǔn)(工作工作)曲線法曲線法 P303 配制一配制一系列標(biāo)準(zhǔn)溶液系列標(biāo)準(zhǔn)溶液分別測(cè)其吸光度，其吸光度分別測(cè)其吸光度，其吸光度應(yīng)在要求的范圍內(nèi)，以標(biāo)準(zhǔn)溶液的濃度為橫坐標(biāo)，標(biāo)應(yīng)在要求的范圍內(nèi)，以標(biāo)準(zhǔn)溶液的濃度為橫坐標(biāo)，標(biāo)準(zhǔn)溶液對(duì)應(yīng)的吸光度為縱坐標(biāo)，繪制準(zhǔn)溶液對(duì)應(yīng)的吸光度為縱坐標(biāo)，繪制標(biāo)準(zhǔn)曲線標(biāo)準(zhǔn)曲線。注意。注意標(biāo)準(zhǔn)溶液濃度的單位。標(biāo)準(zhǔn)溶液濃度的單位。優(yōu)點(diǎn)優(yōu)點(diǎn): 1、可彌補(bǔ)標(biāo)準(zhǔn)對(duì)照法的不足、可彌補(bǔ)標(biāo)準(zhǔn)對(duì)照法的不足 2、曲線可長(zhǎng)期限保存。

26、、曲線可長(zhǎng)期限保存。44 C1 C2 C3 C4 C5 CxA1A2A3A4 C1 C2 C3 C4 C5 （g）AxCx水樣VCLmgFex)/(45 8.4 8.4 吸收光譜法定量的基本方法吸收光譜法定量的基本方法實(shí)驗(yàn)實(shí)驗(yàn)14：鄰二氮菲鄰二氮菲(phen)吸收光譜法測(cè)定水中鐵吸收光譜法測(cè)定水中鐵 P435原理：原理： 232)(3phenFephenFe橙紅色橙紅色 實(shí)驗(yàn)步驟實(shí)驗(yàn)步驟:u 吸收曲線的繪制吸收曲線的繪制u 實(shí)驗(yàn)條件的確定實(shí)驗(yàn)條件的確定確定最大吸收波長(zhǎng)確定最大吸收波長(zhǎng)u 標(biāo)準(zhǔn)曲線的繪制標(biāo)準(zhǔn)曲線的繪制u 水樣的測(cè)定水樣的測(cè)定注意空白實(shí)驗(yàn)注意空白實(shí)驗(yàn)46 編號(hào)編號(hào) 1 2 3 4

27、5 6 78910 Fe2+(ml)10.0g/ml 0.000.501.00 2.503.505.007.00Fe含量含量(g) 0.0 5.0 10.025.035.050.070.0吸光度值吸光度值 0.0 8.4 8.4 吸收光譜法定量的基本方法吸收光譜法定量的基本方法V水樣V水樣V水樣AFe含量含量(g) ? ? ?47水樣VCLmgFex)/(CxA1A2A3A4 C1 C2 C3 C4 C5AxCxFe含量含量(g) 8.4 8.4 吸收光譜法定量的基本方法吸收光譜法定量的基本方法48A1A2A3A4 C1 C2 C3 C4 C5AxCxFe濃度濃度(mg/L)水樣VCLmgFe

28、x00.50)/(Cx 8.4 8.4 吸收光譜法定量的基本方法吸收光譜法定量的基本方法49苯酚含量苯酚含量(g)AP334 習(xí)題習(xí)題91.002.003.004.005.006.000.1000.2000.3000.400 8.4 8.4 吸收光譜法定量的基本方法吸收光譜法定量的基本方法苯酚含量苯酚含量0636. 000.5018. 3)/(Lmg50注意事項(xiàng)注意事項(xiàng) P434比色皿的校正比色皿的校正 8.4 8.4 吸收光譜法定量的基本方法吸收光譜法定量的基本方法51思考題：思考題： 分光光度分析時(shí)怎樣確定顯色劑的用量？分光光度分析時(shí)怎樣確定顯色劑的用量？ 分光光度分析時(shí)怎樣確定分光光度分

29、析時(shí)怎樣確定酸度酸度、溫度溫度和和顯色時(shí)顯色時(shí) 間間？ 吸光度測(cè)量時(shí)怎樣確定入射光的波長(zhǎng)？吸光度測(cè)量時(shí)怎樣確定入射光的波長(zhǎng)？ 怎樣作怎樣作吸收曲線吸收曲線和和標(biāo)準(zhǔn)曲線標(biāo)準(zhǔn)曲線？它們?cè)诠舛确治鲋校克鼈冊(cè)诠舛确治鲋衅鹗裁醋饔茫科鹗裁醋饔茫?. 鄰二氮菲吸收光譜法測(cè)水中的鐵鄰二氮菲吸收光譜法測(cè)水中的鐵加入加入鹽酸羥胺鹽酸羥胺的的作用是作用是_，鄰二氮菲鄰二氮菲的作用是的作用是_。52二、天然水中氮素化合物的測(cè)定二、天然水中氮素化合物的測(cè)定水中氮化物來(lái)源有三種情況：水中氮化物來(lái)源有三種情況：測(cè)定意義測(cè)定意義:如果水中含有如果水中含有大量大量NH3, 說(shuō)明水源在不久前被說(shuō)明水源在不久前被嚴(yán)重污嚴(yán)重污染過(guò)

30、染過(guò), 如果水中如果水中氮增加氮增加的同時(shí)的同時(shí), 還有還有NO2 -氮氮和和氨氮氨氮, 說(shuō)明說(shuō)明不僅不僅曾被污染過(guò)曾被污染過(guò), 現(xiàn)在繼續(xù)被污染現(xiàn)在繼續(xù)被污染。如果水中。如果水中氮含量很高氮含量很高，而，而NH3、測(cè)不出測(cè)不出，說(shuō)明水源曾被污染過(guò)，說(shuō)明水源曾被污染過(guò)，現(xiàn)已現(xiàn)已“自自凈凈” 。沼澤水中的腐殖酸可將硝酸鹽還原為沼澤水中的腐殖酸可將硝酸鹽還原為 NO2-地下水的硝酸鹽在地下水的硝酸鹽在Fe2+的作用下的作用下 NH4+有機(jī)氮化物有機(jī)氮化物 NH3 NO3- 、NO2-(微生物微生物)若水中若水中O2充足充足53 測(cè)定方法：測(cè)定方法：(工作曲線法工作曲線法)A1A2A3A4 C1 C2

31、 C3 C4 C5AxCx 1、氨氮的測(cè)定、氨氮的測(cè)定 氨氮是指以氨氮是指以NH3和和NH4+型體存在的氮，如果水中型體存在的氮，如果水中含有大量氨氮，表明水在近期受到嚴(yán)重污染，常含有含有大量氨氮，表明水在近期受到嚴(yán)重污染，常含有大量的病原細(xì)菌，在衛(wèi)生學(xué)上是危險(xiǎn)的。大量的病原細(xì)菌，在衛(wèi)生學(xué)上是危險(xiǎn)的。實(shí)驗(yàn)實(shí)驗(yàn)17：水中氨氮的測(cè)定水中氨氮的測(cè)定(納氏比色法納氏比色法) P451 清潔水中氨氮的測(cè)定清潔水中氨氮的測(cè)定: 水樣加入顯色劑后測(cè)其吸光水樣加入顯色劑后測(cè)其吸光 度，工作曲線上查找氨氮含量。度，工作曲線上查找氨氮含量。 氨氮含量較少的工業(yè)廢水：需把氨氮含量較少的工業(yè)廢水：需把NH3 蒸餾出再進(jìn)行蒸餾出再進(jìn)行 測(cè)定。測(cè)定。55測(cè)定方法：測(cè)定方法：N-(1-萘基萘基)乙二胺乙二胺光度法測(cè)量亞硝酸鹽氮光度法測(cè)量亞硝酸鹽氮 2、亞硝酸鹽氮的測(cè)定、亞硝酸鹽氮的測(cè)定 亞硝酸鹽氮含量高說(shuō)明水中有機(jī)物