1、18學時藥理實驗實驗一不同給藥途徑對藥物作用的影響【目的】1. 觀察給藥途徑不同對藥物作用的影響.2. 練習小鼠的捉拿方法及腹腔注射法、灌胃注射法、皮下注射法。【原理】戊巴比妥鈉為鎮(zhèn)靜催眠藥，依據(jù)不同劑量及吸收情況的不同依次會出現(xiàn)：鎮(zhèn)靜-催眠-抗驚厥抗癲癇-麻醉-麻痹-死亡作用。用相同劑量，不同給藥途徑的藥物，從而觀察其差異。【實驗材料】1、動物：小鼠2、藥品：0.4%戊巴比妥鈉溶液3、器材：電子秤1臺、1ml注射器2支、灌胃器1支、苦味酸1瓶、棉簽1根。【方法與步驟】1、取小鼠6只，雌雄各半，稱重.編號，分成3組。2、甲組-腹腔注射乙組-皮下注射卜0.4%戊巴比妥鈉溶液0.10ml/10g丁

2、組-灌胃3、立即記錄時間，觀察每只動物翻正反射消失時間及翻正反射恢復時間【結果與處理】組別鼠號途徑0.4%戊巴體重給藥劑量翻正反射消失（t）翻正反射恢復（t）時間（m平均值時間（n甲12ip乙12iH丙12ig【注意事項】1、注意給藥途徑的正確操作。2、注意小鼠翻正反射消失時間判定1min實驗二藥物的抗炎作用（足腫脹法）【目的】熟悉致炎物質致大鼠后肢足跖炎癥性腫脹模型制作方法。了解糖皮質激素的抗炎作用。【原理】鮮蛋活等致炎物質被注入大鼠后肢足跖后，可引起局部血管擴張，通透性增強，組織水腫等炎癥反應，最后致足跖體積變大。糖皮質激素通過抑制炎癥產(chǎn)生的多個環(huán)節(jié)，從而避免致炎物質的致炎作用。【實驗材料

3、】1. 動物：8大鼠2只。2. 藥品：10%鮮蛋活、0.5%氫化可的松溶液、生理鹽水、。3. 器材：大鼠固定器1臺，1ml注射器3支，PV-200足趾容積測量儀，苦味酸、棉簽1根、手套1只。【方法與步驟】取大鼠2只，稱重，做好標記。一只大鼠腹腔注射生理鹽水0.3mL/100g,另一只腹腔注射0.5%氫化可的松溶液0.3mL/100g。1. 在鼠足某處用記號筆畫線作為測量標線，將鼠足緩緩放如測量筒內,當水平面與鼠足上的測量標線重疊時，踏動腳踏開關，記錄足趾容積，為正常值。2. 待二鼠注射藥物30min后，從右后足掌心向踝關節(jié)方向皮下注射10%鮮蛋活0.lmL/只：3. 在注射致炎物后的15min

4、、30min、45min分別測量足趾容積。4. 計算：足跖腫脹度及腫脹率。腫脹度=致炎后的足趾容積一致炎前足趾容積腫脹率=（致炎后的足趾容積一致炎前足趾容積）士致炎前足趾容積X100%【結果與處理】將所得數(shù)據(jù)填入表內并加以比較得出結論。表1氫化可的松對大鼠足跖腫脹的影響藥量后足跖(mL)容積致炎后足跖腫脹度(mL)(%)鼠藥物號重(g)15min30min45min15min30min45min甲乙【注意事項】1. 抗炎實驗中動物性別的選擇：雄性2. 測定大鼠足體積時，選定統(tǒng)一測量位置(大鼠足外踝關節(jié)突起)3. 10%鮮雞蛋活溶液需在臨用前配制。4. 體重120150g的8大鼠對致炎劑最敏感，

5、腫脹度高，差異性小。5. 測量時，應固定1人完成所有測量任務。6. 注射致炎劑時注意藥液勿外漏。實驗三藥物的抗炎作用(耳片法)【目的】熟悉二甲苯致大鼠耳廓炎癥性腫脹模型制作方法。了解糖皮質激素的抗炎作用。【原理】化學刺激物可致動物急性炎癥；毛細血管擴張，滲出增加，出現(xiàn)局部腫脹，重量改變。比較幻予藥物前后動物局部腫脹程度的變化從而觀察到藥物的抗炎作用。【實驗材料】動物：8小鼠4只藥品：0.1%地塞米松、二甲苯、生理鹽水。1. 器材：分析天平1臺、稱量紙1張、打孔器1支、眼科鑲1把、打孔墊1個、手術剪1把、1mL注射器3支、苦味酸1瓶、棉簽1根。【方法與步驟】取8小鼠4只，稱重，做好標記，分成2組

6、。1. 一組腹腔注射0.1%地塞米松0.1ml/10g體重，另一組腹腔注射生理鹽水0.1ml/10g體重給藥30min后，用二甲苯0.05ml均勻涂抹每只鼠的右耳內外兩面。2. 涂抹45min后，小鼠脫臼處死，分別用打孔器取相同部位左右耳片，電子天平稱重。3. 計算：腫脹度=右耳重量-左耳重量腫脹率=（右耳重量-左耳重量）士左耳重量X100%【結果與處理】將所得數(shù)據(jù)填入表內并加以比較得出結論。各組腫地塞米松對小鼠耳片腫脹重量的影響耳片重量組別鼠號體重（g）藥物組別鼠號體重（g）藥物劑量脹率平右左腫脹度腫脹率生理鹽水地塞米松生理鹽水地塞米松生理鹽水地塞米松12【注意事項】1、小鼠耳廓滴加二甲苯時

7、，正反面均勻涂抹。避免滴入耳廓內2、小鼠左右耳打耳片位置統(tǒng)一（耳廓中間部位）。實驗四傳出神經(jīng)藥物對離體腸肌的作用【目的】觀察乙酰膽堿、阿托品、氯化徹對胃腸平滑肌的作用，了解阿托品的作用機制。掌握離體器官的測定方法。【實驗材料】1、動物：家兔。2、藥品：0.01%氯化乙酰膽堿溶液、0.05%硫酸阿托品溶液、1%（化徹溶液、臺氏液。3、器材：離體平滑肌槽1臺、420E型生物機能實驗系統(tǒng)1套、肌張力換能器1支、電腦1臺、雙凹夾1個、手術剪1把、注射器3支、燒杯1個、縫線2根。【方法與步驟】1、將離體平滑肌槽加水，通電加熱，設定溫度為37±0.5C。2、安裝換能器，與420E型生物機能實驗系

8、統(tǒng)第一通道連接。3、離體腸肌的制備：取家兔1只，頸椎脫臼處死，立即打開腹腔，找到幽門部，分離十二指腸，以2cm左右穿線，分段結扎，剪取腸段。將腸段一端連結固定鉤上，置測定管（麥氏浴槽）中。另一端連結張力換能器彈簧片上。上下調節(jié)雙凹夾，控制張力的大小。打開氣量調節(jié)旋鈕，讓氣泡緩慢通入。4、離體腸肌收縮力測定：打開電腦，點擊桌面中BL-420圖標，進入主菜單，點擊工具欄上的“實驗項目”，消化道實驗，消化道平滑肌生理特性（2）。腸管穩(wěn)定10分鐘左右，記錄一段正常收縮曲線，然后依次用藥。1. 加0.01%氯化乙酰膽堿溶液0.2ml,觀察結果如何。2.當腸段收縮明顯時，立即加入0.05%硫酸阿托品溶淡0

9、.2ml,觀察對腸段收縮的影響.3. 當描筆下降到基線時，再次加人0.01%氯化乙酰膽堿溶液0.2ml,觀祭結果。4. 更換浴槽中的臺氏液3次，待腸段恢復收縮后，加人l%氯化徹溶液0.2ml,觀察腸段有何反應。5. 當作用出現(xiàn)后，立劇加人0.05%硫酸阿托品溶液0.2ml,觀察結果如何。實驗結束后，暫停記錄，打開反演窗口，尋找所需波形的開始處，壓縮圖形，剪切整理圖形，保存資料。【結果】描繪或剪貼腸肌活動曲線圖，標明所給藥物的名稱和劑量，分折討論所得結果。【注意事項】1、沖洗和分離腸管時動作應輕柔，盡量避免牽拉腸管。2、如需換液，臺氏液液面高度及溫度應與以前保持一致。3、加藥時不要把藥液直接加到

10、標本上，以免影響結果。4、浴溫和腸肌的張力均可影響實驗結果，應注意調節(jié)實驗五鎮(zhèn)痛藥實驗（熱板法）【目的】觀察嗎啡的鎮(zhèn)癰作用。掌握鎮(zhèn)癰藥實驗（熱板法）操作方法。【原理】利用一定的溫度刺激動物軀體的某一部位以產(chǎn)生疼癰反應。把小鼠放在事先加熱到55C的金屆盤上，以舔后足為疼癰”反應指標，以產(chǎn)生癰反應所需的時間為癰閾值。通過測定給藥前后癰閾值的變化而反映藥物的鎮(zhèn)癰作用。【實驗材料】1、動物：小鼠（雌性）2、藥品：0.1%嗎啡溶液、生理鹽水。3、器材：RB-200智能熱板儀1臺、1mL注射器3支、電子稱1臺、苦味酸1瓶、棉簽1根。【方法與步驟】將智能熱板儀溫設定為55C，儀器升溫至設定值后，取雌性小鼠若

11、干只，逐一將小鼠置熱板儀上,按下計時開關（T）記錄時間，觀察小鼠對熱刺激的反應，以小鼠舔后足作為癰覺指標，一旦出現(xiàn)舔后足動作，再次按下計時開關停止計時，立即將鼠取出。5分鐘后重新測試,如果兩次癰覺反應均發(fā)生在5-30秒內，則為合格。對癰覺過分敏感或遲鈍及喜跳竄小鼠，應棄去。將合格鼠兩次正常癰覺反應時間的均數(shù)算做給藥前的平均癰覺反應時間（既癰閾值）。將挑選合格的小鼠4只稱重、標號，分成二組，分別給各小鼠下列藥物：甲組鼠：腹腔注射0.1%嗎啡溶液0.1mL/10g。乙組鼠：腹腔注射生理鹽水0.1mL/10g作對照。分別在給藥后15、30、45分鐘各測癰覺反應（癰閾值）一次，如小鼠在60秒內不出現(xiàn)癰

12、覺反應，則按60秒計，取出實驗鼠，不再繼續(xù)刺激。【結果與處理】痛閾值提高百分率痛閾值提高百分率痛閾值提高百分率用藥后平均癰閾值-用藥前平均癰閾值x100%用藥前平均癰閾值嗎啡的鎮(zhèn)癰作用（熱板法）組別劑量動物數(shù)藥前平藥后癰閾值提高白分率（%）均均閾值（s）藥后平均癰閾值（s）15min30min45min15min30min45min0.1%嗎啡0.1ml/10g2生理鹽水0.1ml/10g2（另外，也可根據(jù)給藥后不同時間的癰閾提高白分率作圖，橫坐標表示時間，縱坐標表示癰閾提高白分率，觀察嗎啡的鎮(zhèn)癰作用，作用起始時間及維持時間。與生理鹽水組的曲線比較。）【注意事項】1、熱板法小鼠個體差異較大，應

13、選擇癰閾值在5-30秒之間的實驗動物，凡特別喜跳躍的小鼠應淘汰。2、實驗應選擇雌性小鼠，因雄性小鼠在遇熱時睪丸下降，陰囊觸及熱板反應過敏，易致跳躍，影響實驗準確性。3、室溫以1520C為宜。4、作用較弱的鎮(zhèn)癰藥此法不太敏感。實驗六鎮(zhèn)痛藥實驗（小鼠扭體法）許多刺激性化學物質（如醋酸、灑石酸錦鉀、緩激肽、鉀離子等）腹腔注射刺激腹膜，均能使動物產(chǎn)生疼癰反應，可用作疼癰模型，研究疼癰生理及篩選鎮(zhèn)癰藥物。其中小鼠扭體法最常用。【目的】觀察藥物的鎮(zhèn)癰作用，掌握小鼠扭體法實驗方法。【原理】小鼠腹腔注射一定容積和濃度的化學物質，由丁刺激腹膜而致小鼠出現(xiàn)腹部收縮內凹、軀干與后肢伸張、臂部高舉等行為反應，稱為扭體反應。鎮(zhèn)癰藥可抑制這種反應。【實驗材料】1動物：小鼠2藥品：0.1%嗎啡溶液、生理鹽水。3器材：1mL注射器3支、電子稱1臺、苦味酸1瓶、棉簽1根。【方法與步驟】取體重18-22g的健康小白鼠4只，稱重，編號。分成二組。甲組各鼠；腹腔注射0.1%嗎啡溶液0.1mL/10g。乙組各鼠；腹腔注射生理鹽水0.1mL/10g,作對照。給藥后30min，各鼠腹腔注射0.7%冰醋酸溶液（或0.1%灑石酸錦鉀）0.2mL/只記錄小鼠出現(xiàn)疼癰的時間（潛伏期），給致癰劑后15min內產(chǎn)生扭體反應（腹部收縮內凹、軀丁與后肢伸張、臂部高舉）的次數(shù)。【結果與處理】、扭體反應次