1、    哮喘發作期和穩定期患兒誘導痰液分析與評價盛軍邵潔傅曼芬李云珠俞善昌 為觀察哮喘急性發作期患兒經藥物治療后痰液細胞的變化,并了解臨床癥狀的改善與痰液中嗜酸性細胞的關系,我們對急性發作期和穩定期患兒進行了誘導痰液分析,并進行評價。 對象:(1) 哮喘急性發作組:選擇1997年5月10月本院住院或門診哮喘急性發作期患兒。共37例，男20例，女17例，年齡313歲(6.7±2.4歲)。診斷標準根據文獻1。(2)哮喘穩定期組: 選擇1997年5月12月本院住院或門診哮喘患兒，男23例，女12例，年齡4.512歲(7±2.5歲)。給予潑尼

2、松或地塞米松治療3天，隨后改為丁地去炎松或丙酸倍氯米松吸入治療714天，臨床上無咳嗽(或偶咳)，無喘息，兩肺聽診無哮鳴音。平均PEF值218±49.17，共35例。 方法:(1)獲取痰液:用MP-1型面罩式超聲霧化儀分別吸5%高滲鹽水1、2、4分鐘,每次間隔12分鐘,累積霧化時間不超過20分鐘,每次霧化間隙測定PEF值。每個劑量的鹽水吸入后都鼓勵受檢者深吸氣,咳嗽,將痰液吐入無菌容器內。(2)痰液確定:痰栓為乳白色或黃色成團狀或小斑片狀粘稠物,而唾液在吸管內呈透明、清亮狀液體。用玻璃吸管小心吸取棄去唾液后的痰栓。(3)痰液分析:總細胞計數取痰栓600 l,加1%DTT溶液2.4 ml

3、，在旋渦式混合器上震蕩10分鐘,使痰液離散于DTT溶液內，成為均勻一致的痰溶液,加入等量的1.5%冰醋酸,混勻后取少量置于血細胞計數板進行總細胞計數。分類計數：取痰栓直接置于玻片上,壓涂痰片5張,空氣自然干燥后,3張用瑞氏染色法染色，另兩張用1%甲苯胺藍染色。每份標本計數500個細胞，用單盲法進行細胞計數及分類。(4)統計學處理用t檢驗和直線相關性檢驗。 結果:(1)35例哮喘穩定期兒童成功獲取痰液31例(89%)，37例哮喘急性發作期患兒成功獲取痰液31例(84%)。(2)所有受檢者均能耐受痰誘導而無副作用。在痰誘導過程中，PEF從基礎值下降的平均值在發作期為4%，穩定期為0，兩組比較差異無

4、顯著意義。(3)痰液細胞分析:總細胞計數中兩組比較差異無顯著意義。分類計數中急性發作組的嗜酸性細胞、肥大細胞高于穩定期組,兩組比較差異有非常顯著意義(P< 0.01)(附表)。(4)誘導痰液中的嗜酸性細胞與PEF的關系，在穩定期r=-0.866，P< 0.01，急性發作期r=-0.71，P< 0.01。 附表哮喘急性發作期和穩定期患兒誘導痰液細胞計數比較 組別 例數 總細胞計數 (×109/L) 細胞分類計數() EC N M L E MC 發作期組 31 11±9 7±5 23±11 40±15 5±5 18

5、77;12 1.1±1.1 穩定期 31 8±4 14±4 19±6 47±8 12±5 7±4 0.3±0.3 t值 1.6 6.4 1.6 2.1 5.64 5.15 3.8 P值 >0.05 < 0.01 >0.05 < 0.05 < 0.01 < 0.01 < 0.01 注：EC=上皮細胞，N=中性粒細胞，M=單核細胞，L=淋巴細胞，E=嗜酸性細胞，MC=肥大細胞 討論:(1)穩定期患兒痰液分析:本結果顯示穩定期組痰液中的嗜酸性細胞、肥大細胞明顯低于急性發作期組(P

6、< 0.01)。這一結果不僅進一步證實了嗜酸性細胞、肥大細胞是哮喘發作的主要效應細胞，參與了氣道高反應的形成，同時也證明了哮喘患兒經過正規治療后氣道炎癥能得以改善。Pizzichini等2曾對10位急性發作期成人的痰液進行研究，并隨訪其用藥后1、2、3、 7、21天的誘導痰液，結果顯示患者痰液嗜酸性細胞在治療后第2天即明顯下降(P< 0.01)，至第7天為最明顯(P< 0.001)，并發現嗜酸性細胞下降的量與痰中ECP(嗜酸性細胞陽離子蛋白)、白介素-5相關。我們研究發現在痰液的總細胞計數方面，穩定期組與急性發作期組之間差異無顯著意義,淋巴細胞在穩定期組明顯增高，可能為哮喘患

7、兒氣道的慢性炎癥所致。(2)嗜酸性細胞的浸潤強度與急性發作期和穩定期氣道阻塞的嚴重程度顯著相關(r=-0.7068，P< 0.01;r=-0.866 P< 0.01)，說明嗜酸性細胞直接參與了氣道的高反應，造成通氣障礙。隨著氣道內嗜酸性細胞的減少，氣道阻塞狀況的改善，PEF值上升。(3)哮喘患兒經正規潑尼松和吸入皮質激素后12周，病情趨于穩定，癥狀消失，PEF值上升，痰液中嗜酸性細胞，肥大細胞計數明顯下降,氣道的炎癥得以改善。 穩定期哮喘患兒的痰液誘導、分析，有利于了解穩定期哮喘患兒氣道炎癥狀況，指導臨床對哮喘患兒的長期管理和治療。 作者單位:200025 上海第二醫科大學附屬瑞金醫院兒科(第一作者現在上海嘉定區南翔醫院兒科) 參考文獻 1全國兒科哮喘防治協作組.兒童哮喘診斷標準和治療常規.中華兒科雜志,1993,31:222-224. 2Pizzichini MMM,Pizzichini E,Clelland