1、            作者：李聰然 游雪甫 張偉新 婁人慧 楊信怡 王躍明 陳慧貞 蔣建東【摘要】  目的 評價新氨基糖苷類抗生素vertimicin(VTM)的體內抗菌活性。方法 采用小鼠全身感染模型，觀察VTM對臨床分離大腸埃希菌(E.coli)、肺炎克雷伯菌(K.pneumoniae)、銅綠假單胞菌(Ps.aeruginosa)和金葡菌(S.aureus)腹腔感染小鼠的體內療效；采用兔皮膚燙傷感染模型、小鼠泌尿道上行性感染模型觀察VTM對臨床分離大腸埃希菌局部感染的體

2、內療效，并與對照藥進行比較。結果 VTM皮下或靜脈給藥對E.coli 9612、K.pneumoniae 935、Ps.aeruginosa 9417和S.aureus 9344腹腔感染小鼠具有相似的體內療效，皮下給藥的ED50值分別為0.67、0.29、2.41和0.99mg/kg，靜脈給藥的ED50值分別為0.46、0.23、0.99和1.52mg/kg，體內療效與奈替米星相近。兔皮膚燙傷感染模型中，VTM各劑量組兔皮膚組織活菌落數明顯低于對照組(P<0.05或0.01)。小鼠泌尿道上行性感染模型中，VTM各劑量組腎組織活菌落數明顯低于對照組，腎剖面蓋印細菌陰性率明顯高于對照組(P&

3、lt;0.01)，抗菌活性優于慶大霉素。結論 VTM對全身和局部感染動物均顯示較好保護作用，體內療效與奈替米星相近。 【關鍵詞】  Vertimicin 半數有效量 泌尿道上行性感染 皮膚燙傷感染    In vivo antibacterial activity of a new aminoglycoside antibiotic, vertimicin      ABSTRACT  Objective  To investigate the in vivo antibacteria

4、l activity of vertimicin.  Methods  The in vivo efficacies of vertimicin were evaluated in mice with experimental systemic infection caused by E.coli, K.pneumoniae, Ps.aeruginosae and S.aureus, skinburned rabbits infected with E.coli 9612 and mice transurethrally infected with E.coli 9612,

5、 and compared with those of the control.  Results  Vertimicin given by s.c. or i.v. had similar effects on mice systemically infected with E.coli 9612, K.pneumoniae 935, Ps.aeruginosae 9417 and S.aureus 9344, the ED50s of vertimicin given by s.c. were 0.67, 0.29, 2.41 and 0.99 mg/kg respec

6、tively, and those given by i.v. were 0.46, 0.23, 0.99 and 1.52 mg/kg respectively, the in vivo activity was similar to that of netilmicin. In skinburned rabbits infected with E.coli, and treated with vertimicin were significantly reduced the skin bacteria counts compared to the control (P<0.05 or

7、 P<0.01). In mice transurethrally infected with E.coli, the renal colony counts for the vertimicin treated groups were significantly lower than that of the control, and the negative ratios of kidney stamping were significantly higher than that of the control (P<0.01),the activity of vertimicin

8、 was better than that of gentamicin.  Conclusion Vertimicin had relatively good protection to animals with systemic or local infections, and the in vivo activity was similar to that of netilmicin.    KEY WORDS  Vertimicin;  ED50;  Transurethral infection;  Ski

9、nburned infection     Vertimicin(VTM，曾譯威替米星)是浙江康樂集團有限公司溫州制藥廠在verdamicin(VDM)1的基礎上，通過1N位乙基化合成的一種新的氨基糖苷類抗生素，與VDM、慶大霉素(GM)、依替米星(ETM)、奈替米星(NTM)同屬氨基糖苷類的GM亞組(Fig.1)。氨基糖苷類具有廣泛的抗腸桿菌屬和其它需氧革蘭陰性菌屬活性，VTM的體外抗菌活性實驗顯示其對革蘭陰性菌有較強的抗菌活性(與NTM相近)，并且是濃度依賴性的殺菌劑2。此外我們還發現其對革蘭陽性菌也有一定的體外抗菌活性。本文進一步研究VTM的體內抗

10、菌活性。    Fig.1    Chemical structures of vertimicin and netilmicin    1  材料和方法    1.1  藥物及其配制    硫酸VTM(效價538g/mg，批號20010122)、硫酸VDM(效價550g/mg，批號20000912)、硫酸ETM(效價614g/mg，批號200001)和硫酸NTM(效價569g/mg，批號20000301)均由浙江康樂藥業有限

11、公司提供；GM(效價636g/mg，批號03269713)為中國藥品生物制品檢定所標準品。藥物配制時按實際活性計算。    1.2  動物    ICR小鼠，外觀健康，體重1822g，雌、雄各半(全身感染)，或體重2022g，雌性(泌尿道上行性感染)，由北京維通利華實驗動物技術有限公司供應，許可證號：SCXK1100008。新西蘭兔，雄性，體重2.53kg，由中國藥品生物制品檢定所供應，許可證號：2000第07號。    1.3  細菌及其培養稀釋方法   

12、; (1)實驗菌株  用于小鼠全身感染的菌株為大腸埃希菌(E.coli)9612、肺炎克雷伯菌(K.pneumoniae)935、銅綠假單胞菌(Ps.aeruginosa)9417和金葡菌(S.aureus)9344；用于兔皮膚燙傷和小鼠泌尿道上行性感染的菌株為E.coli 9612。所有菌株均為臨床分離株，經實驗室鑒定后使用。    (2)感染菌液制備    小鼠全身感染  將感染菌分別接種于10ml增菌肉湯(Nutrient No.2，Oxoid，0.5%；Yeast Extract，Oxoid，0.5%，用蒸

13、餾水配制)中，35孵育6h，取0.2ml轉種于10ml增菌肉湯中，35再孵育18h，作為感染原菌液。將原菌液用生理鹽水作適當稀釋，而后用5%高活性干酵母稀釋至感染所需濃度。    兔皮膚燙傷感染  同法制備E.coli 9612的感染原菌液。將原菌液用生理鹽水稀釋10倍，得感染菌液，感染濃度為1×108CFU/ml。    小鼠泌尿道上行性感染  將E.coli 9612置37水浴搖床振蕩(140r/min)培養過夜，培養液6500×g、4離心10min，沉淀用5%高活性干酵母重懸，終濃度為4.

14、4×1010CFU/ml，用于感染。    1.4  實驗方法    小鼠全身感染  受試小鼠隨機分組，每組10只，雌、雄各半，腹腔注入100%最小致死量(100% MLD)的菌液0.5ml感染，于感染后15min和6h分別皮下或靜脈注射給藥2次，感染對照不加處理，觀察7d內動物死亡數，用Bliss法3計算半數有效劑量(ED50)及其95%可信限，進行統計學處理。    兔皮膚燙傷感染  健康新西蘭兔，試驗前一天背部脫毛。試驗當天靜脈注射戊巴比妥鈉(30mg/kg)

15、麻醉后，消毒背部皮膚，用自制溫控電燙儀(100，10s)在兔背部脊柱兩側各2cm處依次致燙傷，共8處，造成深II度燙傷，燙傷面積約為2.54cm2(直徑18mm)。燙傷15min后皮內注射0.1ml菌液感染，用自制感染保護罩保護燙傷部位，并用502膠固定。燙傷1h后每個創面用消毒干紗布覆蓋并均勻滴加0.4ml受試藥液，對照給予同體積的生理鹽水，外層用消毒油紗布覆蓋以保持創面濕潤。給藥后24h取創面組織，研磨計數組織活菌落數,用SPSS10.0軟件進行統計學處理4。- 28 焦靈利，倪孟祥，陳日，等. 頭孢唑林鈉聯合舒巴坦鈉對產酶和非產酶菌的體內抗菌活性J. 中國藥師，2000,3(5):26629 Gavalda J, Torres C, Tenorio C, et al. Efficacy of ampicillin plus ceftriaxone in treatment of expeimental endocardi