1、淫羊藿苷對骨髓增生異常綜合征模型大鼠骨髓細胞凋亡的影響         09-09-13 10:01:00     作者：馮曉燕 嚴魯萍 楊源    編輯：studa20【摘要】  目的探討單味中藥提取物淫羊藿苷對骨髓增生異常綜合征（MDS）模型大鼠骨髓細胞凋亡的影響。方法通過復制骨髓增生異常綜合征（MDS）大鼠模型，用淫羊藿苷溶液灌胃。實驗結束后，檢測大鼠外周血象、骨髓象，骨髓細胞總凋亡率。結果淫羊藿苷組外周血白細胞計數、血

2、紅蛋白含量、紅細胞計數靈敏、血小板計數高于模型生理鹽水組，且有顯著差異(P<0.01)；各模型組大鼠外周血和骨髓均能見到不同程度的病態造血，骨髓細胞凋亡指數顯著升高，與空白對照組相比有極顯著差異；淫羊藿苷組骨髓細胞凋亡指數比模型生理鹽水組低，兩組間有極顯著性差異(P<0.001)。結論 淫羊藿苷有升高MDS模型大鼠外周血象、改善骨髓病態造血、降低骨髓細胞凋亡率的作用。 【關鍵詞】  骨髓增生異常綜合征 淫羊藿苷 細胞凋亡骨髓增生異常綜合征(MDS)是一組起源于造血髓系定向干細胞或多能干細胞的異質性克隆性疾患，主要特征是無效造血、外周血細胞減少和有明顯向急性白血病轉化的傾向

3、，是臨床常見的難治性血液病，其發病率正逐年增高。MDS屬祖國醫學 “虛勞”“血證”“內傷發熱”等范疇，國內從中醫角度對MDS研究較多，對其病因病機、辨證論治、中藥復方藥效等方面都進行了研究，取得了一定的成績。在治療方面主要從補腎益髓、益氣活血、清熱解毒等方面用復方進行研究，國內報道以中藥為主治療MDS的總有效率為58.3%89.47%13。本文作者擬通過動物實驗研究，探討單味中藥提取物淫羊藿苷對MDS模型大鼠骨髓細胞凋亡的影響，從而篩選治療MDS有效的中藥，為淫羊藿苷的臨床運用提供實驗基礎。1  材料與方法1.1  動物與藥物Wistar大鼠36只，體重80100 g ，7

4、周齡，清潔級，由貴陽醫學院動物所提供合格證號：SCXK（黔）20020001。二甲基苯蒽(DMBA)由美國Sigma公司生產。FACS240型流式細胞儀（美國BD公司生產），OLYMPUS-BHB211顯微鏡（日本）。淫羊藿苷（由陜西慧科生物股份有限公司提供，批號：20050513），98%淫羊藿苷溶于0.9%生理鹽水中制成3.0 mg/ml濃度的藥液待用。1.2  模型制備與實驗分組取Wistar大鼠36只，隨機分為3組，每組12只，分別為正常對照組、模型組生理鹽水組和模型淫羊藿苷組。參照馮寶章等4的大鼠MDS造模方法于實驗第0，7，14，21，28天按35 mg/kg劑量尾靜脈注

5、射溶于芝麻油、生理鹽水的DMBA于模型組，建立MDS模型。從第2次注射DMBA后（即實驗第14天）分別予生理鹽水、淫羊藿苷溶液按0.2 ml/10 g體重劑量灌胃，1次/d，連續20次。1.3  觀察指標及檢測方法觀察實驗中大鼠的精神活動狀況、出血情況、皮毛光澤度、飲食飲水量、體重變化情況；實驗結束后，尾靜脈取血，參照血液實驗學5方法進行人工計數外周血象，并將外周血涂片瑞氏染色后觀察外周血病態造血情況；取股骨骨髓涂片，瑞士染色后觀察骨髓增生情況及油鏡下觀察骨髓病態造血情況，用流式細胞儀按試劑盒說明檢測骨髓細胞凋亡指數。1.4  資料處理方法用SPSS系統軟件進行數據處理，實

6、驗結果以±s表示，組間差采用t檢驗。2  結果2.1  一般情況比較自尾靜脈注射兩次DMBA起，模型組大鼠逐漸出現皮下紫癜，以嘴唇及雙小腿較明顯，第15天起逐漸出現精神萎靡、瞇眼、扎堆、反應遲鈍、行動遲緩，甚至行動不穩，毛色枯槁、散亂豎起，逐漸消瘦，正常對照組以上各方面都沒有改變，體重增加。實驗過程中除正常對照組外，其余兩組均有大鼠死亡，生理鹽水組死亡4只，模型淫羊藿苷組死亡3只。2.2  淫羊藿苷對MDS模型大鼠外周血象的影響  淫羊藿苷有明顯回升MDS模型大鼠外周血血象的作用，雖然與正常對照組比較淫羊藿苷組的血小板計數、紅細胞計數、白細胞計

7、數、血紅蛋白含量有所降低，兩組間有差異（P0.05），但較模型生理鹽水組明顯升高，與模型生理鹽水組比較有極顯著差異（P0.001）。結果見表12。表1  淫羊藿苷對MDS模型大鼠外周血血小板、白細胞的影響（略）表2  淫羊藿苷對MDS模型大鼠外周血血紅蛋白、紅細胞的影響（略）2.3  淫羊藿苷對MDS模型大鼠外周血病態造血的影響各模型組外周血可見不同程度的病態造血，淫羊藿苷能一定程度上改善MDS模型大鼠外周血病態造血的情況，模型生理鹽水組大鼠6只可見有核紅細胞，3只見紅細胞形態異常，大小不一，可見大紅細胞，2只可見巨大血小板，巨核細胞顆粒減少。模型淫羊藿苷組中，3

8、只可見有核紅細胞、2只見紅細胞形態異常，大小不一，可見大紅細胞， 2只可見成熟粒細胞分葉過多，2只可見巨大血小板，巨核細胞顆粒減少。結果見表3。2.4   淫羊藿苷對MDS模型大鼠骨髓增生程度的影響淫羊藿苷對MDS模型大鼠骨髓增生程度影響不很明顯。模型生理鹽水組大鼠中有3只骨髓增生活躍、5只明顯活躍、1只極度活躍。模型淫羊藿苷組9只大鼠中有4只骨髓增生活躍、4只明顯活躍、1只極度活躍。表3   淫羊藿苷對MDS模型大鼠外周血病態造血的影響（略）2.5  淫羊藿苷對MDS模型大鼠骨髓病態造血的影響各模型組大鼠均可見病態造血，模型淫羊藿苷組能在一定程度上改善骨髓的病態造血情況。模型生理鹽水組8只大鼠中有4只紅系增生異常>50%，3只可見紅系的病態造血，3只可見粒系病態造血，3只可見巨核系的病態造血。模型淫羊藿苷組9只大鼠中有2只紅系增生異常>50%，2只可見紅系的病態造血，2只可見粒系病態造血，1只可見巨核系的病態造血。結果見表4。表4   淫羊藿苷對MDS模型大鼠骨髓病態造血的影響（略）2.6  淫羊藿苷