1、精選文檔生物平安手冊名目名目1第一部分 基本規范2進入規定2人員防護3試驗室工作區3生物平安管理4其次部分 試驗室技術4移液管和移液幫助器的使用5生物平安柜的使用5血清的分別6離心機的使用6冰箱與冰柜的維護和使用7裝有凍干物質安瓿的開啟8第三部分 消毒和滅菌8一、定義8二、化學殺菌劑9氯（次氯酸鈉）10乙醇10碘和碘伏11三、清除局部環境的污染12四、洗手清除手部污染12五、高壓滅菌12高壓滅菌參數12高壓滅菌器的裝載13高壓滅菌器使用留意事項13附錄114設備的平安性14表A1-1 可能產生危害的儀器設備及其操作14表A1-2 儀器設備相關事故的緣由8表A1-3 生物平安設備9表A1-4 個

2、體防護裝備10第一部分 基本規范 依據感染性微生物的相對危害程度（危急度2級，病原體能夠對人致病，但對試驗室工作人員或環境不易導致嚴峻危害），本試驗室為基礎試驗室，屬于二級生物平安水平。進入規定1、在試驗室門上應標有國際通用的生物危害警告標志（圖1）。2、只有經批準的人員方可進入試驗室工作區域。3、試驗室的門應保持關閉。4、兒童不應被批準或允許進入試驗室工作區域。5、與試驗室工作無關的動物不得帶入試驗室。人員防護1、在HIV試驗室工作時，任何時候都必需穿著工作服。2、在進行可能直接或意外接觸到血液、體液以及其他具有潛在感染性的材料的操作時，應戴上合適的手套。手套用完后，應先消毒再摘除，隨后必需

3、洗手。3、在處理完感染性試驗材料后，以及在離開試驗室工作區域前，都必需洗手。4、為了防止眼睛或面部受到潑濺物、碰撞物或人工紫外線輻射的損害，必需戴平安眼鏡、面罩（面具）或其他防護設備。5、嚴禁穿著試驗室工作服離開試驗室，（如去餐廳、咖啡廳、辦公室、圖書館、員工休息室和衛生間）。6、不得在試驗室內穿露腳趾的鞋子。7、禁止在試驗室工作區域進食、飲水、吸煙、化妝和處理隱形眼鏡。8、禁止在試驗室工作區域儲存食品和飲料。9、在試驗室內用過的工作服不得和日常服裝放在同一柜子內。試驗室工作區1、試驗室應保持清潔整齊，嚴禁擺放和試驗無關的物品。2、發生具有潛在危害性的材料溢出以及在每天工作結束之后，都必需清除

4、工作臺面的污染。3、全部受到污染的材料、標本和培育物在廢棄或清潔再利用之前，必需清除污染。4、在進行包裝和運輸時必需遵循國家和或國際的相關規定。5、假如窗戶可以打開，則應安裝防止節肢動物進入的紗窗。 生物平安管理1、試驗室主任（對試驗室直接負責的人員）負責制訂和接受生物平安管理方案以及平安或操作手冊。2、試驗室主管（向試驗室主任匯報）應當保證供應常規的試驗室平安培訓。3、要將生物平安試驗室的特殊危害告知試驗室人員，同時要求他們閱讀生物平安或操作手冊，并遵循標準的操作和規程。試驗室主管應當確保全部試驗室人員都了解這些要求。試驗室內應備有可供取閱的平安或操作手冊。4、應當制訂節肢動物和嚙齒動物的把

5、握方案。5、如有必要，應為全部試驗室人員供應適宜的醫學評估、監測和治療，并應妥當保存相應的醫學記錄。其次部分 試驗室技術試驗室損害以及與工作有關的感染主要是由于人為失誤不良試驗技術以及儀器使用不當造成的。本部分概要介紹了避開或盡量削減這類常見問題的技術和方法。移液管和移液幫助器的使用1、應用移液幫助器，嚴禁用口吸取。2、全部移液管應帶有棉塞以削減移液器具的污染。3、不能向含有感染性物質的溶液中吹入氣體。4、感染性物質不能使用移液管反復吹吸混合。5、不能將液體從移液管內用力吹出。6、污染的移液管應完全浸入適當的消毒液中，并在消毒液中浸泡適當時間后再進行處理。7、盛放廢棄移液管的容器應當放在生物平

6、安柜內。8、為了避開感染性物質從移液管中滴出而集中，在工作臺面應當放置一塊吸有消毒液的紙，使用后將其按感染性廢棄物處理。生物平安柜的使用1、生物平安柜運行正常時才能使用。2、生物平安柜在使用中不能打開玻璃觀看擋板。3、平安柜內應盡量少放置器材或標本，不能影響后部壓力排風系統的氣流循環。4、全部工作必需在工作臺面的中后部進行，并能夠通過玻璃觀看擋板看到。5、盡量削減操作者身后的人員活動。6、操作者不應反復移出和伸進手臂以免干擾氣流。7、不要使試驗記錄本移液管以及其他物品阻擋空氣格柵，由于這將干擾氣體流淌，引起物品的潛在污染和操作者的暴露。8、工作完成后以及每天下班前，應使用70%的酒精對生物平安

7、柜的臺面進行擦拭，但切忌用酒精擦拭玻璃擋板。9、在平安柜內的工作開頭前和結束后，平安柜的風機應至少運行5min。10、在生物平安柜內操作時，不能進行文字工作。血清的分別1、只有經過嚴格培訓的人員才能進行這項工作。2、操作時應戴手套以及眼睛和黏膜的愛護裝置。3、血液和血清應當當心吸取，而不能傾倒。嚴禁用口吸液。4、移液管使用后應完全浸入適當的消毒液中，并在消毒液中浸泡適當的時間，然后再丟棄或滅菌清洗后重復使用。5、帶有血凝塊等的廢棄標本管，在加蓋后應當放在適當的防漏容器內高壓滅菌。離心機的使用1、應依據操作手冊來操作離心機。2、離心管在使用前應檢查是否破損。3、用于離心的離心管應當始終堅固蓋緊。

8、4、離心桶的裝載、平衡、密封和打開必需在生物平安柜內進行。5、離心桶和十字軸應按重量配對，并在裝載離心管后正確平衡。6、操作指南中應給出液面距離心管管口需要留出的空間大小。7、空離心桶應當用蒸餾水來平衡。8、每次使用后，要清除離心桶、轉子和離心機腔的污染。9、使用后應當將離心桶倒置存放使平衡液流干。10、應當每天檢查離心機內轉子部位的腔壁是否被污染或弄臟，如污染明顯，應重新評估離心操作規范。冰箱與冰柜的維護和使用1、冰箱、低溫冰箱和干冰柜應當定期除霜和清潔，應清理出全部在儲存過程中裂開的安瓿和試管等物品。清理時應戴厚橡膠手套并進行面部防護，清理后要對內表面進行消毒。2、儲存在冰箱內的全部容器應

9、當清楚地標明內裝物品的科學名稱、儲存日期和儲存者的姓名。未標明的或廢舊物品應當高壓滅菌并丟棄。3、應當保存一份凍存物品的清單。4、除非有防爆措施，否則冰箱內不能放置易燃溶液。冰箱門上應注明這一點。裝有凍干物質安瓿的開啟1、首先清除安瓿外表面的污染。2、假如管內有棉花或纖維塞，可以在管上靠近棉花或纖維塞的中部銼一痕跡。3、用一團酒精浸泡的棉花將安瓿包起來以愛護雙手，然后手持安瓿從標記的銼痕處打開。4、將頂部當心移去并按污染材料處理。5、假如塞子仍舊在安瓿上，用消毒鑷子除去。6、緩慢向安瓿中加入液體來重懸凍干物，避開消滅泡沫。第三部分 消毒和滅菌一、定義關于消毒和滅菌有很多不同的術語，下面是生物平

10、安中較常用的：抗菌劑（antimicrobial） 能夠殺死微生物或抑制它們生長和繁殖的制劑。防腐劑（antiseptic） 能夠抑制微生物生長和繁殖但不足將其殺滅的物質。防腐劑經常應用于體表。生物殺滅劑（biocide） 全部能夠殺死生物體的制劑的統稱。化學殺菌劑（chemicalgermcide）用于殺死微生物的化學品或化學混合物。清除污染（decontamination）去除和或殺死微生物的任何過程。該詞也用于去除或中和有危害的化學品和放射性物質。消毒劑（disinfectant） 用于殺死微生物的化學品或化學混合物，但不肯定殺死其孢子。消毒劑常用于非生命物體或其表面。消毒（disinf

11、ection） 殺死微生物的物理或化學手段，但不肯定殺死其孢子。滅菌劑（microbicide） 能夠殺死微生物的化學品或化學混合物。該詞經常可以代替“生物殺滅劑”、“化學殺菌劑”或“抗菌劑”。殺孢子劑（sporocide） 用于殺死微生物和孢子的化學品或化學混合物。滅菌 （sterilization） 殺死和或去除全部微生物及其孢子的過程。二、化學殺菌劑很多殺菌劑對人或環境有害，應當按生產商的說明當心地進行選擇、貯存、操作、使用和廢棄。為了個人的平安，建議在稀釋化學殺菌劑時應戴手套、圍裙和愛護眼睛的器具。下面介紹一些常規使用的化學殺菌劑，并列出它們的一般用途和平安特征。除非另外標注，殺菌劑的

12、濃度用重量體積（w/v）來表示。表3-1匯總了含氯消毒劑的推舉使用濃度。表1 含氯消毒劑的推舉使用濃度“清潔”狀況下a“污染”狀況下b所需的有效氯濃度0.1%（1 g/L）0.5%（5 g/L）次氯酸鈉溶液（含有5的有效氯）20 mL/L100 mL/L次氯酸鈣（含有70的有效氯）1.4 g/L7.0 g/L二氯異氰尿酸鈉粉劑（含60的有效氯）1.7 g/L8.5 g/L二氯異氰尿酸鈉片劑（每片含1.5 g 有效氯）每升1 片每升4 片氯胺（含有25的有效氯）c20 g/L20 g/La 去除大部分污染材料后b 溢流狀況（如血液）或大量污染材料沒有除去時c 參見正文氯（次氯酸鈉）1、氯屬于快速

13、作用的氧化劑，是一種可廣泛應用的廣譜化學殺菌劑。它一般以次氯酸鈉（NaOCl）溶液來作為漂白劑銷售。但氯的很多副產物可能對人體及環境有害，應當避開濫用含氯消毒劑，特殊是漂白劑。2、常規試驗室消毒劑的有效氯濃度為1 g/L。處理生物危害性物質的溢出以及含有大量有機物的狀況時用含有5 g/L 有效氯的更強作用的溶液。家用漂白劑的次氯酸鈉溶液含有50 g/L 的有效氯，工業用漂白劑的次氯酸鈉溶液含有近120 g/L 的有效氯，因此必需進行相應的稀釋來達到工作濃度。3、次氯酸鈣Ca（ClO）2的顆粒或片劑一般含有70%的有效氯。用顆粒或片劑配制濃度1.4 g/L 或7.0 g/L 的溶液，其有效氯濃度

14、分別為1 g/L 和5 g/L。4、不建議將漂白劑當作防腐劑使用，但可以用作一般目的的消毒劑以及用于浸泡非金屬類的污染材料。在緊急狀況下也可以用終濃度含12 mg/L 有效氯的漂白劑來消毒飲用水。5、氯氣具有強毒性。因此漂白劑只能在通風良好的地方儲存和使用。6、漂白劑不能與酸混合以避開氯氣快速釋放。乙醇1、乙醇（C2H5OH）對于繁殖的細菌、真菌和含脂病毒具有活性，但不能滅活孢子，而對非含脂病毒的作用則不確定。2、其水溶液最有效的使用濃度約為70（v/v）；更高或更低的濃度均不適宜殺菌。3、醇類溶液的主要優點是處理后物品不會留下任何殘留物。4、將乙醇與其他試劑混合使用比單獨使用更有效，如70（

15、v/v）乙醇和100 g/L 的甲醛混合使用，以及使用含有2 g/L 有效氯的乙醇。5、70%（v/v）乙醇溶液可以用于消毒皮膚、試驗臺和生物平安柜的工作臺面，以及浸泡小的外科手術器械。6、由于乙醇可以使皮膚干燥，所以經常與潤滑劑混合使用。7、在不便于或不行能進行徹底洗手的狀況下，推舉使用含乙醇的擦手液對輕度污染的手進行消毒。但是必需記住，乙醇對孢子無效，而且不能殺死全部類型的非含脂類病毒。8、乙醇是易揮發和易燃的，不能在明火四周使用。9、其工作液應儲存在適當的容器內以避開醇類揮發。10、乙醇可以硬化橡膠并溶解某些膠質。11、為了避開乙醇用于其他非滅菌目的，在試驗室里對乙醇進行特地的清點和儲存

16、是格外重要的。12、含有乙醇溶液的瓶子必需清楚標記以避開被意外高壓滅菌。碘和碘伏1、這類消毒劑的作用與氯類似，只是有機質對它們的抑制作用略弱。2、碘可以使纖維和環境表面著色，一般不適合作為消毒劑。但是，碘伏和碘酊是很好的抗菌劑。3、多聚碘（polyvidone iodine）是一種平安牢靠的外科手術擦手劑和手術前皮膚抗菌劑。4、碘類抗菌劑一般不適于醫療牙醫器械的消毒。5、碘不能在鋁或銅上使用。6、碘有毒性。含有有機碘的產品必需于410儲存，以避開有潛在危害性的細菌在里面生長。三、清除局部環境的污染清除表面污染時使用次氯酸鈉（NaOCl）溶液；含有1有效氯的溶液適于一般的環境衛生設備，但是當處理

17、高危環境時，建議使用高濃度（5 g/L）溶液。用于清除環境污染時，含有3過氧化氫的溶液也可以作為漂白劑的代用品。四、洗手清除手部污染1、試驗室人員需要經常地、徹底地洗手。2、處理完生物危害性材料后以及離開試驗室前均必需洗手。3、大多數狀況下，用一般的肥皂和水徹底沖洗對于清除手部污染就足夠了。但在高度危急的狀況下，建議使用殺菌肥皂。手要完全抹上肥皂，搓洗至少10 秒鐘，用潔凈水沖洗后再用潔凈的紙巾或毛巾擦干。4、應使用紙巾或毛巾來關上水龍頭，以防止再度污染洗凈的手。5、假如沒有條件徹底洗手或洗手不便利，應當用酒精擦手來清除雙手的輕度污染。五、高壓滅菌高壓滅菌的濕熱法是最常用、最為有效的清除病原體

18、污染的物理手段。滅菌后的物品必需當心操作并保存，以保證在使用之前不再被污染。高壓滅菌參數對于大多數目的，下列組合可以確保正確裝載的高壓滅菌器的滅菌效果：1、134、3min2、126、10min3、121、30min4、115、45min高壓滅菌器的裝載為了利于蒸汽的滲透和空氣排出，高壓滅菌物品應松散包裝放置在滅菌器內。要使蒸汽能夠作用到其內容物。高壓滅菌器使用留意事項1、應由受過良好培訓的人員負責高壓滅菌器的操作和日常維護。2、由有資質人員定期檢查滅菌器柜腔、門的密封性以及全部的儀表和把握器。3、應使用飽和蒸汽，并且其中不含腐蝕性抑制劑或其他化學品，這些物質可能污染正在滅菌的物品。4、全部要

19、高壓滅菌的物品都應放在空氣能夠排出并具有良好熱滲透性的容器中；滅菌器柜腔裝載要松散，以便蒸汽可以均勻作用于裝載物。5、當滅菌器內部加壓時，互鎖平安裝置可以防止門被打開，而沒有互鎖裝置的高壓滅菌器，應當關閉主蒸汽閥并待溫度下降到80以下時再打開門。6、當高壓滅菌液體時，由于取出液體時可能因過熱而沸騰，故應接受慢排式設置。7、即使溫度下降到80以下，操作者打開門時也應當戴適當的手套和面罩來進行防護。8、在進行高壓滅菌效果的常規監測中，生物指示劑或熱電偶計應置于每件高壓滅菌物品的中心。最好在“最大”裝載時用熱偶計和記錄儀進行定時監測，以確定滅菌程序是否恰當。9、應當留意保證高壓滅菌器的平安閥沒有被高

20、壓滅菌物品中的紙等堵塞。附錄1設備的平安性儀器設備在使用時，有些操作可能造成微生物學危害，而另外一些操作或處理則是特地設計用來避開或削減生物學危害的。表A1-1 可能產生危害的儀器設備及其操作儀器危害如何消退或削減危害皮下注射針頭 意外接種、產生氣溶膠或有害物質溢出 不要重新給針頭戴護套或截斷針頭。 使用針頭鎖定型注射器以避開針頭和注射器的分別，或使用針頭和注射器為一體的一次性注射器。 接受規范的試驗室技術，例如：注射器抽液時要當心，盡可能削減形成氣泡和接種物泡沫。避開用注射器來混合感染性液體；否則，要確保針頭的尖端伸入到容器中液面之下，并避開用力過大。從有橡皮塞的瓶子中取下針頭之前，應用經適

21、當消毒劑浸濕的脫脂棉來包裹針頭和塞子。豎直向上將注射器中過量的液體和氣泡排到經適當消毒劑浸濕的脫脂棉或裝有棉花的小瓶中。 操作感染性物質時均應在生物平安柜中進行。 使用后要進行高壓滅菌并確保進行了妥當處理。假如使用的是一次性針頭和注射器，只有在高壓滅菌后才能拆卸。 使用可封閉性的容器（平安杯）或密封轉子。在氣溶膠沉降后（30min）再打開容器或轉子，或在生物平安柜中操作。離心機產生氣溶膠、噴濺及離心管裂開 在離心機和真空泵之間安裝HEPA 過濾器。振蕩器產生氣溶膠、泄漏和容器裂開 在打開勻漿器以前先等候30min 以使氣溶膠沉積。冷卻以使氣溶膠分散。表A1-2 儀器設備相關事故的緣由事故事故緣由削減或消退危害設計或建筑有缺陷培育箱有電火花電擊沒有溫度過高斷路裝置沒有供應牢靠的接地 符合國家標準不適當使用離心事故轉軸上的離心桶吊籃沒有平衡 培訓和監督工作人員厭氧培育箱爆炸不正確使用氣體 培訓和監督工作人員不正確配用家用型冰箱爆炸危急性化學品沒有儲存在防火防爆容器中，如用滲漏的螺旋瓶蓋儲存乙醚。 低閃點溶劑和提取物僅貯存在具有火花爆