1、鍵入文字免疫定性項目性能驗證報告單位名稱：河北省兒童醫院科室名稱：檢驗科實 驗 室：免疫實驗室儀器名稱：STAR-FAME全自動酶免分析系統型號規格：STAR LET8CH-FAME 24/30儀器編號：173000-7552 146003-3441驗證人員：閆紅 劉雪超審核人員：郭映輝批 準 人：李貴霞驗證日期：2016年4月19日-2016年4月24日第 17 頁 共 17 頁目 錄性能驗證結果11、基本信息32、正確度驗證43、精密度驗證54、檢出線驗證95、陰陽性符合率13河北省兒童醫院檢驗科性能驗證報告1 基本信息1.1 儀器名稱：STAR-FAME全自動酶免分析系統1.2試劑：項目

2、試劑產家試劑批文試劑批號失效期HBsAg英科新創國藥準字S1091014820151251432016-12-09HBSAb英科新創國食藥監械（準）字2013第3401320號20160162022017-01-17抗-HCV英科新創國藥準字S1095005520151258242016-11-301.3質控品：項目生產廠家批文濃度批號失效期HBsAg北京康徹思坦生物國制標物號10000958號0.5IU/ml20150400220170407HBSAb北京康徹思坦生物國制標物號10001001號30mIU/ml20140600120160602抗-HCV北京康徹思坦生物國制標物號100010

3、91號0.5NCU/ml201511005201711192 正確度驗證以衛生部臨床檢驗中心室間質評結果為準；成績在80%者即為驗證通過。附件：衛生部臨檢中心室間質量評價成績表標本來源：衛生部臨檢中心 批號：152115221523152415251531153215331534153516111612161316141615項目名稱：HBsAg結果衛生部臨檢中心陽性陰性合計本室陽性606本室陰性099合計6915符合率：100%100% 項目名稱：HBsAb結果衛生部臨檢中心陽性陰性合計本室陽性404本室陰性01111合計41115符合率：100%100%項目名稱：抗-HCV結果衛生部臨檢中

4、心陽性陰性合計本室陽性505本室陰性01010合計51015符合率：100%100%3 精密度驗3.1 批內精密度：3.1.1 實驗方案：選擇低值、中值質控品，連續檢測20次，記錄并保存原始檢測數據，計算SD、CV值。3.1.2 檢測要求：批內精密度<15%。3.1.3 結果HBsAg批內精密度樣本號低值OD值檢測結果樣本號中值OD值檢測結果10.378陽性210.819陽性20.345陽性220.775陽性30.347陽性230.769陽性40.328陽性240.78陽性50.327陽性250.856陽性60.337陽性260.754陽性70.335陽性270.803陽性80.331陽

5、性280.845陽性90.334陽性290.832陽性100.352陽性300.783陽性110.366陽性310.789陽性120.364陽性320.781陽性130.349陽性330.83陽性140.355陽性340.747陽性150.356陽性350.819陽性160.371陽性360.81陽性170.395陽性370.787陽性180.384陽性380.791陽性190.377陽性390.791陽性200.365陽性400.795陽性低值樣本X= 0.355 s= 0.020 cv=5.6%中值樣本X= 0.798 s= 0.029 cv=3.6%HBsAb批內精密度樣本號低值OD值檢

6、測結果樣本號中值OD值檢測結果10.256陽性211.24陽性20.226陽性221.238陽性30.224陽性231.24陽性40.211陽性241.188陽性50.217陽性251.316陽性60.212陽性261.27陽性70.212陽性271.315陽性80.22陽性281.33陽性90.239陽性291.368陽性100.215陽性301.298陽性110.235陽性311.297陽性120.228陽性321.231陽性130.227陽性331.441陽性140.229陽性341.296陽性150.215陽性351.307陽性160.197陽性361.177陽性170.229陽性37

7、1.258陽性180.227陽性381.242陽性190.221陽性391.233陽性200.227陽性401.276陽性低值樣本X= 0.223 s= 0.012 cv=5.5%中值樣本X= 1.278 s= 0.061 cv=4.8%HCV批內精密度樣本號低值OD值檢測結果樣本號中值OD值檢測結果10.507陽性210.894陽性20.456陽性220.77陽性30.466陽性230.796陽性40.461陽性240.81陽性50.395陽性250.83陽性60.447陽性260.805陽性70.434陽性270.772陽性80.457陽性280.845陽性90.381陽性290.723陽

8、性100.408陽性300.739陽性110.402陽性310.744陽性120.428陽性320.771陽性130.413陽性330.823陽性140.418陽性340.744陽性150.449陽性350.765陽性160.441陽性360.721陽性170.386陽性370.843陽性180.342陽性380.781陽性190.364陽性390.854陽性200.399陽性400.842陽性低值樣本X= 0.423 s= 0.039 cv=9.3%中值樣本X= 0.794 s= 0.048 cv=6.1%3.2 批間精密度：3.2.1 實驗方案：選擇低值、中值質控品，每天重復測定5次，連續

9、進行4天，記錄并保存原始檢測數據，計算SD、CV值。3.2.2 檢測要求：批間精密度203.2.3 結果HBsAg批間精密度日期低值OD值中值OD值日期低值OD值中值OD值4月20日0.3950.7874月22日0.2770.6794月20日0.3840.7914月22日0.2470.6654月20日0.3770.7914月23日0.2550.5954月20日0.3650.7954月23日0.2620.5994月21日0.3210.754月23日0.2720.5954月21日0.3190.7794月23日0.2390.6184月21日0.3150.7264月24日0.2540.6294月21日

10、0.320.6964月24日0.2690.654月22日0.2610.6114月24日0.2560.6694月22日0.2790.5864月24日0.2630.639 低值樣本X=0.30 s=0.05 cv=16.79 中值樣本X=0.68 s=0.08 cv=11.16HBsAb批間精密度日期低值OD值中值OD值日期低值OD值中值OD值4月20日0.2291.2584月22日0.2191.734月20日0.2271.2424月22日0.2361.7764月20日0.2211.2334月23日0.2081.5554月20日0.2271.2764月23日0.1971.7434月21日0.192

11、1.5434月23日0.2011.7484月21日0.2041.5314月23日0.2181.9594月21日0.1911.5744月24日0.21.6834月21日0.2111.544月24日0.2021.6324月22日0.2471.6724月24日0.2091.6094月22日0.2441.7564月24日0.2061.586低值樣本X=0.21 s=0.02 cv=7.69中值樣本X=1.58 s=0.20 cv=12.55HCV批間精密度日期低值OD值中值OD值日期低值OD值中值OD值4月20日0.3860.8434月22日0.3830.7834月20日0.3420.7814月22日

12、0.2540.7454月20日0.3640.8544月23日0.3850.7424月20日0.3990.8424月23日0.4440.7654月21日0.3390.7094月23日0.3830.6384月21日0.4090.7754月23日0.3520.614月21日0.3790.7084月24日0.4520.8224月21日0.3980.754月24日0.4180.8384月22日0.3810.7814月24日0.4610.8244月22日0.4780.7784月24日0.4290.854低值樣本X=0.39 s=0.05 cv=12.85中值樣本X=0.77 s=0.07 cv=8.804

13、 檢出限驗證4.1實驗方案：根據康徹斯坦定值標準物濃度（見下表）的實際情況進行1:1，1:4，1:8，1:16稀釋檢測，各濃度一次做3個孔，然后計算出預測臨界點(C50)，并重復檢測20次進行驗證C50；在此基礎上，制備高于臨界濃度20和低于臨界濃度20的樣本分別測定20次，記錄陰性及陽性結果數。4.2 實驗要求：要求高于臨界濃度20的樣本重復檢測20次應至少有19次以上（95%）陽性反應，低于臨界濃度20的樣本重復檢測20次應至少有19次以上（95%）陰性反應，即為通過。4.3 實驗結果HBsAg檢出限序號12345稀釋比例原倍1:21:41:81:16終濃度（IU/ml）0.50.250.

14、1250.06250.0312OD值0.531 0.252 0.115 0.047 0.017 預測臨界點（C50）： 0.11IU/ml HBsAg檢出限濃度20次重復檢測序號12345678910OD值0.1160.1090.1160.1080.1020.1050.1180.1110.1080.107序號11121314151617181920OD值0.1080.1050.0980.1020.1090.1070.1030.1030.1040.102X=0.11，經統計， 陽性結果數：13，陰性結果數：7，陽性結果比65%，因此可以判定0.11IU/ml為實驗方法的臨界點HBsAg20次高低

15、濃度樣本測定（±20%樣本濃度）+20%濃度-20%濃度樣本號OD值樣本號OD值樣本號OD值樣本號OD值10.126110.13110.068110.06520.131120.13320.081120.06530.137130.12830.072130.06340.136140.13340.072140.06250.141150.1350.065150.06760.133160.1360.066160.06770.132170.12770.063170.07680.127180.12980.063180.06790.135190.1390.071190.71100.135200.12

16、4100.07200.066+20%濃度樣本OD均值X=0.131，陽性數量20，陽性比例100%-20%濃度樣本OD均值X=0.068, 陰性數量20，陰性比例100%臨界值+20%濃度，也就是0.14IU/ml即為該試驗方法檢出限HBsAb檢出限序號12345稀釋比例原倍1:21:41:81:16終濃度（mIU/ml）30157.53.751.88OD值0.3860.1790.0790.0340.013預測臨界點（C50）： 9.16mIU/ml HBsAb檢出限濃度20次重復檢測序號12345678910OD值0.1180.0820.090.0740.0940.1150.0810.092

17、0.0850.104序號11121314151617181920OD值0.1060.1070.1180.1030.1110.0970.1040.1130.1060.109X=9.16，經統計， 陽性結果數：9，陰性結果數：11，陽性結果比45%，因此可以判定9.16IU/ml為實驗方法的臨界點HBsAb20次高低濃度樣本測定（±20%樣本濃度）+20%濃度-20%濃度樣本號OD值樣本號OD值樣本號OD值樣本號OD值10.194110.19710.078110.09120.195120.19320.08120.07530.199130.1930.09130.08840.201140.1

18、9240.085140.06550.176150.19350.082150.08260.199160.1960.094160.07470.177170.17770.083170.09280.202180.17880.094180.09490.191190.290.089190.089100.195200.199100.097200.093+20%濃度樣本OD均值X=0.192，陽性數量20，陽性比例100%-20%濃度樣本OD均值X=0.085, 陰性數量20，陰性比例100%臨界值+20%濃度，也就是11mIU/ml即為該試驗方法檢出限HCV檢出限序號12345稀釋比例原倍1:21:41:8

19、1:16終濃度（NCU/ml）0.50.250.1250.06250.0312OD值0.4280.1850.0720.0440.015預測臨界點（C50）： 0.184NCU/ml HCV檢出限濃度20次重復檢測序號12345678910OD值0.979 1.100 1.029 1.143 0.857 1.107 1.057 0.993 0.971 0.986 序號11121314151617181920OD值0.971 0.986 1.057 1.243 1.350 1.114 0.857 1.100 1.000 1.021 X=0.184，經統計， 陽性結果數：13，陰性結果數：7，陽性結

20、果比65%，因此可以判定0.184NCU/ml為實驗方法的臨界點HCV20次高低濃度樣本測定（±20%樣本濃度）+20%濃度-20%濃度樣本號OD值樣本號OD值樣本號OD值樣本號OD值10.343110.35610.091110.09720.37120.3220.107120.10630.339130.26430.092130.10340.31140.30740.102140.10650.305150.39850.096150.11260.28160.34660.104160.10670.315170.37370.105170.1380.337180.28880.096180.112

21、90.31190.33790.12190.11100.267200.308100.127200.114+20%濃度樣本均值X=0.323，陽性數量20，陽性比例100%-20%濃度樣本均值X=0.107,陰性數量20，陰性比例100%臨界值+20%濃度，也就是0.22NCU/ml即為該試驗方法檢出5 陰陽性符合率5.1 實驗方案：20份已確診為陽性和20份已確診為陰性的標本在同一批檢測，計算陽性符合率和陰性符合率。5.2 實驗要求：陽性符合率和陰性符合率應95%以上。5.3實驗結果：HBsAg陰陽性符合率 臨界值:0.105臨床診斷明確的陽性樣本臨床診斷明確的陰性樣本樣本號OD值樣本號OD值樣

22、本號OD值樣本號OD值13.0003.0001.34710.007110.00723.0003.0001.61420.007120.00733.0003.0001.0430.006130.00843.0000.1561.42440.008140.00653.0003.0000.94450.009150.00663.0000.7561.10760.006160.00873.0000.1821.34870.007170.00783.0000.5580.74480.008180.00693.0003.0002.54890.007190.007103.0000.1602.552100.006200.007陽性符合率：100%陰性符合率：100%HBsAb陰陽性符合率 臨界值：0.105 臨床診斷明確的陽性臨床診斷明確的陰性樣本號OD值樣