1、海洋植物木果楝種子化學(xué)成分的研究霍長虹，尹寶偉，沈立茹，趙雷，董玫，史清文，王永利（河北醫(yī)科大學(xué) 藥學(xué)院，河北 石家莊 050017）摘 要: 目的 研究海洋植物木果楝 Xylocarpus granatum Koenig 種子的化學(xué)成分。方法 采用色譜法分離，根據(jù)化合物理化性質(zhì)和波譜分析鑒定其結(jié)構(gòu)；用MTT法測定單體化合物的抗腫瘤活性。 結(jié)果 從木果楝種子中分離鑒定了16個(gè)化合物，分別為過氧化麥角甾醇 (1)，xylocarpin G (2)，xylocarpin H (又名granaxylocarpin B, 3)，xylogranatin C (4)，3-detigloyoxy-2-me

2、thylbutanoyloxy xylogranatin B (5)，xylogranatin D (6)，hispidol B (7)，東莨菪葶 (8)，b-谷甾醇 (9)，胡蘿卜苷 (10)，xylomexicanin A (11)，odoratone (12)，xylomexicanin B (13)，piscidinol G (14)，spicatin (15)，7-deacetyl-7-oxogedunin (16)。結(jié)論 化合物11和13為新化合物，化合物1，7，8，12和14為首次從木果楝屬植物中分離得到，化合物16為首次從木果楝中分離得到。化合物3，4，11，14對人腫瘤細(xì)胞株

3、HLE，Hela，KT顯示了不同程度的抑制活性。關(guān)鍵詞: 木果楝；種子；化學(xué)成分；MT T木果楝Xylocarpus granatum Koenig為一種生長在熱帶沿海地帶的海洋紅樹林植物，屬楝科木果楝屬，主要分布于亞洲和非洲的熱帶海岸及大洋洲北部，在我國海南省亦有分布。海南民間用其種皮治赤痢，種仁用作滋補(bǔ)品1。在東南亞國家民間用其治療腹瀉，霍亂和由瘧疾引起的發(fā)燒，還可用做昆蟲據(jù)食劑2。戴好富等報(bào)道木果楝的醋酸乙酯提取物對腫瘤 HeLa 細(xì)胞生長具有抑制活性3。為研究與開發(fā)該植物的有效成分，我們對其化學(xué)成分進(jìn)行了研究，此論文報(bào)道從木果楝種子中分離并鑒定了16個(gè)化合物：過氧化麥角甾醇 (1)，x

4、ylocarpin G (2)，xylocarpin H (又名granaxylocarpin B, 3)，xylogranatin C (4)，3-detigloyoxy-2-methyl- butanoyloxy xylogranatin B (5)，xylogranatin D (6)，hispidol B (7)，東莨菪葶 (8)，b-谷甾醇 （9），胡蘿卜苷 (10)，xylomexicanin A (11)，odoratone (12)，xylomexicanin B (13)，piscidinol G (14)，spicatin (15)，7-deacetyl-7-oxogedu

5、nin (16)。其中化合物11和13為新化合物，1，7，8，12和14為首次從木果楝屬植物中分離得到，16為首次從木果楝中分離得到。同時(shí)采用MTT法評價(jià)了單體化合物對人腫瘤細(xì)胞株HLE，Hela，KT的抑制作用，3，4，11和14對上述細(xì)胞顯示了不同程度的抑制活性。1 儀器與材料X4型顯微熔點(diǎn)測定儀（溫度未校正）；APEX 型傅立葉變換離子回旋質(zhì)譜儀；Varian INOVA-500型核磁共振波譜儀（TMS為內(nèi)標(biāo)）；Waters制備高效液相色譜儀（600泵和2487紫外檢測器，Whatman partisil 10 ODS-2，9.5 × 250 mm）；薄層色譜及柱色譜用硅膠（青

6、島海洋化工廠產(chǎn)品）。木果楝種子采于海南省，由廈門大學(xué)生命科學(xué)學(xué)院王文卿教授鑒定為X. granatum。2 提取與分離木果楝種子粗粉3 kg，用95 %乙醇滲漉提取，滲漉液減壓濃縮后用適量水溶解，依次以石油醚、二氯甲烷、醋酸乙酯、正丁醇萃取，得到相應(yīng)萃取物。二氯甲烷萃取物65.8 g經(jīng)硅膠柱色譜分離（石油醚-丙酮梯度洗脫），共得到10個(gè)部份（Fr. 110）。Fr. 2經(jīng)反復(fù)重結(jié)晶得到化合物9（124.6 mg）。Fr. 3經(jīng)反復(fù)硅膠柱色譜分離純化得化合物1（4.6 mg）。Fr. 5析出白色晶體，再經(jīng)制備HPLC（甲醇：水 = 60：40）純化得到化合物3（35.0 mg）和化合物11 (1

7、0.0 mg)。Fr. 10經(jīng)反復(fù)重結(jié)晶得到化合物10（216.0 mg）。Fr. 6經(jīng)反復(fù)硅膠柱色譜和葡聚糖凝膠色譜分離純化得化合物4（105.1 mg），5（70.2 mg），12（35.0 mg）和16（38.1 mg）。Fr. 7經(jīng)反復(fù)硅膠柱色譜和制備HPLC純化得化合物2（7.6 mg），6（14.7 mg），13（3.2 mg）。Fr. 9經(jīng)反復(fù)硅膠柱色譜和葡聚糖凝膠色譜分離純化得化合物7（4.5 mg），8（4.6 mg），14（8.2 mg），15（60.0 mg）。3 結(jié)構(gòu)鑒定化合物1：白色針狀晶體（丙酮）；1H-NMR（500 MHz，CDCl3）：0.81(3H，s，H-

8、18)， 0.81(3H，d，J = 6.8 Hz，H-21)，0.83(3H，d，J = 7.5 Hz，H-27)，0.88(3H，s，H-19)，0.91(3H，d，J = 7.0 Hz，H-26)，1.00(3H，d，J = 6.5 Hz，H-28)，3.96(1H，m，H-3)，5.13(1H，dd，J = 15.5，8.0 Hz，H-22)，5.22(1H，dd，J = 15.5，7.5 Hz，H-23)，6.25(1H，d，J = 8.5 Hz，H-6)，6.51(1H，d，J = 8.5 Hz，H-7)。13C-NMR（125 MHz，CDCl3）：34.6(C-1)，30.1(

9、C-2)，66.4(C-3)，36.9(C-4)，82.1(C-5)，135.4(C-6)，130.7(C-7)，79.4(C-8)，51.0(C-9)，36.9(C-10)，23.4(C-11)，39.3(C-12)，44.5(C-13)，51.6(C-14)，20.6(C-15)，28.6(C-16)，56.1(C-17)，12.8(C-18)，18.2(C-19)，39.7(C-20)，20.9(C-21)，135.2(C-22)，132.3(C-23)，42.7(C-24)，33.0(C-25)，19.9(C-26)，19.6(C-27)，17.5(C-28)。以上數(shù)據(jù)與文獻(xiàn)報(bào)道的過氧

10、化麥角甾醇一致4。化合物2：白色粉末（甲醇），UV (甲醇) lmax nm 215；1H-NMR（500 MHz，CDCl3）：0.82(3H，s，H-28)，1.07(3H，s，H-19)，1.21(3H，s，H-18)，1.26(3H，s，H-29)，1.40(1H，dd，J = 13.5，8.5 Hz，H-12)，1.79(1H，m，H-11)，1.80(3H，d，J =8.5 Hz，H-4)，1.78(3H，m，H-5)，1.90(s，3-OCOCH3)，2.14(1H，m，H-9)，2.16(1H，d，J =16.5 Hz，H-6b)，2.17(1H，m，H-12)，2.38(1H

11、，m，H-11)，2.39(1H，dd，J = 16.5，10.0 Hz，H-6a)，2.70(1H，d，J = 10.0 Hz，H-5)，2.97(1H，dd，J = 9.0，4.5 Hz，H-2)，3.70(3H，s，7-OCH3)，4.98(1H，s，H-17)，5.10(1H，d，J = 9.0 Hz，H-3)，5.56(1H，d，J = 4.5 Hz，H-30)，6.03(1H，s，H-15)，6.42(1H，s，H-22)，6.84(1H，m，H-3)，7.41(1H，s，H-23)，7.49(1H，s，H-21)。13C-NMR（125 MHz，CDCl3）：107.4(C-1)

12、，53.1(C-2)，74.0(C-3)，37.6(C-4)，40.8(C-5)，32.0(C-6)，174.0(C-7)，81.2(C-8)，51.5(C-9)，42.9(C-10)，14.8(C-11)，24.9(C-12)，39.0(C-13)，160.1(C-14)，117.4(C-15)，163.8(C-16)，81.5(C-17)，19.4(C-18)，20.9(C-19)，119.9(C-20)，141.2(C-21)，109.9(C-22)，142.8(C-23)，24.5(C-28)，21.9(C-29)，76.5(C-30)，51.9(7-OCH3)，166.9(C-1)，

13、127.8(C-2)，138.6(C-3)，11.9(C-4)，14.5(C-5)，170.2(3-OCOCH3)，20.4(3-OCOCH3)。以上數(shù)據(jù)與文獻(xiàn)報(bào)道的xylocarpin G一致5。化合物3：白色針狀晶體（丙酮）；UV (甲醇) lmax nm 215；HREI-MS m/z 582.2471 (calcd for M+ 582.2465)。1H-NMR（500 MHz，CDCl3）：0.97(3H，s，H-18)，1.03(3H，d，J = 5.0 Hz，H-19)，1.13(3H，s，H-29)，1.20(3H，s，H-28)，1.63(1H，m，H-12)，1.83(3H

14、，d，J = 7.5 Hz，H-4)，1.85(3H，s，H-5)，2.28(1H，m，H-6a)，2.30(1H，m，H-5)，2.30(1H，m，H-10)，2.47(1H，m，H-6b)，2.53(1H，m，H-11)，2.69(1H，m，H-12)，3.08(1H，dd，J = 17.5，7.0 Hz，H-11)，3.69(3H，s，7-OCH3)，3.89(1H，s，8-OH)，5.34(1H，s，H-17)，6.09(1H，s，H-15)，6.47(1H，s，H-22)，6.60(1H，s，H-30)，6.96(1H，m，H-3)，7.01(1H，s，H-3)，7.45(1H，s，

15、H-23)，7.56(1H，s，H-21)。13C-NMR（125 MHz，CDCl3）：198.8(C-1)，128.8(C-2)，161.9(C-3)，36.8(C-4)，45.2(C-5)，34.6(C-6)，173.4(C-7)，80.3(C-8)，208.8(C-9)，42.8(C-10)，33.0(C-11)，25.5(C-12)，38.3(C-13)，163.5(C-14)，118.4(C-15)，163.3(C-16)，80.1(C-17)，18.5(C-18)，11.6(C-19)，119.7(C-20)，141.4(C-21)，109.8(C-22)，143.2(C-23)

16、，27.9(C-28)，20.5(C-29)，67.5(C-30)，52.0(7-OCH3)，166.8(C-1)，127.7(C-2)，139.9(C-3)，12.1(C-4)，14.7(C-5)。以上數(shù)據(jù)與文獻(xiàn)報(bào)道的xylocarpin H (在文獻(xiàn)6中命名為granaxylocarpin B)一致5。化合物4：白色晶體（甲醇），UV (甲醇) lmax nm 214；1H-NMR（500 MHz，CDCl3）：0.98(3H，s，H-18)，1.04(3H，d，J = 6.0 Hz，H-19)，1.12(3H，s，H-29)，1.21(3H，s，H-28)，1.65(1H，dd，J =

17、13.5，7.0 Hz，H-12)，2.11(3H，s，30-OCOCH3)，2.27(1H，m，H-6a)，2.28(1H，m，H-10)，2.29(1H，m，H-5)，2.47(1H，m，H-6b)，2.51(1H，m，H-11)，2.61(1H，m，H-12)，3.03(1H，dd，J = 19.5，6.0 Hz，H-11)，3.69(3H，s，7-OCH3)，3.89(1H，s，8-OH)，5.34(1H，s，H-17)，6.18(1H，s，H-15)，6.46(1H，d，J = 1.5 Hz，H-22)，6.54(1H，s，H-30)，7.00(1H，s，H-3)，7.44(1H，d

18、，J = 1.5 Hz，H-23)，7.55(1H，s，H-21)。13C-NMR（125 MHz，CDCl3）：198.8(C-1)，128.4(C-2)，162.0(C-3)，36.8(C-4)，45.2(C-5)，34.6(C-6)，173.4(C-7)，80.0(C-8)，208.6(C-9)，42.8(C-10)，33.0(C-11)，25.5(C-12)，38.4(C-13)，164.1(C-14)，118.2(C-15)，163.3(C-16)，80.1(C-17)，18.5(C-18)，11.6(C-19)，119.6(C-20)，141.4(C-21)，109.8(C-22)

19、，143.2(C-23)，27.8(C-28)，20.5(C-29)，67.4(C-30)，52.0(7-OCH3)，169.9(30-OCOCH3)，21.1(30-OCOCH3)。以上數(shù)據(jù)與文獻(xiàn)報(bào)道的xylogranatin C一致7。化合物5：白色晶體（甲醇），UV (甲醇) lmax nm 212；1H-NMR（500 MHz，CDCl3）：0.78(3H，s，H-28)，0.89(3H，t，J =7.5 Hz，H-4)，1.06(3H，s，H-19)，1.05(3H，d，J =7.5 Hz，H-5)，1.21(3H，s，H-18)，1.24(3H，s，H-29)，1.38(1H，m，

20、H-3b)，1.42(1H，m，H-12)，1.64(1H，m，H-3a)，1.81(1H，m，H-11)，1.99(s，30-OCOCH3)，2.11(1H，m，H-12)，2.15(1H，m，H-9)，2.16(1H，d，J = 9.5 Hz，H-6b)，2.37(1H，m，H-11)，2.38(1H，dd，J = 16.0，9.5 Hz，H-6a)，2.64(1H，d，J = 9.5 Hz，H-5)，2.93(1H，dd，J = 9.5，4.5 Hz，H-2)，3.70(3H，s，7-OCH3)，5.00(1H，s，H-17)，5.08(1H，d，J = 9.0 Hz，H-3)，5.58

21、(1H，d，J = 4.0 Hz，H-30)，6.03(1H，s，H-15)，6.42(1H，s，H-22)，7.42(1H，s，H-23)，7.49(1H，s，H-21)。13C-NMR（125 MHz，CDCl3）：107.4(C-1)，53.3(C-2)，74.0(C-3)，37.4(C-4)，40.5(C-5)，32.1(C-6)，173.9(C-7)，81.3(C-8)，51.5(C-9)，42.9(C-10)，15.0(C-11)，25.1(C-12)，38.9(C-13)，159.4(C-14)，117.7(C-15)，163.7(C-16)，81.5(C-17)，19.5(C-

22、18)，20.5(C-19)，119.9(C-20)，141.2(C-21)，109.9(C-22)，142.9(C-23)，24.5(C-28)，21.7(C-29)，76.0(C-30)，51.9(7-OCH3)，175.9(C-1)，40.9(C-2)，26.5(C-3)，11.6(C-4)，16.4(C-5)，170.0(30-OCOCH3)，20.8(30-OCOCH3)。以上數(shù)據(jù)與文獻(xiàn)報(bào)道的3-detigloyoxy-2-methylbutanoyloxy xylogranatin B一致8。化合物6：無色油狀（甲醇），UV (甲醇) lmax nm 237；1H-NMR（500

23、MHz，CDCl3）：1.08(3H，s，H-18)，1.10(3H，s，H-29)，1.15(3H，d，J = 6.5 Hz，H-19)，1.18(3H，s，H-28)，1.37(1H，m，H-12)，1.66(1H，ddd，J = 15.0，4.5，4.5 Hz，H-11)，1.79(1H，ddd，J = 15.0，15.0，4.0 Hz，H-11)，2.00(s，30-OCOCH3)，2.24(1H，m，H-12)，2.30(1H，m，H-6a)，2.31(1H，m，H-5)，2.41(1H，m，H-10)，2.49(1H，m，H-6b)，3.70(3H，s，7-OCH3)，3.78(1

24、H，s，9-OH)，5.52(1H，s，H-17)，6.27(1H，s，H-30)，6.36(1H，s，H-15)，6.50(1H，s，H-22)，7.01(1H，s，H-3)，7.45(1H，s，H-23)，7.61(1H，s，H-21)。13C-NMR（125 MHz，CDCl3）：198.6(C-1)，130.2(C-2)，161.5(C-3)，36.7(C-4)，45.2(C-5)，34.7(C-6)，173.4(C-7)，200.9(C-8)，79.6(C-9)，43.1(C-10)，29.2(C-11)，28.3(C-12)，41.4(C-13)，156.2(C-14)，121.6

25、(C-15)，163.3(C-16)，81.3(C-17)，18.6(C-18)，12.2(C-19)，119.2(C-20)，141.4(C-21)，109.7(C-22)，143.3(C-23)，28.0(C-28)，20.5(C-29)，66.4(C-30)，52.0(7-OCH3)，168.8(3-OCOCH3)，20.7(3-OCOCH3)。以上數(shù)據(jù)與文獻(xiàn)報(bào)道的xylogranatin D一致7。化合物 7：白色粉末（甲醇），UV (甲醇) lmax nm 212；ESI-MS m/z 477 M+H+。1H-NMR（500 MHz，CD3OD）：0.72(3H，s，H-18)，0.

26、79(3H，s，H-19)，0.80(3H，s，H-30)，0.89(3H，s，H-29)，0.89(3H，d，J = 6.5 Hz，H-21)，0.96(3H，s，H-28)，1.19(3H，s，H-26)，1.21(3H，s，H-27)，3.12(1H，br s，H-24)，4.01(1H，dd，J = 9.5，5.0 Hz，H-23)，5.22(1H，m，H-7)。13C-NMR（125 MHz，CD3OD）：38.6(C-1)，29.4(C-2)，79.8(C-3)，40.0(C-4)，52.2(C-5)，22.5(C-6)，119.3(C-7)，146.9(C-8)，50.5(C-9

27、)，36.0(C-10)，17.3(C-11)，34.8(C-12)，44.8(C-13)，52.4(C-14)，35.1(C-15)，28.3(C-16)，55.3(C-17)，13.6(C-18)，19.5(C-19)，35.2(C-20)，19.3(C-21)，42.2(C-22)，69.9(C-23)，76.7(C-24)，74.8(C-25)，25.0(C-26)，27.0(C-27)，27.8(C-28)，15.4(C-29)，26.8(C-30)。以上數(shù)據(jù)與文獻(xiàn)報(bào)道的hispidol B一致9。化合物 8：淺黃色針狀結(jié)晶（二氯甲烷），1H-NMR（500 MHz，CDCl3）：3

28、.96(3H，s，-OCH3)，6.15(1H，br s，7-OH)，6.27(1H，d，J = 9.5 Hz，H-3)，6.85(1H，s，H-5)，6.92(1H，s，H-8)，7.60(1H，d，J = 9.5 Hz，H-4)。13C-NMR（125 MHz，CDCl3）：161.4(C-2)，111.5(C-3)，144.0(C-4)，113.4(C-5)，143.3(C-6)，149.7(C-7)，103.2(C-8)，150.2(C-9)，107.5(C-10)，56.4(-OCH3)。以上數(shù)據(jù)與文獻(xiàn)報(bào)道的東莨菪葶一致10。化合物 9：白色針狀晶體（丙酮），mp 137 138 ，

29、Liebermann-Burchard 反應(yīng)陽性，10%硫酸乙醇溶液顯色為紫紅色。與b-谷甾醇標(biāo)準(zhǔn)品薄層色譜對照，Rf值及顯色行為均一致，且混合后熔點(diǎn)不下降，故確定為b-谷甾醇。化合物 10：白色粉末（甲醇），mp 288 290 （分解），Liebermann-Burchard 反應(yīng)陽性，Molish反應(yīng)陽性，10%硫酸乙醇溶液顯色為紫紅色。該化合物的NMR數(shù)據(jù)與文獻(xiàn)報(bào)道的胡蘿卜苷基本一致11，經(jīng)與胡蘿卜苷標(biāo)準(zhǔn)品薄層色譜對照，Rf值及顯色行為均一致，且混合后熔點(diǎn)不下降，故確定為胡蘿卜苷。化合物 11 白色晶體 (丙酮)，mp 172174 ，aD25 -27.9º (c 0.21，

30、MeOH)，UV (甲醇)lmax：212 nm，IR (KBr)nmax：3404，2984，2963，1722，1671，1369，1272，1245，1164，1151，1015 cm-1，HRFAB-MS m/z：570.2472，(calcd for M+ 570.2465)，確定分子式為C31H38O10，同時(shí)提示不飽和度為13。IR圖譜顯示，在3404和1722 cm-1 處有吸收峰，則表明羥基和酯基功能團(tuán)的存在。由其1H NMR 和13C NMR 譜可知，13個(gè)不飽和度中有9個(gè)是由4個(gè)碳碳雙鍵和5個(gè)羰基引起的，則其余的4個(gè)不飽和度推測可能是由4個(gè)環(huán)引起。從13C NMR 和 D

31、EPT圖譜上可以觀察到，化合物11有5個(gè)羰基，3個(gè)sp2 雜化的季碳原子，3個(gè)sp3雜化的季碳原子，5個(gè)sp2雜化的次甲基，5個(gè)sp3雜化的次甲基，3個(gè)sp3雜化的亞甲基和7個(gè)甲基（包括1個(gè)甲氧基）。另外，從NMR譜中還可以觀察到檸檬苦素類化合物的特征吸收峰：2個(gè)酮基 (C 198.8和 208.7)；1個(gè)羥基峰 (H 3.87, s)；1個(gè)甲氧基峰 (H 3.69，s；C 52.0) 和一個(gè)呋喃環(huán) (H 7.56，br s；7.45，br s和 6.47，br s；C 143.2，141.4，119.6 和 109.8)。以上的NMR數(shù)據(jù)和2D NMR（包括1H-1H COSY，HMQC和

32、HMBC）均表明，化合物11是一個(gè)B環(huán)開裂的墨西哥交酯類的檸檬苦素。將化合物11的NMR數(shù)據(jù)與9，10開裂的墨西哥交酯類的檸檬苦素類化合物xylogranatin C12 的NMR數(shù)據(jù)進(jìn)行對照，兩個(gè)化合物的數(shù)據(jù)基本吻合，唯一不同的是在化合物11的C-30位存在一個(gè)異丁酰基基團(tuán)H 2.56 m，1.18 (d，J = 7.0 Hz)，1.16 (d，J = 7.0 Hz)；C 175.9，34.1，19.2，18.5，而xylogranatin C的C-30位是一個(gè)乙酰基。另外，HMBC譜中的H-30 (H 6.48，s)與C-1 (C 175.9)的相關(guān)可以證明該異丁酰基存在于C-30位。NO

33、ESY譜可以幫助推測化合物11的立體構(gòu)型，H-30與H-11 (H 3.05，dd，J = 19.5，6.5 Hz)，H-12 (H 2.62，ddd，J = 14.0，14.0，7.0 Hz)的相關(guān)峰，以及H-17 (H 5.34，s)與H-12的相關(guān)峰可知H-30與H-17均為-構(gòu)型。由于從1H NMR中可以觀察到8-OH在H 3.87出現(xiàn)尖銳單峰，并且與18-Me(H 0.98，s)有強(qiáng)烈的NOESY相關(guān)，表明8-OH為a-構(gòu)型。同時(shí)，H-5(H 2.27，m)與19-Me(H 1.04，d，J = 5.5 Hz)的NOESY相關(guān)可以證明這兩個(gè)質(zhì)子處在同一平面。通過以上分析可知化合物11

34、與xylogranatin C有著相同的骨架構(gòu)型。因此，化合物11的結(jié)構(gòu)確定為30-去乙酰基-30-異丁酰基-xylogranatin C，該化合物為新化合物，命名為xylomexicanin A，其結(jié)構(gòu)式見圖1，1D及2D NMR數(shù)據(jù)見表1。化合物12 白色針狀晶體 (甲醇)，mp 236238 ，EI-MS m/z 472。1H-NMR (500 MHz，CDCl3) ：0.82(3H，s，H-18)，0.85(3H，d，J = 6.5 Hz，H-21)，1.01(3H，s，H-19)，1.04(6H，s，H-28，30)，1.12(3H，s，H-29)，1.22(6H，s，H-26，27

35、)，1.36(1H，m，H-16b)，1.46(1H，dd，J = 14.5，8.5 Hz，H-1a)，1.51(2H，dd，J = 18.0，8.0 Hz，H-15)，1.56(2H，m，H-11)，1.62(1H，m，H-12b)，1.65(1H，m，H-20)，1.72(1H，t，J = 8.5 Hz，H-5)，1.86(1H，m，H-17)，1.87(1H，m，H-12a)，2.00(1H，m，H-1b)，2.03(1H，m，H-16a)，2.09(2H，m，H-6)，2.24(1H，dt，J = 14.5，5.5Hz，H-2a)，2.28(1H，m，H-9)，2.76(1H，dt，J

36、 = 14.5，5.5Hz，H-2b)，3.67(1H，t，J = 5.5 Hz，H-24)，3.83(1H，d，J = 6.0 Hz，H-22)，3.98(1H，dd，J = 6.0，5.5 Hz，H-23)，5.31(1H，d，J = 3.0 Hz，H-7)。13C-NMR (125 MHz，CDCl3) ：38.6(C-1)，35.0(C-2)，217.1(C-3)，47.9(C-4)，52.4 (C-5)，24.3(C-6)，117.8(C-7)，146.0(C-8)，48.5(C-9)，34.9(C-10)，18.3(C-11)，33.5(C-12)，43.5(C-13)，51.2(

37、C-14)，34.0(C-15)，27.8(C-16)，49.3(C-17)，21.8(C-18)，12.8(C-19)，37.5(C-20)，12.4(C-21)，83.7(C-22)，72.9(C-23)，77.4(C-24)，80.9(C-25)，27.7(C-26)，21.3(C-27)，24.5(C-28)，21.6(C-29)，27.6(C-30)。以上數(shù)據(jù)與文獻(xiàn)報(bào)道的odoratone13,14數(shù)據(jù)基本一致。化合物13 白色晶體 (甲醇)，aD25 -21.0º (c 0.12， MeOH)，UV (甲醇) lmax：215 nm，IR (KBr)nmax：3432，2

38、967，1723，1599，1383，1026 cm-1。HRFAB-MS m/z 570.2833，(calcd for M+ 570.2829)，確定分子式為C32H42O9，提示該化合物不飽和度為12。IR圖譜在3432，2967和1723 cm-1處有吸收，表明分子結(jié)構(gòu)中存在羥基基團(tuán)，碳碳雙鍵和羰基基團(tuán)。由1H NMR和13C NMR譜可知，12個(gè)不飽和度中有7個(gè)是由3個(gè)碳碳雙鍵和4個(gè)羰基（1個(gè)酮基碳和3個(gè)酯基碳）引起的，則其余的5個(gè)不飽和度推測是由5個(gè)環(huán)引起的。13C NMR中顯示有32個(gè)碳信號(hào)，其中有7個(gè)甲基（包括1個(gè)甲氧基），5個(gè)亞甲基，10個(gè)次甲基（包括4個(gè)烯碳）和10個(gè)季碳（

39、包括4個(gè)羰基碳）。另外，NMR數(shù)據(jù)還顯示分子結(jié)構(gòu)中有如下基團(tuán)：1個(gè)酮羰基(C 217.4)，1個(gè)甲酯基(H 3.72, s；C 52.1，173.9)和1個(gè)呋喃環(huán)H 7.51，br s；7.44，br s；6.50，br s；C 143.1，141.7，119.8，110.4。從NMR和2D NMR（包括1H-1H COSY，HMQC和 HMBC）數(shù)據(jù)中可推測，化合物13是一個(gè)正常的墨西哥交酯（含有一個(gè)14,15雙鍵）類檸檬苦素。將化合物13與xylogranatin A15的NMR數(shù)據(jù)進(jìn)行比較，可知化合物13中的2'-甲基丁酰基H 2.48，m；1.73，m；1.48，m；0.97，

40、(t，J = 7.0 Hz)；1.20，(d，J = 6.5 Hz)；C 175.4，41.3，26.6，11.7，16.8 代替了xylogranatin A中的異丁酰基基團(tuán)。根據(jù)H-3的化學(xué)位移 (H 4.91，d，J = 8.0 Hz)可確定2'-甲基丁烷基與C-3相連。根據(jù)C-8的化學(xué)位移 (C 72.7)可以推測出羥基在C-8位。該化合物的立體構(gòu)型可以參考xylogranatin A來確定。在NOESY譜中可以找到H-3與29-Me的明顯相關(guān)，而不是H-3與H-5或H-3與H-30b的相關(guān)，由此可確定H-3為a-構(gòu)型。H-9 (H 1.83，d，J = 13.0 Hz)與18

41、-Me (H 1.29，s)的明顯NOESY相關(guān)，可以推測出H-9與18-Me均為a-構(gòu)型。同理，H-30b (H 3.18，dd，J = 6.5，15.0 Hz)與H-5 (H 3.48，d，J = 8.5 Hz)的NOESY相關(guān)說明H-30與H-5為順式結(jié)構(gòu)。參考已知的墨西哥交酯類化合物，可知8-OH均為a-構(gòu)型。根據(jù)以上的分析結(jié)果可確定化合物13的結(jié)構(gòu)如附圖1所示，此化合物為新化合物，命名為xylomexicanin B。1D 及2D NMR數(shù)據(jù)見表2。化合物14 白色粉末 (丙酮)，mp 184186 。1H-NMR (500 MHz，DMSO-d6) ：0.91(3H，s，H-18)

42、，0.98(3H，s，H-28)，1.00(3H，s，H-29)，1.04(6H，s，H-27, 30)，1.09(6H，s，H-19, 26)，1.50(1H，m，H-12a)，1.58(1H，m，H-6b,11b)，1.64(1H，m，H-22b)，1.78(1H，m，H-12b)，1.79(1H，m，H-17)，1.84(1H，m，H-22a)，1.85(1H，m，H-16a)，1.88(1H，m，H-6a)，1.89(1H，m，H-11a)，1.97(1H，m，H-20)，2.04(1H，m，H-16b)，2.10(1H，m，H-9)，2.28(1H，d，J = 11.5 Hz，H-5

43、)，2.96(1H，d，J = 5.0 Hz，H-24)，3.86(1H，s，H-7)，4.34(1H，t，J = 8.0 Hz，H-23)，5.15(1H，t，J = 4.5 Hz，H-21)，5.33(1H，br s，H-15)，5.71(1H，d，J = 10.0 Hz，H-2)，7.24(1H，d，J = 10.5 Hz，H-1)。13C-NMR (125 MHz，DMSO-d6) ：160.0(C-1)，124.4(C-2)，204.0(C-3)，43.6(C-4)，44.2 (C-5)，25.5(C-6)，70.6(C-7)，43.7(C-8)，36.4(C-9)，39.8(C-1

44、0)，15.9(C-11)，33.2(C-12)，45.9(C-13)，159.6(C-14)，118.6 (C-15)，34.7(C-16)，52.7(C-17)，19.7(C-18)，18.8(C-19)，44.6(C-20)，95.7(C-21)，31.8(C-22)，76.4(C-23)，77.3(C-24)，71.4(C-25)，28.2(C-26)，24.7(C-27)，21.3(C-28)，26.9(C-29)，27.6(C-30)。以上數(shù)據(jù)與文獻(xiàn)報(bào)道的piscidinol G16數(shù)據(jù)基本一致。化合物15 白色粉末 (丙酮)，mp 117119 。ESI-MS m/z 545 M

45、+H+。1H-NMR (500 MHz，CDCl3) ：0.97(3H，s，H-19)，1.07(6H，s，H-18，28)，1.17(3H，d，J = 3.5 Hz，H-27)，1.21(3H，s，Me)，1.28(3H，s，H-26)，1.43(3H，s，Me)，1.52(1H，m，H-12b)，1.60(1H，m，H-17)，1.67(2H，m，H-22)，1.72(1H，m，H-11b)，1.78(1H，m，H-11a)，1.80(1H，m，H-6b)，1.92(1H，m，H-12a)，1.95(3H，s，7-OCH3)，1.96(1H，m，H-6a)，2.00(1H，m，H-16b)

46、，2.12(1H，m，H-20)，2.14(1H，m，H-9)，2.17(1H，m，H-16a)，2.20(1H，m，H-5)，3.15(1H，br s，23-OH)，3.63(1H，t，J = 11.0 Hz，H-21a)，3.84(1H，dd，J = 4.0，11.0 Hz，H-21b)，3.88(1H，br s，H-23)，5.22(1H，br s，H-7)，5.29(1H，d，J = 2.5 Hz，H-15)，5.86(1H，d，J = 10.0 Hz，H-2)，7.17(1H，d，J = 10.0 Hz，H-1)。13C-NMR (125 MHz，CDCl3) ：158.2(C-1)

47、，125.5(C-2)，204.7(C-3)，44.1(C-4)，46.1 (C-5)，23.8(C-6)，74.6(C-7)，42.7(C-8)，38.5(C-9)，39.8(C-10)，16.7(C-11)，33.9(C-12)，46.5(C-13)，158.7(C-14)，119.2 (C-15)，34.5(C-16)，57.1(C-17)，21.1(C-18)，19.1(C-19)，30.9(C-20)，65.4(C-21)，34.9(C-22)，67.5(C-23)，95.9(C-24)，76.3(C-25)，23.1(C-26)，24.4(C-27)，21.3(C-28)，27.0

48、(C-29)，27.3(C-30)，170.1(-OCOCH3)，19.9(-OCOCH3)。以上數(shù)據(jù)與文獻(xiàn)報(bào)道的spicatin17數(shù)據(jù)基本一致。化合物16 白色晶體 (甲醇)，mp 265267 。1H-NMR (500 MHz，CDCl3) ：1.13(3H，s，H-29)，1.14(3H，s，H-18)，1.16(3H，s，H-28)，1.26(3H，s，H-30)，1.36(3H，s，H-19)，1.48(1H，m，H-12a)，1.80(1H，m，H-11a)，1.84(1H，m，H-12b)，2.00(1H，m，H-11b)，2.17(1H，d，J = 3.0 Hz，H-5)，2

49、.22(1H，d，J = 11.5 Hz，H-9)，2.42(1H，dd，J = 14.0，3.0 Hz，H-6a)，2.95 (1H，t，J = 14.0 Hz，H-6b)，3.87(1H，s，H-15)，5.47(1H，s，H-17)，5.94(1H，d，J = 10.0 Hz，H-2)，6.36(1H，s，H-22)，7.11(1H，d，J = 10.0 Hz，H-1)，7.40(1H，d，J = 1.5 Hz，H-23)，7.42(1H，s，H-21)。13C-NMR (125 MHz，CDCl3) ：155.9(C-1)，126.4(C-2)，203.2(C-3)，45.2(C-4)

50、，54.6 (C-5)，36.7(C-6)，208.1(C-7)，53.4(C-8)，47.6 (C-9)，39.6(C-10)，17.2(C-11)，32.2(C-12)，37.7(C-13)，65.5(C-14)， 53.6 (C-15)，166.8(C-16)，77.9(C-17)，20.9(C-18)，19.8(C-19)，120.2(C-20)，141.0(C-21)，109.8(C-22)，143.1(C-23)，26.9(C-28)，20.6(C-29)，17.4(C-30)。以上數(shù)據(jù)與文獻(xiàn)報(bào)道的7-deacetyl-7-oxogedunin18數(shù)據(jù)一致。4 細(xì)胞毒活性篩選將He

51、la，KT，HLE細(xì)胞懸浮接種于96孔板，每孔50 L（1 ×104 個(gè)細(xì)胞/mL）， 分別加入磷酸鹽緩沖液（PBS）、陽性對照順鉑（Cisplatin，終濃度0. 5% DMSO）和終濃度為10、1和0. 1mol/L的樣品各50L，每組均設(shè)3復(fù)孔，置于飽和濕度、37 、5%CO2 培養(yǎng)箱中培養(yǎng)72 h。于培養(yǎng)結(jié)束前4 h，各培養(yǎng)孔加入5 mg/mL四氮唑鹽（MTT）10L。培養(yǎng)結(jié)束后，棄去培養(yǎng)上清，每孔加入15% SDS 100 L，過夜。次日用酶聯(lián)免疫檢測儀測定各孔吸光度值（OD值），測定波長= 570 nm，參考波長 = 630 nm，并計(jì)算抑制率。其計(jì)算公式為：抑制率（%

52、）=（對照組OD值-實(shí)驗(yàn)組OD值）/對照組OD值×100。Table 3 Antiproliferative activities of isolates from Xylocarpus granatum Cell linesaCompounds/ED50 (mM)341114CisplatinHeLa30.001.8130.0030.0020.31KT30.001.594.5930.007.43HLE2.633.6830.0014.1130.00a HeLa = 子宮頸癌細(xì)胞; HLE = 肝癌細(xì)胞; KT = 乳腺癌腦轉(zhuǎn)移細(xì)胞5 討論 通過研究我們從木果楝種子中分離得到8個(gè)檸檬苦

53、素和4個(gè)前檸檬苦素。其中檸檬苦素11和13為新化合物，前檸檬苦素7，12和14在木果楝屬植物中首次發(fā)現(xiàn)，這些化合物的發(fā)現(xiàn)對木果楝屬植物的分類具有一定意義。同時(shí)，MTT的研究結(jié)果表明上述分離得到的8個(gè)檸檬苦素中只有9,10-開裂的墨西哥交酯型檸檬苦素對人腫瘤細(xì)胞株Hela，KT，HLE顯示出不同程度的抑制作用，尤其是4對上述三種腫瘤細(xì)胞株均顯示出很強(qiáng)的抑制作用。通過結(jié)構(gòu)與活性的比較，我們發(fā)現(xiàn)，對于9,10-開裂的墨西哥交酯型檸檬苦素來說，C-30位上羥基氫的取代基較小的活性較好。而分離得到的4個(gè)前檸檬苦素中只有14顯示了較強(qiáng)的抑制HLE細(xì)胞株的作用，提示其活性可能與C-17位上取代基的結(jié)構(gòu)有關(guān)。

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