1、PCR 培訓(xùn)班考試試題一、選擇題（共 20 題，每題 2 分）1、PCF 技術(shù)擴(kuò)增 DNA 需要的條件是（A ）目的基因引物四種脫氧核苷酸 DNA 聚合酶等mRNA核糖體 A、B 、 C 、 D 、2、鎂離子在 DNA 或 RNA 體外擴(kuò)增反應(yīng)的濃度一般為（D）A、 0.3-1mmol/L B 、 0.5-1mmol/L C 、 0.3-2mmol/L D 、 0.5-2mmol/L3、多重 PCR 需要的引物對(duì)為（D）A、一對(duì)引物 B、半對(duì)引物 C、兩對(duì)引物 D、多對(duì)引物4、PCR 是在引物、模板和 4 種脫氧核糖核苷酸存在的條件下依賴于 DNA 聚合酶 的酶促合成反應(yīng)，其特異性決定因素為（

2、 B）A、模板 B、引物 C、dNTP D、鎂離子5、在 PCF 反應(yīng)中，下列哪項(xiàng)可以引起非靶序列的擴(kuò)增的擴(kuò)增（C ）A、TaqDNA 聚合酶加量過多 B、引物加量過多C、 A、 B 都可D 、緩沖液中鎂離子含量過高6 PCR 技術(shù)的發(fā)明人是（A ）A、 Mullis B 、史蒂文 . 沙夫 C 、蘭德爾 . 才木7、PCR 產(chǎn)物短期存放可在（A ）保存。A、4CB、常溫 C、-80CD、高溫8、PCRT物長期儲(chǔ)存最好置于（D ）A、 4CB 、常溫 C 、 16CD 、 -20C9、PCR 的基本反應(yīng)過程包括（A ）A、變性、退火、延伸 B、變性、延伸 C、變性、退火10、在實(shí)際工作中，基因

3、擴(kuò)增實(shí)驗(yàn)室污染類型包括 （ D ）A、擴(kuò)增產(chǎn)物的污染 B、天然基因組 DNA 的污染 C、試劑污染和標(biāo)本間交叉污染DAB、C 都可能11、PCR 技術(shù)于哪一年發(fā)明（A ）A、 1983 B 、 1971 C 、 1987 D 、 199312、Taq DNA 聚合酶酶促反應(yīng)最快最適溫度為（C ）A、 37CB 、 50-55CC 、 70-75CD 、 80-85C13、以下哪種物質(zhì)在 PCR 反應(yīng)中不需要（D ）A、Taq DNA 聚合酶 B、dNTPs C、鎂離子 D、RNAS14、PCR 僉測(cè)中，經(jīng)過 n 個(gè)循環(huán)的擴(kuò)增，拷貝數(shù)將增加（C ）A、 nB 、 2n C 、 2nD 、 n21

4、6、以下哪項(xiàng)不是臨床 PCF 實(shí)驗(yàn)室設(shè)計(jì)的一般原則（A ） A、各區(qū)合并 B、注意風(fēng)向C、因地制宜 D、方便工作17、PCF 實(shí)驗(yàn)室一般包括（D ）A、試劑準(zhǔn)備區(qū) B、標(biāo)本制備區(qū) C、擴(kuò)增區(qū)和產(chǎn)物分析區(qū) D、AB、C 都含18、PCF 技術(shù)不僅為遺傳病的診斷帶來了便利，而且改進(jìn)了檢測(cè)細(xì)菌和病毒的方 法。若要檢測(cè)一個(gè)人是否感染了艾滋病病毒，你認(rèn)為可以用 PCR 擴(kuò)增血液中的（ D）。A、白細(xì)胞 DNA B 病毒蛋白質(zhì) C、血漿抗體 D、病毒核酸19、如果反應(yīng)體系中加入模板 DNA 分子 100 個(gè)，則經(jīng)過 30 個(gè)循環(huán)后，DNA 分子 的數(shù)量將達(dá)到（ D ）個(gè)。230A、100X30 B、100

5、X30X2 C 、100X30 D 100X220、PCF 擴(kuò)增產(chǎn)物的分析方法主要有（D ）A、凝膠電泳分析法 B、點(diǎn)雜交法 C、熒光探針定量 PCF 法 D、A、B、C 都是二、判斷題（共 20 題，每題 2 分）1、 PCF 引物設(shè)計(jì)的目的是在擴(kuò)增特異性和擴(kuò)增效率間間取得平衡。（V）2、在 PCF 反應(yīng)中，dATP 在 DNAT增中可以提供能量，同時(shí)作為 DNA 合成的原料。（V）3、DNAT增過程未加解旋酶，可以通過先適當(dāng)加溫的方法破壞氫鍵， 使模板 DNA 解旋。（V）4、PCR 反應(yīng)中， 復(fù)性過程中引物與 DNA 模板鏈的結(jié)合是依靠堿基互補(bǔ)配對(duì)原則 完成。（V）5、 PCF 與細(xì)胞內(nèi)

6、 DNA 復(fù)制相比所需要酶的最適溫度較高。（V）& PCF 技術(shù)可用于基因診斷，判斷親緣關(guān)系等。（V）7、PCF 技術(shù)需在體內(nèi)進(jìn)行。（X）8、 PCF 反應(yīng)體系中的緩沖液相當(dāng)于細(xì)胞中的體液。（V）9、 核酸的復(fù)制是由 5,-3/方向進(jìn)行的。（V）10、配對(duì)的堿基總是 A 與 T 和 G 與Co （V）11、HBsAg 轉(zhuǎn)陰性后一段時(shí)間才出現(xiàn)可檢測(cè)的 HBsAb，此段間隔期稱之為“窗15、PCFS因擴(kuò)增儀最關(guān)鍵的部分是（A、溫度控制系統(tǒng) B、熒光檢測(cè)系統(tǒng)A ）C 、軟件系統(tǒng) D 、熱蓋口期”o （V）12、市面上多數(shù)試劑用淬滅基團(tuán) Q 基團(tuán)和報(bào)告基團(tuán) F 基團(tuán)來標(biāo)記熒光定量 PCF的探針

7、。（V）13、PCR 反應(yīng)體系中 Mg2+的作用是促進(jìn) Taq DNA 聚合酶活性。（V）14、 若標(biāo)本中含有蛋白變性劑（如甲醛），PH、離子強(qiáng)度、Mg2+等有較大改變都會(huì)影響 Taq 酶活性。（V）15、每個(gè)子代 DNA 分子中均保留一條親代 DNA 鏈和一條新合成的 DNA 鏈，這 種復(fù)制方式稱之為半保留復(fù)制。（V）16、發(fā)生溶血的標(biāo)本對(duì) PCR 結(jié)果沒影響。（X）17、“平臺(tái)效應(yīng)”是描述 PCR 后期循環(huán)產(chǎn)物對(duì)數(shù)累積趨于飽和。（V）18、 逆轉(zhuǎn)錄聚合酶鏈?zhǔn)椒磻?yīng)（reverse transcription-PCR , RT-PCR 就是在應(yīng) 用 PCF方法檢測(cè) RNA 病毒時(shí)，以 RNA 為模板，在逆轉(zhuǎn)錄酶的作用下形成 cDNA 鏈，然后以cDNA 為模板進(jìn)行正常的 PCR 循環(huán)擴(kuò)增。（V）19、 在定量 PCR 中，72C這一步對(duì)熒光探針的結(jié)合有影響，故去除，實(shí)際上 55C仍可充分延伸，完成擴(kuò)增復(fù)制。（V）20、PCR 可應(yīng)用于遺傳病、腫瘤及病原體檢測(cè)三大方面（V）三、簡答（共兩題，每題 10 分）1、 PCR 技術(shù)答：PCR 技術(shù)是用一對(duì)寡聚核苷酸作為引物（要點(diǎn) 1: 2 分），通過高溫變性、低 溫退火、中溫延伸（要點(diǎn) 2： 5 分）這一周期的多次循環(huán)，