分子診斷技術(shù)_第1頁
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1、現(xiàn)在學(xué)習(xí)的是第一頁,共22頁現(xiàn)在學(xué)習(xí)的是第二頁,共22頁現(xiàn)在學(xué)習(xí)的是第三頁,共22頁現(xiàn)在學(xué)習(xí)的是第四頁,共22頁現(xiàn)在學(xué)習(xí)的是第五頁,共22頁現(xiàn)在學(xué)習(xí)的是第六頁,共22頁現(xiàn)在學(xué)習(xí)的是第七頁,共22頁Dot Bolt Hybridization for HBV DNA Quantitationin 5 l of Patient Sera現(xiàn)在學(xué)習(xí)的是第八頁,共22頁現(xiàn)在學(xué)習(xí)的是第九頁,共22頁現(xiàn)在學(xué)習(xí)的是第十頁,共22頁基因芯片基因芯片(或DNA Chip,或Microarray)又稱DNA微陣列,是指固定在固相載體上的高密度DNA微點(diǎn)陣。即將大量靶基因或寡核苷酸片段有序地,高密度地(點(diǎn)與點(diǎn)間距一般

2、小于500m)排列在玻璃、硅等載體上,稱之為基因芯片。上圖顯示大量的DNA探針,按照一定的規(guī)律有序地排列在支撐物上,每個(gè)探針與相對(duì)應(yīng)的特異互補(bǔ)序列結(jié)合后,即可發(fā)出熒光。利用該芯片可同時(shí)獲取大量信息。DNA Microarray現(xiàn)在學(xué)習(xí)的是第十一頁,共22頁以大量已知序列的寡核苷酸、以大量已知序列的寡核苷酸、cDNAcDNA或基因片段作探針,檢測(cè)樣品中哪或基因片段作探針,檢測(cè)樣品中哪些核酸序列與其互補(bǔ),然后通過定些核酸序列與其互補(bǔ),然后通過定性、定量分析得出待測(cè)樣品的基因性、定量分析得出待測(cè)樣品的基因序列及表達(dá)的信息序列及表達(dá)的信息現(xiàn)在學(xué)習(xí)的是第十二頁,共22頁現(xiàn)在學(xué)習(xí)的是第十三頁,共22頁原位

3、合成原位合成直接點(diǎn)樣直接點(diǎn)樣原位光蝕刻合成原位光蝕刻合成原位噴印合成原位噴印合成 分子印章法分子印章法針式點(diǎn)樣針式點(diǎn)樣噴墨點(diǎn)樣噴墨點(diǎn)樣光導(dǎo)原位合成法光導(dǎo)原位合成法現(xiàn)在學(xué)習(xí)的是第十四頁,共22頁現(xiàn)在學(xué)習(xí)的是第十五頁,共22頁現(xiàn)在學(xué)習(xí)的是第十六頁,共22頁現(xiàn)在學(xué)習(xí)的是第十七頁,共22頁u非對(duì)稱非對(duì)稱PCRu免免PCRu定量定量PCRu隨機(jī)引隨機(jī)引PCRu簡(jiǎn)機(jī)引簡(jiǎn)機(jī)引PCR u定定PCR 現(xiàn)在學(xué)習(xí)的是第十八頁,共22頁現(xiàn)在學(xué)習(xí)的是第十九頁,共22頁退火延伸切割聚合完成l該法也稱TaqMan技術(shù),在PCR系統(tǒng)中,加入能和靶核酸模板雜交的探針,其5端帶有熒光報(bào)告基團(tuán),發(fā)射的熒光被3端帶有的熒光淬滅基團(tuán)所吸收。l引物延伸時(shí),由于聚合酶具有的53核酸外切酶作用,可把熒光報(bào)告基團(tuán)從探針上切下,因與淬滅基團(tuán)遠(yuǎn)離,發(fā)出的熒光不被淬滅,隨模板擴(kuò)增和游離熒光報(bào)告基團(tuán)的增加而增強(qiáng),并和初始靶核酸的量呈正相關(guān)?,F(xiàn)在學(xué)習(xí)的是第二十頁,共22頁

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