1、.酶催化反應的動力學第三節酶催化反應的動力學復習題問：略新授：I酶反應動力學的概念：研究酶促反應速度及其影響因素（哪些因素影響、如何影響）稱酶促反應動力學。H酶反應動力學的影響因素：酶濃度、底物濃度、pH、溫度、抑制劑及激活劑等。一、底物濃度對反應速度的影響當其它條件在最適、不變情況下（課本P33圖3 5）(or Km)S較低時，與S呈正比，即呈直 線關系。 當S增加至一定程度時,v隨S 增加而提高，不呈直線關系。S再增加，v達到最大 V max o（一）米曼氏方程式：1 .概念：酶促反應速度與底物濃度 關系的數學方程式。2 .方程式："+S說明：Vmax為最大反應速度，S為底物濃度

2、，Km為米氏常數v是在不同S時的反應速度當底物濃度很低時，V = Vmax *S / Km ,反應速度與底物成正比；反之，v白Vmax ,反應速度達最大；再增加底物濃度，反應速度不受影響。3 . Km概念：反應速度達到最大反應速度一半時的作用物濃度。述：Km是酶的特征性常數，表示酶與作用物的親和力大小。Km越大，酶與作用物的親和力越小。同工酶的Km不同。4 .米氏方程應用酶的鑒定一一根據Km相同與否判定是否同一個酶酶的純化一一根據Km穩定與否 判定酶是否被純化計算欲使反應速度達到某一特定 反應速度時的合理S（二）Km的意義1. Km值等于酶促反應速度達到Vmax 一半時的作用物濃度2. Km值

3、可反映酶對底物的親和 力，兩者呈反比3. Km值是酶的特征性常數之一，只與酶的結構、底物和反應環境（如溫度、pH、離子強度） 有關，與酶濃度無關。:、酶濃度對反應速度的影響（課本 P33 圖 36)述：在酶促反應系統中，當 S足夠 大時，v8E。三、溫度對反應速度的影響1 .兩者聯系：溫度對酶促反應的具有雙重影響。升高溫度可 加快酶促反應速度， 同時也 增加酶變性的機會。述：溫度升高到 60 c以上時，大多 數酶開始變性；80 c時，多數酶 的變性已不可逆。2 .最適溫度概念：酶催化活性最大時的環境 溫度述：人體組織中酶的最適溫度一般在 37-40C影響因素：反應時間相互關系酶可以在較短的時間

4、內耐受較高的溫度；相反，延長反應時間，最適溫度變降低。環境溫度高于最適溫度時，反應速度則因酶的變性而降低。低溫能降低酶活性，但一般不破壞酶；溫度回升后，酶又可以恢復活 性。3 .臨床應用：低溫麻醉；低溫保存 菌種；酶制劑的保存四、pH對反應速度的影響1 .原因：在不同的pH值條件下，酶 分子的許多極性基團呈不 同的解離狀態，而酶活性中 心的必需基團往往僅在某 一解離狀態時才最易同底 物結合或具有最大的催化作用。所以，pH值的改變 對酶的催化作用影響很大。2 .最適pH概念：酶催化活性最大時的環境PH述：胃蛋白酶的最適 pH1.5,精氨酸 酶則為9.0。影響因素：底物濃度、緩沖液的種 類與濃度、

5、酶的純度等相互關系溶液的pH值高于或低于最適 pH時，酶活性降低；遠離最適 pH時，會導致酶的變性失活。述：在測定酶的活性時，應選用適宜的緩沖液以保持酶活性的相對恒定。五、抑制劑（I）對反應速度的影響I概念：凡能降低酶的活性而本身不引起酶蛋白變性的物質H種類：見下表r不可逆性抑制印制競爭性抑制可逆性抑制 , 非競爭性抑制反競爭性抑制（一） 不可逆性抑制1.概念：其抑制劑通常與酶活性中心上的必需基團以共價鍵 相結合而使酶失活的抑制作 用。2 .此抑制劑不可用透析法去除3 .舉例：有機磷農藥中毒 如605、敵百蟲、DDV等。述：這類抑制劑與酶活性中心的內、外的必需基團形成牢固不可逆的共價結合。重金

6、屬和碑制劑與琉基酶結合，故可用BAL （二疏基丙醇）急救。（二）可逆性抑制I概念：其抑制劑通過非共價鍵與 酶和（或）酶-底物復合物可 逆性結合而使酶活性降低或消 失的抑制作用。n抑制劑去除方法：透析法或超濾 法m種類1 .競爭性抑制概念：有些抑制劑與酶的底物結 構相似，可與底物競爭酶活性 中心，從而阻礙酶與底物結合 成中間產物的抑制作用。特點：I與s結構相似，與 S 競爭結合E的同一部位。抑制程度取決于I/S 值及I與E的的親和力。動力學特點：Vmax不變，Km增 加 舉例：丙二酸（P35） 應用：用以闡明某些藥物的作用機制（P35）如磺胺類藥物2 .非競爭性抑制概念：底物與抑制劑之間無競爭關

7、系，但酶-底物一抑制劑復 合物不能進一步釋放出產物的 抑制作用。特點：I與S結構不相似，結合酶部位與 S不同，與酶活 性中心外必需基團結合，引起 酶構象改變。抑制程度只與I有關。動力學特點： Vmax減小，Km 不 變舉例：哇巴因六、激活劑對酶反應速度的影響1 .概念：使酶從無活性變為有活性 的或使酶活性增加的物質述：如金屬離子、氯離子等，它們都 能使酶活性增強。2 .種類必需激活劑概念：對酶促反應不可缺少的大多數金屬離子激活劑舉例：Mc2+非必需激活劑概念：不存在時，酶仍有一定催 化活性的某些激活劑舉例：Cl-課外作業：一、名解：酶的最適溫度 ；酶的最適 pH ;不可逆性抑制；可逆性抑制；競爭性抑制二、簡答：1 .