1、化學發(fā)光發(fā)光試劑及其應用 Name: 巫華斌 Student Num：03081058化學發(fā)光試劑及其應用 化學發(fā)光試劑概述 化學發(fā)光分析的基本原理 化學發(fā)光試劑的主要類型 化學發(fā)光試劑的應用化學發(fā)光試劑概述 發(fā)光被定義為處在激發(fā)態(tài)的分子或原子回到基態(tài)時所發(fā)射的光。按照獲得激發(fā)態(tài)能源的不同有各種類型的發(fā)光。在化學發(fā)光（chemluminescence, CL）中，由化學反應產(chǎn)生能的原子或分子由激發(fā)態(tài)回到基態(tài)時所產(chǎn)生的這一光輻射現(xiàn)象叫化學發(fā)光。根據(jù)化學發(fā)光的強度測定物質(zhì)含量的分析方法叫化學發(fā)光分析。 1887年 Redziszewski首次報道了絡吩堿（lophine,2,4,5-三苯基咪痤）在

2、堿性條件下與氧氣反應發(fā)出黃金設色的光人為的化學發(fā)光 化學發(fā)光的特點化學發(fā)光的特點 1。靈敏度高，如用熒光素酶和磷酸三腺苷（ATP）的發(fā)光反應，可測定2*10-17mol/L的ATP，即可檢測一個細胞中的ATP含量。 2分析方法簡單快捷，不需要復雜的儀器，不需要光源和色散裝置，業(yè)沒有光學分析方法中常見的散射光和雜散光等引起的背景值。 化學發(fā)光分析法的測量儀器比較簡單，主要包括樣品室、光檢測器、放大器和信號輸出裝置。化學發(fā)光反應在樣品室中進行，反應發(fā)出的光直接照射在檢測器上，目前常用 LUM-F流動注射化學發(fā)光儀器 1化學發(fā)光的基本條件化學發(fā)光的基本條件w 一個化學反應要產(chǎn)生化學發(fā)光現(xiàn)象，必須滿足

3、以下條件：w第一是：該反應必須提供足夠的激發(fā)能（對于藍光發(fā)射需300kj.mol-1,紅光需150kj.mol-1），導致電子從基態(tài)躍遷至激發(fā)態(tài)。w第二是：化學反應的能量至少能被一種物質(zhì)所說接受并使之生成激發(fā)態(tài)。w第三是：處于激發(fā)態(tài)的分子或原子必須具有一定的化學發(fā)光量子效率時期能釋放出光子，或能轉(zhuǎn)移它的能量給另一個分子使之處于激發(fā)態(tài)并使 發(fā)出光子3 3化學發(fā)光強度與反應物濃度的關(guān)系化學發(fā)光強度與反應物濃度的關(guān)系 化學發(fā)光反應所以能用于分析測定，是因為化學發(fā)光強度（ICL）與化學反應速度（dp/dt）相關(guān)聯(lián)，而一切影響反應速度的因素有多可以作為建立測定方法的依據(jù)。化學發(fā)光反應一般可表示為： A+

4、B C*, C* C+hv該發(fā)光反應的化學發(fā)光強度取決于翻譯的速度dp/dt和反應的化學發(fā)光量子效率（ CL ） ICL（T）= CLdp/d式中CL可表示為：CL=r+f,其中r為生成激發(fā)態(tài)產(chǎn)物的量子效率，f 為激發(fā)態(tài)產(chǎn)物分子的發(fā)光量子效率，對于一定的化學發(fā)光反應， 為一定值;其反應速度可按質(zhì)量作用定律表示出與反應體系中物質(zhì)濃度的關(guān)系。因此，通過測定化學發(fā)光強度就可以測定反應體系種某種物質(zhì)的濃度，原則上講，對任何發(fā)光反應，只要反應是一級或假一及反應，都可以通過上式進行化學發(fā)光定量分析。化學發(fā)光分析測定的物質(zhì)對象可分為三類：第一類物質(zhì)是化學發(fā)光反應中的的反應物；第二類物質(zhì)是化學發(fā)光反應中的催化

5、劑，增敏劑或抑制劑;第三類是偶合反應中反應物，催化劑，增敏劑等。這三類物質(zhì)還可以通過標記方式來測定人們感興區(qū)的其他物質(zhì)。這就夸大了化學發(fā)光分析的應用范圍。例如，在上述化學發(fā)光反應中，如果物質(zhì)B保持恒定，而物質(zhì)A變化且為一級或假一及反應，則 此式表明化學發(fā)光強度與A的濃度成正比。時 間化學發(fā)光強度( )( )/CLCLCLCLAIIt dtdA tdt dtC 。 化學發(fā)光分析測定的物質(zhì)對象可分為三類：第一類物質(zhì)是化學發(fā)光反應中的的反應物；第二類物質(zhì)是化學發(fā)光反應中的催化劑，增敏劑或抑制劑;第三類是偶合反應中反應物，催化劑，增敏劑等。這三類物質(zhì)還可以通過標記方式來測定人們感興區(qū)的其他物質(zhì)。這就夸

6、大了化學發(fā)光分析的應用范圍。化學發(fā)光試劑化學發(fā)光試劑 1魯米諾（魯米諾（luminol）,異魯米異魯米(isoluminol)和和他們的衍生物他們的衍生物 魯米諾（3氨基鄰苯甲酰肼,1）,異魯米諾（2）及其衍生物（如氨基丁基乙基鄰苯甲酰肼，ABENH,3） 在發(fā)光分析中被使用。 在二甲基亞砜中，魯米諾的量子產(chǎn)率不超過5%，在水溶液中是1%1.5%。魯米諾在堿性條件下能被許多氧化劑（例如H2O2,O2,ClO-等）氧化而發(fā)出藍色的廣，發(fā)光反應的量子產(chǎn)率介于0.010.05之間是一個研究最早，最多，應用最廣泛的發(fā)光試劑。 魯米諾（魯米諾（luminol） 異魯米諾異魯米諾(isoluminol)

7、NH2NHONHO H2NNHONHO 魯米諾的發(fā)光機理見下圖，NH2NHONHONH2NHNHOOOOH-N2NH2OOOOH*NH2OOOOH+光魯米諾于H2O2的反應是一個自身化學發(fā)光反應。v 過氧草酸鹽（peroxalate）（酯）包括一大類物質(zhì)，他們自身并不發(fā)光，其化學發(fā)光均為敏化華學范廣，化學發(fā)光反應是芳香草酸值得過氧化氫氧化作用，芳香草酸鹽和H2O2芳香草酸鹽和H2O2反應形成高能量的中間物。v 與魯米諾相比，過氧草酸鹽化學反應的發(fā)光效率更高，可達到27%，且在較寬的酸度范圍內(nèi)(PH410)都能發(fā)光。v 過草酸發(fā)光體西可用于測定的物質(zhì)有：（1）待測物質(zhì)本身是熒光劑，可作為能量接受體和發(fā)光體;(2)待測物質(zhì)曹禺某一反應可產(chǎn)生H2O2等氧化劑而間接被測定；（3）待測物質(zhì)可被淹聲稱熒光物質(zhì)。可見，過氧草酸鹽類化學發(fā)光法英的分析應用還賴于新熒光衍生劑的開發(fā)。 1無機物的分析 2.有機物及藥物的分析 3生物體