1、車間環境衛生檢測標準1 .目的：依照GB12693-2020乳制品企業良好生產標準及本公司生產干凈區環境、衛生治理規定中的相關規定及要求，特制定本標準。2 .范圍本標準規定了本公司實驗室實施車間環境衛生檢測的依據、方式及檢測結果判定標準。本標準適用于本公司實驗室實施車間環境衛生的各項檢測。3檢測項目：菌落總數、霉菌、酵母、阪崎腸桿菌、大腸菌群、沙門氏菌4 .檢測頻率及檢測時刻：每日生產前進行生產設備、工器具、包裝材料、員工個人衛生等部位的涂抹實驗。每日生產進程中對生產車間空氣進行沉降實驗。5 .職責由查驗人員負責車間環境衛生檢測的具體操作。6 .檢測方式空氣沉降法菌落總數：1）車間空氣采樣:選

2、取4個采樣點，（見附錄1車間空氣采樣位點圖）。采樣高度為工采樣點應遠離墻壁1m以上，并躲開空調、門窗等空氣流通處。2）生產車間空氣檢測采樣部位：混粉間、殺菌機、預封機、真封機、100g灌裝間、軟包裝灌裝間、壓片間、儲粉間等，每部位為一采樣點。3）將營養瓊脂平板置于采樣點處，打開平皿蓋，暴露30min，蓋上平皿蓋。反轉平板,置36±1培育48h。4）假設為車間空氣菌落總數測定，那么應計算4個采樣點菌落的平均數；假設為生產車間空氣檢測采樣部位菌落總數測定，那么應計數每一個平板上的菌落數，均以每皿菌落數（CFU/IIIL）報告結果。霉菌、酵母：1）、2）同菌落總數。3）將虎紅瓊脂平板置于采

3、樣點處，打開平皿蓋，暴露30min，蓋上平皿蓋。反轉平板,置25±1培育3d5do4）假設為車間空氣霉菌、酵母總數測定，那么應計算4個采樣點菌落的平均數；假設為生產車間空氣檢測采樣部位霉菌、酵母總數測定，那么應計數每一個平板上的菌落數，均以每皿菌落數（CFU/川L）報告結果。阪崎腸桿菌1）車間空氣采樣:選取4個采樣點，（見附錄1車間空氣采樣位點圖）。采樣高度為工采樣點應遠離墻壁1m以上，并躲開空調、門窗等空氣流通處。2）將阪崎腸桿菌顯色平板置于采樣點處，打開平肌蓋，暴露30min,蓋上平皿蓋。反轉平板，置36±1培育48h。3）計數每一個阪崎腸桿菌顯色平板上藍綠色菌落，并計

4、算4個采樣點藍綠色菌落的平均數，以每皿阪崎腸桿菌菌落數（CFU/皿）報告結果。表面涂抹法物體表面涂抹：菌落總數、霉菌和酵母將經滅菌的內徑為5cmX5cm的規格板放在被檢物體表面，用一浸有滅菌生理鹽水的棉簽在其內涂抹，然后剪去手接觸的部份棉棒，將棉簽放入裝有10mL滅菌生理鹽水/乳糖膽鹽發酵管的采樣管內及時送檢。將每支滅菌生理鹽水采樣管充分混勻后，取1mL樣液，別離放入滅菌平皿內，加入冷至45左右的營養瓊脂/虎紅瓊脂約15mL,每一個樣品平行接種2個平皿，將營養瓊脂平板置36c±1培育48h.；虎紅瓊脂平板置2528培育35d.計數平板上的細菌/霉菌、酵母菌落數，以每毫升檢樣中的菌落總

5、數（CFU）的平均數報告結果。阪崎腸桿菌將經滅菌的內徑為5cmX5cm的規格板放在被檢物體表面，用一浸有滅菌營養肉湯的棉簽在其內涂抹，然后剪去手接觸的部份棉棒，將棉簽放入裝有10mL滅菌營養肉湯的采樣管內及時送檢。將每支滅菌營養肉湯的采樣管充分混勻后，取1mL樣液，以mL、mL、mL接種量別離加入三個阪崎腸桿菌顯色平板，然后用無菌L棒涂布整個平板，注意不要觸及平板邊緣。利用前，如阪崎腸桿菌顯色平板表面有水珠，可放在2550的培育箱里干燥，直到平板表面的水珠消失方可利用。反轉平板,置36±1培育48h。挑取藍綠色可疑菌落，采納API20E進行生化鑒定及進行氧化酶、產黃素實驗。依照鑒定及

6、實驗結果報告檢出或未檢出阪崎腸桿菌。沙門氏菌將經滅菌的內徑為5cmX5cm的規格板放在被檢物體表面，用一滅菌的棉簽在其內涂抹，然后剪去手接觸的部份棉棒，將棉簽放入裝有10mL滅菌營養肉湯的采樣管內及時送檢。將滅菌營養肉湯的采樣管于于36±1培育818h。輕輕搖勻采樣管內的混合物，取1mL樣液轉種于10mL亞硒酸鹽胱氨酸(SC)內，于36±1培育1824h。用接種環取增菌液1環，劃線接種于一個科馬嘉顯色培育基平板，于36±1培育1824h。挑取紫紅色可疑菌落，采納API20E進行生化鑒定實驗。依照鑒定及實驗結果報告檢出或未檢出沙門氏菌。大腸菌群將每支乳糖膽鹽發酵管置

7、36±1培育24h±2ho假設產氣，即初步判定為大腸菌群陽性。以大腸菌群陽性/陰性報告結果。員工手部涂抹：被檢人五指并攏，用一浸有滅菌生理鹽水的棉簽在右手指曲面，從指尖到指端來回涂抹10次，然后剪去手接觸的部份棉棒，將棉簽放入裝有10mL滅菌乳糖膽鹽發酵管內及時送檢。將每支乳糖膽鹽發酵管置36±1培育24h±2h。假設產氣，即初步判定為大腸菌群陽性。以員工腕表而大腸菌群陽性或陰性/手報告結果。涂抹部位：生產設備、工器具的涂抹：預混機、混粉缸、混粉缸上/下料口、篩粉機下料口、下粉漏斗、填充器、篩網、受粉槽、鋼管、軟管、盆、勺等。包裝材料的涂抹：底蓋、內袋等。員工衛生狀況涂抹：連體服、手套、手。涂抹及檢測方式同。7判定依據菌落總數：空氣暴露30minW10CFU/1II1,表而涂抹W50CFU/mL；霉菌、酵母：空氣暴露30minW10CFU/1III,表面涂抹W10CFU/mL；阪崎腸桿菌：空氣暴露30min0CFU/1II1,表面涂抹不得檢出大腸菌群：陰性。8 .檢測報告查驗員應真實、準確填寫生產車間環境微生物檢測報告，經實驗室主管審核后，報送品控部和生產部。9 .說明混粉間、殺菌機、預封機、真封機為天天必需檢測的部位，100g灌裝間、軟包裝灌裝間、壓片間、儲粉間僅在利歷時進行檢測。鋼管