1、儀器測(cè)試原理 為凝固法、發(fā)色底物法和免疫分析法凝固法基本測(cè)試原理是光學(xué)法的散射光檢測(cè)（用660nm光電二極管檢測(cè)散射光強(qiáng)度的變化），還并用了百分比方式百分比方式的測(cè)定原理：當(dāng)試劑加入標(biāo)本后，凝血開(kāi)始啟動(dòng)，隨之光學(xué)出現(xiàn)變化，儀器把這種光學(xué)的變化描繪成凝固曲線：把開(kāi)始出現(xiàn)凝集的起始點(diǎn)作為0%、把完全凝固的終點(diǎn)作為100%、把50%變化點(diǎn)處作為凝固時(shí)間（報(bào)告點(diǎn)），當(dāng)測(cè)定含有干擾物（黃疸、溶血、高脂血癥等）或低纖維蛋白原血癥的特殊標(biāo)本時(shí)，其作為起始點(diǎn)的0%的基線會(huì)隨之上移或下移,相當(dāng)于扣除本底干擾.凝固法測(cè)試項(xiàng)目 以上凝固法檢測(cè)原理所測(cè)定的項(xiàng)目包括了最常用的如PT、APTT、FIB、TT、內(nèi)源凝血因子

2、（F VIII、XI、XI、XII），外源凝血因子（F II、V、VII、X）等發(fā)色底物法：血漿、試劑、底物混合發(fā)生反應(yīng)，根據(jù)吸光度變化，計(jì)算結(jié)果 是通過(guò)測(cè)定產(chǎn)色物質(zhì)的吸光度變化，以推算待測(cè)物的含量，這種方法屬生物化學(xué)法，其基本原理是：試劑中為人工合成的含某種酶裂解位點(diǎn)的短肽，與產(chǎn)色物質(zhì)如對(duì)硝基苯胺(pNA)連接，待檢物品中含有活性酶或無(wú)活性的酶原被加入的激活劑活化，在檢測(cè)過(guò)程中產(chǎn)色物質(zhì)被解離下來(lái)，使被檢物品出現(xiàn)顏色變化，其與被檢物含量呈一定的數(shù)量關(guān)系。此方法以酶學(xué)方法為基礎(chǔ)，可檢測(cè)項(xiàng)目包括如：AT-III、Plg、PC、PS、FM、PAI，Tpa，2-AP等。免疫分析法：血漿與乳膠試劑發(fā)生反

3、應(yīng) 以被檢物作為抗原，制備相應(yīng)的多克隆抗體，利用抗原抗體的特異結(jié)合反應(yīng)來(lái)對(duì)被檢物進(jìn)行定性和定量檢測(cè)，在凝血儀上多采用免疫比濁法測(cè)定，其基本原理是當(dāng)一定波長(zhǎng)的光線通過(guò)反應(yīng)混合液時(shí)，被其中抗原抗體反應(yīng)形成的免疫復(fù)合物吸收而減弱，在一定范圍內(nèi)，其吸光度與復(fù)合物量呈正相關(guān)，因此當(dāng)抗體量固定時(shí)，根據(jù)復(fù)合物的吸光度值，即可推算出待測(cè)抗原含量，可測(cè)定項(xiàng)目如D-二聚體、vWF因子、FDP等凝血測(cè)試一般注意事項(xiàng)1.樣本采集 穿刺要一針見(jiàn)血，避免淤血，氣泡，溶血和組織液污染； 為避免血液當(dāng)中有組織液的滲入，采血時(shí)以第二或第三管樣品做凝血測(cè)試管為佳； 如果從導(dǎo)管取樣，則需用生理鹽水沖洗管道，前面5ml血不能使用；

4、采血后立即與抗凝劑充分混合，盡快送往實(shí)驗(yàn)室； 采血量必須準(zhǔn)確，如果少于計(jì)劃量的90%，則不能使用； 不能在靜脈穿刺部位或附近部位采樣；2.樣本處理 使用3.8%或3.2%(W/V)拘櫞酸鈉溶液作為抗凝劑； 血樣與抗凝劑的比例為9:1，如果血球壓積55%，則需調(diào)整這個(gè)比例，方法是：0.00185血液毫升數(shù)(100-壓積)=抗凝劑毫升數(shù)，按比例重抽血檢驗(yàn)；2.樣本處理 血漿分離：采樣后60分鐘內(nèi)進(jìn)行；分離血漿應(yīng)在3000r/min 離心10分鐘，務(wù)使血小板去除； 盛血漿容器應(yīng)加塞，防止PH改變； 血漿存放時(shí)間不能太久：室溫存放在2個(gè)小時(shí)以內(nèi)，2-8攝氏度，不能大于4個(gè)3.試劑 清洗液（clean）

5、開(kāi)蓋后放于儀器上有效期僅24小時(shí) 緩沖液：開(kāi)蓋后放置儀器上保存:24h,使用放置時(shí)間太長(zhǎng)的緩沖液會(huì)導(dǎo)致凝血時(shí)間延長(zhǎng)即Fib含量測(cè)定偏低! 質(zhì)控血漿：1ml蒸餾水溶解置室溫15分鐘后使用3.試劑 TT:每瓶用5ml專用緩沖液溶解,須放置室溫10分鐘后才使用；機(jī)上有效期（15）：10小時(shí) PT：每瓶用4ml蒸餾水溶解,須放置室溫或3730分鐘后才使用；機(jī)上放置時(shí)間長(zhǎng)，有沉淀，可稍加混勻。 溶解時(shí)要輕轉(zhuǎn)動(dòng)容器，避免劇烈振蕩4.影響測(cè)定結(jié)果的因素 抗凝劑：草酸鈉、EDTA、肝素不適于作抗凝劑； 嚴(yán)重黃疸，脂血，重度溶血會(huì)影響測(cè)定結(jié)果，如是因抽血不當(dāng)或采血時(shí)機(jī)不當(dāng)引起的，應(yīng)盡可能重抽血。 使用纖溶藥物，如雙香豆素，鏈激酶，尿酶等可使凝固時(shí)間延長(zhǎng)； 超過(guò)治療劑量的肝素使凝固時(shí)間延長(zhǎng)； FDP增加使凝固時(shí)間延長(zhǎng)； 某些藥物，如口服避孕藥，雌激素，天