1、基因工程的課堂應用試題2016一真題1根據基因工程的有關知識，回答下列問題：？(1 )限制性內切酶切割DNA分子后產生的片段，其末端類型有(2 )質粒運載體用EcoR I切割后產生的片段如下：AATTCGG CTTAA為使運載體與目的基因相連，含有目的基因的DNA除可用EcoR I切割外，還可用另一種限制性內切酶切割，該酶必須具有的特點是 o(3) 按其來源不同，基因工程中所使用的 DNA連接酶有兩類，即 DNA連接酶和DNA連接酶。(4) 反轉錄作用的模板是 ,產物是 o若要在體外獲得大量反轉錄產物，常采用 技術。(5 )基因工程中除質粒外， 和也可作為運載體。(6)若用重組質粒轉化大腸桿菌

2、，一般情況下，不能直接用未處理的大腸桿菌作為受體細胞，原因是o_2已知生物體內有一種蛋白質 (P),該蛋白質是一種轉運蛋白，由305個氨基酸組成。 如果將P分子 中158位的絲氨酸變成亮氨酸，240位的谷氨酰胺變成苯丙氨酸，改變后的蛋白質(PJ不但保留P的功能，而且具有了酶的催化活性。回答下列問題：從上述資料可知，若要改變蛋白質的功能，可以考慮對蛋白質的 進行改造。以P基因序列為基礎，獲得P】基因的途徑有修飾 基因或合成 基因。所獲得的基因表達時是遵循中心法則的，中心法則的全部內容包括 的復制；以及遺傳信息在不同分子之間的流動，即：。蛋白質工程也被稱為第二代基因工程，其基本途徑是從預期蛋白質功

3、能出發，通過和，進而確定相對應的脫氧核昔酸序列，據此獲得基因，再經表達、純化獲得蛋白質，之后還需要對蛋白質的生物進行鑒二練習題3生物分子間特異性結合的性質廣泛用于生命科學研究。以下實例為體外處理“蛋白 質？ DNA復合 體”獲得DNA片段信息的過程圖。蛋白質(DDNA酶ATGCTTC 測岸-TACGAAG -據圖回答:(1)過程酶作用的部位是鍵，此過程只發生在非結合區 DNA,過程酶作用的部位是鍵0（2） 、兩過程利用了酶的 特性。（3） 若將得到的DNA片段用于構建重組質粒，需要過程的測序結果與酶的識別序列進行對 比，以確定選用何種酶。（4）如果復合體中的蛋白質為 RNA酶聚合，則其識別、結

4、合 DNA序列區為基因的4.已知甲種農作物因受到乙種昆蟲危害而減產，乙種昆蟲食用某種原核生物分泌的丙種蛋白質后死亡。因此，可將丙種蛋白質基因轉入到甲種農作物體內，使甲種農作物獲得抗乙種昆蟲危害的能力。回答下列問題：（1） 為了獲得丙中蛋白質的基因，在已知丙種蛋白質氨基酸序列的基礎上，推測出丙中蛋白質的 序列，據此可利用 方法合成目的基因。獲得丙中蛋白質的基 因還可用、方法。（2）在利用上述丙中蛋白質基因和質粒載體構建重組質粒的過程中，常需使用酶和0（3）將含有重組質粒的農桿菌與甲種農作物的愈傷組織共培養,篩選出含有丙種蛋白質的愈傷組織，由該愈傷組織培養成的再生植株可抵抗的危害。（4） 若用含有

5、重組質粒的農桿菌直接感染甲種農作物植株葉片傷口，則該植株的種子 （填“含有”或“不含”）丙種蛋白質基因。5紅細胞生成素（EPO）是體內促進紅細胞生成的一種糖蛋白，可用于 治 療腎衰性貧血等疾病。由于天然 EPO來源極為有限，目前臨床上使用的紅 細胞生成素主要來自于基因工程技術生產的重組人紅細胞生成素（rhEPO），其簡要生產流程如右圖。請回答：（1） 圖中所指的是技術。（2） 中所指的物質是 ,所指的物 質是提取核DNA人臉胎干細胸n擴培堤取CDNA文療歸選中國倉1卵聲細胞糸（CHO）高效表達出的重組 CHO細 胞純化二小考題6肺細胞中的let-7基因表達減弱，癌基因RAS表達增強，會引發肺癌

6、。研究人員利用基因工程技術將let? 7基因導入肺癌細胞實現表達，發現肺癌細胞的增殖受到抑制。該基因工程技術基本流程如圖1。請回答:小?1傳ft) 3養miW RAS(1)進行過程時，需用 酶切開載體以插入let? 7基因。載體應用RNA聚合酶識別和結合的部位，以驅動let? 7基因轉錄，該部位稱為(2 )進行過程時，需用 酶處理貼附在培養皿壁上的細胞，以利于傳代培(3 )研究發現，let? 7基因能影響癌基因RAS的表達，其影響機理如圖2。據圖分析,可從細胞提取進行分子雜交，以直接檢測Iet-7基因是否轉錄。肺癌細胞增殖受到抑制，可能是由于細胞中 (RASmRNA/RAS蛋白)含量減少引起的

7、7為擴大可耕地面積，增加糧食產量，黃河三角洲等鹽堿地的開發利用備受關注。我3! 處。（填 “ a或 “ b：6石卞a作探針進行分子雜交檢國科學家應用耐鹽基因培育出了耐鹽水稻新品系。5,(1)獲得耐鹽基因后，構建重組 DNA分子所用的限制性內切酶作 b : I用于圖中的 , DNA連接酶作用于(1)將重組DNA分子導入水稻受體細胞的常用方法有農桿菌轉化法和法(4) 為了確定耐鹽轉基因水稻是否培育成功，既要用放射性同位素標記的測，又要用 法從個體水平鑒定水稻植株的耐鹽性。8天然釀酒酵母菌通常缺乏分解淀粉的酶類，用作發酵原料的淀粉需經一系列復雜的 轉化過程才能被 利用。研究者從某絲狀真菌中獲取淀粉酶

8、基因并轉人釀酒酵母菌，獲得的 釀酒酵母工程菌可直接利用淀粉 產生酒精。請回答下列問題：(1) 淀粉酶基因切割下來所用的工具是 ，用將淀粉酶基因與載體拼接成新的DNA分子，下一步將該DNA分子,以完成工程菌的構建。(2) 要鑒定淀粉酶基因是否插人釀酒酵母菌，可采用的檢測方法是 ;若要鑒定淀粉酶基因是否翻譯成淀粉酶，可采用 檢測。將該工程菌接種在含淀粉的固體的原因平板培養基上，培養一定時間后，加入碘液，工程菌周圍出現透明圈，請解釋該現象發生 一 基因工程高考真題1 （1）平末端和粘性末端 （2 ）切割產生的DNA片段末端與EcoR I切割產生的相同（3） T4 Ecoli （ 4 ） mRNA 單

9、鏈 DNA P C R （聚合酶鏈式反應） （5 ）動植物病毒 X 噬菌體的衍生物 （ 6 ）未處理的 大腸桿菌吸收質粒（外源 DNA） 的能力極弱2【答案】 （1）氨基酸序列（或結構） （ 1 分，其他答案合理也給分）（2） P Pl（每空 2 分，共 4 分） DNA 和 RNA （或遺傳物質） （2 分） DNA-RNA 、 RNADNARNA-蛋白質（或轉錄、逆轉錄、翻譯） （3分）（ 3）設計蛋白質的結構 推測氨基酸序列（每空 2 分，共 4 分） 功能（1 分）3【答案】 （ 1 ）磷酸二酯，肽（ 2） 專一性（ 3） 限制性核酸內切酶（ 4） 啟動子（或轉錄起始區）4 （ 1） 基因 化學 基因文庫 PCR （ 每空 2 分，共 8 分，其他合理答案也給分）（ 2） 限制 DNA 連接（每空 1 分，共 2 分）（ 3） 乙種昆蟲 （2分）（ 4） 不含（ 3 分）。5【答案】 （10分）（ 1 ） PCR（ 2） mRNA； rhEPO6【答案】 （ 1 （） 分）（ 1 ） 限制性核酸內切酶（或限制）啟動子（ 2） 胰蛋白（