第一組年產(chǎn)萬(wàn)株馬鈴薯組培苗工廠設(shè)計(jì)_第1頁(yè)
第一組年產(chǎn)萬(wàn)株馬鈴薯組培苗工廠設(shè)計(jì)_第2頁(yè)
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1、植 物 組 培 育 苗 工 廠 設(shè) 計(jì)題目:年產(chǎn)500萬(wàn)株馬鈴薯苗組培育苗工廠設(shè)計(jì)姓名:鄔龍祺組員:楊宇鵬、田濤、周桂花、 張路、李彪、馮恩輝、李彌班級(jí):生物工程111 班指導(dǎo)老師:郭燕華時(shí)間:2014年12月19日目 錄第一章 前言 3第二章 廠址選擇與工廠總平面設(shè)計(jì) 6 2.1廠址選擇 2.2工廠平面設(shè)計(jì)第三章 車間布置及其設(shè)備介紹 73.1 準(zhǔn)備間3.2 培養(yǎng)基配制及滅菌室3.3 檢測(cè)、稱量室、藥品室 3.4 接種室3.5 培養(yǎng)室3.6 主要設(shè)備第四章 工廠化組培苗工藝流程 12 4.1組培苗工藝流程 4.2商品組培苗生產(chǎn)流程第五章 工藝計(jì)算 17 5.1生產(chǎn)規(guī)模與生產(chǎn)計(jì)劃計(jì)算 5.2計(jì)

2、劃的制定 5.3每年物料總衡算第六章 廢物處理 23 6.1廢水處理方法 6.2廢棄瓊脂培養(yǎng)基處理方法第七章 工程項(xiàng)目的設(shè)計(jì)概算 25 7.1投資估算7.2工廠組織及勞動(dòng)定員7.3經(jīng)費(fèi)總預(yù)算和用途7.4設(shè)計(jì)的預(yù)期經(jīng)濟(jì)效益第一章 前 言1.該植物的生物學(xué)知識(shí)、特性馬鈴薯是茄科植物,通常用塊莖繁殖,但也可用種子種植。許多馬鈴薯品種能天然結(jié)果。育種家利用雜交方法得到的種子和天然結(jié)實(shí)的種子進(jìn)行馬鈴薯新品種選育。分離小的種子還可以直接用于生產(chǎn)。所以了解馬鈴薯的生物學(xué)特征在生產(chǎn)上有重要意義。1根馬鈴薯用塊莖種植和用種子種植時(shí),根部形態(tài)不相同。用塊莖種植的根為須根,沒(méi)有直根。須根從種薯上幼芽基部發(fā)出,而后又

3、分枝形成許多側(cè)根。根系發(fā)育及分枝情況,因品種與栽培條件不同而異。大部分品種的根系分布在土壤表層下40厘米,一般不超過(guò)70厘米,在砂質(zhì)土壤中根深也可達(dá)1米以上。早熟種的根系一般不如晚熟種發(fā)達(dá),而且早熟種根系分布較淺,晚熟種分布廣而較深。所以,種植馬鈴薯時(shí)要根據(jù)品種的熟性和根系的分布情況來(lái)確定株、行距,才能獲得高產(chǎn)。 用種子種植時(shí)植株有主根(直根)和側(cè)根。根的分枝隨植株的生長(zhǎng)而增多。主根為圓錐形深入土中,若生長(zhǎng)條件好,實(shí)生苗的根系也很發(fā)達(dá)。有的地方實(shí)生苗當(dāng)年單株產(chǎn)量可達(dá)1千克以上,這與實(shí)生苗形成的強(qiáng)大的根系是分不開(kāi)的。 2莖馬鈴薯的莖有地上莖、地下莖、匍匐莖和塊莖。地上莖:種植的馬鈴薯塊莖發(fā)芽生長(zhǎng)

4、后,在地面上著生枝葉的莖為地上莖。莖上有棱3-4條,棱角突出呈翼狀。莖上節(jié)部膨大,節(jié)間分明。節(jié)處著生復(fù)葉,復(fù)葉基部有小型托葉。多數(shù)品種節(jié)處堅(jiān)實(shí),節(jié)間中空。莖色有綠、紫褐等,因品種而異。莖有直立、半直立和匍匐型3種。栽培種的莖,大多為直立或半直立型。莖高多數(shù)品種在40-100厘米之間,少數(shù)中晚熟品種在100厘米以上。莖上分枝的部位與品種有關(guān),早熟品種在中上部發(fā)出,中晚熟品種大都在下部或靠近莖的基部發(fā)出。另外,莖的粗細(xì)、有無(wú)茸毛等均可作為區(qū)分品種的標(biāo)志。 (2)地下莖:塊莖發(fā)芽后埋在土壤內(nèi)的莖為地下莖。地下莖的節(jié)間較短,在節(jié)的部位生出匍匐莖(枝)。匍匐莖頂端膨大形成塊莖。(3)匍匐莖:匍匐莖又稱匍

5、匐枝,實(shí)際上是莖在土壤中的分枝。早熟品種在幼苗出土后7-10天即開(kāi)始生出匍匐莖;2周后匍匐莖的頂端膨大,逐漸形成塊莖,初期還能在匍匐莖上看到鱗片狀幼葉。如果播種的薯塊覆土太淺或遇到土壤溫度過(guò)高等不良環(huán)境條件,匍匐莖會(huì)長(zhǎng)出地面變成普通的分枝。這就會(huì)影響結(jié)薯而減產(chǎn)。匍匐莖的多少和長(zhǎng)短,因品種而異。一般早熟種較短,3-10厘米;晚熟種較長(zhǎng),有的達(dá)10厘米以上。匍匐莖較短的結(jié)薯集中,便于收獲。通常1個(gè)匍匐莖上只結(jié)1個(gè)塊莖,每株以5-8個(gè)匍匐莖并形成塊莖為適宜。如果匍匐莖過(guò)多或匍匐莖又產(chǎn)生分枝,則形成塊莖又多又小,就失去利用價(jià)值。(4)塊莖:栽培馬鈴薯的主要目的就是為了獲得高產(chǎn)的塊莖。塊莖是生長(zhǎng)在土壤中

6、的縮短了的莖。它的作用在于貯存養(yǎng)分、繁殖后代。莖與根的明顯區(qū)別是莖上有芽,而根上沒(méi)有固定芽,只能產(chǎn)生不定芽。馬鈴薯塊莖上的芽眼多少、深淺是鑒別品種的主要標(biāo)志。塊莖上每個(gè)芽眼通常由一個(gè)主芽、兩個(gè)副芽組成。塊莖通過(guò)休眠期后,頂芽的主芽先生長(zhǎng),而后側(cè)芽的主芽相繼發(fā)出。主芽受損后副芽可取而代之,繼續(xù)生長(zhǎng)。塊莖的形狀、皮色、肉色等多種多樣,都是區(qū)別品種的特征。生產(chǎn)上對(duì)塊莖的要求除高產(chǎn)外,還希望形狀好,芽眼淺,表皮光滑,色澤悅目等。特別是塊莖形狀最好是卵圓形,頂部不凹,臍部不陷,芽眼少而平,既有利于加工去皮,又便于食用清洗。這樣的品種才適合市場(chǎng)銷售和商品薯出口。 2.該植物的經(jīng)濟(jì)價(jià)值、生產(chǎn)現(xiàn)狀與市場(chǎng)前景馬

7、鈴薯含有淀粉、蛋白質(zhì)、磷、鐵、無(wú)機(jī)鹽以及多種維生素,兼具有糧食、蔬菜的雙重優(yōu)點(diǎn),在馬鈴薯的全部營(yíng)養(yǎng)物質(zhì)中,淀粉含量占第一位,其次是蛋白質(zhì),馬鈴薯的蛋白質(zhì)屬于完全蛋白質(zhì),能夠很好地被人體吸收,它所含的維生素C比去皮的蘋果高50。營(yíng)養(yǎng)均衡是它的突出特點(diǎn)之一,它所含有的維生素是小麥和稻米的7倍,各類微量元素含量是稻米、甘薯的兩倍左右。古時(shí)候人們出海遠(yuǎn)航,為避免發(fā)生壞血病都隨身攜帶馬鈴薯,一個(gè)人吃200300克的新鮮馬鈴薯就可以補(bǔ)償人一晝夜維C的消耗,它的各種營(yíng)養(yǎng)成分比例平衡、全面。有資料報(bào)道,每天只吃全脂牛奶和馬鈴薯就可以滿足人體所需要的全部食物營(yíng)養(yǎng)元素。與其他主食相比,儲(chǔ)存得當(dāng)(發(fā)芽的馬鈴薯會(huì)產(chǎn)生

8、生物堿龍葵素,對(duì)人體有毒)的馬鈴薯營(yíng)養(yǎng)全面,富含各類微量元素、維生素,具有低脂肪、低熱量的特點(diǎn),符合現(xiàn)代人的膳食要求。中醫(yī)認(rèn)為馬鈴薯“性平味甘無(wú)毒,能健脾和胃,益氣調(diào)中,緩急止痛,通利大便。對(duì)脾胃虛弱、消化不良、腸胃不和、脘腹作痛、大便不暢的患者效果顯著”。現(xiàn)代研究證明,馬鈴薯對(duì)調(diào)解消化不良有特效,是胃病和心臟病患者的良藥及優(yōu)質(zhì)保健品。馬鈴薯淀粉在人體內(nèi)吸收速度慢,是糖尿病患者的理想食療蔬菜;馬鈴薯中含有大量的優(yōu)質(zhì)纖維素,在腸道內(nèi)可以供給腸道微生物大量營(yíng)養(yǎng),促進(jìn)腸道微生物生長(zhǎng)發(fā)育;同時(shí)還可以促進(jìn)腸道蠕動(dòng),保持腸道水分,有預(yù)防便秘和防治癌癥等作用;馬鈴薯中鉀的含量極高,每周吃五六個(gè)馬鈴薯,可使患

9、中風(fēng)的幾率下降40,對(duì)調(diào)解消化不良又有特效;它還有防治神經(jīng)性脫發(fā)的作用,用新鮮馬鈴薯片反復(fù)涂擦脫發(fā)的部位,對(duì)促進(jìn)頭發(fā)再生有顯著的效果。馬鈴薯現(xiàn)已經(jīng)成為中國(guó)最重要的農(nóng)作物之一,僅次于水稻、玉米、小麥居第4位。現(xiàn)在全球種植馬鈴薯的國(guó)家有148個(gè),總產(chǎn)量3億噸。中國(guó)種植面積7(DO萬(wàn)畝、總產(chǎn)量超過(guò)7000萬(wàn)噸,分別占全球的五分之一和四分之一。中國(guó)加入世貿(mào)組織,水稻、小麥、玉米和大豆的國(guó)際市場(chǎng)競(jìng)爭(zhēng)力日趨減弱但馬鈴薯的產(chǎn)量高、成本低,有很大的發(fā)展優(yōu)勢(shì)與發(fā)展?jié)摿ΑqR鈴薯生產(chǎn)的經(jīng)濟(jì)效益高,據(jù)測(cè)算,1999年我國(guó)每年每公頃谷物的產(chǎn)值約為3956元,豆類3386元,油料類為4116元,而薯類(主要是馬鈴薯)為8

10、790元,以此產(chǎn)值計(jì)算,馬鈴薯可以達(dá)到油料作物的兩倍多,遠(yuǎn)遠(yuǎn)高于谷類和豆類所創(chuàng)造的產(chǎn)值。此外,馬鈴薯加工增值潛力很大,可以實(shí)現(xiàn)加工增值15至20倍,國(guó)外7080的馬鈴薯都是依靠加工實(shí)現(xiàn)增值。總之,隨著馬鈴薯用途的不斷拓寬,馬鈴薯在中國(guó)的傳播發(fā)展前景廣闊,為農(nóng)業(yè)的增產(chǎn)增收起到越來(lái)越重要的作用。第二章廠址選擇與工廠總平面設(shè)計(jì)2.1廠址選擇 廠址選擇是化工廠建設(shè)過(guò)程中非常重要的一個(gè)環(huán)節(jié)。廠址的選擇是否正確合理,將對(duì)以后工廠的建設(shè)速度、運(yùn)轉(zhuǎn)成本、環(huán)境保護(hù)、發(fā)展?jié)摿ι踔涟踩a(chǎn)等方面都會(huì)產(chǎn)生直接的影響。 馬鈴薯工廠化育苗廠址應(yīng)選在地勢(shì)平坦、排水良好處。切忌選在地勢(shì)低注、排水不良和風(fēng)口處。對(duì)土壤肥力和質(zhì)地

11、要求不高,但要求交通方便、水源充足、電力供應(yīng)正常。同時(shí)、冰雹、大風(fēng)等災(zāi)害性天氣、生產(chǎn)原材料與產(chǎn)地距離、造林地距離也是必須考慮的因素。 馬鈴薯工廠化育苗的場(chǎng)地由播種車間,催芽室,育苗溫室及附屬用房(包裝間,組培室等)組成。播種車間占地面積視育苗數(shù)量而定,一般為100平方米左右,主要放置播種流水線,絞拌機(jī)及一部分基質(zhì),肥料,育苗盤,推車等。催芽室一般15平方米左右,設(shè)有加熱,增濕和空氣交換等自動(dòng)控制和顯示系統(tǒng),室內(nèi)溫度,光照可調(diào),相對(duì)濕度能保持在85%90%。2.2工廠平面設(shè)計(jì)工廠總平面如下:本項(xiàng)目占地2畝。煉苗溫室、種植溫室都可利用本園區(qū)現(xiàn)有設(shè)施,需要新建的主要內(nèi)容如下:1.組培室彩鋼板房600

12、平方米;2.凈化室及凈化系統(tǒng)400平方米;3.控溫控濕系統(tǒng);4.給排水系統(tǒng)和300kv雙回路供電系統(tǒng);5.組織培養(yǎng)設(shè)施設(shè)備和實(shí)驗(yàn)儀器。工廠平面圖見(jiàn)附圖。第三章 車間布置及其設(shè)備介紹3.1 準(zhǔn)備間要求具有耐酸堿的水池和排水口。每天都有大量的植物材料碎片、瓊脂等東西堆積,因此排水口一定要安裝過(guò)濾網(wǎng),做到每天清洗檢查,一是減少微生物滋生源,二是避免排水系統(tǒng)堵塞,帶來(lái)不必要的麻煩。配有不同形狀及大小的洗滌刷,條件允許的話可以安裝洗瓶機(jī)器,更能提高工作效率。配備數(shù)個(gè)塑料箱盛裝瓶子,將瓶放入箱內(nèi)時(shí),應(yīng)倒立,這樣可使瓶子自然干燥。3.2 培養(yǎng)基配制及滅菌室 手提式高壓滅菌鍋23個(gè),用于一些小型物品或急需用品

13、的高壓滅菌。組培工廠必須配備1至數(shù)臺(tái)大型滅菌鍋,直徑4050cm的不銹鋼或鋁鍋23個(gè),用于溶解瓊脂或調(diào)制培養(yǎng)基,加熱源最好采用煤氣灶或用電。 去離子水發(fā)生器12臺(tái)。 干燥箱1臺(tái),用于器皿或急需用具的干熱滅菌。 大型工作臺(tái)12張,用于培養(yǎng)基分裝、包扎等。 玻璃柜1個(gè),用于放置藥品等。 試劑瓶、具刻度移液管、皮下注射器、量筒、搪瓷量杯、容量瓶、各式塑料瓶或塑料桶等易損品數(shù)個(gè),更重要的是配備大量充足的培養(yǎng)瓶。3.3 檢測(cè)、稱量室、藥品室 PCR儀:可用于真菌和細(xì)菌性病原菌的檢測(cè)和部分病毒病的檢測(cè)。 酶標(biāo)儀:通過(guò)血清免疫技術(shù)(ELISA)進(jìn)行主要病毒病的檢測(cè)。 雙目顯微鏡、解剖鏡:用于植物組織培養(yǎng)材料

14、的形態(tài)發(fā)育及細(xì)胞觀察。 凹穴載玻片:用于細(xì)胞懸浮培養(yǎng)。 載玻片和蓋玻片:用于制作細(xì)胞和組織的顯微制片。 光照培養(yǎng)箱;用于不同種類植物培養(yǎng)方法或培養(yǎng)條件的研究。 冰箱:用于貯存化學(xué)藥品,培養(yǎng)基母液和植物材料等。 低溫冰箱:用于長(zhǎng)期貯存培養(yǎng)基儲(chǔ)備液,某些酶和椰子汁等。 稱量?jī)x器:包括感量為110000的電子天平,感量為110的普通托盤天平,稱量為15kg的臺(tái)秤等,用于藥品的稱量配制和植物組織生長(zhǎng)量的測(cè)定。 水質(zhì)及培養(yǎng)基檢測(cè)儀器:包括pH酸度計(jì)、電導(dǎo)率儀或Ec值測(cè)定儀。3.4 接種室 這是組培工廠的最核心和關(guān)鍵部分,是進(jìn)行無(wú)菌操作的場(chǎng)所,如植物材料的消毒接種,無(wú)菌材料的繼代,叢生苗的增殖或切割,嫩莖

15、插植生根等。它也關(guān)系到污染率這項(xiàng)最重要的成本指標(biāo)的高低,直接影響組培工廠的工作效率及經(jīng)濟(jì)效益。無(wú)菌操作室原則上宜小不宜大,要有緩沖間,以便進(jìn)人無(wú)菌室前在此洗手、換衣、換鞋、預(yù)處理材料等。無(wú)菌室的地板和四周墻壁應(yīng)盡可能光潔,不易積染灰塵,易于采取各種清潔和消毒措施。無(wú)菌室內(nèi)要吊裝紫外滅菌燈,用于經(jīng)常照射滅菌。要安裝空調(diào)機(jī),保持室溫在2325,原則上無(wú)菌室的門窗應(yīng)緊閉,保持與外界相對(duì)隔絕。無(wú)菌操作室內(nèi)需要的用具如下: 超凈工作臺(tái):用于進(jìn)行無(wú)菌操作。 室內(nèi)小推車:用于運(yùn)送培養(yǎng)物、培養(yǎng)基和各種器皿用具。 酒精燈:用于灼燒各種金屬用具。 手持噴霧器:用于在超凈工作臺(tái)內(nèi)或?qū)ζ渌锲穱姙⒕凭M(jìn)行消毒。 帶蓋

16、螺口玻璃瓶:用于盛裝無(wú)菌水,對(duì)植物材料進(jìn)行表面消毒。 大的鈍頭鑷子:用于進(jìn)行接種和繼代、生根等操作。 細(xì)解剖針;用于植物材料的解剖。 解剖刀:用于切割植物材料。 各種孔徑的不銹鋼篩網(wǎng):用于分離太小不同的細(xì)胞團(tuán)。 低速臺(tái)式離心機(jī):用于沉淀細(xì)胞以便確定沉積細(xì)胞的總體積或清洗原生質(zhì)體。 振蕩培養(yǎng)器;用于植物材料的液體培養(yǎng)。 血球計(jì)算器;用于細(xì)胞計(jì)數(shù)。3.5 培養(yǎng)室培養(yǎng)室要講究保溫隔熱。如果是專為組織培養(yǎng)設(shè)計(jì)的新建筑,為了減少能源消耗,培養(yǎng)室應(yīng)盡量利用自然光照,最大限度地增加采光面積。除必要的承重結(jié)構(gòu)外,全部安裝落地式雙層大玻璃窗,并在窗外設(shè)置防止直射的半透明瓦楞板,它的寬度、數(shù)目應(yīng)按當(dāng)?shù)氐木暥取⑷照?/p>

17、強(qiáng)度、日照時(shí)數(shù)等氣象因子適當(dāng)考慮。培養(yǎng)室的四壁可選白色或淺米黃色防霉漆、涂料等涂層,地面也應(yīng)選淺色建材,最好是白水泥、白水磨石或同樣的磨石砌塊、瓷磚等,頂部為白色,總之各處都應(yīng)增強(qiáng)反光,以提 高室內(nèi)的光亮度和易于清掃。我國(guó)大多數(shù)地區(qū)屬大陸性氣候,夏熱冬冷,而培養(yǎng)室要求常年保持25士(12),因此房屋構(gòu)造上要做到保溫、隔熱、防寒性能良好,做到冬暖夏涼。溫度調(diào)節(jié)常借助空調(diào)機(jī),使高溫季節(jié)降溫,低溫季節(jié)升溫。在華南、昆明等冬暖地區(qū),冬季由輔助照明燈產(chǎn)生的熱量即可很容易地維持室溫在2 5左右。房屋結(jié)構(gòu)及隔熱性能良好, 無(wú)論降溫或升溫都可有效地節(jié)省能源,并易于保持溫度的穩(wěn)定。培養(yǎng)室應(yīng)設(shè)計(jì)能有效通風(fēng)的窗戶,

18、定期或需要時(shí)加強(qiáng)通風(fēng)散熱,如夏初或秋末,一天內(nèi)溫度變化很大,即使夏天,有時(shí)夜溫也不適宜必要時(shí)都可利用通風(fēng)來(lái)調(diào)節(jié)溫度,這樣可節(jié)省一些降溫用電。方法是只要在室內(nèi)地板稍高處設(shè)置進(jìn)風(fēng)氣窗,在氣窗的對(duì)側(cè),近天花板處 設(shè)置排風(fēng)窗,亦可安裝小功率的排風(fēng)扇,利用自然空氣來(lái)調(diào)節(jié)室內(nèi)的溫度。進(jìn)風(fēng)氣窗可用兩層以上的紗布簡(jiǎn)單地濾塵。如果改建,則應(yīng)考慮增加窗戶,改為雙層窗,內(nèi)壁加保溫隔熱層,如加一層纖維板或膠合板,墻與板之間填塞保溫物如蛭石、軟木磚、泡沫塑料塊等。如原有建筑質(zhì)量較好,外界溫度變化并非太劇烈,也可只釘一層纖維板,留下適當(dāng)?shù)目諝鈱樱踔劣诳芍苯永迷蟹可嶙髋囵B(yǎng)室。培養(yǎng)室的天花板也應(yīng)有保溫層,地面架設(shè)地板,

19、以利保溫。至于這些結(jié)構(gòu)應(yīng)當(dāng)完善到什么程度,主要根據(jù)當(dāng)?shù)氐臏囟茸兓闆r、投資的多少等來(lái)決定。3.6 主要設(shè)備:如電子天平、超凈工作臺(tái)、高壓蒸汽滅菌鍋、微波爐、冰箱等工廠所需儀器、設(shè)備擬定價(jià)目表設(shè) 備 一 覽 表序號(hào)設(shè)備名稱型號(hào)尺寸單價(jià) (元)數(shù)量總價(jià)/萬(wàn)元備注1洗瓶機(jī)Labconco-4400331 24.1寸w×27.4寸d×34.1-36.1寸 h95000219 廣口瓶;93度水溫 2定量灌裝機(jī)GFZLQ1200×800×2100mm4500029全自動(dòng)直列式;灌裝量 0.5L-10L;生產(chǎn)能力1000-2000瓶/小時(shí) 3臥式滅菌器750043容積

20、60 L4消毒滅菌鍋40000145液體培養(yǎng)搖床600021.2垂直或水平6連續(xù)可調(diào)移液器1000101.25ml、2ml、1ml、100l、110l、0.11l各2支7電子天平JA10003B350×215×325mm400031.2稱量范圍/g0-1000;可讀性精度/g1mg8磁力攪拌器Feb-90185×185×140mm100010.1攪拌速度:0-1250轉(zhuǎn)/分;加熱溫度:室溫-150;加熱功率:0-350W9微波爐G80Q23YSP-V99159820.32微波電壓220V/50Hz;容量23L;輸出功率800W10萬(wàn)用電爐 DL-2500

21、40.2 功率:2KW;電壓:220V 11在線PH計(jì)PH2200S96×96×135 mm(H×W×D)300020.6pH:014.00pH; ORP:-2000+2000 mV; Temp:080 12酶標(biāo)儀3000013病毒檢測(cè)13電泳儀600010.6病毒檢測(cè)14解剖鏡200010.240倍15顯微鏡1800011.81001000倍16離心機(jī)600021.2300010000r/min17冰柜haierFCD-270SE1385×560×920mm寬×深×高200020.418低溫冰箱MDF-25H56

22、51810×755×840 mm寬×深×高400001419藥品柜 GS-12長(zhǎng)度900mm/寬度450mm/高度1800mm200020.4寶鋼產(chǎn)1.0mm厚冷軋?zhí)间摫“?0操作臺(tái)全鋼5500042采用寶鋼集團(tuán)1.0-1.2mm優(yōu)質(zhì)鋼 21光照培養(yǎng)箱LRH-400GS840×780×1840mm1000033400L22鼓風(fēng)干燥箱DGX-8243B膽尺寸500×600×750mm500021控溫范圍:10040023超凈工作臺(tái)SW-CJ-2F1360×680×520mm寬×深

23、5;高8000108 雙人單面;送風(fēng)方式:垂直送風(fēng)24接種器械滅菌器HM-3000C 最大消毒物品外徑35mm 1000202中心最高溫度:825± 5025紫外線殺菌燈 PHILIPS TUV16W全長(zhǎng):451.6mm;管徑:28.0mm 50400.2 功率:16W;壽命:8000H26培養(yǎng)架ZPJ-12501800×500×2000mm70020014 6層;200瓶/層;光照度可調(diào):2000-5000lux27除濕機(jī)CFZ-858520×390×770mm400022.4適用面積30-6028培養(yǎng)瓶玻璃罐頭瓶瓶高110mm;口徑59mm

24、;底徑80mm0.445000018壁厚3-5mm;容量:400ml29組培筐HT-K1外620×520×65mm內(nèi)580×485×48mm106000.6耐高溫高壓,白色,790g30恒溫培養(yǎng)箱100020.230-10031推車RCS-FA-012800×500×30mm150100.15 平臺(tái)高度165mm; 最大承重300KG 32玻璃儀器0.6量筒、燒杯、玻璃棒等合計(jì)103.57第四章 工廠化組培苗工藝流程4.1組培苗工藝流程工廠化生產(chǎn)種苗,首先要制定好生產(chǎn)計(jì)劃。制定生產(chǎn)計(jì)劃要根據(jù)每種植物的組織培養(yǎng)工廠化生產(chǎn)的工藝流程。擬定

25、工藝流程,又要根據(jù)植物組織培養(yǎng)的技術(shù)路線。以馬鈴薯為例,其工廠化生產(chǎn)工藝流程見(jiàn)圖:外植體 將薯塊沙培催芽,待萌芽發(fā)展至23cm采集品種純正、生長(zhǎng)健壯,切成若干塊消毒 75%的酒精 0.1%HgCl2消毒3-5分鐘,無(wú)菌水沖洗4-5次培養(yǎng)基誘導(dǎo)培養(yǎng)基:MS+6-BA 5.0 mg/ml +NAA 0.2 mg/ml,蔗糖3.0%,PH5.8增殖培養(yǎng)基:MS+6-BA 3.0 mg/ml +NAA 0.1 mg/ml,蔗糖3.0%,PH5.8誘根培養(yǎng)基:MS+NAA 0.2 mg/ml,蔗糖3.0%,PH5.8接種(每瓶5株)25天 無(wú)菌操作 芽的增殖 根的誘導(dǎo):溫度28±2,光強(qiáng)200

26、0-3000 Lux, 每日光照10-12小時(shí) 生根率85% 污染率5%試管苗 繁殖倍數(shù)在3左右 繼代培養(yǎng)周期:60天。繼代培養(yǎng)(6代)煉苗 在誘根培養(yǎng)18天后,置于可控制光強(qiáng)的 遮蔭棚內(nèi)進(jìn)行煉苗,以達(dá)到壯苗的目的移栽培養(yǎng)袋中的小苗,達(dá)到假莖高4-5cm、具體3-4片以上的真葉和根系生長(zhǎng)良好的規(guī)格時(shí),即可在假植苗圃中移栽,培育達(dá)到杯苗質(zhì)量標(biāo)準(zhǔn),方可定植于大田檢疫性病原檢測(cè) 對(duì)每一個(gè)外植體發(fā)生的不定芽進(jìn)行病毒檢測(cè)商品苗 馬鈴薯脫毒及快速繁殖工藝流程圖4.2 商品組培苗生產(chǎn)流程商品苗的選擇培養(yǎng)基的選擇及配置誘導(dǎo)培養(yǎng)基:MS+6-BA 5.0 mg/ml +NAA 0.2 mg/ml,蔗糖3.0%,

27、PH5.8增殖培養(yǎng)基:MS+6-BA 3.0 mg/ml +NAA 0.1 mg/ml,蔗糖3.0%,PH5.8誘根培養(yǎng)基:MS+NAA 0.2 mg/ml,蔗糖3.0%,PH5.8.外植體的滅菌、接種.1滅菌外植體在接種前必須滅菌。在滅菌前,先在準(zhǔn)備室對(duì)外植體進(jìn)行預(yù)處理,去掉不需要的部分,將準(zhǔn)備使用的植物材料在流水中沖洗干凈。經(jīng)過(guò)預(yù)處理的植物材料,其表面仍有很多細(xì)菌和真菌,因此拿入接種室后還需進(jìn)一步滅菌。 常規(guī)的表面滅菌處理方法是把材料放進(jìn)75%的酒精中,約30s后用無(wú)菌水沖洗1次,再在0.1%的升汞(HgCl2)中浸泡35min,然后用無(wú)菌水沖洗45次。滅菌時(shí)進(jìn)行攪動(dòng),使植物材料與滅菌劑有

28、良好的接觸。 .2接種接種是把經(jīng)過(guò)表面滅菌后的植物材料切碎或分離出器官、組織、細(xì)胞,轉(zhuǎn)放到無(wú)菌培養(yǎng)基上的全部操作過(guò)程。整個(gè)接種過(guò)程均須無(wú)菌操作。(1)接種室用紫外燈照射滅菌2030 min,或提前0.51天用高錳酸鉀和甲醛混合液薰蒸。接種臺(tái)要提前開(kāi)啟。(2)工作人員進(jìn)入接種室前需用肥皂水洗手滅菌,并在緩沖室換上已經(jīng)滅菌的白色工作服和拖鞋,戴工作帽和口罩。工作人員的呼吸也是污染的主要途徑,通常在平靜呼吸時(shí)細(xì)菌是很少的,但是談話或咳嗽時(shí)細(xì)菌便增多,頭皮屑也帶有細(xì)菌,因此操作過(guò)程應(yīng)禁止不必要的談話,并戴上帽子和口罩。(3)進(jìn)入接種室后用75%的酒精擦洗雙手、接種臺(tái)和一切需放上工作臺(tái)的所有器具,對(duì)外植

29、體進(jìn)行滅菌處理。特別注意防止“雙重傳遞”的污染,例如器械被手污染后又污染培養(yǎng)基等。(4)點(diǎn)燃酒精燈,將接種鉤、剪刀、鑷子放入不銹鋼盤或瓷盤內(nèi)燒灼,冷卻后備用。接種鉤、剪刀、鑷子等不使用時(shí)浸泡在95%酒精中,用時(shí)在火焰上滅菌,待冷卻后使用。每次使用前均需進(jìn)行用具滅菌。(5)將外植體放入經(jīng)燒灼滅菌的不銹鋼盤或瓷盤內(nèi)處理。如外植體為莖段的,將莖段上的葉柄和莖的上下端剪掉一小節(jié);培養(yǎng)脫毒苗的,在雙筒解剖鏡下剝離切取大小約0.20.3 mm的莖尖分生組織。(6)燒灼瓶口和塞子,將培養(yǎng)瓶?jī)A斜拿穩(wěn),打開(kāi)塞子,用鑷子將接種材料送入瓶?jī)?nèi),用接種鉤將材料壓入培養(yǎng)基中,燒灼瓶口和塞子并上塞。在打開(kāi)培養(yǎng)瓶、三角瓶或試

30、管時(shí),最大的污染危險(xiǎn)是管口邊沿沾染的微生物落入管內(nèi),燒灼是解決這個(gè)問(wèn)題的有效辦法。如果培養(yǎng)液接觸了瓶口,則瓶口要燒到足夠的熱度,以殺死存在的細(xì)菌。為避免灰塵污染瓶口,可用紙包扎瓶口和塞子,以遮蓋瓶子頸部和試管口,相對(duì)地減少污染機(jī)會(huì)。.3外植體的培養(yǎng)接種后的外植體應(yīng)送到培養(yǎng)室去培養(yǎng)。培養(yǎng)過(guò)程中既要調(diào)控好培養(yǎng)條件,又要注意防止發(fā)生菌類污染、外植體褐變和植株玻璃化現(xiàn)象,確保組織培養(yǎng)的成功。培養(yǎng)室的培養(yǎng)條件要根據(jù)植物對(duì)環(huán)境條件的不同需求進(jìn)行調(diào)控。其中最主要的是光照、溫度、濕度、氧氣等。(1)光照 光照對(duì)離體培養(yǎng)物的生長(zhǎng)發(fā)育具有重要的作用。通常對(duì)愈傷組織的誘導(dǎo)來(lái)說(shuō),暗培養(yǎng)比光培養(yǎng)更合適。但器官的分化需要

31、光照,并且隨著試管苗的生長(zhǎng),光照強(qiáng)度需要不斷地加強(qiáng),才能使小苗生長(zhǎng)健壯,并促進(jìn)它從“異養(yǎng)”向“自養(yǎng)”轉(zhuǎn)化,提高移植后的成活率。一般先暗培養(yǎng)1周,1 周后每日光照1012h,光照強(qiáng)度從20003000lx逐漸過(guò)渡。暗培養(yǎng)可用鋁箔或者適合的黑色材料(如黑色棉布)包裹在容器的周圍,或置于大紙箱和暗室中培養(yǎng)。 (2)溫度 離體培養(yǎng)中對(duì)溫度的調(diào)控要比光照顯得更為突出。不同的植物有不同的最適生長(zhǎng)溫度。馬鈴薯在培養(yǎng)瓶中培養(yǎng)的溫度適應(yīng)范圍較寬,在2228都可以。但溫度過(guò)低,會(huì)使苗質(zhì)脆弱,生長(zhǎng)速度延緩;溫度過(guò)高培養(yǎng)基水分蒸發(fā)較快,致使植株還未分化到所需程度,就開(kāi)始出現(xiàn)干萎。所以溫度最好2426之間。 (3)氧氣

32、 植物組織培養(yǎng)中,外植體的呼吸需要氧氣。在液體培養(yǎng)中,振蕩培養(yǎng)是解決通氣的有效辦法。在固體培養(yǎng)中,對(duì)于某些耗氧多的植物要采用通氣性好的瓶蓋、瓶塞,或用透氣膜封口。對(duì)于耗氧少的植物,組織培養(yǎng)中培養(yǎng)瓶?jī)?nèi)能維持正常的氧氣和二氧化碳循環(huán),用密封性好的封口材料更能有效地防止菌類污染。.4芽的增殖和根的誘導(dǎo)(1)芽的增殖外植體經(jīng)初代培養(yǎng)誘導(dǎo)出不帶菌的無(wú)菌芽。為了滿足規(guī)模生產(chǎn)的需要,當(dāng)試管苗長(zhǎng)到7-8片葉時(shí),必須通過(guò)不斷的繼代培養(yǎng),使無(wú)菌芽大量增殖,培養(yǎng)出成千上萬(wàn)的無(wú)菌芽。繼代培養(yǎng)所用培養(yǎng)基可與初代培養(yǎng)基相同,也可根據(jù)可能出現(xiàn)的情況,逐漸地適量降低細(xì)胞分裂素的濃度,調(diào)整無(wú)機(jī)養(yǎng)分比例,或加入活性炭等,以防出現(xiàn)

33、玻璃化或褐化現(xiàn)象。繼代培養(yǎng)的接種過(guò)程與初代培養(yǎng)有兩點(diǎn)不同,一是不需要對(duì)接種材料進(jìn)行滅菌處理;二是在空間較大的培養(yǎng)瓶中接種,接種更方便。接種時(shí),先將外植體上的無(wú)菌芽剪下,或?qū)⒁牙^代過(guò)的叢狀無(wú)菌芽分開(kāi)。較長(zhǎng)的無(wú)菌芽可剪成幾段接種,但必須保證每一段上至少有一個(gè)節(jié)。接著用鑷子將剪好的接種材料放入培養(yǎng)瓶中,再用接種鉤撥動(dòng)使材料在瓶中均勻分布,最后將接種材料的下端壓入培養(yǎng)基中。除此以外,斷代培養(yǎng)的接種過(guò)程和要求與初代培養(yǎng)相同,同樣必須確保無(wú)菌操作。繼代培養(yǎng)期間培養(yǎng)室環(huán)境條件的控制,除了不需要暗培養(yǎng)外,光照、溫度、濕度和通氣條件的控制與初代培養(yǎng)基本相同。要注意根據(jù)繼代苗出現(xiàn)的情況,調(diào)節(jié)光照、溫度、濕度和通氣

34、條件,或及時(shí)轉(zhuǎn)入新的培養(yǎng)基中培養(yǎng),防止產(chǎn)生褐化現(xiàn)象和玻璃化現(xiàn)象。(2)根的誘導(dǎo) 與繼代培養(yǎng)基和初代培養(yǎng)基相比,生根培養(yǎng)基有個(gè)三特點(diǎn)。無(wú)機(jī)鹽濃度較低。一般認(rèn)為,礦質(zhì)元素濃度高時(shí)有利于發(fā)展莖葉,較低時(shí)有利于生根,所以生根培養(yǎng)時(shí)一般選用無(wú)機(jī)鹽濃度較低的培養(yǎng)基配方。用無(wú)機(jī)鹽濃度較高的培養(yǎng)基配方時(shí),應(yīng)稀釋一定的倍數(shù)。如使用MS培養(yǎng)基,在生根誘導(dǎo)培養(yǎng)中多采用1/2MS或1/4MS。細(xì)胞分裂素少或無(wú)。生根培養(yǎng)基一般要完全去除或僅用很低濃度的細(xì)胞分裂素,并加入適量的生長(zhǎng)素,最常用的生長(zhǎng)素是NAA。糖濃度較低。在生根階段,培養(yǎng)基中的糖濃度要降低到1.01.5%,以促進(jìn)植株增強(qiáng)自養(yǎng)能力,有利于完整植株的形成和生長(zhǎng)

35、。.5組培苗的煉苗與移栽 (1)組培苗的煉苗將瓶苗移出培養(yǎng)室,放在準(zhǔn)備室內(nèi),打開(kāi)瓶口封口,將瓶苗室溫放置2一3d后,進(jìn)行移栽。將實(shí)驗(yàn)田翻耕,使耕作層土層疏松,整理出畦。在土壤上面鋪一層約5cm 的蛙石,澆透水。將小拱棚支架搭好備用。將雙斜面小棚打成屋脊?fàn)罨蛉切危芭锬媳弊呦颍虚g設(shè)一條拉桿,可起到堅(jiān)固抗風(fēng)的作用閣。一般棚內(nèi)相對(duì)濕度可達(dá)70%-100%,白天通風(fēng)時(shí),棚內(nèi)相對(duì)濕度可保持在40一60 %;夜間密閉時(shí)可達(dá)到90以上。棚內(nèi)地溫比露地高5一6,有利于再生苗的生長(zhǎng)和提高再生苗成活率。當(dāng)瓶苗根長(zhǎng)至2cm左右時(shí),用鑷子輕輕取出,用流水將瓶苗根部的培養(yǎng)基沖洗干凈,然后栽在準(zhǔn)備好的蛙石中

36、,隨后用噴壺澆一遍透水,將棚膜罩上,以水壓邊。白天氣溫過(guò)30時(shí)用遮陽(yáng)網(wǎng)遮蔭。馴化過(guò)程中通過(guò)通風(fēng)、遮蔭、灑水使棚內(nèi)溫度白天保持在25左右。待白天氣溫穩(wěn)定在28以上,生了新根約3cm時(shí),可去膜移栽。(2)組培苗的移栽 煉苗后將苗木取出,洗去培養(yǎng)基,移栽到無(wú)菌的混合土中,保持一定的溫度和水分,長(zhǎng)出23片新葉時(shí)移栽到田間或盆缽中。第五章 工藝計(jì)算5.1生產(chǎn)規(guī)模與生產(chǎn)計(jì)劃計(jì)算生產(chǎn)規(guī)模的確定:生產(chǎn)規(guī)模為年產(chǎn)500萬(wàn)馬鈴薯脫毒苗。 試管苗規(guī)模的確定:年產(chǎn)500萬(wàn)組培商品苗,主要考慮三個(gè)方面:增殖,生根,馴化。經(jīng)過(guò)在網(wǎng)上查閱相應(yīng)馬鈴薯的生長(zhǎng)周期及相關(guān)的一些組培技術(shù)的整理,知道馬鈴薯從培育、誘導(dǎo)到成苗(約15-

37、20cm)需要25天,初代、繼代擴(kuò)培需要15天。所以每一次繁殖周期取2個(gè)月,整個(gè)過(guò)程中,母株制備過(guò)程成活率85%,有效生根率85%,移栽成活率95%,合格商品苗95%。 工廠化生產(chǎn)的工藝流程:初培建立無(wú)菌系(脫毒系)繼代增殖生根馴化移栽培育商品苗商品苗實(shí)際值的計(jì)算:需考慮有有效生根率(R1,如85%)、移栽成活率(R2,如95%)及合格商品苗獲得率(R3,如95%)等。 MY·R1·R2·R3 已知 M= 50000000(株) M=10000000(株) 株 株試管苗增殖率理論值的計(jì)算:YmXn注:Y年繁殖數(shù),m無(wú)菌母株苗數(shù)(可自己建立,也可購(gòu)買現(xiàn)存的無(wú)菌苗,一

38、般每瓶80800元),X每個(gè)培養(yǎng)周期增殖的倍數(shù)(工廠化生產(chǎn)中一般控制在38),n全年可增殖的倍數(shù)(若每月繼代1次,則一年為12)。 試管苗增殖率理論值的計(jì)算:YmXn 注:Y年繁殖數(shù),m無(wú)菌母株苗數(shù)(可自己建立,也可購(gòu)買現(xiàn)存的無(wú)菌苗,一般每瓶80800元),X每個(gè)擴(kuò)大培養(yǎng)周期增殖的倍數(shù)(工廠化生產(chǎn)中一般控制在38),n全年可增殖的倍數(shù)(若每?jī)稍聰U(kuò)大 培養(yǎng)1次,則一年為6)。 取 X=6 ,n = 6,已知 Y=6517843 (株) (株)每周期接種的母株數(shù)為:140/85%=165(株)如購(gòu)買現(xiàn)成的商品苗,且買的商品苗都是無(wú)菌苗,可直接繼代,且每瓶10株;每瓶?jī)r(jià)格約為200元,需購(gòu)買17瓶商

39、品苗,花費(fèi)為3400元。 試管苗增殖率實(shí)際值的計(jì)算:考慮污染率、弱苗、不正常苗及損傷苗 YmCnm(Ne/N0)nm(NtPe/N0)n 其中: 注:Ne-有效苗數(shù),N0原接種苗數(shù),Nt新苗數(shù),L損耗苗數(shù), C有效繁殖系數(shù),Pe有效苗率。將母株培養(yǎng)到15-20cm左右,現(xiàn)每株母株取帶有幼芽的小枝進(jìn)行扦插初代培養(yǎng),每株1-2cm,每母株取四段,扦插到合適的培養(yǎng)基上,待長(zhǎng)成合適時(shí),進(jìn)行第二次擴(kuò)大培養(yǎng),該過(guò)程與初次擴(kuò)大培養(yǎng)相似,但所取的莖斷為5段。整個(gè)過(guò)程成活率為85%,計(jì)算如下: No=4(株), Pe=85%, C=Nt*Pe/No=6, Nt=4*6/85%=30(株) Ne=No*Pe=26

40、(株) L=Nt-Ne=30-26=4(株)5.2計(jì)劃的制定:(每?jī)稍吕^代1次,每年共繼代6次) 全年生產(chǎn)總株數(shù): Y=6517843株 每?jī)稍律a(chǎn)總株數(shù): A=Y/6 株 注:生根芽苗數(shù)與繼代增殖培養(yǎng)的芽苗數(shù)比例一般不小于1:2,即每次繼代 培養(yǎng)中至少應(yīng)有1/3的芽苗(要求芽苗長(zhǎng)1-3cm)被接種到生根培養(yǎng)基上進(jìn)行生根培養(yǎng): 每?jī)稍吕^代株數(shù): 株 每?jī)稍律陻?shù): 株整個(gè)馬鈴薯組培過(guò)程中的數(shù)據(jù)統(tǒng)計(jì):擴(kuò)培數(shù)據(jù)計(jì)算母株/次初次擴(kuò)培倍數(shù)/次二次擴(kuò)培倍數(shù)/次有效繁殖系數(shù)/次1456總母株數(shù)每周期繼代數(shù)每周期生根數(shù)總接種母株數(shù)1683434523021726121980MS 培養(yǎng)基物料恒算叢生芽誘導(dǎo)最

41、佳培養(yǎng)基:MS+2 mg/L 6-BA+0.1mg/L NAA叢生芽繼代最佳培養(yǎng)基:MS+1 mg/L 6-BA+0.1mg/L NAA 叢生芽生根最佳培養(yǎng)基: MS+0.1mg/L NAAMS 培養(yǎng)基母液包括:儲(chǔ)備液I (大量元素母液)、儲(chǔ)備液II(微量元素母液)、儲(chǔ)備液III(有機(jī)成分母液)、儲(chǔ)備液IV(鐵鹽母液)及植物激素母液(NAA 母液和6-BA 母液)。MS 培養(yǎng)基母液的配制與保存 水、藥、蔗糖、瓊脂混合PH調(diào)整 分裝滅菌冷卻接種 玻璃器皿水洗干燥MS 培養(yǎng)基母液包括:儲(chǔ)備液I (大量元素母液)、儲(chǔ)備液II(微量元素母液)、儲(chǔ)備液III(有機(jī)成分母液)、儲(chǔ)備液IV(鐵鹽母液)及植物

42、激素母液(NAA 母液和6-BA 母液)。儲(chǔ)備液IIII的配方為儲(chǔ)備液I33000 mg/L ,38000 mg/L ,8 800 mg/L CaCl·,7400 mg/L Mg·7HO,3400 mg/L KP儲(chǔ)備液II166mg/L KI,1240 mg/L ,4460 mg/L ·4,1720mg/L , 5 mg/L Cu·5,5 mg/L Co·儲(chǔ)備液III2 000 mg/L 肌醇,100 mg/L 煙酸,100 mg/L 鹽酸吡哆醇,100 mg/L 鹽酸硫胺素,400 mg/L 甘氨酸儲(chǔ)備液IIII的配制方法:將每種試劑先分別溶

43、解,再彼此混合,最后定溶至所需數(shù)量。儲(chǔ)備液IV 的配制方法為:取FeSO4·7H2O5 566 mg 和Na2EDTA·2H2O 7460 mg 分別置于450 mL 蒸餾水中,加熱攪拌使之溶解,然后將2 種溶液混合,再加蒸餾水至1 L。植物激素母液的配制方法為:100mg/L NAA母液。稱取10 mgNAA,用少量95%乙醇或少量乙酸溶解后,用蒸餾水定溶至100 mL。1000mg/L 6-BA 母液。稱取100 mg 6-BA,用少量1 mol/mL 的鹽酸溶解后,用蒸餾水定溶至100 mL。然后根據(jù)所需功能的不同,在MS 培養(yǎng)基中加入不同量的NAA和6-BA 母液,

44、具體加入量見(jiàn)表 各功能培養(yǎng)基中植物激素母液加入量 mL/L培養(yǎng)基NAA 母液6-BA 母液叢生芽誘導(dǎo)0.12.0繼代增殖0.1 0.5 1.5生根培養(yǎng)0.10-1L MS 培養(yǎng)基 培養(yǎng)基的配制:分別取50 mL 儲(chǔ)備液I,5 mL儲(chǔ)備液II,5 mL 儲(chǔ)備液III 和5 mL 儲(chǔ)備液IV,1 mL,NAA 母液,2 mL 6-BA 母液放入1 000 mL 的燒杯中;另取1 個(gè)燒杯(或不銹鋼鍋)加入700 mL 蒸餾水、30 g 蔗糖、7 g 瓊脂,加熱使瓊脂溶化,再將溶解的瓊脂糖溶液倒入盛有各種母液的燒杯中,用蒸餾水定溶至1 L,混勻后測(cè)pH;用1 mol/L NaOH 或1 mol/L H

45、Cl調(diào)節(jié)pH至5.8,最后將培養(yǎng)基分裝到錐形瓶中物料恒算:先對(duì)1L培養(yǎng)基進(jìn)行物料衡算蔗糖 30 g 瓊脂 7 g 儲(chǔ)備液I用量為50 mL,則有: 33000 mg/L×50 mL=1650mg: 38000 mg/L×50 mL = 1900 mgCaCl·: 8800 mg/L×50 mL = 440 mgMg·7HO: 7400 mg/L×50 mL =370 m gKP: 3400 mg/L×50 mL=170 mg儲(chǔ)備液II用量為5 mL,則有 KI: 166 mg/L×5 mL=0,83 mg: 1 2

46、40 mg/L×5 mL=6,2 mg·4: 4 460 mg/L×5 mL=22.3 mg: 1 720 mg/L×5 mL=8.6 mg: 50 mg/×5 mL=0,25 mgCu·5: 5 mg/L×5 mL=0.025 mgCo·: 5 mg/L×5 mL=0.025 mg儲(chǔ)備液III用量為5 mL,則有 肌醇: 2000 mg/L×5 mL=10 mg煙酸: 100 mg/L×5 mL=0.5 mg鹽酸吡哆醇: 100 mg/L×5 mL=0.5 mg鹽酸硫胺素:

47、 100 mg/L×5 mL=0.5 mg甘氨酸 : 400 mg/L×5 mL=2 mg儲(chǔ)備液IV用量為 1 mL,則有FeSO·7HO : 566 mg/L ×1 mL =0.566 mgNaEDTA·2HO: 7460 mg/L ×1 mL =7.460 mgNAA 母液用量為1mL 6-BA 母液用量為2 mL NAA: 100mg/L×1 mL =0.1 mg6-BA: 1000 mg/L×2 mL =2 mg所需培養(yǎng)基總數(shù):每周期誘導(dǎo)培養(yǎng)基數(shù)每周期繼代培養(yǎng)基數(shù)每周期生根培養(yǎng)基數(shù)1657242053621

48、02每周期所需培養(yǎng)基體積:設(shè)每個(gè)培養(yǎng)瓶分裝30ml培養(yǎng)基則有 : 每周期所需的誘導(dǎo)培養(yǎng)基體積為:165×30ml=4.95L 其中 NAA 母液體積為:4.95×1/10000=0.000495 L 6-BA 母液體積為:4.95×2/1000=0.0099 L MS 培養(yǎng)基體積為: 4.95-0.000495-0.0099=4.94 L每周期所需的繼代培養(yǎng)基體積為:724205×30ml=21726.15 L 其中 NAA 母液體積為:21726.15×1/10000=2.172615 L 6-BA 母液體積為:21726.15×1

49、/1000=21.72615 L MS 培養(yǎng)基體積為:21726.15-21.72615-2.172615=21702.25 L每周期所需的生根培養(yǎng)基體積為:362102×30ml=10863.06 L 其中NAA 母液體積為:10863.06×1/10000=1.086306 L MS 培養(yǎng)基體積為:10863.06-1.086306=10861.97 L每周期MS 培養(yǎng)基體積體積為: 4.94+21702.25+10861.97=32569.16 L每周期所需NAA 母液體積為: (0.000495+2.172615+1.086306)+32569.16×1/

50、1000=35.83 L每周期所需6-BA母液體積為: (0.0099+21.72615)+ 32569.16×2/1000=86.87437 L5.3每年物料總衡算 每年物料衡算表物料名稱每L凈含量/ mg每周期體積/L每年周期數(shù)總重量/Kg瓊脂700032569.1661367904.72蔗糖3000032569.1665862448.80KI 0.83 32569.166162.194HBO6.2 32569.166121.157MnSO·4HO22.3 32569.1664357.754ZnSO·7HO8.6 32569.1661680.569NaMoO&

51、#183;2HO0.25 32569.16648.854CuSO·5HO0.025 32569.1664.890 CoCl·6HO0.025 32569.1664.890 NHNO 1650 32569.166322434.684KNO1900 32569.166371288.424 CaCl·2HO440 32569.16685982.582 MgSO·7HO370 32569.16672303.535 KHPO170 32569.16633220.54 肌醇 10 32569.1661954.150煙酸 0.5 32569.16697.707鹽酸吡哆醇 0.5 32569.16697.707鹽酸硫胺素 0.5 32569.16697.707 甘氨酸 2 32569.166390.830FeSO·7HO 0.566 32569.166110.605 NaEDTA·2HO7.460 32569.1661457.800NAA 0.1 35.8360.02156-BA2 86.8743761.0425 第六章 廢物處理6.1廢水處理方法 生物塘法 生物塘是一種利用天然凈化能力處理廢水的生物處理設(shè)施,該技術(shù)在 20 世紀(jì)50年代以后得到快速發(fā)展,尤其是在生活污水和有機(jī)工業(yè)廢水

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