1、模塊模塊2-2 大孔樹脂分離荷葉生物堿大孔樹脂分離荷葉生物堿分離情景分離情景視野視野拓展拓展視野視野拓展拓展大孔樹脂概況大孔樹脂概況 大孔吸附樹脂內(nèi)部結(jié)構(gòu)很復(fù)雜。從大孔吸附樹脂內(nèi)部結(jié)構(gòu)很復(fù)雜。從掃描電子顯微鏡下可觀察到，掃描電子顯微鏡下可觀察到，樹脂樹脂內(nèi)部像一堆葡萄微球內(nèi)部像一堆葡萄微球，葡萄珠的大，葡萄珠的大小約在小約在0.060.5m范圍內(nèi)，葡萄珠范圍內(nèi)，葡萄珠之間存在許多空隙，這實(shí)際上就是之間存在許多空隙，這實(shí)際上就是樹脂的孔。樹脂的孔。 分離情景分離情景大孔樹脂概況大孔樹脂概況 大孔吸附樹脂內(nèi)部結(jié)構(gòu)很復(fù)雜。從大孔吸附樹脂內(nèi)部結(jié)構(gòu)很復(fù)雜。從掃描電子顯微鏡下可觀察到，掃描電子顯微鏡下可觀

2、察到，樹脂樹脂內(nèi)部像一堆葡萄微球內(nèi)部像一堆葡萄微球，葡萄珠的大，葡萄珠的大小約在小約在0.060.5m范圍內(nèi)，葡萄珠范圍內(nèi)，葡萄珠之間存在許多空隙，這實(shí)際上就是之間存在許多空隙，這實(shí)際上就是樹脂的孔。樹脂的孔。 分離情景分離情景大孔樹脂概況大孔樹脂概況分離情景分離情景大孔樹脂概況大孔樹脂概況 研究表明葡萄球內(nèi)部還有許多研究表明葡萄球內(nèi)部還有許多微孔微孔。葡萄珠之間的相互粘連則形成宏。葡萄珠之間的相互粘連則形成宏觀上球型的樹脂。正是這種觀上球型的樹脂。正是這種多孔結(jié)多孔結(jié)構(gòu)構(gòu)賦予樹脂優(yōu)良的吸附性能，因此賦予樹脂優(yōu)良的吸附性能，因此是吸附樹脂制備和性能研究中的關(guān)是吸附樹脂制備和性能研究中的關(guān)鍵技術(shù)

3、。鍵技術(shù)。 分離情景分離情景大孔樹脂概況大孔樹脂概況分離情景分離情景大孔樹脂概況大孔樹脂概況分離情景分離情景大孔樹脂概況大孔樹脂概況分離情景分離情景大孔樹脂分離原理示意圖大孔樹脂分離原理示意圖樹樹脂脂顆顆粒粒大孔樹脂概況大孔樹脂概況分離情景分離情景大孔樹脂概況大孔樹脂概況分離情景分離情景大孔樹脂概況大孔樹脂概況分離情景分離情景生物堿分離技術(shù)生物堿分離技術(shù) 生物堿大多具有明顯生物堿大多具有明顯生物活性生物活性，且對許多藥用植物，且對許多藥用植物生物堿分類方法往往較多。生物堿分類方法往往較多。 按其按其植物來源植物來源可分為茄科生物堿、百合科生物堿、可分為茄科生物堿、百合科生物堿、罌粟科生物堿等；

4、罌粟科生物堿等； 按其按其生理作用生理作用可分為降壓生物堿、驅(qū)蟲生物堿、鎮(zhèn)可分為降壓生物堿、驅(qū)蟲生物堿、鎮(zhèn)痛生物堿、抗瘧生物堿等；痛生物堿、抗瘧生物堿等； 按其按其性質(zhì)性質(zhì)可分為揮發(fā)堿、酚性堿、弱堿、強(qiáng)堿、水可分為揮發(fā)堿、酚性堿、弱堿、強(qiáng)堿、水溶堿等溶堿等分離情景分離情景嘧啶類，主要是喹喏西啶類莨菪烷類異喹琳類，主要有芐基異喹琳類、雙芐基異喹琳類、原小檗堿類和嗎啡類吲哚類，主要有色胺吲哚類、單萜吲哚類、二聚吲哚類萜類，烏頭所含生物堿有機(jī)胺類，麻黃所含生物堿常用的生物堿類型常用的生物堿類型分離情景分離情景生物堿分離方法 膜分離膜分離有機(jī)溶劑萃取法有機(jī)溶劑萃取法離子交換樹脂離子交換樹脂柱色譜分離法

5、柱色譜分離法硅膠柱色譜硅膠柱色譜大孔樹脂分離分離情景分離情景荷葉生物堿分離 荷葉中的生物堿荷葉中的生物堿堿性較弱堿性較弱，不能直接溶解于水中，不能直接溶解于水中，但能與，但能與酸酸結(jié)合生成鹽而溶于水，加堿至堿性又結(jié)合生成鹽而溶于水，加堿至堿性又可以成為游離態(tài)，故荷葉生物堿一般先采用偏酸可以成為游離態(tài)，故荷葉生物堿一般先采用偏酸性的水溶液浸提，然后調(diào)溶液的性的水溶液浸提，然后調(diào)溶液的pHpH值至堿性用有值至堿性用有機(jī)溶劑如氯仿萃取。機(jī)溶劑如氯仿萃取。 生產(chǎn)訂單：荷葉生物堿提取物生產(chǎn)訂單：荷葉生物堿提取物100kg100kg， 總生物堿總生物堿（Total AlkaloidsTotal Alkal

6、oids）4%4%，水分，水分5%5%，灰分，灰分5%5%，國標(biāo)檢測；價(jià)格：￥國標(biāo)檢測；價(jià)格：￥400400元元/Kg/Kg。分離情景分離情景操作流程操作流程分離情景分離情景操作流程 4 1 2 3操作流程操作流程分離情景分離情景操作流程操作流程分離情景分離情景操作流程操作流程分離情景分離情景操作流程操作流程分離情景分離情景操作流程操作流程分離情景分離情景操作流程操作流程分離情景分離情景操作流程操作流程分離情景分離情景操作流程操作流程分離情景分離情景操作流程操作流程分離情景分離情景操作流程操作流程分離情景分離情景操作流程操作流程分離情景分離情景90%操作流程操作流程分離情景分離情景操作流程操作

7、流程分離情景分離情景操作流程操作流程分離情景分離情景操作流程操作流程分離情景分離情景影響大孔樹脂吸附分離的因素影響大孔樹脂吸附分離的因素分離情景分離情景教師講解教師講解影響大孔樹脂吸附分離的因素影響大孔樹脂吸附分離的因素分離情景分離情景教師講解教師講解影響大孔樹脂吸附分離的因素影響大孔樹脂吸附分離的因素分離情景分離情景教師講解教師講解影響大孔樹脂吸附分離的因素影響大孔樹脂吸附分離的因素分離情景分離情景教師講解教師講解影響大孔樹脂吸附分離的因素影響大孔樹脂吸附分離的因素分離情景分離情景教師講解教師講解影響大孔樹脂吸附分離的因素影響大孔樹脂吸附分離的因素分離情景分離情景教師講解教師講解影響大孔樹脂

8、吸附分離的因素影響大孔樹脂吸附分離的因素分離情景分離情景教師講解教師講解影響大孔樹脂吸附分離的因素影響大孔樹脂吸附分離的因素分離情景分離情景教師講解教師講解影響大孔樹脂吸附分離的因素影響大孔樹脂吸附分離的因素分離情景分離情景教師講解教師講解影響大孔樹脂吸附分離的因素影響大孔樹脂吸附分離的因素分離情景分離情景教師講解教師講解如何確定上樣液的濃度與上樣量？如何確定上樣液的濃度與上樣量？洗脫流速對洗脫效果實(shí)際影響情況如何？洗脫流速對洗脫效果實(shí)際影響情況如何？如何確定需要收集的餾分？本次實(shí)訓(xùn)實(shí)際如何確定需要收集的餾分？本次實(shí)訓(xùn)實(shí)際操作情況呢？操作情況呢？如何將實(shí)驗(yàn)室的樹脂分離裝置與企業(yè)生產(chǎn)如何將實(shí)驗(yàn)室

9、的樹脂分離裝置與企業(yè)生產(chǎn)相銜接？相銜接？分離情景分離情景視野拓展-柱色譜技術(shù) 液相色譜中的柱色譜法又稱柱層析法，既可以用比較復(fù)雜的裝置，也可以用簡單的設(shè)備。用一根適宜的柱子，一個洗脫裝置，一個流量控制裝置（蠕動泵），一個紫外檢測儀和一個部分收集器就可以構(gòu)成最基本的分離裝置。色譜柱是整個過程的心臟，在使用時必須滿足下述要求:柱底應(yīng)有一凝膠的支持層，該支持層應(yīng)保證溶液能從柱中自由流出；支持層下面的死體積要盡可能小；柱子的出口應(yīng)有一個合適的接頭與檢測器和部分收集器相連；以玻璃管和塑料管較好。 分離情景分離情景柱子基本結(jié)構(gòu)圖分離情景分離情景（一）離子交換層析法 離子交換層析是利用離子交換劑上的可交換離

10、子與周圍介質(zhì)中被分離的各種離子間的親和力不同，經(jīng)過交換平衡達(dá)到分離的目的的一種柱層析法。該法可以同時分析多種離子化合物，具有靈敏度高，重復(fù)性、選擇性好，分析速度快等優(yōu)點(diǎn)，是當(dāng)前最常用的層析法之一 。分離情景分離情景基本原理 離子交換層析對物質(zhì)的分離通常是在一根充填有離子交換劑的玻璃管中進(jìn)行的。離子交換劑為人工合成的多聚物，其上帶有許多可電離基團(tuán)，根據(jù)這些基團(tuán)所帶電荷不同，可分為陰離子交換劑和陽離子交換劑。含有欲被分離的離子的溶液通過離子交換柱時，各種離子即與離子交換劑上的荷電部位競爭性結(jié)合。任何離子通過柱時的移動速率決定于與離子交換劑的親和力、電離程度和溶液中各種競爭性離子的性質(zhì)和濃度。離子交

11、換劑是由離子交換劑是由基質(zhì)基質(zhì)、荷電基團(tuán)荷電基團(tuán)和和反離子反離子構(gòu)成，在水構(gòu)成，在水中呈不溶解狀態(tài)，能釋放出反離子。同時它與溶液中中呈不溶解狀態(tài)，能釋放出反離子。同時它與溶液中的其他離子或離子化合物相互結(jié)合，結(jié)合后不改變本的其他離子或離子化合物相互結(jié)合，結(jié)合后不改變本身和被結(jié)合離子或離子化合物的理化性質(zhì)。離子交換身和被結(jié)合離子或離子化合物的理化性質(zhì)。離子交換劑與水溶液中離子或離子化合物所進(jìn)行的離子交換反劑與水溶液中離子或離子化合物所進(jìn)行的離子交換反應(yīng)是可逆的。應(yīng)是可逆的。 分離情景分離情景離子交換劑分類 離子交換劑離子交換劑疏水性離子交換劑疏水性離子交換劑 親水性離子交換劑親水性離子交換劑 陽

12、離子交換樹脂陽離子交換樹脂 陰離子交換樹脂陰離子交換樹脂 螯合離子交換樹脂螯合離子交換樹脂 纖維素離子交換劑纖維素離子交換劑 交聯(lián)葡聚糖離子交換劑交聯(lián)葡聚糖離子交換劑 瓊脂糖離子交換劑瓊脂糖離子交換劑 分離情景分離情景操作要點(diǎn) （一）交換劑的預(yù)處理、再生和轉(zhuǎn)型 干樹脂用水浸泡干樹脂用水浸泡2 2小時后減壓抽去氣泡，傾去水，再用大量去離子水洗至小時后減壓抽去氣泡，傾去水，再用大量去離子水洗至澄清，去水后加澄清，去水后加4 4倍量的倍量的2mol2molL HCIL HCI溶液，攪拌溶液，攪拌4 4小時，除去小時，除去酸液酸液，用水，用水洗至中性，再加洗至中性，再加4 4倍量的倍量的2mol2mo

13、lL L NaOHNaOH溶液，攪拌溶液，攪拌4 4小時，除去小時，除去堿液堿液，用，用水洗至中性備用。水洗至中性備用。 （二）交換劑裝柱 實(shí)驗(yàn)室中最簡單的層析柱可用實(shí)驗(yàn)室中最簡單的層析柱可用堿式滴定管堿式滴定管代替。一般用玻璃或有機(jī)玻代替。一般用玻璃或有機(jī)玻璃制成的管，底部熔接有璃制成的管，底部熔接有3 3號燒結(jié)濾板，也可用玻璃纖維代替。柱的高號燒結(jié)濾板，也可用玻璃纖維代替。柱的高度依分離物質(zhì)的不同而定，當(dāng)所用的交換劑與待分離物質(zhì)各組分之間度依分離物質(zhì)的不同而定，當(dāng)所用的交換劑與待分離物質(zhì)各組分之間的親和力相差不多而需要交換劑的體積較大時，以增加柱長為宜，使的親和力相差不多而需要交換劑的體積

14、較大時，以增加柱長為宜，使待分離的組分被洗脫后再結(jié)合于交換劑上的概率增加，使性質(zhì)相近的待分離的組分被洗脫后再結(jié)合于交換劑上的概率增加，使性質(zhì)相近的組分能較好地分離，因而增加了分辨率。柱的直徑與高度的比以組分能較好地分離，因而增加了分辨率。柱的直徑與高度的比以1 1：2020左右為宜。左右為宜。 （三）樣品上柱、洗脫和收集 裝柱完畢，通過恒流泵加入起始緩沖溶液，流洗交裝柱完畢，通過恒流泵加入起始緩沖溶液，流洗交換劑，直至流出液的換劑，直至流出液的pHpH與起始緩沖溶液相同。關(guān)閉層析與起始緩沖溶液相同。關(guān)閉層析柱出液口，準(zhǔn)備加樣。柱出液口，準(zhǔn)備加樣。 打開柱出液口，待緩沖溶液下移至柱床表面時，關(guān)打開柱出液口，待緩沖溶液下移至柱床表面時，關(guān)閉出液口。用滴管加入已用起始緩沖溶液平衡后的樣品。閉出液口。用滴管加入已用起始緩沖溶液平衡后的樣品。沿柱內(nèi)壁滴加樣品，待樣品液加到一定高度后，再移向沿柱內(nèi)壁滴加樣品，待樣品液加到一定高度后，再移向中央滴加，務(wù)必使樣品液均勻分