微生物實驗課件:實驗2 顯微鏡的使用和細菌形態的觀察_第1頁
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文檔簡介

1、微生物學實驗注意事項: 每次實驗前必須對實驗內容進行充分預習,以了解實驗的目的、原理和方法,做到心中有數,思路清楚; 認真、及時做好實驗記錄,對于當時不能得到結果而需要連續觀察的實驗,則需記下每次觀察的現象和結果,以便分析; 實驗室內應保持整潔,勿高聲談話和隨便走動,保持室內安靜; 實驗時小心仔細,全部操作應嚴格按規程進行,萬一遇有盛菌試管或瓶不慎打破、皮膚破傷或菌液入口等意外發生,應立即報告教師,及時處理,切勿隱瞞; 實驗過程中,注意火險。 使用顯微生物或其它貴重儀器時,要求細心操作,特別愛護。消耗材料和藥品用畢后放回原處。 每次實驗完畢,必須把所用的儀器抹凈放妥,將實驗室收拾整齊,擦凈桌面

2、。 每次實驗需進行培養的材料,應標明自己的組別及處理方法,放于教師指定的地點進行培養。實驗室中的菌種和物品等,未經教師許可,不得攜出室外。 每次實驗的結果,應以實事求是的科學態度填入報告表中,力求簡明準確,認真回答思考題,并及時交教師批閱。 離開實驗室前將手洗凈,注意關閉火、水、電、門窗等。課前準備 實驗大衣 實驗記錄本、白紙、 繪圖工具:鉛筆、橡皮、圓規等 部分實驗需自備樣品 女生請將長發扎起,控制好劉海長度玻璃器皿的清洗、包扎和干熱滅菌顯微鏡的使用及細菌形態的觀察細菌涂片制備及染色常用培養基的制備和濕熱滅菌細菌的分離、接種和培養霉菌的形態觀察酵母菌的形態與計數,放線菌的形態觀察細菌生理生化

3、實驗質粒DNA轉化實驗細菌總數的測定大腸菌群的測定酸奶的制做實驗報告格式 實驗目的 實驗原理 實驗材料 實驗方法過程 實驗結果 討論 思考題實驗二、顯微鏡的使用及細菌形態的觀察 實驗目的 學習并掌握顯微鏡的構造及使用方法。 觀察細菌形態。 實驗材料 菌種:大腸桿菌、枯草芽孢桿菌、檸檬色葡萄球菌染色片。 顯微鏡、標本片、香柏油、清洗液、擦鏡紙。實驗原理 普通光學顯微鏡是利用目鏡和物鏡兩組透鏡系統來放大物像的。由機械部分和光學部分組成。 物鏡的焦距、工作距離與虹彩光圈的關系。 油鏡的使用。 顯微鏡的分辮率、放大倍數。顯微鏡的構造顯微鏡的構造 1.光學部分光學部分: :目鏡目鏡 、 物物鏡鏡 、 照

4、明裝置照明裝置(聚光鏡、聚光鏡、 虹彩光圈、虹彩光圈、 反光鏡等反光鏡等)。它使檢視物放大它使檢視物放大, ,生成物生成物象。象。2.機械部分機械部分: :鏡座、鏡臂、鏡筒、鏡座、鏡臂、鏡筒、物鏡轉換器、載物臺、載物臺物鏡轉換器、載物臺、載物臺轉移器、粗調節器、細調節器轉移器、粗調節器、細調節器等部件等部件. .它起著支持它起著支持 調節調節 固定固定等作用等作用. .圖圖1-1-2 光學顯微鏡的成像原理光學顯微鏡的成像原理倒立的虛像倒立的虛像 顯微鏡的放大倍數和分辨率顯微鏡的放大倍數和分辨率 1.放大倍數放大倍數:物鏡放大倍數:物鏡放大倍數目鏡放目鏡放大倍數大倍數 2. 顯微鏡的分辨率顯微鏡

5、的分辨率:是表示顯微鏡辨析是表示顯微鏡辨析兩點之間距離的能力。可用公式表示兩點之間距離的能力。可用公式表示為:為: D=/2nsin(/2 ) 式中式中D D:物鏡分辨出物體兩點間的最短距離。物鏡分辨出物體兩點間的最短距離。 :可見光的波長(平均可見光的波長(平均0.550.55 m) m) n:n: 物鏡和被檢標本間介質的折射率。物鏡和被檢標本間介質的折射率。 :鏡口角(即入射角)。鏡口角(即入射角)。D值越小,分辨率越高,看到的物象越清晰值越小,分辨率越高,看到的物象越清晰 油鏡使用的原理油鏡使用的原理 油鏡,即油浸接物鏡。當光油鏡,即油浸接物鏡。當光線由反光鏡通過玻片與鏡頭線由反光鏡通過

6、玻片與鏡頭之間的空氣時,由于空氣與之間的空氣時,由于空氣與玻片的密度不同,使光線受玻片的密度不同,使光線受到曲折,發生散射,降低了到曲折,發生散射,降低了視野的照明度。若中間的介視野的照明度。若中間的介質是一層油(質是一層油(其折射率與玻其折射率與玻片的相近片的相近),則幾乎不發生),則幾乎不發生折射,增加了視野的進光量,折射,增加了視野的進光量,從而使物象更加清晰。從而使物象更加清晰。u根據公式根據公式D=/2nsin(/2 ) ,增大分母,使得增大分母,使得D值值減小,分辨率增大。減小,分辨率增大。1.不準擅自拆卸顯微鏡的任何部件不準擅自拆卸顯微鏡的任何部件, ,以免損壞。以免損壞。2.鏡

7、面只能用擦鏡紙擦,不能用手指或粗布,鏡面只能用擦鏡紙擦,不能用手指或粗布,以保證光潔度以保證光潔度3.觀察標本時,必須依次用低、中、高倍鏡,觀察標本時,必須依次用低、中、高倍鏡,最后用油鏡。當目視接目鏡時,特別在使用最后用油鏡。當目視接目鏡時,特別在使用油鏡時,切不可使用粗調節器,以免壓碎玻油鏡時,切不可使用粗調節器,以免壓碎玻片或損傷鏡面。片或損傷鏡面。4.拿顯微鏡時,一定要右手拿鏡臂,左手托鏡拿顯微鏡時,一定要右手拿鏡臂,左手托鏡座,不可單手拿,更不可傾斜拿。座,不可單手拿,更不可傾斜拿。5.顯微鏡應存放在陰涼干燥處,以免鏡片滋生顯微鏡應存放在陰涼干燥處,以免鏡片滋生霉菌而腐蝕鏡片霉菌而腐蝕鏡片。顯微鏡保養和使用中的注意事項顯微鏡保養和使用中的注意事項實驗步驟1觀察前的準備觀察前的準備1)顯微鏡的安置2)光源調節3)目鏡調節4)聚光器數值孔徑的調節2 2顯微觀察顯微觀察物鏡的作用“先低倍、后高倍、再油鏡”。調焦的規律“由上而下”。勿使物鏡鏡頭碰觸玻片,以免引起損壞。3 3顯微鏡用畢后的處理顯微鏡用畢后的處理1)清潔油鏡鏡頭2)清潔其它部件3)物鏡成“八”字形,載物臺下移至最低處。4)放回原處。實驗報告實驗報告圖示所觀察的細菌,標明菌名(拉丁文)、放大倍數、菌體形狀、顏

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