1、2010年高考生物試題分類匯編生物技術實踐微生物的培養與應用（10廣東卷）第38題（生物技術實踐）和39題（現代生物科技專題）是選做題，考生只需作答其中一題。請根據下述材料，回答第38題或39題。 材料：飼料原料中的磷元素有相當一部分存在于植酸中，豬、禽等動物由于缺乏有關酶，無法有效利用植酸，造成磷源浪費，而且植酸隨糞便排除后易造成環境有機磷污染。植酸酶能催化植酸水解成肌醇和磷酸，因此成為目前重要的飼料添加劑之一。38.（10分）生物技術實踐（1）商品化植酸酶主要來自微生物。在產酶菌株篩選過程中，常在基本培養基中添加不溶于水的植酸鈣制成固體平板，植酸鈣被植酸酶分解后可在平板上產生 ，可根據其大

2、小選擇目的菌株，所得菌株需要進一步測定植酸酶活性。活性測定可以植酸鈉作為底物，活性可用一定條件下單位時間 表示。（2）利用上述所得菌株制備植酸酶的流程如下圖：中的主要成分為 ；中包含多種酸酶等多種蛋白質。請寫出一種純化得到植酸酶的方法及其依據。（3）為建設基因工程菌，可用PCR等技術從上述菌株中克隆植酸酶基因。PCR反應包含多次循環，每次循環包括三步： 。反應過程中打開模板DNA雙鏈的方法是 。（4）除植酸酶外，微生物還應用在 的生產中。答案：（1）透明圈 植酸鈉的消耗量（肌醇和磷酸的生成量）（2）小分子雜質 凝膠色譜法：根據蛋白質之間分子大小，吸附性質等差異進行純化。（或電泳法：根據蛋白質之

3、間電荷，分子大小等差異進行純化。）（3）變性，復性，和延伸 加熱（4）蛋白酶，脂肪酶，纖維素酶解析：本題考查對微生物的分離和培養，蛋白質的純化，酶活性鑒定等知識，結合實際應用。（10遼寧、寧夏卷）40.【生物選修1生物技術實踐】（15分）（1）在大腸桿菌培養過程中，除考慮營養條件外，還要考慮_、_和滲透壓等條件。由于該細菌具有體積小、結構簡單、變異類型容易選擇、_、_等優點，因此常作為遺傳學研究的實驗材料。（2）在微生物培養操作過程中，為防止雜菌污染，需對培養基和培養皿進行_（消毒、滅菌）；操作者的雙手需要進行清洗和_；靜止空氣中的細菌可用紫外線殺滅，其原因是紫外線能使蛋白質變性，還能_。（3

4、）若用稀釋涂布平板法計數大腸桿菌活菌的個數，要想使所得估計值更接近實際值，除應嚴格操作、多次重復外，還應保證待測樣品稀釋的_。（4）通常，對獲得的純菌種還可以依據菌落的形狀、大小等菌落特征對細菌進行初步的_。（5）培養大腸桿菌時，在接種前需要檢測培養基是否被污染。對于固體培養基應采用的檢測方法是_。（6）若用大腸桿菌進行實驗，使用過的培養基及其培養物必須經過_處理后才能丟棄，以防止培養物的擴散。答案：（1）溫度 酸堿度 易培養 生活周期短（2）滅菌 消毒 損傷DNA的結構（3）比例合適（4）鑒定(或分類)（5）將未接種的培養基在適宜的溫度下放置適宜的時間，觀察培養基上是否有菌落產生.（6）滅菌

5、解析：（1）大腸桿菌具有體積小、結構簡單、變異類型容易選擇、易培養、生活周期短等優點，培養過程中，除考慮營養條件外，還要考慮溫度、酸堿度和滲透壓等條件。（2）滅菌使用強烈的理化因素殺死物體內外所有的微生物，所以對培養基和培養皿進行滅菌，消毒使用較為溫和的物理或化學方法僅殺死物體表面或內部一部分對人體有害的微生物，操作者的雙手需要進行清洗和消毒，紫外線能使蛋白質變性，還能損傷DNA的結構。（3）稀釋涂布平板法是將菌液進行一系列的梯度稀釋，然后將不同稀釋度的菌液分別涂布到瓊脂固體培養基的表面，進行培養，應保證樣品稀釋的比例適合。（4）對獲得的純菌種還可以依據菌落的形狀、大小等菌落特征對細菌進行初步

6、的鑒定。（5）培養大腸桿菌時，在接種前需要檢測培養基是否被污染。對于固體培養基應采用的檢測方法是將未接種的培養基在適宜的溫度下放置適宜的時間，觀察培養基上是否有菌落產生。（6）因為有的大腸桿菌會釋放一種強烈的毒素，并可能導致腸管出現嚴重癥狀，使用過的培養基及其培養物必須經過滅菌處理后才能丟棄，以防止培養物的擴散。（10上海卷）39.（9分）氯苯化合物是重要的有機化工原料，原因不易降解，會污染環境。某研究小組依照下列實驗方案（圖1）篩選出能高效降解氯苯的微生物SP1菌，培養基配方如表1。（1）配制號固體培養基時，除添加號液體培養基成分外，還應添加1%的_。（2）培養基配制時，滅菌與調PH的先后順

7、序是_。（3）從用途上來說，號培養基和號培養基分別屬于_培養基和_培養基。在號培養基中，為SP1菌提供氮源的成分是_。（4）在營養缺乏或環境惡劣時，SP1的菌體會變成一個圓形的休眠體，這種休眠體被稱為_。（5）將SP1菌接種在含不同濃度氯苯的號培養液中培養，得到生長曲線（如圖2）。從圖2可知SP1菌在_培養條件下最早停止生長，其原因是_。答案：（1）瓊脂（2）先調PH，后滅菌（3）通用 選擇 硝酸銨（4）芽孢（5）20mg/L氯苯 硝酸最早耗盡解析：本題主要考查微生物相關知識。（1）固體培養基必須含有適量的瓊脂；（2）配置培養基時應先調PH后滅菌；（3）號培養基是為了獲得更多的菌株，屬于通用培

8、養基，號培養基是為選擇出SP1菌株屬于選擇培養基，號培養基成分中含N物質為硝酸銨，則應由它為SP1菌株提供氮源；（4）在惡劣環境下一些菌體會形成芽孢休眠體，來度過不良環境；（5）SP1菌株是以氯苯為碳源，當氯苯消耗盡菌株因缺少碳源而不能繼續生存，故氯苯含量越少，SP1菌株越早停止生長。酶的研究與應用（10廣東文基）72嫩肉粉是以蛋白酶為主要成分的食品添加劑，就酶的作用特點而言，下列使用方法中最佳的是A炒肉的過程中加入B肉炒熟后起鍋前加入C先用沸水溶解后與肉片混勻，炒熟D室溫下與肉片混勻，放置一段時間，炒熟答案：D解析：本題考查酶的使用方法，酶的活性容易受到溫度，酸堿度影響而失活，所以要保持酶的

9、活性，才能使之發揮作用。ABC在反應之前都經高溫處理了，所以酶失去活性，只有D，先讓酶反應，后炒熟，不影響酶的作用發揮。（10江蘇卷）31（6分）酶解法制備原生質體的原理是利用酶溶液對細胞壁成分的降解作用。蝸牛酶液從蝸牛（以植物為食）消化腺中提取；果膠酶、纖維素酶從微生物中提取。為了研究不同酶液的酶解效果，某實驗小組取無菌煙草幼葉，切成相同大小的小片，等量放入6支試管中，試劑用量和實驗結果列于下表。請回答有關問題。 試管編號項目IV蒸餾水（mL）2O1111緩沖液（mL）0210.50.50.5果膠酶液（mL）O0O0.5O0蝸牛酶液（mL）O0OO0.50纖維素酶液（mL）0O0O00.5實

10、驗結果（綠色深淺程度）+（注：“+”越多表示綠色越深，“一”表示顏色無顯著變化）（1）實驗過程中，需要輕搖試管，其目的是 ，使原生質體從葉小片中游離出來，以便觀察懸浮液綠色的深淺。（2）從綠色的深淺可推測：蝸牛酶液酶解效果最好，原因是蝸牛酶液含有 等多種酶。該實驗中 是空白對照組，其設置意義是 。（3）用網篩過濾原生質體到離心管內，離心后收集沉淀物，并用 洗滌。（4）原生質體是否符合要求還需進行檢驗，其檢驗的方法是 。答案：（1）為了使細胞壁與酶充分接觸，提高酶解效果（2）果膠酶和纖維素酶 、 排除無關變量的干擾 （3）等滲溶液（4）低滲漲破法解析：本題考查有關酶的催化效率的實驗，（1）實驗過

11、程中，需要輕搖試管，可以使細胞壁與酶充分接觸，可以提高酶解效果（2）蝸牛以植物為食，所以唾液酶中含有果膠酶和纖維素酶，、沒有添加酶溶液為空白對照組。其目的是排除無關變量的干擾。（3）離心后收集沉淀物，并用等滲溶液清洗，目的是保持細胞正常形態。（4）要用低滲漲破法來檢驗原生質體是否符合要求，若沒有細胞壁則可以漲破，有則不能漲破。生物技術在食品加工及其他方面的應用（10江蘇卷）3下列關于固定化酶和固定化細胞的敘述，正確的是 A固定化細胞技術在多步連續催化反應方面優勢明顯B固定化酶的應用中，要控制好pH、溫度和溶解氧C利用固定化酶降解水體中有機磷農藥，需提供適宜的營養條件 D利用固定化酵母細胞進行發

12、酵，糖類的作用只是作為反應底物答案：A解析：本題考查固定化酶和固定化細胞的相關知識。B選項固定化酶不像普通酶那樣對環境要求那么高，耐受性比較好，和溶解氧沒什么關系；C選項利用固定化酶降解水體中有機磷農藥，純粹的化學反應，不需要提供營養條件，固定化細胞發揮作用需要。D選項利用固定化酵母細胞進行發酵，糖類的作用作為反應底物也為碳源來調節酵母菌的代謝方式。（10江蘇卷）23下列關于DNA和蛋白質提取與分離實驗的敘述，正確的有 A提取細胞中的DNA和蛋白質都需用蒸餾水漲破細胞 B用不同濃度NaCl溶液反復溶解與析出DNA可去除蛋白質C蛋白質提取和分離過程中進行透析可去除溶液中的DNAD蛋白質和DNA都

13、可以用電泳的方法進行分離純化 答案：BD解析：A選項，在提取DNA時，如果是用動物的細胞需要用蒸餾水漲破，如果用植物細胞則不需要，而是用洗滌劑溶解細胞膜；用2 molL的NaCl溶液溶解DNA，然后過濾出蛋白質，再降低NaCl溶液的濃度，析出DNA。DNA和蛋白質樣品都是帶負電荷的，從負極向正極移動，移動的距離都和樣品的分子量有關。C中透析用以出去小分子物質，DNA是大分子物質，D是常規方法比如用十二烷基磺酸鈉，可以根據其分子大小及所帶電荷性質進行分離純化（10山東卷）34.（8分）（生物一生物技術實）人參是一種名貴中藥材，其有效成分主要是人參皂苷。利用細胞培養技術生產人參皂苷的大致流程如下：

14、人參根切塊愈傷組織單細胞或小細胞團細胞培養物培養物干粉人參皂苷懸浮培養細胞分離誘導收集提取請回答：（1）配制誘導愈傷組織的固體培養基，分裝后要進行 。接種前，要對人參根進行 。（2）用于離體培養的根切塊，叫做 。培養幾天后發現少數培養基被污染，若是有顏色的絨毛狀菌落，屬于 污染；若是有光澤的黏液狀菌落，屬于 污染。（3）用少量 酶處理愈傷組織，獲取單細胞或小細胞團，在液體培養基中進行懸浮培養，可有效提高人參皂苷合成量。（4）人參皂苷易溶于水溶性（親水性）有機溶液，從培養物干粉中提取人參皂苷宜選用 方法，操作時應采用 加熱。答案：（1）滅菌 消毒 （2）外植體 真菌（霉菌） 細菌 （3）果膠 （

15、4）萃取 水浴解析：山東理綜生物試題選修一試題歷年來，立足課本，主要考察課本的基礎知識，題目較簡單。今年仍然立足課本，以植物組織培養為材料背景考察了植物組織培養過程中涉及到的培養基及消毒滅菌的相關的知識，及污染后的菌落特征的比較。同時考查了選修一中關于物質的提取和鑒定的專題，跨度較大，考查的知識面較廣。（1）接種前，要對材料進行消毒（不能填滅菌，滅菌時是采用強烈的因素殺菌），配制培養基并分裝后要用滅菌鍋滅菌。（2）比較菌落特征：真菌污染：有顏色的絨毛狀菌落 細菌污染：有光澤的黏液狀菌落（3）利用果膠酶處理愈傷組織可以獲得單個的細胞（4由題干，人參皂苷易溶于親水性有機溶液，故而采用萃取的方法可以

16、從培養物干粉中提取人參皂苷宜。（10上海卷）36.（8分）回答下列有關植物組織培養的問題。（1）用于植物組織培養的植物材料稱為_。（2）組織培養中的細胞，從分化狀態轉變為未分化狀態的過程稱為_。（3）在再分化階段所用的培養基中，含有植物激素X和植物激素Y，逐漸改變培養基中這兩種植物激素的濃度比，未分化細胞群的變化情況如下圖所示，據圖指出兩種激素的不同濃度比與形成芽、根、愈傷組織的關系：1）當植物激素X與植物激素Y的濃度比等于1時，_；2）_；3）_；（4）若植物激素Y是生長素，在植物組織培養中其主要作用是_；則植物激素X的名稱是_。（5）生產上用試管苗保留植物的優良性狀，其原因是_。答案：（1

17、）外植體（2）去分化（脫分化）（3）1）未分化細胞群經分裂形成愈傷組織； 2）當植物激素X與植物激素Y的濃度比大于1時，未分化細胞群分化形成芽； 3）當植物激素X與植物激素Y的濃度比小于1時，未分化細胞群分化形成根。（4）促進細胞的生長（伸長）、分裂和分化 細胞分裂素（5）組織培養形成試管苗的過程屬于無性生殖，后代不發生性狀分離。解析：本題主要考查植物組織培養相關知識。（1）植物組織培養的材料叫外植體；（2）植物組織培養的核心過程是脫分化與再分化，脫分化指由分化狀態變為未分化狀態，再分化指由未分化狀態變為分化狀態；（3）仔細分析所給示意圖，可知植物激素X與植物激素Y濃度比為1時，利于愈傷組織的

18、形成，大于1時利于細胞群分化出芽，小于1時利于細胞群分化出根；（4）生長素在植物組織培養中主要作用是促進細胞生長、分裂和分化，植物組織培養過程中除需要生長素外還必需細胞分裂素，二者共同起作用；（5）植物組織培養是一種無性繁殖技術，利于保持親本的優良性狀。（10海南卷）25（18分）（選修模塊1：生物技術實踐）請回答下列與實驗室提取芳香油有關的問題：（1）植物芳香油的提取可采用的方法有壓榨法、_和_。（2）芳香油溶解性的特點是不溶于_，易溶于_，因此可用_作為提取劑來提取芳香油。（3）橘子果實含有芳香油，通常可用_作為材料提取芳香油，而且提取時往往選用新鮮的材料，理由是_。（4）對材料壓榨后可得到糊狀液體，為除去其中的固體物獲得乳狀液可采用的方法是_。（5）得到的乳狀液加入氯化鈉并放置一段時間后，芳香油將分布于液體的_層，原因是_。加入氯化鈉的作用是_。（6）從乳狀液中分離得到的芳香油中要加入無水硫酸鈉，此劑的作用是_。答案：（1）蒸餾法 萃取法（每空