1、深靜脈血栓形成動物模型的研究進展    深靜脈血栓形成(deep venous thrombosis，DVT)已成為影響人類健康的重要疾病，早期易并發致命性的肺栓塞，后期遺留腫脹、郁積性皮炎、頑固性小腿潰瘍等嚴重影響患者的生活質量。因此，建立DVT動物模型是研究體內靜脈血栓形成發病機制、病理生理變化和評價各種診治方法包括藥物干預的重要載體。文獻報道1，應用實驗性靜脈血栓形成動物模型有50余年的歷史，約有18種不同的動物被用來制備模型。近年來，我國各種DVT動物模型取得了很大進展，現將其綜述如下。1靜脈結扎(阻斷)法此方法是通過血液瘀滯誘導靜脈血栓形成。結

2、扎深靜脈，導致靜脈血液回流障礙，局部血流淤滯、缺氧，血管內皮細胞損傷，啟動凝血過程。此外，血小板與局部形成的凝血因子也因血流受阻停留在局部，致使血栓形成。通常根據不同的實驗動物，結扎的血管也各不相同。常用的方法如下。1.1下腔靜脈結扎法Reyers等2首先在1980年通過結扎大鼠下腔靜脈建立大鼠DVT模型。方法如下:麻醉大鼠后，沿腹白線切開進腹，分離下腔靜脈，于左腎靜脈下方用粗絲線結扎下腔靜脈，縫合腹壁，結扎后26 h重新打開腹腔，在結扎線下方2cm處夾閉血管，剖開管腔，取出血栓，稱量血栓干重。一般在結扎后3h血栓形成率為60%80%，結扎后6h血栓形成率為100%。以血栓形成百分率、血栓質量

3、、凝血及纖溶系統為研究對象。顧毅等3采用此模型，插入Fogarty導管取栓，觀察不同時相導管取栓對靜脈壁的影響，探討應用球囊導管取栓術治療深靜脈血栓形成的時機。還有學者在Reyers造模方法的基礎上進行改良，張智輝4等結扎大鼠下腔靜脈下段及雙側髂總靜脈制備后肢深靜脈血栓形成模型，血栓形成率均較單純結扎下腔靜脈高;賽力克·馬高維亞等5在左腎靜脈與下腔靜脈交匯處用絲線把下腔靜脈與導絲一起結扎，血管夾阻斷下腔靜脈下段，1h后撤掉血管夾，抽出導絲，認為此模型能保障血栓近心端血管通暢，符合人體DVT急性期的病理演變，是適合作為動態研究的動物模型。還有報道6采用單純下腔靜脈結扎法建立靜脈血栓家兔

4、模型。綜合文獻，制備兔下腔靜脈血栓模型者遠少于大鼠下腔靜脈血栓模型，這與大鼠模型的易行性、經濟性密切相關。1.2髂靜脈結扎法高峰等7采用髂靜脈結扎法成功制備大鼠模型。方法:麻醉大鼠后，取下腹部正中切口，打開后腹膜，顯露左髂動、靜脈，60單絲尼龍線依次縫扎左髂靜脈近端、沿途屬支及遠端。40min即見肉眼血栓形成。作者認為此模型與犬、豬、貓、兔等體型較大的動物模型相比，有術后管理容易，死亡率低等優勢，且在解剖位置上可以模仿臨床病例。缺點:大鼠髂靜脈較細，不易解剖分離。1.3股靜脈結扎(阻斷)法常選用犬、兔等形體較大的動物。方法:暫時結扎(或阻斷)股靜脈近、遠端，血栓形成后，松開結扎線或解除阻斷。采

5、用此模型，戎建杰等8研究和比較導管直接溶栓和系統性溶栓對急性深靜脈血栓形成后靜脈壁形態學的影響及近期療效;王輝等9根據血栓形成不同時期應用超聲消融儀的超聲溶栓效果、血管再通情況、靜脈壁及瓣膜的病理變化，探討腔內超聲溶栓治療深靜脈血栓的療效;周為民等10則通過觀察Amplatz血栓消融術、經導管藥物溶栓及外科取栓術對急性股靜脈血栓形成后靜脈壁形態學的影響，探討這三種治療方法的各自優勢。2機械性損傷法采用器械損傷血管，使內皮下細胞外基質裸露，促使血小板與膠原接觸而被激活和黏附，形成血栓。該方法主要是模擬創傷后或手術后肢體制動等而導致的深靜脈血栓形成，能較好的反映創傷后發生深靜脈血栓形成的病理變化過

6、程。何飛等11采用擊打裝置，以固定能量擊打兔左側大腿近端外側，石膏固定左下肢屈髖屈膝位，7天后即成功制備創傷性肢體DVT模型。張春強等12將大鼠麻醉后，切開皮膚，顯露股靜脈，直接鉗夾股靜脈，制備急性大鼠創傷性深靜脈血栓形成模型;采用定量打擊大鼠雙側大腿+石膏固定的方法制備亞急性大鼠創傷性深靜脈血栓形成，觀察炎癥相關基因的表達變化，探討炎癥在創傷性深靜脈血栓形成中的意義。3電流損傷法利用電刺激，損傷血管內膜，啟動凝血機制，從而導致深靜脈血栓形成。楊軍13先給大鼠肌注地塞米松磷酸鈉注射液(1mg/kg體重)，每日1次，連續7天。第8天麻醉大鼠后，取股內側縱行切口，游離股靜脈主干長約1.5cm，將實

7、驗性體內血栓形成測定儀的正、負電極分別置于股靜脈的遠、近端，接通直流電(1.5mA)，持續刺激7min。成功制備大鼠DVT模型，探討藥物抗靜脈血栓形成的藥理作用。4靜脈異物法此方法通常暫時阻斷局部血管血流，然后插入異物(銅絲)，啟動內、外源性凝血過程，促發靜脈血栓形成。國內學者1415依照Knight16等方法建立犬、兔動物模型。麻醉動物后，沿股靜脈走向切開皮膚，鈍性分離皮下組織及肌肉，充分暴露股靜脈，于其近端和遠端分別上血管夾，向近心端插入自制的螺旋銅絲，縫合血管，確定血管再通后，逐層縫合。此模型旨在評估放射性核素標記抗血栓成分(血小板和纖維蛋白)的單克隆抗體對體內新、舊血栓的放免顯像研究。

8、5光化學法本法是將光敏物質注射入動物血管內，在特定的波長的光線照射下，發生光化學反應而產生單線態氧等活性氧，繼而損傷靜脈內皮細胞，激發血小板黏附、聚集而形成血栓。朱聽等17利用光化學誘導倉鼠股靜脈血栓形成，并采用數字顯微縮時攝影記錄血栓形成的過程，通過數字處理獲得血栓的三維圖像，可用于血栓形成機理和抗栓藥物的研究。6血栓誘導劑致血栓形成法通常局部血管注射凝血酶，啟動凝血過程，形成血栓。張鵬等18在DSA的導引下，經頸外靜脈及股靜脈途徑分別將直徑10mm和6mm的球囊導管置于髂總靜脈近心端及股靜脈遠心端，充盈球囊阻斷血流，并經導管注入凝血酶100U，1h后彩超檢查證實血栓形成，4h后抽癟球囊退出

9、導管，成功建立犬靜脈血栓模型，認為介入技術建立的犬下肢DVT模型具有操作簡單、創傷小、動物易存活，血栓形成快速可靠地優點，有利于深靜脈血栓的影像學診斷和臨床治療研究。7展望和問題建立合適的DVT模型是研究DVT發病機制和治療方法的基本前提。當前，DVT動物模型仍是誘發性動物模型，主要以阻斷靜脈回流，造成血液淤滯誘發血栓形成為主，注入血栓誘導劑或(和)機械性損傷血管內皮細胞為輔，并建立了一些較為可靠、易行的動物模型，如對藥物抗血栓機制的研究，下腔靜脈結扎法大鼠血栓模型最為經濟、常用;犬、兔等股靜脈血栓模型常用于血管介入溶栓、取栓及對血栓放免顯像診斷的研究，但費用高、造模術后管理困難大等。國外還有文獻報道1920利用基因敲除或轉基因老鼠，制備DVT模型，有助于對DVT發病機制進行更深入研究。DVT的發病機制復雜，目前公認是Virchow的三大發病因素，即血流滯緩、血液高凝、靜脈壁的損傷相互作用的結果。研究表明212