1、PCR 培訓班考試試題一、選擇題（共 20 題，每題 2 分）1、PCF 技術擴增 DNA 需要的條件是（A ）目的基因引物四種脫氧核苷酸 DNA 聚合酶等mRNA核糖體 A、B 、 C 、 D 、2、鎂離子在 DNA 或 RNA 體外擴增反應的濃度一般為（D）A、 0.3-1mmol/L B 、 0.5-1mmol/L C 、 0.3-2mmol/L D 、 0.5-2mmol/L3、多重 PCR 需要的引物對為（D）A、一對引物 B、半對引物 C、兩對引物 D、多對引物4、PCR 是在引物、模板和 4 種脫氧核糖核苷酸存在的條件下依賴于 DNA 聚合酶 的酶促合成反應，其特異性決定因素為（

2、 B）A、模板 B、引物 C、dNTP D、鎂離子5、在 PCF 反應中，下列哪項可以引起非靶序列的擴增的擴增（C ）A、TaqDNA 聚合酶加量過多 B、引物加量過多C、 A、 B 都可D 、緩沖液中鎂離子含量過高6 PCR 技術的發明人是（A ）A、 Mullis B 、史蒂文 . 沙夫 C 、蘭德爾 . 才木7、PCR 產物短期存放可在（A ）保存。A、4CB、常溫 C、-80CD、高溫8、PCRT物長期儲存最好置于（D ）A、 4CB 、常溫 C 、 16CD 、 -20C9、PCR 的基本反應過程包括（A ）A、變性、退火、延伸 B、變性、延伸 C、變性、退火10、在實際工作中，基因

3、擴增實驗室污染類型包括 （ D ）A、擴增產物的污染 B、天然基因組 DNA 的污染 C、試劑污染和標本間交叉污染DAB、C 都可能11、PCR 技術于哪一年發明（A ）A、 1983 B 、 1971 C 、 1987 D 、 199312、Taq DNA 聚合酶酶促反應最快最適溫度為（C ）A、 37CB 、 50-55CC 、 70-75CD 、 80-85C13、以下哪種物質在 PCR 反應中不需要（D ）A、Taq DNA 聚合酶 B、dNTPs C、鎂離子 D、RNAS14、PCR 僉測中，經過 n 個循環的擴增，拷貝數將增加（C ）A、 nB 、 2n C 、 2nD 、 n21

4、6、以下哪項不是臨床 PCF 實驗室設計的一般原則（A ） A、各區合并 B、注意風向C、因地制宜 D、方便工作17、PCF 實驗室一般包括（D ）A、試劑準備區 B、標本制備區 C、擴增區和產物分析區 D、AB、C 都含18、PCF 技術不僅為遺傳病的診斷帶來了便利，而且改進了檢測細菌和病毒的方 法。若要檢測一個人是否感染了艾滋病病毒，你認為可以用 PCR 擴增血液中的（ D）。A、白細胞 DNA B 病毒蛋白質 C、血漿抗體 D、病毒核酸19、如果反應體系中加入模板 DNA 分子 100 個，則經過 30 個循環后，DNA 分子 的數量將達到（ D ）個。230A、100X30 B、100

5、X30X2 C 、100X30 D 100X220、PCF 擴增產物的分析方法主要有（D ）A、凝膠電泳分析法 B、點雜交法 C、熒光探針定量 PCF 法 D、A、B、C 都是二、判斷題（共 20 題，每題 2 分）1、 PCF 引物設計的目的是在擴增特異性和擴增效率間間取得平衡。（V）2、在 PCF 反應中，dATP 在 DNAT增中可以提供能量，同時作為 DNA 合成的原料。（V）3、DNAT增過程未加解旋酶，可以通過先適當加溫的方法破壞氫鍵， 使模板 DNA 解旋。（V）4、PCR 反應中， 復性過程中引物與 DNA 模板鏈的結合是依靠堿基互補配對原則 完成。（V）5、 PCF 與細胞內

6、 DNA 復制相比所需要酶的最適溫度較高。（V）& PCF 技術可用于基因診斷，判斷親緣關系等。（V）7、PCF 技術需在體內進行。（X）8、 PCF 反應體系中的緩沖液相當于細胞中的體液。（V）9、 核酸的復制是由 5,-3/方向進行的。（V）10、配對的堿基總是 A 與 T 和 G 與Co （V）11、HBsAg 轉陰性后一段時間才出現可檢測的 HBsAb，此段間隔期稱之為“窗15、PCFS因擴增儀最關鍵的部分是（A、溫度控制系統 B、熒光檢測系統A ）C 、軟件系統 D 、熱蓋口期”o （V）12、市面上多數試劑用淬滅基團 Q 基團和報告基團 F 基團來標記熒光定量 PCF的探針

7、。（V）13、PCR 反應體系中 Mg2+的作用是促進 Taq DNA 聚合酶活性。（V）14、 若標本中含有蛋白變性劑（如甲醛），PH、離子強度、Mg2+等有較大改變都會影響 Taq 酶活性。（V）15、每個子代 DNA 分子中均保留一條親代 DNA 鏈和一條新合成的 DNA 鏈，這 種復制方式稱之為半保留復制。（V）16、發生溶血的標本對 PCR 結果沒影響。（X）17、“平臺效應”是描述 PCR 后期循環產物對數累積趨于飽和。（V）18、 逆轉錄聚合酶鏈式反應（reverse transcription-PCR , RT-PCR 就是在應 用 PCF方法檢測 RNA 病毒時，以 RNA 為模板，在逆轉錄酶的作用下形成 cDNA 鏈，然后以cDNA 為模板進行正常的 PCR 循環擴增。（V）19、 在定量 PCR 中，72C這一步對熒光探針的結合有影響，故去除，實際上 55C仍可充分延伸，完成擴增復制。（V）20、PCR 可應用于遺傳病、腫瘤及病原體檢測三大方面（V）三、簡答（共兩題，每題 10 分）1、 PCR 技術答：PCR 技術是用一對寡聚核苷酸作為引物（要點 1: 2 分），通過高溫變性、低 溫退火、中溫延伸（要點 2： 5 分）這一周期的多次循環，