1、檢測生物組織中的糖類、脂肪和蛋白質實驗報告姓名:班級:【實驗目的】1、嘗試檢測生物組織中的糖類、脂肪和蛋白質,探討細胞中主要化合物的種類。2、掌握實驗的操作技能。3、認識到脂肪、糖類、蛋白質和淀粉是生物組織的重要成分。【實驗原理】某些化學試劑能夠使生物組織中的有關有機化合物產生特定的顏色反應。脂肪可以被蘇丹染液染成橘黃色也可以被蘇丹染液染成紅色。糖類中的還原性糖(如葡萄糖、果糖可以與斐林試劑發生作用,產生磚紅色沉淀。蛋白質與雙縮脲試劑發生作用,產生紫色反應。淀粉遇碘變藍色。因此,可以根據與某些化學試劑所產生的顏色反應,檢測生物組織中糖類、脂肪或蛋白質的存在。【材料器具】1.實驗材料:蘋果或梨勻

2、漿,馬鈴薯勻漿,花生種子,花生種子勻漿,豆漿。2.儀器:解剖刀,試管(最好用刻度試管,試管架,試管夾,滴管,大小燒杯,量筒,酒精燈,三腳架,石棉網,火柴,載玻片,蓋玻片,毛筆,吸水紙,顯微鏡。3.試劑:斐林試劑(甲夜:質量濃度為0.1g/ml的NaOH溶液,乙夜:質量濃度為0.05g/ml 的CuSO4溶液蘇丹III或蘇丹染液,雙縮脲試劑(A夜:質量濃度為0.1g/ml的NaOH溶液,B夜:質量濃度為0.01g/ml的CuSO4溶液,體積分數為50%的酒精溶液,蒸餾水,碘液。【實驗注意問題】一定要聽從老師的安排,不讓動的堅決不動。保持安靜,堅決不能大聲喧嘩。注意實驗安全注意愛護實驗器材,誰損壞

3、誰負責。【實驗過程】(一可溶性糖的鑒定操作方法注意問題解釋1. 制備組織樣液。(去皮、切塊、研磨、過濾蘋果或梨組織液必須臨時制備。因蘋果多酚氧化酶含量高,組織液很易被氧化成褐色,將產生的顏色掩蓋。2. 取1支試管,向試管內注入2mL組織樣液。3. 向試管內注入1mL新制的斐林試劑,振蕩。應將組成斐林試劑的甲液、乙液分別配制、儲存,實驗前才將甲、乙液等量混勻成斐林試劑;切勿將甲液、乙液分別加入蘋果組織樣液中進行檢測。斐林試劑很不穩定,甲、乙液混合保存時,生成的Cu ( OH 2在70900C下分解成黑色CuO 和水;甲、乙液分別加入時可能會與組織樣液發生反應,無Cu ( OH 2生成。4. 試管

4、放在盛有50650C溫水的大燒杯中,加熱約2分鐘,溶液顏色:淺藍色棕色(沉淀最好用試管夾夾住試管上部,使試管底部不觸及燒杯底部,試管口不朝向實驗者。也可用酒精燈水浴加熱。防止試管內的溶液沖出試管,造成燙傷;縮短實驗時間。(二脂肪的鑒定操作方法注意問題解釋花生種子浸泡、去皮、切下一些子葉薄片,將薄片放在載玻片的水滴中,用吸水紙吸去裝片中的水。干種子要浸泡34小時,新花生的浸泡時間則可縮短。因為浸泡時間短,不易切片,浸泡時間過長,組織較軟,切下的薄片不易成形。切片要盡可能薄些,便于觀察。在子葉薄片上滴23滴蘇丹或蘇丹染液,染色1分鐘。染色時間不宜過長。用吸水紙吸去薄片周圍染液,用50%酒精洗去浮色

5、,再用吸水紙吸去酒精。酒精用于洗去浮色,若不洗去,會影響對橘黃色脂肪滴的觀察。同時,酒精是脂溶性溶劑,可將花生細胞中的脂肪顆粒溶解成油滴。用吸水紙吸去薄片周圍酒精,滴上12滴蒸餾水,蓋上蓋玻片。滴上清水可防止蓋蓋玻片時產生氣泡。低倍鏡下找到花生子葉薄片最薄處,可看到細胞中有染成或圓形小顆粒。裝片不宜久放。時間一長,油滴會溶解在乙醇中。(三蛋白質的鑒定操作方法注意問題解釋制備組織樣液。(浸泡、去皮研磨、過濾。黃豆浸泡1至2天,容易研磨成漿,也可購新鮮豆漿以節約實驗時間。鑒定。加樣液約2ml于試管中,加入雙縮脲試劑A液1ml,搖勻;再加入雙縮脲試劑B液3 4滴,搖勻,溶液變。A液和B液也要分開配制

6、,儲存。CuSO4溶液不能多加。先加NaOH溶液,為Cu2+與蛋白質反應提供一個堿性的環境。A、B液混裝或同時加入,會導致Cu2+變成Cu ( OH 2沉淀,而失效。否則CuSO4的藍色會遮蓋反應的真實顏色。可用蛋清代替豆漿。蛋清要先稀釋。如果稀釋不夠,在實驗中蛋清粘在試管壁,與雙縮脲試劑反應后會粘固在試管內壁上,使反應不容易徹底,并且試管也不易洗干凈。附:淀粉的檢測和觀察:用試管取2ml待測組織樣液,向試管內加2滴碘液,觀察顏色變化。碘液不要滴太多以免影響顏色觀察【實驗結論】實驗結果和分析:生物組織樣液化學試劑特定顏色反應證明某種化合物存在梨花生種子黃豆馬鈴薯【課后鞏固】1、以花生子葉為材料

7、進行脂肪的檢測時,制作臨時裝片的正確步驟是 ( 蓋蓋玻片切子葉蘇丹染液染色滴加蒸餾水酒精洗去浮色A.B.C.D.2、下列各組中的前項為需檢測的物質,中項為使用的試劑,后項為產生的顏色,正確的是 ( A. 葡萄糖、斐林試劑、磚紅色B. 脂肪、蘇丹染液、紅色C. 蛋白質、雙縮脲試劑、藍色D. 脂肪、蘇丹染液、橘黃色3、醫院確認糖尿病的常用方法及結果是( A. 加入斐林試劑,出現磚紅色B.加入碘碘化鉀溶液,出現藍色C. 加入蘇丹溶液,出現橘黃色D.加入碘碘化鉀溶液,出現淡黃色4、在可溶性還原糖、脂肪、蛋白質的鑒定實驗中,對實驗材料的選擇敘述錯誤的是( A.馬鈴薯塊莖中含有較多的糖且近于白色,可用于進行可溶性還原糖的鑒定B.花生種子富含脂肪且子葉肥厚,是用于脂肪鑒定的好材料C.大豆種子蛋白質含量高,是進行蛋白質鑒定的理想植物組織材料D.雞蛋清含蛋白質多,是進行蛋白質鑒定的動物材料5、在鑒定可溶性還原糖的實驗中,加入斐林試劑時必