1、121學習并掌握觀察霉菌形態的基本方法2了解四類常見霉菌的基本形態 一、實驗目的一、實驗目的3二、實驗原理二、實驗原理w 霉菌：霉菌：凡在營養基質上形成絨毛狀、棉絮狀或蜘蛛網形的絲狀菌體的真菌，統稱為霉菌。霉菌包括分類學上許多不同綱或類的真菌，它們分別屬于藻狀菌綱、子囊菌綱、擔子菌綱和半知菌類。 霉菌可產生復雜分枝的菌絲體，分基內菌絲和氣生菌絲，氣生菌絲生長到一定階段分化產生繁殖菌絲，由繁殖菌絲產生孢子。霉菌菌絲體（尤其是繁殖菌絲）及孢子的形態特征是識別不同種類霉菌的重要依據。 4 載玻片培養觀察法：載玻片培養觀察法： 用無菌操作將培養基瓊脂薄層置于載玻片上，接種后蓋上蓋玻片培養，霉菌即在載玻

2、片和蓋玻片之間的有限空間內沿蓋玻片橫向生長。培養一定時間后，將載玻片上的培養物置顯微鏡下觀察。這種方法既可以保持霉菌自然生長狀態，還便于觀察不同發育期的培養物。5三、實驗材料三、實驗材料1 1菌種菌種：黃曲霉、青霉、黑根霉和毛霉培養2-5d的馬鈴薯瓊脂平板培養物。2 2培養基培養基：土豆瓊脂或察氏瓊脂乳酸石炭酸棉蘭染液、碘液、酒精、蒸餾水等3 3儀器或其他用具儀器或其他用具：平皿，蓋玻片，U形玻棒，解剖刀，20%的甘油以及顯微鏡等。6霉菌小培養霉菌小培養四、實驗步驟四、實驗步驟7 1 1、培養小室的滅菌：、培養小室的滅菌：在平皿皿底鋪一張略小于皿底的圓濾紙片，再放一U形玻棒，其上放一潔凈載玻片

3、和兩塊蓋玻片，蓋上皿蓋，包扎后于121滅菌30min，烘干備用。 2 2、瓊脂塊的制作：、瓊脂塊的制作：取已滅菌的馬鈴薯瓊脂（或察氏瓊脂）培養基6-7ml注入另一塊滅菌平皿中，使之凝固成薄層。用解剖刀切成0.5-1cm2的瓊脂塊，并將其移至上述培養室中的載玻片上（每塊放兩片）。注意無菌操作83 3、接種：、接種：用尖細的接種針挑取很少量的孢子接種于瓊脂塊的邊緣上，用無菌鑷子將蓋玻片覆蓋在瓊脂塊上。接種量要少，盡可能將分散的孢子接種在瓊脂塊的邊緣上，否則培養后菌絲過于稠密影響觀察。4 4、培養、培養：現在平皿的濾紙上加3-5ml滅菌到20%的甘油（保持濕度），蓋上平皿，28培養。5 5、鏡檢、鏡

4、檢：根據需要可以在不同的培養時間內取出載玻片置低倍鏡下觀察，必要時換高倍鏡觀察。9a.a.觀察黑根霉菌絲情況和孢子情況（著重辨觀察黑根霉菌絲情況和孢子情況（著重辨認認匍匐菌絲、假根、包囊梗、孢子囊匍匐菌絲、假根、包囊梗、孢子囊）：）：10根霉假根假根11孢囊孢子（孢囊孢子（sporangiosporesporangiospore）12b.b.觀察毛霉菌絲情況和孢子情況（著重辨觀察毛霉菌絲情況和孢子情況（著重辨認認孢囊梗、孢子囊孢囊梗、孢子囊）：）：13 c. c.觀察黃曲霉菌絲觀察黃曲霉菌絲分隔分隔情況和分生孢子著生情情況和分生孢子著生情況（著重辨認況（著重辨認足細胞、分生孢子梗和分生孢足細胞

5、、分生孢子梗和分生孢子子）：）：14黑曲霉1516 足細胞足細胞17d.d.觀察青霉菌絲觀察青霉菌絲分隔分隔和分生孢子著生情況和分生孢子著生情況（著重辨認著重辨認帚狀分支的分生孢子梗帚狀分支的分生孢子梗）：）： 18青霉青霉19菌落特征：菌落特征：霉菌的菌落大、疏松、干燥、不透明，多呈絨毛狀、絮狀或網狀等，菌體可沿培養基表面蔓延生長，由于不同的真菌孢子含有不同的色素，所以菌落可呈紅、黃、綠、青綠、青灰、黑、白、灰等多種顏色。2021五、實驗結果五、實驗結果繪四種霉菌的形態特征：繪四種霉菌的形態特征：黃曲霉：黃曲霉：有隔菌絲，外生孢子（分生孢子），有足細胞，頂囊，分生孢子梗青霉：青霉：有隔菌絲，外生孢子（分生孢子），為帚帚狀分生孢子穗狀分生孢子穗，初級小梗，次級小梗；黑根霉：黑根霉：無隔菌絲，內生孢子（孢囊孢子），孢囊梗，匍匐枝和假根；毛霉：毛霉：無隔菌絲，內生孢子（孢囊孢子），孢囊梗22六、思考題六、思考題 w 1、你主要根據哪些形態特征來區分上述四種霉菌？ P46，（1）w 2、你認為在顯微鏡下，細菌，放線菌，酵母菌和霉菌的主要區別是什么？P46，（2） 23w 1.1.鏡檢時，你如何區分放線菌的基內菌鏡檢時，你如何區分放線菌的基內菌絲和氣生菌絲？絲和氣生菌絲？P P42