1、課題2 土壤中分解尿素的細菌的分離與計數* * GGGGUTiSHEWG Jf/NKOWGJI基礎鞏固11在微生物學中，將允許特定種類的微生物生長，同時抑制或者阻止其他種類微生物生長的培養基稱做（）A.鑒別培養基B加富培養基C.選擇培養基D.基礎培養基解析:選擇培養基可選擇目標微生物，同時抑制或阻止其他微生物生長。答案：C匚2測定土壤中某細菌和真菌數量的過程中，和真菌相比，細菌需要選用稀釋倍數更高的稀釋液進行平板培養的原因是（）A.細菌個體小，真菌個體大B.細菌易稀釋，真菌不易稀釋C.在土壤中細菌比真菌多D.隨機的，沒有原因解析:在土壤中，細菌比真菌多，所以為了確保獲得菌落數在30300之間的

2、培養平 板，測定細菌數量時一般選用104、105和106倍的稀釋液進行平板培養，而測定真 菌數量時一般選用102、103和104倍的稀釋液進行平板培養。答案：C匚3下列能選擇出分解尿素的細菌的培養基是（）A.KH 2P。4、Na2HPO4、MgS04 7H2。、葡萄糖、尿素、瓊脂、水B.KH2P04、Na2HPO4、MgS04 7H2O、葡萄糖、瓊月旨、水C.KH2P。4、Na2HPO4、MgS04 7H2。、尿素、瓊月旨、水D.KH2P04、Na2HPO4、MgS04 7H2O、牛肉膏、蛋白陳、瓊脂、水解析:分解尿素的細菌能利用尿素，因此選擇培養基中應只有尿素這一種氮源。此外，培養基中還應含

3、有碳源。答案：AI4能夠測定樣品活菌數的方法是（）A.稀釋涂布平板法B.直接計數法C.重量法D.比濁法解析:利用稀釋涂布平板法能夠在不影響細菌生存的情況下將細菌個體從固體培養基上分離出來，并可根據菌落數測定出樣品活菌數，故稀釋涂布平板法可用于測 定樣品活菌數。直接計數法計得的是活菌和死菌的總和。答案：AI 5下列關于微生物分離和培養的敘述，錯誤的是（）A.微生物培養前，需對培養基進行消毒B.測定土壤樣品中的細菌數目，常用菌落計數法C.分離土壤中不同的微生物，要采用不同的稀釋度D.分離能分解尿素的細菌，要以尿素作為培養基中唯一的氮源解析:微生物培養前，需對培養基進行滅菌，而不是消毒；測定土壤樣品

4、中的細菌數 目，常用菌落計數法，而一般不用活菌計數法；分離土壤中不同的微生物，要采用不 同的稀釋度以便能選擇出菌落數在30300的平板進行計數；分離能分解尿素的細 菌，要以尿素作為培養基中唯一的氮源。答案：A匚6下列是關于 檢測土壤中細菌總數”實驗操作的敘述，錯誤的是（）A.用蒸儲水配制牛肉膏蛋白陳培養基，經高溫、高壓滅菌后倒平板B.取104,105,106倍的土壤稀釋液和無菌水各0.1 mL,分別涂布于各組平板上C.將實驗組和對照組平板倒置,37 C恒溫培養2448 hD.確定對照組無菌后，選擇菌落數在300以上的實驗組平板進行計數解析:檢測土壤中細菌總數時，用蒸儲水配制牛肉膏蛋白陳培養基，

5、經高溫、高壓滅 菌后倒平板；取104,105,106倍的土壤稀釋液和無菌水各0.1 mL,分別涂布于各組平 板上，將實驗組和對照組平板倒置，37 C恒溫培養2448 h0在確定對照組無菌后, 選擇菌落數在30300的平板進行計數。答案:D匚7下列屬于菌種鑒定重要依據的是（）A.細菌的大小、形狀和顏色B.菌落的大小、形狀和顏色C.有無鞭毛D.培養基的不同解析:不同種類的細菌所形成的菌落在大小、形狀、光澤度、顏色、硬度、透明 度等方面具有不同的特征，所以，每種細菌在一定條件下所形成的菌落，可以作為 菌種鑒定的重要依據。單個的細菌用肉眼是看不見的，故細菌的個體特征不能作為菌種鑒定的依據。答案:B。8

6、若大腸桿菌和圓褐固氮菌混合在一起，采用下列哪組培養基可將它們分離？（）A.加食鹽的培養基和牛肉膏蛋白陳培養基B.伊紅美藍培養基和無氮培養基C.斜面培養基和液體培養基D.加青霉素的培養基和液體培養基解析:大腸桿菌的代謝產物可與伊紅美藍結合，使菌落呈黑色；圓褐固氮菌能自行 固氮，可用無氮培養基選擇。答案:BJ 9某小組同學為了調查湖水中細菌的污染情況而進行了實驗。實驗包括制備培養基、滅菌、接種及培養、菌落觀察計數。請回答與此實驗相關的問題。培養基中含有的蛋白陳、淀粉分別為細菌提供了 和。除此之外，培養基還必須含有的基本成分是 和。(2)對培養基進行滅菌，應該采用的方法是 。(3)為了盡快觀察到細菌

7、培養的實驗結果，應將接種了湖水樣品的平板置于 中培養，培養的溫度設定在37 Co要使該實驗所得結果可靠，還應該同時在另一 平板上接種 作為對照實驗。培養20 h后，觀察到平板上有形態和顏色不同的菌落，這說明湖水樣品中有 一 (填""或多")種細菌。一般說來，菌落總數越多，湖水遭受細菌污染的程度 (5)如果提高培養基中NaCl的濃度，可以用于篩選耐 細菌，這種培養 基被稱為 0解析:(1)蛋白陳來源于動物材料，含有維生素、糖和有機氮等營養物質，主要是為微 生物提供氮源。培養微生物的培養基一般都含有水、碳源、氮源、無機鹽。(2)實驗室的滅菌方法一般有灼燒滅菌(適合于接

8、種工具的滅菌卜干熱滅菌(適合于耐 高溫的、需要保持干燥的物品的滅菌)、高壓蒸汽滅菌(適合于培養基等的滅菌)。 (3)要想使微生物快速繁殖，就要將平板置于適宜的條件下，特別是溫度要適宜，所 以要置于恒溫培養箱中。對照組應接種無菌水，以排除其他因素的干擾。(4)不同 的細菌形成的菌落具有不同的形態，細菌菌落的特征是識別不同細菌的主要依據。 菌落一般是由一個細菌細胞繁殖而來的，菌落多則說明細菌的數目多。(5)加入了 特定的物質，用于篩選各種特定細菌的培養基就是選擇培養基。例如,加入了 NaCl 就可以用于篩選耐鹽細菌。答案：(1)氮源(碳源，不作要求)碳源 無機鹽 水(2)高壓蒸汽滅菌法(3)恒溫培

9、養箱無菌水多高(5)鹽(或NaCl) 選擇培養基匚10請回答下列與大腸桿菌有關的問題。(1)大腸桿菌的同化作用類型是 。(2)下表是某公司研發的一種檢測大腸桿菌菌群的培養基的配方。成分含量/g蛋白陳10.0乳糖5.0OS5.0K2HPO42.0顯色劑0.2瓊脂12.0將上述物質溶解后，用蒸儲水定咨到1 000 mL根據用途劃分該培養基屬于 (填選擇”或鑒別”)培養基。該培 養基中的碳源是_。（3）培養大腸桿菌時，為防止雜菌污染，需對培養基和培養皿進行 。現有1 L水樣，用無菌吸管吸取1 mL轉至盛有9 mL無菌水的試管中，依次稀釋 到103稀釋度。各取0.1 mL已稀釋103倍的水樣分別接種到

10、3個培養基上培養, 一段時間后記錄的菌落數分別為 55,56,57,則每升原水樣中大腸桿菌數為 0解析:（1）大腸桿菌不能制造有機物，必須利用現成的有機物來合成組成自身的物 質屬于異養型生物。（2）根據題表中培養基的配方可看出，該培養基中添加了顯色 劑，可判斷此培養基為鑒別培養基。（3）培養大腸桿菌等微生物時，為防止雜菌污染, 需要對培養基和培養皿進行滅菌。（4）根據公式計算：每升原水樣中大腸桿菌數 =（55+56+57）+3+0.1 103M03=5.6 漢08。答案：（1）異養型鑒別乳糖、蔗糖（蛋白陳）（3）滅菌（4）5.6 1 治8能力提升J1下列操作需要在酒精燈火焰旁進行的有（）土壤取

11、樣稱取土壤稀釋土壤溶液涂布平板微生物的培養A.B.C.D.解析:除了土壤取樣和微生物的培養不便于在酒精燈火焰旁進行外，其他均要在酒精燈火焰旁進行，以防止雜菌污染。答案:DC 2下列關于能分解尿素的細菌的說法，正確的是（）A.該細菌能分解尿素的原因是其能合成蛋白酶B.分離該細菌時以尿素作為唯一碳源C.含有大量尿素的環境誘導該細菌產生了分解尿素的特性D.用以尿素為唯一氮源且添加了酸堿緩沖劑的培養基培養該細菌，不會使酚紅指示劑變紅解析:酶具有專一性，分解尿素的細菌之所以能分解尿素是因為它能合成并分泌月尿 酶;分離能分解尿素的細菌時以尿素作為唯一氮源；環境中含有的大量的尿素對分 解尿素的細菌起了選擇作

12、用，而非誘導作用；該菌產生的月尿酶把尿素分解為氨后， 使pH升高,可使酚紅指示劑變紅，但添加酸堿緩沖劑后，阻止了 pH的升高，因此培 養基中酚紅指示劑不變紅。答案:D匚3從土壤中分離分解尿素的細菌的實驗過程如下圖所示。下列有關敘述錯誤的是（） 習.基I樣山 土壤凌腫山4培養一現-IA.選肥沃、濕潤的土壤，在距表層3 cm的深處取樣B.圖中A應為加入蒸儲水 舊應為高壓蒸汽滅菌C.統計土樣中尿素分解菌的活菌數目宜采用稀釋涂布平板法接種D.在加入酚紅的鑒別培養基上，有紅色環帶出現的是尿素分解菌解析:土壤樣品的溶解和稀釋應用無菌水，A應為加入無菌水制得土壤浸出液 舊應 為對土壤浸出液進行梯度稀釋。土壤

13、樣品不能滅菌處理，滅菌會導致其中的細菌等全部死亡。答案:BJ 4下列不屬于微生物計數方法的是（）A.平板劃線法B.稀釋涂布平板法C.顯微鏡直接計數D.濾膜法解析:平板劃線法可用于菌種的純化和分離，不能用于計數。稀釋涂布平板法常用 來統計樣品中活菌的數目，顯微鏡直接計數也是測定微生物數量的常用方法。濾 膜法常用于檢測水樣中大腸桿菌的數目，通常是將已知體積的水樣過濾后，將濾膜 放到伊紅美藍培養基上培養，根據培養基上黑色菌落的數目，計算出水樣中大腸桿 菌的數量。答案：A匚5將硝化細菌接種到下列培養基中，其中可以長出硝化細菌菌落的是（）A.無氮培養基，試管密閉B.無氮培養基，試管口用棉塞塞住C.含氮（

14、無機氮源）培養基，試管密閉D.含氮（無機氮源）培養基，試管口用棉塞塞住解析:硝化細菌是自養需氧型微生物，利用的是無機氮源，因此培養硝化細菌需要 含無機氮源的培養基，試管口應用棉塞塞住。答案:D匚6篩選”是生物學中培育生物新類型常用的手段。下列做法不可能篩選成功的 有（）A.在無氮培養基上篩選圓褐固氮菌B.在不含精氨酸的培養液中篩選能合成精氨酸的微生物C.用含青霉素的培養基篩選酵母菌和霉菌D.用不含碳源的培養基篩選根瘤菌解析:根瘤菌是異養型生物，在不含碳源的培養基上不能生長。答案:D匚7實驗測定鏈霉素對3種細菌的抗生素效應，用3種細菌在事先準備好的瓊脂 塊平板上畫3條平行線（3條線均與下圖中的鏈

15、霉素帶接觸），將平板置于37 c條 件下恒溫培養3 d,結果如下圖所示。根據實驗結果分析以下敘述，錯誤的是（ ）瓊脂培養基站櫬*卜前A.鏈霉素能阻止結核桿菌的生長B.鏈霉素對結核桿菌的抑制作用比對霍亂菌更有效C.鏈霉素對結核桿菌的抑制作用比對傷寒桿菌更有效D.鏈霉素可以用于治療傷寒病人解析:由題圖可知，鏈霉素能阻止霍亂菌和結核桿菌的生長繁殖，不能阻止傷寒桿 菌的生長繁殖，所以它不能用于治療感染傷寒桿菌的病人。鏈霉素對結核桿菌的 抑制作用比對霍亂菌更有效。答案:DJ 8高溫淀粉酶在大規模工業生產中有很大的實用性。研究者從熱泉中篩選了能 高效產生高溫淀粉酶的嗜熱菌，其篩選過程如下圖所示?；卮鹣铝袉?/p>

16、題。、藤活悔 冽定中熱菊神晶過程稱為，過程是為了。(2)1號培養基稱為 (按功能分)；該培養基中除了加入淀 粉外，還需加入的另一種重要的營養成分為 。A.瓊脂B.葡萄糖C.硝酸俊D.碳酸氫鈉一般要對配制的培養基進行高壓滅菌，其中 高壓”是為了。 解析：(1)圖示中過程后試管中單位體積內微生物數量減少，所以過程稱為稀 釋。過程是將試管內液體培養基中的微生物涂布在培養皿中的固體培養基上，所以過程是為了篩選單個菌落。(2) I號培養基的功能是篩選，所以為選擇培養 基。該培養基中除了加入淀粉外，還需加入另一種重要的營養成分 硝酸俊，以 作為培養微生物的氮源。(3)一股要對配制的培養基進行高壓蒸汽滅菌，

17、其中高壓 是為了殺死培養基中的芽抱。答案：(1)稀釋 篩選單個菌落(或篩選)選擇培養基C(3)殺死培養基中的芽抱I9苯酚及其衍生物廣泛存在于工業廢水中，對環境有嚴重危害。小明同學準備 依據下圖操作步驟，從處理廢水的活性污泥中分離篩選酚降解高效菌株。請回答 下列問題。潔卷片泥豆疑培養1U酚降解菌富集培養基含有蛋白陳、K2HPO4、MgSO4、苯酚和水,其中可作為碳 源的有。(2)將采集到的樣品接種培養，苯酚用量應隨轉接次數增加而逐漸，以達到富集酚降解菌的目的。若上圖平板中菌落過于密集，應進一步以便于菌落計數與分離。制備平板培養基時除了需要水、營養物質外，還必須添加。下圖為連續劃線法示意圖，在圖中

18、(填圖中序號)區域更易獲得單菌落。采用比色測定法（使用苯酚顯色劑）檢測降解后的廢水中苯酚殘留量。先制作系 列濃度梯度并進行顯色反應，下表中15號比色管的苯酚濃度應分別為。管號123456苯酚濃度/（mg L-1）1如果廢水為50 mg/L苯酚溶液，降解后約有21%的苯酚殘留，則需將殘留液稀釋_ （填序號:51020股后,再進行比色。解析：（1）培養基中的營養物質一般都包括水、無機鹽、碳源、氮源 ，蛋白豚和苯酚中含有C元素,可作為碳源。（2）要富集該菌，應提高其主要營養物質的含量。若菌 落過于密集，說明稀釋倍數不夠，應進一步稀釋，再涂布平板。制備固體培養基時需 加入凝固劑瓊脂。（3）用平板劃線法接種菌體時，隨劃線次數的增加，菌體數量逐漸 減少,故區域更易獲得單菌落。（4）題中已給出6號比色管中的苯酚濃度為1 mg/L,根據濃度梯度的設計原則和空白對照原則，15號比色管中的苯酚