1、 動物細胞融合過程示意圖動物細胞融合過程示意圖不同DNA的兩個細胞 滅活的病毒滅活的病毒有絲分裂兩個完整的雜交細胞滅活病毒誘導細胞融合的原理：n病毒表面含有的糖蛋白和一些酶能夠與細病毒表面含有的糖蛋白和一些酶能夠與細胞膜上的糖蛋白發生作用，使細胞互相凝胞膜上的糖蛋白發生作用，使細胞互相凝聚，細胞膜上的蛋白質分子和脂質分子重聚，細胞膜上的蛋白質分子和脂質分子重新排布，細胞膜打開，細胞發生融合。新排布，細胞膜打開，細胞發生融合。n滅活是指用物理或化學手段使病毒或細菌滅活是指用物理或化學手段使病毒或細菌失去感染能力，但并不破壞這些病原體的失去感染能力，但并不破壞這些病原體的抗原結構。抗原結構。思考題

2、思考題1.1.植物體細胞雜交時首先應用什么方法去掉細胞壁？植物體細胞雜交時首先應用什么方法去掉細胞壁？ 酶解法，如纖維素酶和果膠酶酶解法，如纖維素酶和果膠酶2.2.動物細胞融合時需要進行去壁處理嗎？為什么？動物細胞融合時需要進行去壁處理嗎？為什么？無需，因為動物細胞無細胞壁無需，因為動物細胞無細胞壁3.3.植物體細胞雜交誘導原生質體融合常用的方法有哪些？植物體細胞雜交誘導原生質體融合常用的方法有哪些？離心、電激等物理方法；離心、電激等物理方法；PEGPEG等化學方法等化學方法4.4.動物細胞融合能利用上述兩類方法嗎？還有其他方法嗎？動物細胞融合能利用上述兩類方法嗎？還有其他方法嗎？能能 還可以

3、利用滅活的病毒進行誘導還可以利用滅活的病毒進行誘導5.5.植物體細胞雜交應先進行原生質體的融合再進行組織培養形植物體細胞雜交應先進行原生質體的融合再進行組織培養形 成完整的雜種個體，動物細胞融合后能形成雜種動物個體嗎？成完整的雜種個體，動物細胞融合后能形成雜種動物個體嗎？不能不能提問？1.1.抗體是由何種細胞產生的？抗體是由何種細胞產生的？ 效應效應B B細胞（漿細胞）細胞（漿細胞）2.2.一個淋巴細胞一個淋巴細胞( (漿細胞漿細胞) )能分泌多種抗體嗎？能分泌多種抗體嗎？ 每一個淋巴細胞只分泌一種特異性抗體每一個淋巴細胞只分泌一種特異性抗體3. 3. 引起機體免疫反應產生的抗體只有一種嗎？引

4、起機體免疫反應產生的抗體只有一種嗎？ 動物在免疫反應過程中，體內產生的特異性抗體種類可多達百萬種以上動物在免疫反應過程中，體內產生的特異性抗體種類可多達百萬種以上4. 4. 簡述獲得抗體的傳統途徑？簡述獲得抗體的傳統途徑？ 抗原抗原 動物體動物體 抗體抗體 抗原不純抗原不純 抗體不純抗體不純二、單克隆抗體二、單克隆抗體刺激刺激漿細胞漿細胞6.6.如何獲得化學性質單一、特異性強的抗體？如何獲得化學性質單一、特異性強的抗體？ 體外培養單個效應淋巴細胞，提取分泌的抗體體外培養單個效應淋巴細胞，提取分泌的抗體7.7.體外培養淋巴細胞能無限增殖嗎體外培養淋巴細胞能無限增殖嗎? ?怎樣解決這個問題？怎樣解

5、決這個問題？5.5.這種方法獲得的抗體有什么缺陷？這種方法獲得的抗體有什么缺陷？ 產量低，純度低，特異性差產量低，純度低，特異性差與骨髓瘤細胞融合與骨髓瘤細胞融合單克隆抗體的制備單克隆抗體的制備抗原抗原小鼠小鼠效應效應B細胞細胞骨髓瘤細胞骨髓瘤細胞雜交瘤細胞雜交瘤細胞細胞融合，細胞融合，篩選篩選細胞培養細胞培養篩選篩選體外培養體外培養體內培養體內培養單克隆抗體單克隆抗體特定的雜交瘤特定的雜交瘤拓展：聚乙二醇處拓展：聚乙二醇處理后，培養液中存理后，培養液中存在哪幾種細胞？在哪幾種細胞？B-B B-瘤瘤 瘤瘤-瘤瘤 未融合的未融合的B細胞細胞 未融合的瘤細胞未融合的瘤細胞補救練習1.1.動物細胞融

6、合技術最重要的用途是動物細胞融合技術最重要的用途是 （ ）A.A.克服遠源雜交不親和克服遠源雜交不親和 B.B.制備單克隆抗體制備單克隆抗體C.C.培育新物種培育新物種 D.D.生產雜種細胞生產雜種細胞B2.2.單克隆抗體是由下列哪種細胞產生的單克隆抗體是由下列哪種細胞產生的 （ ）A.BA.B淋巴細胞淋巴細胞 B.TB.T淋巴細胞淋巴細胞 C.C.骨髓瘤細胞骨髓瘤細胞 D.D.雜交瘤細胞雜交瘤細胞 D3.3.（多選）（多選）19751975年米爾斯坦和柯勒成功地獲得了單克隆抗體。下年米爾斯坦和柯勒成功地獲得了單克隆抗體。下列細胞中與單克隆抗體的制備有關的是列細胞中與單克隆抗體的制備有關的是（

7、 ）A.A.效應效應B B細胞細胞 B BT T淋巴細胞淋巴細胞C.C.骨髓瘤細胞骨髓瘤細胞 D D雜交瘤細胞雜交瘤細胞 A B C DB B體外培養體外培養骨髓瘤細胞骨髓瘤細胞雜交瘤細胞雜交瘤細胞足夠數量的細胞群足夠數量的細胞群注射到注射到小鼠腹腔小鼠腹腔A AC C 4.4.下圖為某同學根據雜交瘤技術的方法，設計的生產破下圖為某同學根據雜交瘤技術的方法，設計的生產破傷風桿菌的實驗方案傷風桿菌的實驗方案制備單克隆抗體制備單克隆抗體不能，沒有將抗原注入小鼠體內，無法獲得產不能，沒有將抗原注入小鼠體內，無法獲得產生單一抗體的生單一抗體的B B淋巴細胞。淋巴細胞。(1).(1).該實驗方案的目的是

8、：該實驗方案的目的是：_(2).(2).該方案能達到預期效果嗎？為什么？該方案能達到預期效果嗎？為什么？(3).A(3).A是從小鼠的脾臟中取得是從小鼠的脾臟中取得_ _ 該細胞能該細胞能夠產生夠產生_ _ 。(4).(4).圖中圖中B B為為_過程，常用過程，常用_作為誘導劑，該細胞繼承作為誘導劑，該細胞繼承_的遺傳特性，既能的遺傳特性，既能_,_,又能又能_。(5).C(5).C過程指細胞培養，該過程包括過程指細胞培養，該過程包括_培養和培養和_培養兩個階段，其中培養兩個階段，其中_代以內的的細胞屬于代以內的的細胞屬于細胞株。細胞株。B B淋巴細胞淋巴細胞抗體抗體細胞融合細胞融合滅活的病毒

9、滅活的病毒雙親細胞雙親細胞分泌抗體分泌抗體無限增殖無限增殖原代原代傳代傳代50501. 1. 單克隆抗體制備過程中，骨髓瘤細胞和單克隆抗體制備過程中，骨髓瘤細胞和B B淋巴細胞淋巴細胞誘導融合后，要用特定培養基篩選出雜交瘤細胞，誘導融合后，要用特定培養基篩選出雜交瘤細胞，在這種培養基上不能存活增殖的細胞是在這種培養基上不能存活增殖的細胞是 （ ）淋巴細胞淋巴細胞 小鼠骨髓瘤細胞小鼠骨髓瘤細胞 B B淋巴細胞自身融合細胞淋巴細胞自身融合細胞小鼠骨髓瘤細胞自身融合細胞小鼠骨髓瘤細胞自身融合細胞 雜交瘤細胞雜交瘤細胞A.A. B. B.C.C. D.D. C C2.2.動物細胞融合和植物原生質融合決定于動物細胞融合和植物原生質融合決定于 ( )( )A.A.細胞膜的流動性細胞膜的流動性 B B細胞膜的選擇透過性細胞膜的選擇透過性C.C.細胞質的流動性細胞質的流動性D D細胞質酶的活性細胞質酶的活性 A3.“3.“生物導彈生物導彈”是指是指 （ ）A.A.單克隆抗體單克隆抗體 B.B.雜交瘤細胞雜