1、第五章巴比妥類藥物的分析第五章巴比妥類藥物的分析一巴比妥類藥物的結(jié)構(gòu)剖析巴比妥類藥物的結(jié)構(gòu)剖析巴比妥類藥物為環(huán)狀酰脲類鎮(zhèn)靜催眠藥，是巴比妥酸的衍生物，其基本結(jié)構(gòu)巴比妥類藥物為環(huán)狀酰脲類鎮(zhèn)靜催眠藥，是巴比妥酸的衍生物，其基本結(jié)構(gòu)通式為：O23NHCHNCCCOOR1R21456 由于由于5位取代基位取代基R1和和R2不同，形成不同巴比妥類藥物，具有不同的理化性質(zhì)不同，形成不同巴比妥類藥物，具有不同的理化性質(zhì).臨臨床上常用藥物多為巴比妥酸的床上常用藥物多為巴比妥酸的5,5-二取代衍生物二取代衍生物,少數(shù)為少數(shù)為1,5,5-三取代物或三取代物或c2位為硫代位為硫代巴比妥酸的，二取代衍生物中國藥典收載

2、的本類藥物有苯巴比妥及其鈉鹽巴比妥酸的，二取代衍生物中國藥典收載的本類藥物有苯巴比妥及其鈉鹽.異異戊巴比妥及其鈉鹽司可巴比妥鈉和注射用硫噴妥鈉等戊巴比妥及其鈉鹽司可巴比妥鈉和注射用硫噴妥鈉等巴比妥類藥物的基本結(jié)構(gòu)：一巴比妥酸環(huán)狀丙二酰脲巴比妥類藥物的基本結(jié)構(gòu)：一巴比妥酸環(huán)狀丙二酰脲 二取代基部分取代基不同，形成不同的具體藥物有二取代基部分取代基不同，形成不同的具體藥物有不同的理化性質(zhì)理化性質(zhì)可用于區(qū)別各種巴比妥類藥物不同的理化性質(zhì)理化性質(zhì)可用于區(qū)別各種巴比妥類藥物二巴比妥類藥物的理化特征二巴比妥類藥物的理化特征巴比妥類藥物通常為白色結(jié)晶或結(jié)晶性粉末，具有一定的熔點(diǎn)在空氣中穩(wěn)定，加熱巴比妥類藥物

3、通常為白色結(jié)晶或結(jié)晶性粉末，具有一定的熔點(diǎn)在空氣中穩(wěn)定，加熱都能升華一般微溶或極微溶于水，易溶于乙醚等有機(jī)溶劑其鈉鹽易溶于水而難溶于都能升華一般微溶或極微溶于水，易溶于乙醚等有機(jī)溶劑其鈉鹽易溶于水而難溶于有機(jī)溶劑有機(jī)溶劑.六元環(huán)結(jié)構(gòu)較穩(wěn)定，遇酸，氧化劑，還原劑時(shí)，一般情況下環(huán)不會(huì)破裂，遇堿六元環(huán)結(jié)構(gòu)較穩(wěn)定，遇酸，氧化劑，還原劑時(shí)，一般情況下環(huán)不會(huì)破裂，遇堿共熱就開環(huán)，并產(chǎn)生氨氣這種理化性質(zhì)可用于區(qū)別各種巴比妥類藥物共熱就開環(huán)，并產(chǎn)生氨氣這種理化性質(zhì)可用于區(qū)別各種巴比妥類藥物（一一）弱酸性）弱酸性巴比妥類藥物的母核環(huán)結(jié)構(gòu)中含有，二酰亞胺基團(tuán)，能使其分子發(fā)生酮式烯巴比妥類藥物的母核環(huán)結(jié)構(gòu)中含有，二

4、酰亞胺基團(tuán)，能使其分子發(fā)生酮式烯醇式互變反應(yīng)異構(gòu)，在水溶液中發(fā)生二極電離醇式互變反應(yīng)異構(gòu)，在水溶液中發(fā)生二極電離由于本類藥物具有弱酸性（由于本類藥物具有弱酸性（pka值為值為7.3-8.4）故可以與強(qiáng)堿反應(yīng)生成可溶性鹽一）故可以與強(qiáng)堿反應(yīng)生成可溶性鹽一般為鈉鹽般為鈉鹽由于弱酸與強(qiáng)堿形成巴比妥鹽，其水溶液呈堿性，加酸酸化后，則析出結(jié)晶性的游離由于弱酸與強(qiáng)堿形成巴比妥鹽，其水溶液呈堿性，加酸酸化后，則析出結(jié)晶性的游離巴比妥類藥物，可用有機(jī)溶劑將其提取出來上述這些性質(zhì)可用于巴比妥類藥物的分離巴比妥類藥物，可用有機(jī)溶劑將其提取出來上述這些性質(zhì)可用于巴比妥類藥物的分離鑒別，檢查和含量測定鑒別，檢查和含量

5、測定（二二）水解反應(yīng)）水解反應(yīng)巴比妥類藥物的水解巴比妥類藥物的水解本類藥物得分子結(jié)構(gòu)中含有酰亞胺基團(tuán)，與堿溶液共沸即水解釋放氨氣，可使紅本類藥物得分子結(jié)構(gòu)中含有酰亞胺基團(tuán)，與堿溶液共沸即水解釋放氨氣，可使紅色石蕊試紙變藍(lán)色石蕊試紙變藍(lán)（）采用此反應(yīng)鑒別異物戊巴比妥和巴比妥。采用此反應(yīng)鑒別異物戊巴比妥和巴比妥。鑒別方法：取異物戊巴比妥或巴比妥鑒別方法：取異物戊巴比妥或巴比妥0.2克，加氫氧化鈉試液毫升，加熱煮沸克，加氫氧化鈉試液毫升，加熱煮沸則產(chǎn)生具有氨臭的氣體則產(chǎn)生具有氨臭的氣體巴比妥類藥物鈉鹽的水解巴比妥類藥物鈉鹽的水解本類藥物的鈉鹽，在潮濕的情況下也能水解一般情況下，在溫室和本類藥物的鈉鹽

6、，在潮濕的情況下也能水解一般情況下，在溫室和ph值值以下水解較慢；以下水解較慢； ph值以上隨著堿度的增加水解速度的加快值以上隨著堿度的增加水解速度的加快（三三）與重金屬離子反應(yīng)）與重金屬離子反應(yīng)巴比妥類藥物分子結(jié)構(gòu)中含有丙二酰脲（巴比妥類藥物分子結(jié)構(gòu)中含有丙二酰脲（-CONHCONHCO-）或酰亞胺基團(tuán)）或酰亞胺基團(tuán)在合適的在合適的pH值溶液中，可與某些重金屬離子，如值溶液中，可與某些重金屬離子，如Ag+,Cu2+,Co2+, Hg2+等反應(yīng)呈等反應(yīng)呈色或產(chǎn)生有色沉淀雖然這類化學(xué)反應(yīng)的專屬性不強(qiáng)，但仍常用于本類藥物的鑒別色或產(chǎn)生有色沉淀雖然這類化學(xué)反應(yīng)的專屬性不強(qiáng)，但仍常用于本類藥物的鑒別和

7、含量測定和含量測定與銀鹽反應(yīng)，與銀鹽反應(yīng)，巴比妥類藥物分子結(jié)構(gòu)中含有酰亞胺基團(tuán)，碳酸鈉溶液中，生成鈉鹽而溶解，巴比妥類藥物分子結(jié)構(gòu)中含有酰亞胺基團(tuán)，碳酸鈉溶液中，生成鈉鹽而溶解，再與硝酸銀溶液反應(yīng)，首先生成可溶性的一銀鹽，加入過量的硝酸銀溶液，則生成再與硝酸銀溶液反應(yīng)，首先生成可溶性的一銀鹽，加入過量的硝酸銀溶液，則生成難溶性的二銀鹽的白色沉淀此反應(yīng)可用于本類藥物的鑒別和含量測定難溶性的二銀鹽的白色沉淀此反應(yīng)可用于本類藥物的鑒別和含量測定與銅鹽的反應(yīng)與銅鹽的反應(yīng)巴比妥類藥物在吡啶溶液中生成的烯醇式異構(gòu)體與銅離子吡啶溶液反應(yīng)，形巴比妥類藥物在吡啶溶液中生成的烯醇式異構(gòu)體與銅離子吡啶溶液反應(yīng)，形成

8、穩(wěn)定的化合物，產(chǎn)生類似雙縮脲的呈色反應(yīng)成穩(wěn)定的化合物，產(chǎn)生類似雙縮脲的呈色反應(yīng)此反應(yīng)中，巴比妥類藥物呈紫堇色或生成紫色沉淀，含硫巴比妥類藥物則呈此反應(yīng)中，巴比妥類藥物呈紫堇色或生成紫色沉淀，含硫巴比妥類藥物則呈綠色在不同的綠色在不同的pH值溶液中，值溶液中，5,5-二取代基不同的巴比妥類藥物與銅鹽生成的紫二取代基不同的巴比妥類藥物與銅鹽生成的紫色化合物，在氯仿中的溶解度不同在較高色化合物，在氯仿中的溶解度不同在較高pH值溶液中，值溶液中， 5,5-取代基的親脂性越取代基的親脂性越強(qiáng)，形成的紫色化合物越易溶于氯仿中此反應(yīng)用于本類藥物的鑒別強(qiáng)，形成的紫色化合物越易溶于氯仿中此反應(yīng)用于本類藥物的鑒別

9、與鈷鹽的反應(yīng)與鈷鹽的反應(yīng)巴比妥類藥物在在堿性溶液中可與鈷鹽反應(yīng)，生成紫堇色配位化合物，可用于巴比妥類藥物在在堿性溶液中可與鈷鹽反應(yīng)，生成紫堇色配位化合物，可用于本類藥物的鑒別和含量測定本類藥物的鑒別和含量測定此反應(yīng)在無水條件下進(jìn)行，能使反應(yīng)很靈敏，而且形成的有色產(chǎn)物也比較穩(wěn)定此反應(yīng)在無水條件下進(jìn)行，能使反應(yīng)很靈敏，而且形成的有色產(chǎn)物也比較穩(wěn)定因此所用試劑都應(yīng)不含水分常用試劑為無水乙醇或甲醇；鈷鹽為醋酸鈷，硝酸鈷，氧因此所用試劑都應(yīng)不含水分常用試劑為無水乙醇或甲醇；鈷鹽為醋酸鈷，硝酸鈷，氧化鈷；堿為有機(jī)堿最好化鈷；堿為有機(jī)堿最好與汞鹽的反應(yīng)與汞鹽的反應(yīng)巴比妥類藥物與硝酸汞和氧化汞反應(yīng)，生成白色汞

10、鹽沉淀，此沉淀能溶于氨試液中巴比妥類藥物與硝酸汞和氧化汞反應(yīng)，生成白色汞鹽沉淀，此沉淀能溶于氨試液中（四）與香草醛的反應(yīng)（四）與香草醛的反應(yīng)巴比妥類藥物分子結(jié)構(gòu)丙二酰脲基團(tuán)中氫比較活潑，可與香草醛在濃硫酸存在下巴比妥類藥物分子結(jié)構(gòu)丙二酰脲基團(tuán)中氫比較活潑，可與香草醛在濃硫酸存在下發(fā)生縮合反應(yīng)，生成棕紅色產(chǎn)物發(fā)生縮合反應(yīng)，生成棕紅色產(chǎn)物.BP(2000)戊巴比妥采用此反應(yīng)進(jìn)行鑒別。具體鑒別戊巴比妥采用此反應(yīng)進(jìn)行鑒別。具體鑒別方法如下：于瓷盤中放入戊巴比妥毫克，加硫酸毫升混合后，放在水浴上加熱方法如下：于瓷盤中放入戊巴比妥毫克，加硫酸毫升混合后，放在水浴上加熱分鐘的，產(chǎn)生棕紅色。放冷，加乙醇五毫升

11、，先變?yōu)樽仙缓笞優(yōu)樘m色。分鐘的，產(chǎn)生棕紅色。放冷，加乙醇五毫升，先變?yōu)樽仙缓笞優(yōu)樘m色。加乙醇后加乙醇后，其反應(yīng)產(chǎn)物可轉(zhuǎn)變?yōu)椋浩浞磻?yīng)產(chǎn)物可轉(zhuǎn)變?yōu)椋海ㄎ澹ㄎ澹┳贤馕展庾V特征紫外吸收光譜特征巴比妥類藥物的紫外吸收光譜隨其電離級(jí)數(shù)不同，而發(fā)生顯著的變化巴比妥類藥物的紫外吸收光譜隨其電離級(jí)數(shù)不同，而發(fā)生顯著的變化. 如下圖所示：如下圖所示：在酸性溶液中，無明顯的紫外吸收峰；在堿性溶在酸性溶液中，無明顯的紫外吸收峰；在堿性溶液中，發(fā)生一級(jí)電離，形成了共軛體系結(jié)構(gòu)，在液中，發(fā)生一級(jí)電離，形成了共軛體系結(jié)構(gòu)，在納米出現(xiàn)最大吸收峰；在強(qiáng)堿溶液中，不納米出現(xiàn)最大吸收峰；在強(qiáng)堿溶液中，不發(fā)生二級(jí)電離，故仍在

12、納米處發(fā)生二級(jí)電離，故仍在納米處硫代巴比妥類藥物的紫外吸收光譜則不同，在酸硫代巴比妥類藥物的紫外吸收光譜則不同，在酸性和堿性溶液均具有較明顯的紫外吸收如圖性和堿性溶液均具有較明顯的紫外吸收如圖所示的硫噴妥的吸收光譜在鹽酸溶液中，兩個(gè)所示的硫噴妥的吸收光譜在鹽酸溶液中，兩個(gè)吸收峰分別在納米和納米處；在氫吸收峰分別在納米和納米處；在氫氧化鈉溶液中，兩個(gè)吸收峰分別移至納米氧化鈉溶液中，兩個(gè)吸收峰分別移至納米和納米；在強(qiáng)堿溶液中，在納米處和納米；在強(qiáng)堿溶液中，在納米處消失，只存在納米處的吸收峰消失，只存在納米處的吸收峰圖圖巴比妥類藥物在不同巴比妥類藥物在不同ph值溶液中紫外吸收光譜特征性變化，可用于巴

13、比妥類藥物值溶液中紫外吸收光譜特征性變化，可用于巴比妥類藥物鑒別，檢查，含量測定鑒別，檢查，含量測定（六）（六）薄層色譜行為特征薄層色譜行為特征巴比妥類藥物具有不同的分子結(jié)構(gòu)，則其色譜行為亦不同，可用于鑒別，常用的巴比妥類藥物具有不同的分子結(jié)構(gòu)，則其色譜行為亦不同，可用于鑒別，常用的方法有薄層色譜法和高效液相色譜法等方法有薄層色譜法和高效液相色譜法等（七）顯微結(jié)晶（七）顯微結(jié)晶巴比妥類藥物可根據(jù)其本身或與某種試劑的反應(yīng)產(chǎn)物的特殊晶型，進(jìn)行同類或不巴比妥類藥物可根據(jù)其本身或與某種試劑的反應(yīng)產(chǎn)物的特殊晶型，進(jìn)行同類或不類藥物的鑒別此法亦適用于生物樣品中微量巴比妥類藥物的檢驗(yàn)類藥物的鑒別此法亦適用于

14、生物樣品中微量巴比妥類藥物的檢驗(yàn)藥物本身的晶形藥物本身的晶形取藥物或從酸性溶液中，用有機(jī)溶劑提取，經(jīng)酸化，提取，揮干的殘?jiān)僭S，取藥物或從酸性溶液中，用有機(jī)溶劑提取，經(jīng)酸化，提取，揮干的殘?jiān)僭S，放置在載玻片上，加氫氧化鈉溶液一滴，攪拌溶液后，再加放置在載玻片上，加氫氧化鈉溶液一滴，攪拌溶液后，再加硫酸溶液一滴，即生成巴比妥類藥物的特殊結(jié)晶在顯微鏡下觀察結(jié)晶形硫酸溶液一滴，即生成巴比妥類藥物的特殊結(jié)晶在顯微鏡下觀察結(jié)晶形狀：巴比妥為長方形；苯巴比妥在開始時(shí)呈球形，然后變成花瓣?duì)畹慕Y(jié)晶，狀：巴比妥為長方形；苯巴比妥在開始時(shí)呈球形，然后變成花瓣?duì)畹慕Y(jié)晶，如下圖：如下圖：反應(yīng)產(chǎn)物的結(jié)晶產(chǎn)物反應(yīng)產(chǎn)物的

15、結(jié)晶產(chǎn)物鑒于某些巴比妥類藥物可與重金屬離子反應(yīng)，生成具有特殊晶形的淀粉因此，鑒于某些巴比妥類藥物可與重金屬離子反應(yīng)，生成具有特殊晶形的淀粉因此，可以利用此進(jìn)行鑒別例如，巴比妥可與硫酸銅吡啶試驗(yàn)進(jìn)行反應(yīng)，形成十字可以利用此進(jìn)行鑒別例如，巴比妥可與硫酸銅吡啶試驗(yàn)進(jìn)行反應(yīng)，形成十字形紫色結(jié)晶，如下圖：形紫色結(jié)晶，如下圖：苯巴比妥反應(yīng)后，則形成淺紫色細(xì)小不規(guī)則的或類似菱苯巴比妥反應(yīng)后，則形成淺紫色細(xì)小不規(guī)則的或類似菱形的結(jié)晶；其他巴比妥類藥物不能形成結(jié)晶，可以利用形的結(jié)晶；其他巴比妥類藥物不能形成結(jié)晶，可以利用這一特性來區(qū)分之這一特性來區(qū)分之三鑒別實(shí)驗(yàn)三鑒別實(shí)驗(yàn)巴比妥類藥物的結(jié)構(gòu)特征和具體的理化特性，

16、如分子結(jié)構(gòu)中含有酰亞胺基，硫元巴比妥類藥物的結(jié)構(gòu)特征和具體的理化特性，如分子結(jié)構(gòu)中含有酰亞胺基，硫元素與不同取代基等可用于本類藥物的鑒別試驗(yàn)常用的鑒別試驗(yàn)方法有丙二酰脲類素與不同取代基等可用于本類藥物的鑒別試驗(yàn)常用的鑒別試驗(yàn)方法有丙二酰脲類鑒別試驗(yàn)，制備衍生物測定熔點(diǎn)，芳環(huán)反應(yīng)，不飽和鍵反應(yīng)鑒別試驗(yàn)，制備衍生物測定熔點(diǎn)，芳環(huán)反應(yīng)，不飽和鍵反應(yīng)硫和鈉元素反應(yīng)等另外，巴比妥類藥物光譜和色譜行為特征也用于本類藥物的鑒硫和鈉元素反應(yīng)等另外，巴比妥類藥物光譜和色譜行為特征也用于本類藥物的鑒別別（一）丙二酰脲類鑒別反應(yīng)（一）丙二酰脲類鑒別反應(yīng)丙二酰脲類反應(yīng)是巴比妥類藥物母核反應(yīng)，因而是本類藥物共有的反應(yīng)，

17、收丙二酰脲類反應(yīng)是巴比妥類藥物母核反應(yīng)，因而是本類藥物共有的反應(yīng)，收載在藥典附錄中載在藥典附錄中“一般鑒別試驗(yàn)一般鑒別試驗(yàn)項(xiàng)下丙二酰脲類的鑒別反應(yīng)有銀鹽和銅鹽反應(yīng)，項(xiàng)下丙二酰脲類的鑒別反應(yīng)有銀鹽和銅鹽反應(yīng)，其試驗(yàn)原理前已闡述，鑒別試驗(yàn)應(yīng)用于苯巴比妥，異戊巴比妥其試驗(yàn)原理前已闡述，鑒別試驗(yàn)應(yīng)用于苯巴比妥，異戊巴比妥及其鹽和司可巴比妥鈉的鑒別及其鹽和司可巴比妥鈉的鑒別銀鹽反應(yīng)方法銀鹽反應(yīng)方法取供試品克，加碳酸鈉溶液毫升與水毫升，振搖二分，濾過，濾液取供試品克，加碳酸鈉溶液毫升與水毫升，振搖二分，濾過，濾液中逐滴加入硝酸銀溶液，生成白色沉淀，振搖溶解繼續(xù)加沉淀不再溶中逐滴加入硝酸銀溶液，生成白色沉淀

18、，振搖溶解繼續(xù)加沉淀不再溶銅鹽反應(yīng)方法銅鹽反應(yīng)方法取供試品毫克，加吡啶溶液毫升溶解后加吡啶試液，即生成紫色沉淀取供試品毫克，加吡啶溶液毫升溶解后加吡啶試液，即生成紫色沉淀（二）測定熔點(diǎn)（二）測定熔點(diǎn)熔點(diǎn)是一種物質(zhì)在規(guī)定方法下，由固態(tài)轉(zhuǎn)變?yōu)橐簯B(tài)的溫度巴比妥類藥物可直接熔點(diǎn)是一種物質(zhì)在規(guī)定方法下，由固態(tài)轉(zhuǎn)變?yōu)橐簯B(tài)的溫度巴比妥類藥物可直接用用藥典方法測定熔點(diǎn)，其鈉鹽可利用它易溶于水，酸化后析出游歷巴比妥母體，過濾沉藥典方法測定熔點(diǎn)，其鈉鹽可利用它易溶于水，酸化后析出游歷巴比妥母體，過濾沉淀淀測定熔點(diǎn)測定熔點(diǎn)現(xiàn)舉例如下：現(xiàn)舉例如下：司可巴比妥鈉的鑒別司可巴比妥鈉的鑒別苯巴比妥鈉的鑒別苯巴比妥鈉的鑒別巴

19、比妥的鑒別巴比妥的鑒別:取本品取本品0.5克，加克，加mol/L碳酸鈉溶液毫升使溶解，加碳酸鈉溶液毫升使溶解，加4.5%(W/V)對(duì)硝基氯芐的乙醇溶液毫升，水浴加熱回流對(duì)硝基氯芐的乙醇溶液毫升，水浴加熱回流min，放置，放置h后，濾后，濾過，所得沉淀用乙醇進(jìn)行重結(jié)晶后，在過，所得沉淀用乙醇進(jìn)行重結(jié)晶后，在100105 干燥，測定衍生物的熔點(diǎn)，應(yīng)為干燥，測定衍生物的熔點(diǎn)，應(yīng)為150 左右反應(yīng)如下：左右反應(yīng)如下：中國藥典未收載此法，而國外藥典仍用此法鑒別異戊巴比妥中國藥典未收載此法，而國外藥典仍用此法鑒別異戊巴比妥（三）利用特殊取代基或元素的鑒別試驗(yàn)（三）利用特殊取代基或元素的鑒別試驗(yàn)利用不飽和取

20、代基的試驗(yàn)具有不飽和取代基的巴比妥類藥物，中國藥典收載了利用不飽和取代基的試驗(yàn)具有不飽和取代基的巴比妥類藥物，中國藥典收載了司可巴比妥鈉因其分子結(jié)構(gòu)中含有丙烯基，不飽和鍵可與碘司可巴比妥鈉因其分子結(jié)構(gòu)中含有丙烯基，不飽和鍵可與碘,溴或高錳酸鉀反應(yīng)發(fā)生加溴或高錳酸鉀反應(yīng)發(fā)生加成及氧化反應(yīng)而使碘，溴或高錳酸鉀褪色成及氧化反應(yīng)而使碘，溴或高錳酸鉀褪色（）與碘試液反應(yīng)（）與碘試液反應(yīng)（）與高錳酸鉀反應(yīng)（）與高錳酸鉀反應(yīng) 2.利用芳環(huán)取代基的鑒別試驗(yàn)利用芳環(huán)取代基的鑒別試驗(yàn) 具有芳環(huán)取代基的巴比妥類藥物具有芳環(huán)取代基的巴比妥類藥物,中國藥典收載了苯巴比妥及其鈉鹽中國藥典收載了苯巴比妥及其鈉鹽.可用以下方

21、可用以下方法鑒別法鑒別: (1)硝化反應(yīng)硝化反應(yīng):含芳香取代基的巴比妥類藥物含芳香取代基的巴比妥類藥物,與硝酸鉀和硫酸共熱與硝酸鉀和硫酸共熱,可發(fā)生硝化反應(yīng)可發(fā)生硝化反應(yīng)生成黃色硝基化合物生成黃色硝基化合物. (2)與硫酸與硫酸-亞硝酸鈉的反應(yīng)亞硝酸鈉的反應(yīng):苯巴比妥與硫酸苯巴比妥與硫酸-亞硝酸鈉反應(yīng)生成橙黃色產(chǎn)物亞硝酸鈉反應(yīng)生成橙黃色產(chǎn)物,并并隨即轉(zhuǎn)變?yōu)槌燃t色隨即轉(zhuǎn)變?yōu)槌燃t色. 鑒別方法鑒別方法:取本品約取本品約10mg.加硫酸滴與亞硝酸鈉約加硫酸滴與亞硝酸鈉約5mg,混合混合,即顯橙黃色即顯橙黃色,隨即隨即轉(zhuǎn)變?yōu)槌燃t色轉(zhuǎn)變?yōu)槌燃t色. (3)與甲醛與甲醛-硫酸的反應(yīng)硫酸的反應(yīng):苯巴比妥與甲醛

22、苯巴比妥與甲醛-硫酸反應(yīng)硫酸反應(yīng),生成玫瑰紅色產(chǎn)物生成玫瑰紅色產(chǎn)物,此鑒別方此鑒別方法收載于中國藥典法收載于中國藥典,可用于區(qū)別苯巴比妥和其它巴比妥類藥物可用于區(qū)別苯巴比妥和其它巴比妥類藥物. 鑒別方法鑒別方法:取本品約取本品約50mg,置試管中置試管中,加甲醛試液加甲醛試液1ml,加熱煮沸加熱煮沸,冷卻冷卻,沿壁加入沿壁加入硫酸硫酸0.5ml,使成兩液層使成兩液層,水浴加熱水浴加熱.接界面呈玫瑰紅色接界面呈玫瑰紅色. 3與硫元素的鑒別反應(yīng)與硫元素的鑒別反應(yīng) 巴比妥類分子結(jié)構(gòu)中含有硫的藥物巴比妥類分子結(jié)構(gòu)中含有硫的藥物,如硫噴妥鈉，可將其硫元素轉(zhuǎn)變?yōu)闊o機(jī)硫離如硫噴妥鈉，可將其硫元素轉(zhuǎn)變?yōu)闊o機(jī)硫

23、離子子,而顯硫化物的反應(yīng)而顯硫化物的反應(yīng).如下反應(yīng)可鑒別硫代巴比妥與其它巴比妥類藥物如下反應(yīng)可鑒別硫代巴比妥與其它巴比妥類藥物. 四四.特殊雜質(zhì)檢查特殊雜質(zhì)檢查 ( 一一)苯巴比妥的特殊雜質(zhì)檢查苯巴比妥的特殊雜質(zhì)檢查 苯巴比妥的合成工藝為苯巴比妥的合成工藝為:由以上由以上 合成工藝過程可以看出合成工藝過程可以看出,苯巴比妥中特殊雜質(zhì)主要是合成中產(chǎn)生的中間體苯巴比妥中特殊雜質(zhì)主要是合成中產(chǎn)生的中間體()和和()以及副產(chǎn)物以及副產(chǎn)物,常通過檢查酸度常通過檢查酸度.乙醇溶液的澄清度及中性或堿性物質(zhì)來加以控乙醇溶液的澄清度及中性或堿性物質(zhì)來加以控制制. 1.酸度酸度 酸度的檢查主要是控制副產(chǎn)物苯基丙二

24、酰脲酸度的檢查主要是控制副產(chǎn)物苯基丙二酰脲.苯基丙二酰脲是由于中間苯基丙二酰脲是由于中間體體(2)的乙基反應(yīng)不完全的乙基反應(yīng)不完全,而與脲素縮合生成的而與脲素縮合生成的,因其分子中因其分子中5位碳上的氫受相鄰丙羧基影位碳上的氫受相鄰丙羧基影響響,致使酸性增強(qiáng)致使酸性增強(qiáng).能使甲基紅指示劑呈紅色能使甲基紅指示劑呈紅色. 檢查方法檢查方法:取本品取本品0.2g,加水加水10ml,煮沸攪拌煮沸攪拌1min,放冷放冷,濾過濾過,取濾液取濾液5ml,加甲基橙加甲基橙指示劑滴，不得顯紅色指示劑滴，不得顯紅色. 2.溶液澄清度溶液澄清度 本項(xiàng)檢查主要控制乙醇不溶性雜質(zhì)本項(xiàng)檢查主要控制乙醇不溶性雜質(zhì),利用苯巴

25、比妥酸這些雜質(zhì)在乙利用苯巴比妥酸這些雜質(zhì)在乙醇中的溶解度比苯巴比妥小的特性來進(jìn)行檢查醇中的溶解度比苯巴比妥小的特性來進(jìn)行檢查. 檢查方法檢查方法:取本品取本品1.0g,加乙醇加乙醇5ml,加熱回流加熱回流3min,溶液應(yīng)澄清溶液應(yīng)澄清. 3.中性或堿性物質(zhì)中性或堿性物質(zhì) 中性或堿性物質(zhì)是中間體中性或堿性物質(zhì)是中間體()形成的副產(chǎn)物形成的副產(chǎn)物2-苯基丁二酰苯基丁二酰胺胺,2-苯基丁二酰脲或分解產(chǎn)物等雜質(zhì)苯基丁二酰脲或分解產(chǎn)物等雜質(zhì),不溶于氫氧化鈉溶液但溶于乙醚不溶于氫氧化鈉溶液但溶于乙醚;而苯巴比妥具而苯巴比妥具有酸性溶于氫氧化鈉溶液有酸性溶于氫氧化鈉溶液,故采用提取重量法測其含量故采用提取重

26、量法測其含量. 檢查方法檢查方法:取本品取本品1.0g,置于分液漏斗中置于分液漏斗中,加氫氧化鈉試液加氫氧化鈉試液10ml溶解后溶解后,加水加水5ml與乙醚與乙醚25ml,振搖振搖1min,分取醚層分取醚層,用水洗滌次用水洗滌次,每次每次ml,取醚液經(jīng)干燥濾紙濾過取醚液經(jīng)干燥濾紙濾過,蒸干蒸干, 在在105干燥干燥h,遺留殘?jiān)怀^遺留殘?jiān)怀^3mg. (二二)司可巴比妥鈉的特殊雜質(zhì)檢查司可巴比妥鈉的特殊雜質(zhì)檢查 司可巴比妥鈉的合成工藝司可巴比妥鈉的合成工藝: 1.溶液澄清度溶液澄清度 司可巴比妥鈉在水中極易溶解司可巴比妥鈉在水中極易溶解,水溶液應(yīng)澄清水溶液應(yīng)澄清,否則表明含有水否則表明含有

27、水不溶性雜質(zhì)不溶性雜質(zhì),因本品的水溶液易與空氣中的二氧化碳作用因本品的水溶液易與空氣中的二氧化碳作用,而析出司可巴比妥而析出司可巴比妥,故進(jìn)行該故進(jìn)行該項(xiàng)目檢查時(shí)溶解樣品的水應(yīng)新沸放冷以消除水中二氧化碳的干擾項(xiàng)目檢查時(shí)溶解樣品的水應(yīng)新沸放冷以消除水中二氧化碳的干擾. 檢查方法檢查方法:取本品取本品1.0g,加新沸過的冷水加新沸過的冷水10ml溶解后溶解后,溶液應(yīng)澄清溶液應(yīng)澄清. 2.中性或堿性物質(zhì)中性或堿性物質(zhì) 本項(xiàng)檢查的雜質(zhì)是合成過程中產(chǎn)生的中性或堿性副產(chǎn)物以及本項(xiàng)檢查的雜質(zhì)是合成過程中產(chǎn)生的中性或堿性副產(chǎn)物以及司可巴比妥鈉的分解產(chǎn)物司可巴比妥鈉的分解產(chǎn)物,如酰脲如酰脲(),酰胺酰胺()類化

28、合物類化合物. 雜質(zhì)產(chǎn)生的發(fā)應(yīng)式如下雜質(zhì)產(chǎn)生的發(fā)應(yīng)式如下: 這類雜質(zhì)不溶于氫氧化鈉溶液而溶于乙醚這類雜質(zhì)不溶于氫氧化鈉溶液而溶于乙醚,可于堿性條件下用乙醚提取后可于堿性條件下用乙醚提取后,稱重稱重,控制控制其限量其限量.檢查方法與苯巴比妥相同檢查方法與苯巴比妥相同.五含五含 量量 測測 定定 巴比妥類藥物的含量測定方法巴比妥類藥物的含量測定方法 ,有銀量法有銀量法、溴量法溴量法、酸量法酸量法、紫外分光光度法紫外分光光度法、提提取重量法取重量法HPLC法及法及GC法等法等.（一）銀量法（一）銀量法 巴比妥類藥物再適當(dāng)?shù)膲A性溶液中巴比妥類藥物再適當(dāng)?shù)膲A性溶液中,可與銀離子定量成鹽可與銀離子定量成鹽

29、. 根據(jù)這一性質(zhì)根據(jù)這一性質(zhì), 采用銀量法采用銀量法測其含量測其含量( 反應(yīng)式見本章第二節(jié)反應(yīng)式見本章第二節(jié) “一一”下下) . 測定方法測定方法 ： 將供試品溶于碳酸鈉溶液中將供試品溶于碳酸鈉溶液中,保持溫度在保持溫度在1520, 用硝酸銀直接滴定用硝酸銀直接滴定. 在滴定過程中在滴定過程中,首首先形成可溶性一銀鹽先形成可溶性一銀鹽, 當(dāng)被測定的巴比妥類藥物完全形成一銀鹽后當(dāng)被測定的巴比妥類藥物完全形成一銀鹽后, 繼續(xù)用硝酸銀溶液滴繼續(xù)用硝酸銀溶液滴定定,稍過量的銀離子就和巴比妥類藥物形成難溶性的二銀鹽沉淀稍過量的銀離子就和巴比妥類藥物形成難溶性的二銀鹽沉淀, 使溶液變?yōu)榛鞚崾谷芤鹤優(yōu)榛鞚?

30、 以此指以此指示終點(diǎn)示終點(diǎn). 討論討論 ： 此法操作簡便、專屬性強(qiáng)此法操作簡便、專屬性強(qiáng), 分解產(chǎn)物或其他一些可能產(chǎn)生的雜質(zhì)不與硝酸銀反應(yīng)分解產(chǎn)物或其他一些可能產(chǎn)生的雜質(zhì)不與硝酸銀反應(yīng); 但在但在接近終點(diǎn)時(shí)反應(yīng)較慢接近終點(diǎn)時(shí)反應(yīng)較慢, 觀察出現(xiàn)混濁的終點(diǎn)較難掌握觀察出現(xiàn)混濁的終點(diǎn)較難掌握, 滴定時(shí)必須控制溫度滴定時(shí)必須控制溫度, 防止測定結(jié)果偏防止測定結(jié)果偏高高, 中國藥典中國藥典1963、1977年版采用該法測定年版采用該法測定, 以所產(chǎn)生的沉淀在以所產(chǎn)生的沉淀在30秒內(nèi)不消失為終點(diǎn)秒內(nèi)不消失為終點(diǎn). 為了減少目測誤差為了減少目測誤差,對(duì)于本法作過多次改進(jìn)對(duì)于本法作過多次改進(jìn). 曾用丙酮作為

31、介質(zhì)來克服滴定過程中溫度變曾用丙酮作為介質(zhì)來克服滴定過程中溫度變化化 的影響和改善終點(diǎn)的觀察的影響和改善終點(diǎn)的觀察, 結(jié)果仍不夠滿意結(jié)果仍不夠滿意; 中國藥典中國藥典(1985年版年版)改用甲醇及改用甲醇及3.0無水碳無水碳 酸鈉溶劑系統(tǒng)酸鈉溶劑系統(tǒng), 以飽和甘汞電池為參比電極以飽和甘汞電池為參比電極, 銀電極為指示電極銀電極為指示電極, 用硝酸銀液電位滴定用硝酸銀液電位滴定,得到得到明顯改進(jìn)明顯改進(jìn), 并為并為2000年版藥典所沿用年版藥典所沿用.以異戊巴比妥鈉的含量測定方法為例以異戊巴比妥鈉的含量測定方法為例(中國藥典中國藥典2005年版年版) 1.測定方法測定方法 取本品約取本品約0.2

32、 ,精密稱定精密稱定, 加甲醇加甲醇40ml使溶解，再加新配制的使溶解，再加新配制的.0無水無水碳酸鈉溶液碳酸鈉溶液15ml, 照電位滴定照電位滴定, 用硝酸銀滴定液用硝酸銀滴定液(0.1mol/L)滴定滴定,即得即得.每每1ml硝酸銀滴定液硝酸銀滴定液(0.1mol/l) 相當(dāng)于相當(dāng)于22.63mg的的C11H18N2O3.2.測定中注意事項(xiàng)測定中注意事項(xiàng) (1) 無水碳酸鈉溶液需臨用時(shí)新配無水碳酸鈉溶液需臨用時(shí)新配. 因?yàn)樘妓徕c久置后可吸收空氣中的二氧化碳因?yàn)樘妓徕c久置后可吸收空氣中的二氧化碳, 產(chǎn)生碳產(chǎn)生碳酸氫酸氫 鈉鈉,使含量下降使含量下降; (2) 銀電極臨用前需用硝酸浸洗銀電極臨用

33、前需用硝酸浸洗12分鐘分鐘, 再用水淋洗干凈再用水淋洗干凈. .（二）溴量法（二）溴量法 凡在凡在5位取代基中含有雙鍵的巴比妥類藥物位取代基中含有雙鍵的巴比妥類藥物, 可與溴定量地發(fā)生加成反應(yīng)可與溴定量地發(fā)生加成反應(yīng),可以用溴量法可以用溴量法進(jìn)行測定進(jìn)行測定.如司可巴比妥鈉及其膠囊的含量如司可巴比妥鈉及其膠囊的含量,即用該法測定即用該法測定.本法操作簡單本法操作簡單,專屬性強(qiáng)專屬性強(qiáng),針對(duì)結(jié)構(gòu)針對(duì)結(jié)構(gòu)中的雙鍵特征中的雙鍵特征,可與其他方法區(qū)別可與其他方法區(qū)別. 以中國藥典以中國藥典(2000版版)測定司可巴比妥鈉的方法為例測定司可巴比妥鈉的方法為例 測定方法測定方法 取本品約取本品約0.1 g

34、,精密稱定精密稱定,置置250ml碘量瓶中碘量瓶中,加水加水10ml,振搖使溶解振搖使溶解,精密加溴滴精密加溴滴定液定液(0.1mol/L)25ml,再加鹽酸再加鹽酸ml，立即密塞并振搖，立即密塞并振搖1min，在暗處靜置，在暗處靜置15min后，注意微開后，注意微開瓶塞，加碘化鉀試液瓶塞，加碘化鉀試液10ml，立即密塞，搖勻后用硫代硫酸鈉滴定液（，立即密塞，搖勻后用硫代硫酸鈉滴定液（0.1molL）滴定，至）滴定，至近終點(diǎn)時(shí)近終點(diǎn)時(shí),加淀粉指示液，繼續(xù)滴定至蘭色消失加淀粉指示液，繼續(xù)滴定至蘭色消失,并將滴定結(jié)果用空白試液校正并將滴定結(jié)果用空白試液校正.每每1ml溴滴定溴滴定液液0.1molL

35、)相當(dāng)于相當(dāng)于13.01mg的的C12H17N2NaO3.（三）酸堿滴定法（三）酸堿滴定法 巴比妥類藥物呈弱酸性巴比妥類藥物呈弱酸性,可作為一元酸以標(biāo)準(zhǔn)堿液直接滴定可作為一元酸以標(biāo)準(zhǔn)堿液直接滴定.或在非水溶液中用強(qiáng)或在非水溶液中用強(qiáng)堿溶液滴定堿溶液滴定.在水在水-醇混合溶劑中的滴定法醇混合溶劑中的滴定法 本類藥物在水中溶解度較小本類藥物在水中溶解度較小,滴定時(shí)多在醇溶液或含水的醇溶液中進(jìn)行滴定時(shí)多在醇溶液或含水的醇溶液中進(jìn)行,這樣也這樣也能避免反應(yīng)中產(chǎn)生的弱酸鹽易于水解而影響滴定終點(diǎn)能避免反應(yīng)中產(chǎn)生的弱酸鹽易于水解而影響滴定終點(diǎn).以麝香草酚酞為指示劑以麝香草酚酞為指示劑, 滴定滴定至溶液顯淡蘭

36、色為終點(diǎn)至溶液顯淡蘭色為終點(diǎn). 以異戊巴比妥的含量測定為例以異戊巴比妥的含量測定為例 測定方法測定方法 取本品取本品0.5g,精密稱定精密稱定,加乙醇加乙醇20ml溶解后溶解后,加麝香草酚酞指示液加麝香草酚酞指示液6滴滴,用氫氧化鈉滴定液用氫氧化鈉滴定液(0.1mol/L)滴定滴定,并將滴定結(jié)果用空白試驗(yàn)校正并將滴定結(jié)果用空白試驗(yàn)校正,即得即得.每每1ml氫氧化鈉氫氧化鈉(0.1molL)相當(dāng)于相當(dāng)于22.63mg的的C11H18N2O3. 討論討論 : 本法操作簡便本法操作簡便,但終點(diǎn)較難判斷但終點(diǎn)較難判斷.為便于確定終點(diǎn)為便于確定終點(diǎn),采用空白對(duì)照采用空白對(duì)照. 因操作過程因操作過程中吸收

37、二氧化碳能使終點(diǎn)的淡蘭色褪去中吸收二氧化碳能使終點(diǎn)的淡蘭色褪去,采用空白對(duì)照也難以克服采用空白對(duì)照也難以克服,因此可采用電位因此可采用電位法指示終點(diǎn)法指示終點(diǎn).2. 在膠束水溶液中的滴定方法在膠束水溶液中的滴定方法: 是在有機(jī)表面活性劑的是在有機(jī)表面活性劑的膠束水溶液中進(jìn)行滴定膠束水溶液中進(jìn)行滴定,用用指示劑或電位法指示終點(diǎn)指示劑或電位法指示終點(diǎn).3. 非水溶液滴定法非水溶液滴定法: 巴比妥類藥物在非水溶液中的酸性增強(qiáng)巴比妥類藥物在非水溶液中的酸性增強(qiáng),用堿性標(biāo)準(zhǔn)溶液滴定用堿性標(biāo)準(zhǔn)溶液滴定時(shí)時(shí),終點(diǎn)較明顯終點(diǎn)較明顯.測定時(shí)常用的溶劑有二甲基甲酰胺測定時(shí)常用的溶劑有二甲基甲酰胺,甲醇甲醇,氯仿氯

38、仿,丙酮丙酮,無水乙醇無水乙醇,苯苯,吡吡啶啶,甲醇甲醇-苯苯(15:85),乙醇乙醇-氯仿氯仿(1:10)等等;常用的滴定劑有甲醇鉀常用的滴定劑有甲醇鉀(鈉鈉)的甲醇或乙醇的甲醇或乙醇溶液溶液,氫氧化四丁基銨的氯苯溶液等氫氧化四丁基銨的氯苯溶液等,常用的指示劑為麝香草酚藍(lán)等常用的指示劑為麝香草酚藍(lán)等,也可用玻璃也可用玻璃-甘甘汞電極系統(tǒng)汞電極系統(tǒng),以電位法指示終點(diǎn)以電位法指示終點(diǎn). 以司可巴比妥的含量測定為例以司可巴比妥的含量測定為例 測定方法測定方法 取本品約取本品約0.45g,加二甲基甲酰胺加二甲基甲酰胺60ml溶解后溶解后,加麝香草酚蘭指示劑加麝香草酚蘭指示劑4滴滴,在隔絕二氧化碳的條

39、件下在隔絕二氧化碳的條件下,以電磁攪拌以電磁攪拌,用甲醇鈉滴定液用甲醇鈉滴定液(0.1mol/L)滴定滴定,并將滴定結(jié)果并將滴定結(jié)果用空白試驗(yàn)校正用空白試驗(yàn)校正. 每每1ml甲醇鈉滴定液甲醇鈉滴定液(0.1mol/L)相當(dāng)于相當(dāng)于23.83mg的的C12H18N2O3. 本法可用于巴比妥類藥物及其制劑的分析本法可用于巴比妥類藥物及其制劑的分析.用于制劑時(shí)用于制劑時(shí),可先用有機(jī)溶劑提取可先用有機(jī)溶劑提取,然后然后按上法進(jìn)行測定按上法進(jìn)行測定.片劑中如含有硬脂酸鎂對(duì)此法有干擾片劑中如含有硬脂酸鎂對(duì)此法有干擾. （四）（四） 紫外分光光度法紫外分光光度法 巴比妥類藥物在酸性溶液中幾乎不電離巴比妥類藥

40、物在酸性溶液中幾乎不電離,無明顯的紫外吸收無明顯的紫外吸收.但在堿性溶液中電離為但在堿性溶液中電離為具有紫外吸收特征的結(jié)構(gòu)具有紫外吸收特征的結(jié)構(gòu).在紫外區(qū)產(chǎn)生特征吸收在紫外區(qū)產(chǎn)生特征吸收,可用紫外分光光度法測定其含量可用紫外分光光度法測定其含量. 本法實(shí)用于巴比妥類藥物的原料藥和制劑的含量測定本法實(shí)用于巴比妥類藥物的原料藥和制劑的含量測定.當(dāng)測定含有干擾性物質(zhì)的樣當(dāng)測定含有干擾性物質(zhì)的樣品時(shí)品時(shí),須用提取分離除去干擾物后須用提取分離除去干擾物后,再進(jìn)行測定再進(jìn)行測定. 巴比妥類藥物紫外吸收的有關(guān)數(shù)據(jù)見下表巴比妥類藥物紫外吸收的有關(guān)數(shù)據(jù)見下表:藥名入max(nm)溶劑異戊巴比妥238440PH9.4硼酸鹽緩沖液戊巴比妥239420HCL 液