1、第九章蛋白質(zhì)組學的研究方法和進展第一節(jié)第一節(jié) 蛋白質(zhì)組學的概念及其發(fā)展史蛋白質(zhì)組學的概念及其發(fā)展史一、蛋白質(zhì)組學的概念一、蛋白質(zhì)組學的概念 蛋白質(zhì)組是澳大利亞學者蛋白質(zhì)組是澳大利亞學者WilliamsWilliams和和WilkinsWilkins于于19941994年首先提出，是指年首先提出，是指“一個細胞或一個組織基因一個細胞或一個組織基因組所表達的全部蛋白質(zhì)組所表達的全部蛋白質(zhì)”。蛋白質(zhì)組學蛋白質(zhì)組學(proteomics)(proteomics) 指應用各種技術手段來研究蛋白質(zhì)組的一門指應用各種技術手段來研究蛋白質(zhì)組的一門新興科學，其目的是從整體的角度分析細胞新興科學，其目的是從整體的

2、角度分析細胞內(nèi)動態(tài)變化的蛋白質(zhì)組成成份、表達水平與內(nèi)動態(tài)變化的蛋白質(zhì)組成成份、表達水平與修飾狀態(tài)，了解蛋白質(zhì)之間的相互作用與聯(lián)修飾狀態(tài)，了解蛋白質(zhì)之間的相互作用與聯(lián)系，揭示蛋白質(zhì)功能與細胞生命活動規(guī)律。系，揭示蛋白質(zhì)功能與細胞生命活動規(guī)律。 主要研究內(nèi)容主要研究內(nèi)容 了解某種特定的細胞、組織了解某種特定的細胞、組織或器官制造的蛋白質(zhì)種類；或器官制造的蛋白質(zhì)種類； 明確各種蛋白質(zhì)分子是如何形明確各種蛋白質(zhì)分子是如何形成類似于電路的網(wǎng)絡的；成類似于電路的網(wǎng)絡的； 描繪蛋白質(zhì)的精確三維結(jié)構(gòu)，揭示其描繪蛋白質(zhì)的精確三維結(jié)構(gòu)，揭示其結(jié)構(gòu)上的關鍵部位，如與藥物結(jié)合并且決結(jié)構(gòu)上的關鍵部位，如與藥物結(jié)合并且決

3、定其活性的部位。定其活性的部位。 功能蛋白質(zhì)組學功能蛋白質(zhì)組學( (functional proteomics) )的提出的提出 n功能蛋白質(zhì)組：細胞在一定階段或與某功能蛋白質(zhì)組：細胞在一定階段或與某一生理現(xiàn)象相關的所有蛋白質(zhì)。一生理現(xiàn)象相關的所有蛋白質(zhì)。n介于對個別蛋白質(zhì)的傳統(tǒng)蛋白質(zhì)化學研介于對個別蛋白質(zhì)的傳統(tǒng)蛋白質(zhì)化學研究和以全部蛋白質(zhì)為研究對象的蛋白質(zhì)究和以全部蛋白質(zhì)為研究對象的蛋白質(zhì)組學之間。組學之間。 n從局部入手研究蛋白質(zhì)組的各個功能亞從局部入手研究蛋白質(zhì)組的各個功能亞群體。群體。 n將多個亞群體組合起來，逐步描繪出接將多個亞群體組合起來，逐步描繪出接近于生命細胞的近于生命細胞的“

4、全部蛋白質(zhì)全部蛋白質(zhì)”的蛋白的蛋白質(zhì)組圖譜。質(zhì)組圖譜。背背 景景 基因組時代基因組時代 后基因組時代后基因組時代 研究重點的轉(zhuǎn)移及其標志研究重點的轉(zhuǎn)移及其標志 功能基因組學產(chǎn)生，其任務是解析和綜合功能基因組學產(chǎn)生，其任務是解析和綜合大量的遺傳信息，闡明基因遺傳信息與人類大量的遺傳信息，闡明基因遺傳信息與人類生命活動的關系。生命活動的關系。二、蛋白質(zhì)組學的產(chǎn)生與發(fā)展二、蛋白質(zhì)組學的產(chǎn)生與發(fā)展mRNAmRNA水平的基因表達研究取得進展，但水平的基因表達研究取得進展，但mRNAmRNA與蛋白質(zhì)間的相關系數(shù)僅為與蛋白質(zhì)間的相關系數(shù)僅為0.40.40.50.5 蛋白質(zhì)自身特點難以從蛋白質(zhì)自身特點難以從D

5、NADNA和和mRNAmRNA水平得水平得到解答到解答 進進 展展各國政府支持，國際著名研究和商業(yè)機構(gòu)加盟：各國政府支持，國際著名研究和商業(yè)機構(gòu)加盟： 19961996年澳大利亞建立了世界上第一個蛋白質(zhì)組研年澳大利亞建立了世界上第一個蛋白質(zhì)組研究中心究中心 美國國立癌癥研究院（美國國立癌癥研究院（NCINCI）投資）投資1 0001 000萬美元建萬美元建立肺、直腸、乳腺、卵巢腫瘤的蛋白質(zhì)組數(shù)據(jù)庫。立肺、直腸、乳腺、卵巢腫瘤的蛋白質(zhì)組數(shù)據(jù)庫。 NCI NCI和和FDAFDA共同投資數(shù)百萬美元建立癌癥不同階共同投資數(shù)百萬美元建立癌癥不同階段的蛋白質(zhì)組數(shù)據(jù)庫。段的蛋白質(zhì)組數(shù)據(jù)庫。 英國建立三個蛋白

6、質(zhì)組研究中心對已完成或英國建立三個蛋白質(zhì)組研究中心對已完成或即將完成全基因組測序的生物體進行蛋白質(zhì)組研即將完成全基因組測序的生物體進行蛋白質(zhì)組研究。究。 CeleraCelera公司投資上億美元獨自啟動了全面鑒公司投資上億美元獨自啟動了全面鑒定和分類匯總?cè)祟惤M織、細胞和體液中的蛋白質(zhì)定和分類匯總?cè)祟惤M織、細胞和體液中的蛋白質(zhì)及其異構(gòu)體，構(gòu)建新一代的蛋白質(zhì)表達數(shù)據(jù)庫的及其異構(gòu)體，構(gòu)建新一代的蛋白質(zhì)表達數(shù)據(jù)庫的工作。工作。n 1997年召開了第一次國際年召開了第一次國際“蛋白質(zhì)組蛋白質(zhì)組學學”會議會議n 1998年在美國舊金山召開了第二屆國年在美國舊金山召開了第二屆國際蛋白質(zhì)組學會議際蛋白質(zhì)組學會

7、議 n 1999年年1月在英國倫敦舉行了應用蛋月在英國倫敦舉行了應用蛋白質(zhì)組會議白質(zhì)組會議 我國也于我國也于1998年啟動了蛋白質(zhì)組學研年啟動了蛋白質(zhì)組學研究，在中科院上海生物化學研究所舉辦究，在中科院上海生物化學研究所舉辦了兩次全國性的蛋白質(zhì)組學研討會了兩次全國性的蛋白質(zhì)組學研討會 2003成立了中國人類蛋白質(zhì)組組成立了中國人類蛋白質(zhì)組組織（織（CHHUPO），并分別于），并分別于2003年年9月、月、2004年年8月以及月以及2005年年8月召開月召開了中國蛋白質(zhì)組學首屆、第二屆及第三了中國蛋白質(zhì)組學首屆、第二屆及第三屆學術大會，屆學術大會，2004年年10月在中國北京月在中國北京召開了第

8、三屆國際蛋白質(zhì)組學會議。召開了第三屆國際蛋白質(zhì)組學會議。 n 科技部已將疾病蛋白質(zhì)組研究列入我國科技部已將疾病蛋白質(zhì)組研究列入我國“973”計劃計劃項目和項目和“863”計劃項目計劃項目；國家自然科學基金委員會也國家自然科學基金委員會也將將“蛋白質(zhì)組研究蛋白質(zhì)組研究”列為重點項目。列為重點項目。n我國在鼻咽癌、白血病、肝癌和肺癌蛋白質(zhì)組研究方面我國在鼻咽癌、白血病、肝癌和肺癌蛋白質(zhì)組研究方面取得了較大的進展取得了較大的進展。 第二節(jié)第二節(jié) 蛋白質(zhì)組學研究方法概述蛋白質(zhì)組學研究方法概述蛋白質(zhì)組研究更為復雜和困難：蛋白質(zhì)組研究更為復雜和困難： 蛋白質(zhì)數(shù)目大大超過基因數(shù)目。蛋白質(zhì)數(shù)目大大超過基因數(shù)目

9、。 蛋白質(zhì)隨時間和空間而變化。蛋白質(zhì)隨時間和空間而變化。 發(fā)展高通量、高靈敏度、高準確性發(fā)展高通量、高靈敏度、高準確性的研究技術平臺是現(xiàn)在乃至相當一段時的研究技術平臺是現(xiàn)在乃至相當一段時間內(nèi)蛋白質(zhì)組學研究中的主要任務。間內(nèi)蛋白質(zhì)組學研究中的主要任務。 當前主要任務 一、蛋白質(zhì)組表達模式的研究方法一、蛋白質(zhì)組表達模式的研究方法 最初的蛋白質(zhì)組學主要是研究蛋白質(zhì)組的組最初的蛋白質(zhì)組學主要是研究蛋白質(zhì)組的組成成分即蛋白質(zhì)組表達模式成成分即蛋白質(zhì)組表達模式, , 支撐技術主要有雙向凝膠電泳、以質(zhì)譜為代支撐技術主要有雙向凝膠電泳、以質(zhì)譜為代表的蛋白質(zhì)鑒定技術及生物信息學分析技術。表的蛋白質(zhì)鑒定技術及生物

10、信息學分析技術。（一）蛋白質(zhì)組研究中的樣品制備 n通常可采用細胞或組織中的全蛋白質(zhì)組通常可采用細胞或組織中的全蛋白質(zhì)組分進行蛋白質(zhì)組分析。分進行蛋白質(zhì)組分析。 n也可以進行樣品預分級，即將細胞或組也可以進行樣品預分級，即將細胞或組織中的全體蛋白質(zhì)分成不同部分，分別織中的全體蛋白質(zhì)分成不同部分，分別進行研究。進行研究。 樣品預分級的主要方法樣品預分級的主要方法n蛋白質(zhì)溶解性：可溶性蛋白、非溶性蛋白質(zhì)溶解性：可溶性蛋白、非溶性蛋白等蛋白等n蛋白質(zhì)定位：膜蛋白、核蛋白等蛋白質(zhì)定位：膜蛋白、核蛋白等n蛋白質(zhì)細胞器定位：線粒體、高爾基蛋白質(zhì)細胞器定位：線粒體、高爾基體、葉綠體等體、葉綠體等 樣品預分級主

11、要作用樣品預分級主要作用: :在于提高低豐在于提高低豐度蛋白質(zhì)的上樣量和檢測靈敏度度蛋白質(zhì)的上樣量和檢測靈敏度。（二）蛋白質(zhì)組研究中的樣品分離n雙向凝膠電泳雙向凝膠電泳two-dimensional two-dimensional electrophoresiselectrophoresis，2-DE)2-DE)：利用蛋白質(zhì)的：利用蛋白質(zhì)的等電點和分子量，結(jié)合凝膠化學特性，分等電點和分子量，結(jié)合凝膠化學特性，分離各種蛋白質(zhì)的方法。離各種蛋白質(zhì)的方法。原原 理理 第一向在高壓電場下對蛋白質(zhì)進行第一向在高壓電場下對蛋白質(zhì)進行等電聚焦等電聚焦(IEF), , 再在第一向垂直方向再在第一向垂直方向上進

12、行第二向上進行第二向SDS-聚丙烯酰胺凝膠電聚丙烯酰胺凝膠電泳泳(SDS-PAGE)。 1975年首先由年首先由OFarrell等創(chuàng)立。等創(chuàng)立。特特 點點n可分離可分離10100 kD分子量的蛋白質(zhì)分子量的蛋白質(zhì) n高靈敏度和高分辨率高靈敏度和高分辨率n便于計算機進行圖像分析處理便于計算機進行圖像分析處理 n與質(zhì)譜分析匹配與質(zhì)譜分析匹配 第一向第一向IEF電泳電泳 n傳統(tǒng)傳統(tǒng)OFarrell系統(tǒng)雙向電泳的缺陷。系統(tǒng)雙向電泳的缺陷。nBjellgvist等發(fā)展并完善了固相等發(fā)展并完善了固相pH梯度等電聚梯度等電聚焦技術，焦技術，Grg等成功地將之應用于雙向電泳等成功地將之應用于雙向電泳。固相固相

13、pHpH梯度等電聚焦的優(yōu)點梯度等電聚焦的優(yōu)點克服了載體兩性電解質(zhì)陰極漂移等缺點克服了載體兩性電解質(zhì)陰極漂移等缺點。穩(wěn)定的可以隨意精確設定的穩(wěn)定的可以隨意精確設定的pH梯度。梯度。 尤其可在較窄的尤其可在較窄的pH范圍內(nèi)進行第二輪范圍內(nèi)進行第二輪分析，大大提高了分辨率及重復性。分析，大大提高了分辨率及重復性。 第二向第二向SDS-PAGE電泳電泳 垂直板電泳垂直板電泳 水平超薄膠電泳水平超薄膠電泳 2-DE技術的缺點技術的缺點 極酸、極堿性蛋白質(zhì)，疏水性蛋白質(zhì)，極酸、極堿性蛋白質(zhì)，疏水性蛋白質(zhì)，極大蛋白質(zhì)、極小蛋白質(zhì)以及低豐度蛋極大蛋白質(zhì)、極小蛋白質(zhì)以及低豐度蛋白質(zhì)用此種技術難于有效分離。白質(zhì)用

14、此種技術難于有效分離。 膠內(nèi)酶解過程費時、費力，難于與質(zhì)譜膠內(nèi)酶解過程費時、費力，難于與質(zhì)譜聯(lián)用實現(xiàn)自動化。聯(lián)用實現(xiàn)自動化。 新型非凝膠技術新型非凝膠技術 液相色譜法液相色譜法liquid chromatography，LC毛細管電泳毛細管電泳capillary electrophoresis，CEn液質(zhì)聯(lián)用技術（液質(zhì)聯(lián)用技術（LC-MS/MSLC-MS/MS） 蛋白質(zhì)混合物直接通過液相色譜分離以代替蛋白質(zhì)混合物直接通過液相色譜分離以代替2-DE的分離，然后進入的分離，然后進入MS系統(tǒng)獲得肽段分子系統(tǒng)獲得肽段分子量，再通過串聯(lián)量，再通過串聯(lián)MS技術，得到部分序列信息，技術，得到部分序列信息，最

15、后通過計算機聯(lián)網(wǎng)查詢、鑒定蛋白質(zhì)。最后通過計算機聯(lián)網(wǎng)查詢、鑒定蛋白質(zhì)。 根據(jù)蛋白質(zhì)帶電性及疏水性不同，根據(jù)蛋白質(zhì)帶電性及疏水性不同，用用LC/LC分離多肽復合物。分離多肽復合物。 n多維多維色譜技術（色譜技術（LC/LC-MS/MS）n多維蛋白質(zhì)鑒定技術多維蛋白質(zhì)鑒定技術(multidimensional protein identification technology)新型蛋白質(zhì)鑒定技術新型蛋白質(zhì)鑒定技術 質(zhì)譜（質(zhì)譜（MSMS）法）法 基本原理：樣品分子離子化后，根據(jù)離基本原理：樣品分子離子化后，根據(jù)離子間質(zhì)荷比（子間質(zhì)荷比（m/zm/z）的差異來分離并確）的差異來分離并確定樣品的分子量。

16、定樣品的分子量。 （三）蛋白質(zhì)組研究中的樣品分析鑒定（三）蛋白質(zhì)組研究中的樣品分析鑒定n基質(zhì)輔助激光解吸基質(zhì)輔助激光解吸/電離飛行時間質(zhì)譜電離飛行時間質(zhì)譜（matrix-assisted laser desorption/ionization time of flight mass spectrometry，MALDI-TOF MS） n電噴霧質(zhì)譜（電噴霧質(zhì)譜（electrospray ionization mass spectrometry， ESI-MS） 主要質(zhì)譜類型主要質(zhì)譜類型鑒定和注釋蛋白質(zhì)的路線鑒定和注釋蛋白質(zhì)的路線 n通過肽質(zhì)譜指紋圖（通過肽質(zhì)譜指紋圖（peptide mass

17、fingerprinting，PMF）和數(shù)據(jù)庫搜尋匹配）和數(shù)據(jù)庫搜尋匹配 n通過測出樣品中部分肽段二級質(zhì)譜信息或氨基酸通過測出樣品中部分肽段二級質(zhì)譜信息或氨基酸序列標簽和數(shù)據(jù)庫搜尋匹配序列標簽和數(shù)據(jù)庫搜尋匹配 目目 錄錄（四）蛋白質(zhì)組學研究的生物信息學（四）蛋白質(zhì)組學研究的生物信息學 生物信息學是蛋白質(zhì)組學研究的一個生物信息學是蛋白質(zhì)組學研究的一個不可缺少的部分。不可缺少的部分。應應 用用n構(gòu)建和分析雙向凝膠電泳圖譜構(gòu)建和分析雙向凝膠電泳圖譜 n數(shù)據(jù)庫的搜索與構(gòu)建數(shù)據(jù)庫的搜索與構(gòu)建蛋白質(zhì)組數(shù)據(jù)庫是蛋白質(zhì)組研究水平蛋白質(zhì)組數(shù)據(jù)庫是蛋白質(zhì)組研究水平的標志和基礎的標志和基礎 n瑞士的瑞士的SWISS

18、-PROT擁有目前世界上最擁有目前世界上最大、種類最多的蛋白質(zhì)組數(shù)據(jù)庫。大、種類最多的蛋白質(zhì)組數(shù)據(jù)庫。n目前應用最普遍的數(shù)據(jù)庫是目前應用最普遍的數(shù)據(jù)庫是NRDB 和和dbEST數(shù)據(jù)庫。數(shù)據(jù)庫。dbEST數(shù)據(jù)庫數(shù)據(jù)庫 由美國國家生物技術信息中心（由美國國家生物技術信息中心（NCBINCBI）和歐洲生物）和歐洲生物信息學研究所（信息學研究所（EBIEBI）共同編輯，包括許多生物體）共同編輯，包括許多生物體的表達序列標簽（的表達序列標簽（ESTEST） 肽序列標簽肽序列標簽(PST)或部分序列信息最適合查尋或部分序列信息最適合查尋 概念：把一個基因組表達的全部蛋白概念：把一個基因組表達的全部蛋白質(zhì)或

19、一個復雜體系中所有的蛋白質(zhì)進質(zhì)或一個復雜體系中所有的蛋白質(zhì)進行精確的定量和鑒定。行精確的定量和鑒定。 （五）定量蛋白質(zhì)組學研究（五）定量蛋白質(zhì)組學研究 低豐度蛋白質(zhì)檢測困難低豐度蛋白質(zhì)檢測困難 蛋白質(zhì)表達量差異很小，如在蛋白質(zhì)表達量差異很小，如在50%以下時，精確定量成為瓶頸以下時，精確定量成為瓶頸 蛋白質(zhì)表達的瞬時變化蛋白質(zhì)表達的瞬時變化 蛋白質(zhì)定量的難點蛋白質(zhì)定量的難點1 1基于雙向凝膠電泳的定量蛋白基于雙向凝膠電泳的定量蛋白質(zhì)組研究策略質(zhì)組研究策略 雙向凝膠電泳雙向凝膠電泳(2-DE)是目前唯一能分離展是目前唯一能分離展示大量蛋白質(zhì)并進行蛋白質(zhì)定量分析的一種示大量蛋白質(zhì)并進行蛋白質(zhì)定量分

20、析的一種方法。方法。 熒光差異顯示雙向電泳（熒光差異顯示雙向電泳（F-2D-DIGE） 2基于生物質(zhì)譜的定量蛋白質(zhì)組研究基于生物質(zhì)譜的定量蛋白質(zhì)組研究策略策略 原理：對于具有相同離子化能力的蛋白質(zhì)原理：對于具有相同離子化能力的蛋白質(zhì)或多肽，可以通過比較質(zhì)譜峰的強度（或或多肽，可以通過比較質(zhì)譜峰的強度（或峰面積）得到待比較蛋白質(zhì)的相對量。峰面積）得到待比較蛋白質(zhì)的相對量。 二、蛋白質(zhì)組功能模式的研究方法二、蛋白質(zhì)組功能模式的研究方法主要研究目標 n揭示蛋白質(zhì)組成員間的相互作用、相互揭示蛋白質(zhì)組成員間的相互作用、相互協(xié)調(diào)的關系，并深入了解蛋白質(zhì)的結(jié)構(gòu)協(xié)調(diào)的關系，并深入了解蛋白質(zhì)的結(jié)構(gòu)與功能的相互關

21、系，以及基因結(jié)構(gòu)與蛋與功能的相互關系，以及基因結(jié)構(gòu)與蛋白質(zhì)結(jié)構(gòu)功能的關系。白質(zhì)結(jié)構(gòu)功能的關系。 （一）蛋白質(zhì)翻譯后修飾的研究（一）蛋白質(zhì)翻譯后修飾的研究翻譯后修飾翻譯后修飾糖基化糖基化乙酰化乙酰化甲基化甲基化羧基化羧基化二硫鍵二硫鍵n修飾肽的檢測的高靈敏度方法修飾肽的檢測的高靈敏度方法 n蛋白質(zhì)翻譯后修飾的定量分析蛋白質(zhì)翻譯后修飾的定量分析 n合適的修飾狀態(tài)下處理和電離條件合適的修飾狀態(tài)下處理和電離條件 n測定工作量巨大測定工作量巨大 研究面臨的困難：研究面臨的困難： （二）蛋白質(zhì)相互作用研究技術（二）蛋白質(zhì)相互作用研究技術n生命的基本過程是不同功能蛋白質(zhì)在時生命的基本過程是不同功能蛋白質(zhì)在時

22、空上有序和協(xié)同作用空上有序和協(xié)同作用 n新陳代謝以蛋白質(zhì)復合體或多蛋白質(zhì)網(wǎng)新陳代謝以蛋白質(zhì)復合體或多蛋白質(zhì)網(wǎng)絡協(xié)同作用實現(xiàn)絡協(xié)同作用實現(xiàn) n細胞信號轉(zhuǎn)導及病原體感染和免疫反應細胞信號轉(zhuǎn)導及病原體感染和免疫反應 n1989年年Field 和和Song等人在酵母細胞中等人在酵母細胞中設計的分析蛋白質(zhì)相互作用的方法。設計的分析蛋白質(zhì)相互作用的方法。n以真核細胞轉(zhuǎn)錄激活因子的結(jié)構(gòu)和活性以真核細胞轉(zhuǎn)錄激活因子的結(jié)構(gòu)和活性特點為基礎。特點為基礎。1 1酵母雙雜交系統(tǒng)酵母雙雜交系統(tǒng)（yeast two-hybrid systemyeast two-hybrid system） 轉(zhuǎn)錄激活因子轉(zhuǎn)錄激活因子GAL

23、4GAL4的特點的特點nN N端含端含NLSNLS和與酵母和與酵母GAL1GAL1基因啟動子上游激活序列基因啟動子上游激活序列(UASG)(UASG)結(jié)合的結(jié)構(gòu)域結(jié)合的結(jié)構(gòu)域nC C端含端含GAL1GAL1轉(zhuǎn)錄激活結(jié)構(gòu)域轉(zhuǎn)錄激活結(jié)構(gòu)域n功能上相互獨立又互相依賴，只有通過某種方功能上相互獨立又互相依賴，只有通過某種方式結(jié)合在一起才具有完整的轉(zhuǎn)錄因子活性式結(jié)合在一起才具有完整的轉(zhuǎn)錄因子活性 系系 統(tǒng)統(tǒng) 構(gòu)構(gòu) 建建n分別構(gòu)建含分別構(gòu)建含GAL4 BD GAL4 BD 和和AD AD 的兩個酵的兩個酵母融合蛋白表達載體；母融合蛋白表達載體；n建立含特殊基因型、適用于雙雜交建立含特殊基因型、適用于雙雜交

24、體分析的酵母菌株體分析的酵母菌株 2 2噬菌體表面顯示技術噬菌體表面顯示技術 ( phage display )( phage display ) 三個基本因素：三個基本因素： 在噬菌體在噬菌體pp和和pp衣殼蛋白衣殼蛋白N N端插入外源端插入外源待篩基因編碼的蛋白，形成的融合蛋白表達待篩基因編碼的蛋白，形成的融合蛋白表達在噬菌體顆粒的表面；同時其保持的外源蛋在噬菌體顆粒的表面；同時其保持的外源蛋白天然構(gòu)象能被相應的抗體或受體識別。白天然構(gòu)象能被相應的抗體或受體識別。n利用固相支持物上的抗體或受體，采用親利用固相支持物上的抗體或受體，采用親和篩選法（和篩選法（panning），從噬菌體文庫中）

25、，從噬菌體文庫中篩選出能結(jié)合篩選分子的目的噬菌體。篩選出能結(jié)合篩選分子的目的噬菌體。n外源多肽或蛋白質(zhì)表達在噬菌體的表面，外源多肽或蛋白質(zhì)表達在噬菌體的表面，其編碼基因可通過分泌型噬菌體的單鏈其編碼基因可通過分泌型噬菌體的單鏈DNA測序推導出來。測序推導出來。主主 要要 應應 用用篩選與特異抗體或受體相互作用的蛋白質(zhì)篩選與特異抗體或受體相互作用的蛋白質(zhì) 研究抗體或受體的結(jié)合位點研究抗體或受體的結(jié)合位點構(gòu)建隨機肽庫、抗體庫和蛋白文庫構(gòu)建隨機肽庫、抗體庫和蛋白文庫 改造和提高蛋白質(zhì)的生物學和免疫學特性改造和提高蛋白質(zhì)的生物學和免疫學特性 研究新型多肽藥物、疫苗和抗體研究新型多肽藥物、疫苗和抗體 研究涉及到蛋白質(zhì)與核酸相互作用的