1、選擇性毒蕈堿樣膽堿受體激動劑和拮抗劑的研究進展         08-06-07 16:36:00     作者：祝世發 景富春 周穎    編輯：studa20【關鍵詞】  M受體關鍵詞：M受體；激動劑和拮抗劑毒蕈堿樣膽堿受體(簡稱M受體)廣泛地分布于中樞和周圍神經組織、心臟、平滑肌及腺體等，參與機體多種重要的生理功能。在中樞神經系統，M受體可能傳遞神經元的興奮或抑制沖動，包括大腦的各種功能如喚醒、注意、情緒反應和運動功能調

2、節，特別是調節較高級認知活動如學習和記憶;在周圍神經系統，M受體通過與不同的鳥核苷酸調節蛋白(簡稱G蛋白)偶聯，引起一系列生理生化效應，如血管平滑肌舒張、心率減慢、心肌收縮力減弱、胃腸道和膀胱平滑肌收縮加強、腺苷酸環化酶活性改變、肌酸磷脂系統激活及離子通道的開放或關閉等。上述作用可表現為興奮(如胃腸道平滑肌收縮)或抑制(如血管平滑肌舒張)，這可能與各組織器官的特點及其具有的M受體亞型的不同有關。以往臨床應用的M受體激動劑或拮抗劑，都有不同程度的不良反應。近年來，在M受體亞型選擇性激動劑和拮抗劑方面的研究進展，為M受體亞型的分類和開發不良反應較小的藥物提供了廣闊的前景。1 M受體亞型的分類從分子

3、生物學角度，膽堿能M受體基因編碼5種受體蛋白質，分別表示為ml，m2，m3，m4和m5亞型。目前根據國際藥理學聯合會命名法，公認藥理學上至少有4種亞型存在，即M1，M2，M3和M4，并且m1m4與M1M4相對應通過原位雜交分析，m5基因表達的蛋白質分布局限于腦中獨立區域，外周組織表達甚少，尚未找到在藥理學上與之對應的亞型。互補DNA編碼膽堿受體的表達，已使確定單個膽堿受體亞型的藥理學特性更趨簡單化。目前雖然在實驗室可獲得一些克隆化受體亞型，但每種M受體亞型的藥理作用仍不甚清楚，主要因為許多組織和細胞群能夠表達M受體亞型的異質性蛋白，M受體亞型特性列于表11。表1 膽堿能受體各亞型的特性藥理分型

4、（略）                                                 

5、60;                                                 

6、60;                                             由于缺少選擇性膽堿能M4受體拮抗劑，將M4與M1或M2受體區別開

7、來仍很困難。所以M4受體的生理功能常被忽視。在家兔血管，調節去甲腎上腺素(NE)釋放的突觸前膜受體，可以是M4受體，而不是以往許多實驗中假定的M2受體。而且，在豚鼠氣管上的膽堿能自身受體可能是M4而不是以往認為的M2受體。而且，近來提出豚鼠膀胱上也是M4受體。上述發現對突觸前膜M2受體的特性及其分類的正確性提出質疑。M受體介導的功能反應方面的作用，可通過測定幾種重要拮抗劑的親和力來決定(如表1所示)，而不用M受體激動劑。因為激動劑以親和力為基礎，不能以大小次序區分M受體亞型。藥物受體理論表明，激動劑的效能取決于一些組織因素，如受體密度、G蛋白密度及偶聯的刺激反應的效應。以上因素在組織間、細胞群

8、隨激動劑效能改變而變化，如McnA343，一般作為M1選擇性激動劑，發揮作用時可能作用于儲備的優勢受體上。因此，對其反應并不能提供M:受體激活的確切證據。的確，有研究顯示，在CHO細胞群中，MCNA343可作為功能選擇性M4受體激動劑。實驗證明，確定M受體亞型分類的更好工具是M受體拮抗劑。特別值得提出的是加拉明(gallamine)，它能變構性調節膽堿能M2受體的功能。這種特性使得確定其親和力和闡明亞型選擇性更為復雜。膽堿能M1受體一般認為可通過對哌侖西平(pirenzepine，PZ)和4DAMP有更高的親和力，而對methoctramine或himbacine的親和力較低來確定;膽堿能M2

9、受體對triPitramine，methoctramine或himbacine顯示有高度親和力，對PZ、4DAMP和PFHHSID親和力較低;膽堿能M3受體對4DAMP、PFHHSID有高度親和力，對PZ、methoctramine，himbacine的親和力較低。膽堿能M4受體的區分仍較困難，因為Pz、methoctracine對這種亞型都有高度親和力。Himbacine和PFHHSID同樣的高度親和力可用于區別M1和M2受體亞型。近來，已發現一些拮抗劑對M4受體的分類具有潛在應用價值有報道，(S)dimethinPene雖有組胺H1受體拮抗劑活性，但對M2受體選擇性高于M1、M3和M4受體

10、。與其它選擇性M2受體拮抗劑比較，triPitramine對M2的選擇性也高于對M4受體。TriPitramine在功能上區分M2和M4受體表明M4受體介導離體豚鼠肺實質肌條收縮，如果上述論點成立，則與放射配基結合實驗顯示的M4受體在家兔肺實質中占優勢的論點相符合。因而，離體豚鼠肺實質收縮可作為一種簡易的生物鑒定M4受體的方法。另據報道2，一種來自Drendroaspis  angusticeps毒液的毒素，對M1、M4受體的親和力很高，而與M2、M3受體的結合很少。這種配墓可能是目前確定的最具選擇性的M受體拮抗劑。Zorn等研究表明，在轉染的細胞系，氯氮平(c lozapine)對

11、人體M4受體是1完全激動劑，對M1、M2和M3受體是拮抗劑;另外這種選擇性可由于細胞受體表達水平的改變而變化，氯氮平可能成為一種新的精確定義M4亞型的配基。m5基因產物的藥理學特性似乎不同于其它M亞型受體。近來，在SAg昆蟲細胞系桿狀病毒感染系統中，Guo等已證明，異丙嗪對m5受休有47倍的選擇性，在哺乳類表達系統中尚未見有關研究報道。綜上所述，從藥理學角度闡明膽堿能M受體亞型時，應當與分子生物學上M受體亞型DNA序列一致。目前可應用單一的或聯用二種以上的M受體拮抗劑來闡明M受體亞型，但仍未發現內在活性及選擇性很高的M受體激動劑，以協助闡明M受體亞型的功能。2 選擇性膽堿能M受體激動劑研究表明，在不同的組織或器官中，某些M受體激動劑通過與占優勢的某一種M受體亞型作用，產生激活或抑制效應。例如，匹羅卡品的類似物SDZENS 163，在大鼠頸上神經節為Ml受體激動劑;在豚鼠回腸為部分M3受體激動劑;在豚鼠心房則為M3受體拮抗劑;此外，尚能介導離體犬隱靜脈收縮反應，表現為完全性M受體拮抗劑特性。篩選新型選擇性膽堿能M1受體激動劑主要依賴于組織細胞中與生物鑒定