1、O12345678AB第六章 黃酮類化合物黃酮類化合物FlavonoidsOO12345678OO12345678本 章 內 容一、定義二、分類三、理化性質與顏色反應四、提取與分離五、黃酮類化合物波譜解析六、生物活性 一、定義 色原酮 2-苯基色原酮 （2-phenylchromone)OO12345678OO12345678O12345678C6 - C3 - C6AB本 章 內 容一、定義二、分類三、理化性質與顏色反應四、提取與分離五、黃酮類化合物波譜解析六、生物活性二、分類 黃酮類 黃酮醇類 二氫黃酮類 二氫黃酮醇類OOOOOHOOOOOH 二、分類 異黃酮類 二氫異黃酮類 查耳酮類 花

2、色素類OOOOOHOOOH+ 二、分類 黃烷-3-醇類 二黃烷-3,4-二醇類 二氫查耳酮類 橙酮類OOHOOHOHOHOOOCH 二、分類高異黃酮類 雙苯吡酮類（酮類）OOOO本 章 內 容一、定義二、分類三、理化性質與顏色反應四、提取與分離五、黃酮類化合物波譜解析六、生物活性三、理化性質與顏色反應（一）性狀（二）熒光（三）溶解性（四）酸堿性（五）顯色反應 （一）性狀多為晶性固體，少數為無定形粉末。顏色：與分子中是否存在交叉共軛體系及助色 團的類型、數目及取代位置有關。黃酮、黃酮醇及其苷類灰黃黃色查耳酮黃橙黃色二氫黃酮及醇、異黃酮不顯色或微黃色 三、理化性質與顏色反應（一）性狀（一）性狀（二

3、）熒光（三）溶解性（四）酸堿性（五）顯色反應 （二）熒光 C3-OH在紫外光下有強烈熒光 （亮黃色或亮綠色） C3-OH成苷后熒光減弱。 三、理化性質與顏色反應（一）性狀（一）性狀（二）熒光（二）熒光（三）溶解性（四）酸堿性（五）顯色反應 （三）溶解性黃酮苷元黃酮苷元難溶或不溶于H2O 易溶MeOH、EtOH等溶劑 易溶稀堿液 黃酮、黃酮醇、查耳酮難溶于水 （均屬平面型分子） 二氫黃酮及醇對水有一定溶解度 （屬非平面分子）黃酮苷黃酮苷易溶于水、MeOH、EtOH等溶劑 （苷元引入OH多，則水中溶解度大） 三、理化性質與顏色反應（一）性狀（一）性狀（二）熒光（二）熒光（三）溶解性（三）溶解性（四

4、）酸堿性（五）顯色反應 （四）酸堿性 分子中多Ar-OH顯酸性 （可溶于堿性水溶液、吡啶等溶劑中） 由于Ar-OH數目、位置不同，酸性強弱也不同以黃酮為例： 7,4-二二-OH 7或或4-OH 一般酚一般酚-OH 5-OH（溶NaHCO3）（溶Na2CO3）（溶不同濃度NaOH） （可用于提取、分離及鑒定工作） （四）酸堿性 -吡喃酮環上1-位氧原子，因有未共用電子對顯微弱的堿性可與強無機酸（H2SO4、HCl）等生成鹽。OOOOHClClHOH2+-所生成的鹽極不穩定，加水后即可分解。黃酮鹽（呈不同的 可用于鑒別）C-H2SO4顏色 三、理化性質與顏色反應（一）性狀（一）性狀（二）熒光（二）

5、熒光（三）溶解性（三）溶解性（四）酸堿性（四）酸堿性（五）顯色反應 （五）顯色反應 1.還原反應 （1）鹽酸-鎂粉反應（HCl-Mg） （2）四氫硼鈉反應（NaBH4） 2.金屬鹽類試劑的絡合反應 （1）鋁鹽 （4）鎂鹽 （2）鉛鹽 （5）氯化鍶 （3）鋯鹽 （6）三氯化鐵反應 3.硼酸顯色反應 4.堿性試劑顯色反應 （五）顯色反應 1.還原反應 (1)鹽酸鎂粉反應（HCl-Mg）樣品/EtOHMg粉HCl+濃橙紅紫紫紅紅色色查耳酮橙酮兒茶素大多數異黃酮HCl-Mg不不 呈呈 色色 （五）顯色反應 1.還原反應 （2）四氫硼鈉反應（NaBH4）二氫黃酮類NaBH4+紅紅紫紫色色其它黃酮類不呈色

6、 （五）顯色反應 1.還原反應 （1）鹽酸-鎂粉反應（HCl-Mg） （2）四氫硼鈉反應（NaBH4） 2.金屬鹽類試劑的絡合反應金屬鹽類試劑的絡合反應 （1）鋁鹽）鋁鹽 （4）鎂鹽）鎂鹽 （2）鉛鹽）鉛鹽 （5）氯化鍶）氯化鍶 （3）鋯鹽）鋯鹽 （6）三氯化鐵反應）三氯化鐵反應 3.硼酸顯色反應硼酸顯色反應 4.堿性試劑顯色反應堿性試劑顯色反應OOOHOOOHOHOH 常可與金屬類試劑反應，生成有色絡合物。 （1）鋁鹽 （2）鉛鹽 （3）鋯鹽 （4）鎂鹽 （5）氯化鍶 （6）三氯化鐵反應黃酮類化合物分子結構中多具有下列結構： （五）顯色反應 2.金屬鹽類試劑的絡合（1）鋁鹽）鋁鹽 可用于定性

7、及定量分析 （五）顯色反應 2.金屬鹽類試劑的絡合樣品+ 1% AlCl3或硝酸鋁絡絡合合物物（黃色） max 415 nm（有熒光）樣品+ 1 1% % 醋醋酸酸鉛鉛或堿式醋酸鉛/H2O黃黃 紅紅色色 沉沉淀淀（2）鉛鹽）鉛鹽（3）鋯鹽）鋯鹽 （ZrOCl2） （五）顯色反應 2.金屬鹽類試劑的絡合OOOHOOOHOOOZrClOOOZrClOOH2OOH22%ZrOCl2黃綠色絡合物2%枸櫞酸2%枸櫞酸不變不變褪色褪色（4）鎂鹽）鎂鹽 （五）顯色反應 2.金屬鹽類試劑的絡合樣樣品品+醋醋酸酸鎂鎂/ /M Me eO OH H呈呈色色可可滴滴在在濾濾紙紙上上二氫黃酮二氫黃酮二氫黃酮醇二氫黃酮

8、醇天藍色熒光天藍色熒光C5-OH色澤更明顯色澤更明顯黃酮黃酮黃酮醇黃酮醇異黃酮異黃酮黃 橙黃 褐色褐色（5）氯化鍶（）氯化鍶（SrCl2） （五）顯色反應 2.金屬鹽類試劑的絡合（鄰二酚羥基）+SrC12氨性 MeOH 液綠色綠色樣品棕色棕色黑色黑色沉淀沉淀樣品+顯色顯色Ar-OHFeCl3H2O或醇液（6）三氯化鐵反應）三氯化鐵反應 （五）顯色反應 1.還原反應 （1）鹽酸-鎂粉反應（HCl-Mg） （2）四氫硼鈉反應（NaBH4） 2.金屬鹽類試劑的絡合反應 （1）鋁鹽 （4）鎂鹽 （2）鉛鹽 （5）氯化鍶 （3）鋯鹽 （6）三氯化鐵反應 3.硼酸顯色反應硼酸顯色反應 4.堿性試劑顯色反應

9、堿性試劑顯色反應OOOHOHO+硼 酸硼 酸H+亮黃色亮黃色 （五）顯色反應 3.硼酸顯色反應 （五）顯色反應 1.還原反應 （1）鹽酸-鎂粉反應（HCl-Mg） （2）四氫硼鈉反應（NaBH4） 2.金屬鹽類試劑的絡合反應 （1）鋁鹽 （4）鎂鹽 （2）鉛鹽 （5）氯化鍶 （3）鋯鹽 （6）三氯化鐵反應 3.硼酸顯色反應 4.堿性試劑顯色反應堿性試劑顯色反應 （五）顯色反應 4.堿性試劑顯色反應OOOHOHOHOMeOHOOHOHOHOMeOH-H+橙皮素橙皮素開環橙皮橙皮（二氫黃酮）（二氫黃酮）查爾酮查爾酮OH-H+開環二氫黃酮類二氫黃酮類查爾酮類查爾酮類環合環合（ 橙橙 黃黃 色色 ）

10、三、理化性質與顏色反應（一）性狀（二）熒光（三）溶解性（四）酸堿性（五）顯色反應本 章 內 容一、定義二、分類三、理化性質與顏色反應四、提取與分離五、黃酮類化合物波譜解析六、生物活性 四、黃酮類化合物的提取分離 根據化合物的性質，采取哪些提取方法呢？ 化合物的極性？ 方法溶劑萃取 化合物的酸性？ 方法堿提酸沉 化合物的解離性？ 方法離子交換 四、黃酮類化合物的提取分離（一）提取 1.溶劑萃取法 2.堿提酸沉法 3.離子交換法 4.炭粉吸附法 （一）提取 1.溶劑萃取法藥 材 EtOH提取藥 渣 乙醇液回收乙醇浸 膏回收液 （一）提取 1.溶劑萃取法浸 膏加水水溶液分別用不同極性溶劑萃取石油醚、

11、氯仿、石油醚 氯 仿 乙酸乙酯正丁醇水（極性小）（苷元等） （極性大的苷元）（黃酮苷類）（多糖、蛋白質等）（分步萃取）乙酸乙酯、正丁醇 四、黃酮類化合物的提取分離（一）提取 1.溶劑萃取法 2.堿提酸沉法 3.離子交換法 4.炭粉吸附法 （一）提取 2.堿提取酸沉淀法注意：加入的酸、堿度應盡可能低。例如：蘆丁的提取樣品樣品OH-提取液提取液過濾過濾H+沉淀沉淀（黃酮類）（黃酮類）槐花米H2O石灰乳調 pH = 89藥渣濾液酸調pH = 34沉淀濾液 四、黃酮類化合物的提取分離（一）提取 1.溶劑萃取法 2.堿提酸沉法 3.離子交換法 4.炭粉吸附法 （一）提取 3.離子交換樹脂法注意：應用此法

12、主要目的是除雜質。黃酮H2O洗除水溶性雜質液洗出黃酮類化合物水水甲醇甲醇 四、黃酮類化合物的提取分離（一）提取 1.溶劑萃取法 2.堿提酸沉法 3.離子交換法 4.炭粉吸附法 （一）提取 4.炭粉吸附法 主要適用于苷類成分的精制。藥材甲醇提取物分次加入活性炭，攪拌，靜置檢查上清液有無黃酮反應，過濾濾液吸苷炭末依次用沸甲醇、沸水、7%酚/水、15%酚/醇洗脫沸甲醇沸水 7%酚/水 15%酚/醇濃縮，加乙醚乙醚（除酚）水（黃酮苷） 四、黃酮類化合物的提取分離 （一）提取 1.溶劑萃取法 2.堿提酸沉法 3.離子交換法 4.炭粉吸附法 （二）分離 （二）分離 根據化合物的性質，采取哪些分離方法呢？

13、化合物的極性大小？ 方法吸附、分配色譜 化合物的酸性強弱？ 方法pH梯度萃取 化合物的分子大小？ 方法葡聚糖凝膠 分子中具有特殊結構？ （如：鄰二酚羥基） 方法金屬鹽絡合 四、黃酮類化合物的提取分離 （二）分離 1.柱色譜法 （硅膠、氧化鋁、纖維粉、 聚酰胺、葡聚糖凝膠） 2.pH梯度萃取法 3.鉛鹽沉淀法 （二）分離 1.柱色譜法（1）硅膠柱色譜 出柱先后順序： 若母核結構相同，而-OH取代數目不同，則-OH多的后出柱后出柱 易形成分子內氫鍵的-OH，其極性變小先出柱先出柱如：鄰二-OH 間二-OH （Rf值） 一般出柱順序：苷元苷元 單糖苷單糖苷 雙糖苷雙糖苷 多糖苷多糖苷 （二）分離 1

14、.柱色譜法（2）氧化鋁柱色譜 通常情況下，要求在分子的結構中 無酸性基團，或Ar-OH被甲基化。 （3）纖維粉柱色譜 其分離原理同紙層色譜。 （二）分離 1.柱色譜法（4）聚酰胺柱色譜 聚酰胺（Polyamide）是由酰胺聚合而成的一類高分子物質。商品名綿綸、尼龍。 原理：氫鍵吸附學說 聚酰胺分子內有很多酰胺鍵，可與酚類、酸類、醌類、硝基化合物等形成氫鍵，因而對這些物質產生了吸附作用。 （二）分離 1.柱色譜法（4）聚酰胺柱色譜聚酰胺吸附物質的原理如下圖：NNOOHHNNOOHHOHOO固定相固定相移動相移動相 （二）分離 1.柱色譜法（4）聚酰胺柱色譜 吸附強弱取決于 化合物與聚酰胺形成氫鍵

15、的能力。 聚酰胺對化合物的吸附力在水中有下列規律： 形成氫鍵的基團越多，則吸附力越強；OHOHOHOHOHOH （二）分離 1.柱色譜法（4）聚酰胺柱色譜 易形成分子內氫鍵，則吸附力減弱；OHOHOHOHOHOHCOOHOOHOH （二）分離 1.柱色譜法（4）聚酰胺柱色譜 芳香核、共軛雙鍵多者吸附力大；OHOH （二）分離 1.柱色譜法（4）聚酰胺柱色譜 以上介紹了聚酰胺對化合物吸附力的影響因素。 即： 形成氫鍵的基團越多，則吸附力越強； （Ar-OH、-COOH、醌基、硝基等） 易形成分子內氫鍵，則吸附力減弱； （鄰二-OH、3-OH 4-酮基、5-OH 4-酮基等） 芳香核、共軛雙鍵多者

16、吸附力大； （二）分離 1.柱色譜法（4）聚酰胺柱色譜 聚酰胺柱色譜在分離黃酮類化合物時 有下述規律： （二）分離 1.柱色譜法（4）聚酰胺柱色譜 不同類型黃酮化合物的出柱先后順序： 異黃酮 二氫黃酮醇 黃酮 黃酮醇 OOOHOHOHOHOOOHOHOHOOOHOHOHOHOOOHOHOH （二）分離 1.柱色譜法（4）聚酰胺柱色譜 苷元相同，出柱先后順序： 叁糖苷 雙糖苷 單糖苷 苷元 查爾酮往往比相應的黃酮類化合物難于洗脫 。OHOOHOHOHOOOHOHOH查爾酮黃酮 （二）分離 1.柱色譜法（4）聚酰胺柱色譜 在聚酰胺柱上，常用的洗脫溶劑如下： 水 甲醇 丙酮 氫氧化鈉/H2O 甲酰胺

17、 二甲基甲酰胺 尿素/H2O （洗脫能力：弱 強） （二）分離 1.柱色譜法（4）聚酰胺柱色譜 聚酰胺色譜的應用： 黃酮類、酚類、生物堿類、萜類、甾體、糖類等黃酮類、酚類可逆聚酰胺吸附鞣質不可逆聚酰胺吸附利用此性質，可除提取物中的鞣質 （二）分離 1.柱色譜法（5）葡聚糖凝膠柱色譜葡聚糖凝膠（Sephadex gel） 用于黃酮類化合物的分離，主要有兩種型號： Sephadex-G型Sephadex LH-20型（羥丙基葡聚糖凝膠） （二）分離 1.柱色譜法（5）葡聚糖凝膠柱色譜 作用機理： 分離游離黃酮時吸附作用 （取決于游離Ar-OH的數目， Ar-OH少則先出柱） 分離黃酮苷是分子篩起主

18、導作用 （分子量大的先出柱） （二）分離 1.柱色譜法（5）葡聚糖凝膠柱色譜 常用洗脫溶劑： 堿性水溶液（0.1mol/L NH4OH） （含鹽水溶液0.5mol/L NaCl等） 醇及含水醇 其它溶劑 含水丙酮、甲醇-氯仿等。 四、黃酮類化合物的提取分離 （二）分離 1.柱色譜法 （硅膠、氧化鋁、纖維粉、 聚酰胺、葡聚糖凝膠） 2.pH梯度萃取法 3.鉛鹽沉淀法 （二）分離 2.pH梯度萃取法 適用于酸性強弱不同的黃酮苷元的分離。混合物/乙醚5%NaHCO35%NaHCO3萃取乙醚酸化回收EtoAcEtoAc5%NaCO35%NaCO3乙醚0.2%NaOH堿液乙醚（一般Ar-OH）4%NaO

19、H堿液乙醚（ 3，5-OH）（無-OH）（4-7二-OH）（ 4、 7-OH） 四、黃酮類化合物的提取分離 （二）分離 1.柱色譜法 （硅膠、氧化鋁、纖維粉、 聚酰胺、葡聚糖凝膠） 2.pH梯度萃取法 3.鉛鹽沉淀法 （二）分離 3.鉛鹽沉淀法 根據分子中某些特定官能團進行分離。混合物/乙醇Pb(Ac)2水溶液乙醇沉淀 （具鄰二-OH）H2S 過濾通入硫化鉛沉淀或丙酮溶液溶30%乙醇中中性性濾液回收鄰二酚羥基堿堿式式Pb(OH)Ac濾液沉淀脫鉛（單-OH 或C3、C5-OH）（不具鄰二-OH） 四、黃酮類化合物的提取分離（一）提取 1.溶劑萃取法 2.堿提酸沉法 3.離子交換法 4.炭粉吸附法

20、（二）分離 1.柱色譜法 2.pH梯度萃取法 3.鉛鹽沉淀法本 章 內 容一、定義二、分類三、理化性質與顏色反應四、提取與分離五、黃酮類化合物波譜解析六、生物活性 五、黃酮類化合物波譜解析 在黃酮類化合物結構分析中的應用 主要有： （一）紫外光譜（UV） （二）核磁共振1H-NMR （三）核磁共振13C-NMR （四）質譜（MS）OOROOR 五、黃酮類化合物波譜解析（一）紫外光譜（UV） 多數黃酮類化合物在紫外（UV）譜中主要由兩個吸收帶組成。 苯甲酰基系統 桂皮酰基系統 ( benzoyl) (cinnamoyl) Band II Band I 220280 nm 300400 nmOOR

21、 五、黃酮類化合物波譜解析（一）紫外光譜（UV） 黃酮類化合物結構中的交叉共軛交叉共軛體系苯甲酰基系統 桂皮酰基系統 ( benzoyl) (cinnamoyl) Band II Band I 220280 nm 300400 nm 五、黃酮類化合物波譜解析（一）紫外光譜（UV）黃酮類化合物在MeOH溶液中的 黃酮及黃酮醇類 查爾酮及橙酮類 異黃酮、二氫黃酮及二氫黃酮醇類 五、黃酮類化合物波譜解析（一）紫外光譜（UV） 黃酮及黃酮醇類木犀草素（黃酮類）槲皮素（黃酮醇類）OOR74引入供電基(-OH、-OMe)AB吸收帶向紅位移BandIBandII 五、黃酮類化合物波譜解析（一）紫外光譜（UV

22、） 黃酮類在MeOH中B環氧代對Band I的影響OOOHOHOHOOOHOHOHOHOOOHOHOHOHOH3,5,7-3,5,7,4-3,5,7,3,4-三羥基黃酮四羥基黃酮五羥基黃酮高良姜素山奈酚槲皮素359367370紅移紅移紅移紅移 五、黃酮類化合物波譜解析（一）紫外光譜（UV） 黃酮類在MeOH中A環氧代對Band II的影響OOOHOOOHOHOOOHOHOH7-5,7-5,6,7-羥基黃酮二羥基黃酮三羥基黃酮252262274紅移紅移 五、黃酮類化合物波譜解析（一）紫外光譜（UV） 利用在MeOH中的UV區別黃酮和黃酮醇類Band I黃酮黃酮醇（3-O被取代）黃酮醇（3-OH游

23、離）328357304350352385 五、黃酮類化合物波譜解析（一）紫外光譜（UV）黃酮類化合物在MeOH溶液中的 黃酮及黃酮醇類 查爾酮及橙酮類 異黃酮、二氫黃酮及二氫黃酮醇類 五、黃酮類化合物波譜解析（一）紫外光譜（UV） 查耳酮及橙酮類 波譜特征： 帶 I 強主峰 帶 II 弱次強峰2,3,4-三羥基查耳酮3,4-二羥基橙酮O2345623456查耳酮OCH27O1234561234567橙酮 五、黃酮類化合物波譜解析（一）紫外光譜（UV） 查耳酮類 Band II220 270 nm Band I 340 390 nm 有時分裂為 Ia（340390） Ib（300320） 環上引

24、入氧取代基（同黃酮及黃酮醇類） 使帶 I 紅移（ 2-OH影響最大） 2-OH甲基化或苷化使帶I紫移1520nm 五、黃酮類化合物波譜解析（一）紫外光譜（UV） 橙酮類 常出現34個吸收峰 主峰（Band I） 370 430 nm天然來源的橙酮 388 413 nm五、黃酮類化合物波譜解析（一）紫外光譜（UV）黃酮類化合物在MeOH溶液中的 黃酮及黃酮醇類 查爾酮及橙酮類 異黃酮、二氫黃酮及二氫黃酮醇類 五、黃酮類化合物波譜解析（一）紫外光譜（UV） 異黃酮、二氫黃酮及二氫黃酮醇7-羥基異黃酮4,7-二羥基二氫黃酮 OOOOOOOH 五、黃酮類化合物波譜解析（一）紫外光譜（UV） 異黃酮、二

25、氫黃酮及二氫黃酮醇異黃酮、二氫黃酮及二氫黃酮醇共同特點： 帶 I 弱B環不能與吡喃酮環上羰基共軛 帶 II 強主峰根據主峰位置區別： 異黃酮245270 nm 二氫黃酮、二氫黃酮醇270295 nm五、黃酮類化合物波譜解析（一）紫外光譜（UV）黃酮類化合物在黃酮類化合物在MeOH溶液中的溶液中的 黃酮及黃酮醇類黃酮及黃酮醇類 查爾酮及橙酮類查爾酮及橙酮類 異黃酮、二氫黃酮及二氫黃酮醇類異黃酮、二氫黃酮及二氫黃酮醇類 五、黃酮類化合物波譜解析（一）紫外光譜（UV） 加入診斷試劑后引起的位移及其在結構測定中的意義 下面以黃酮及黃酮醇為例進行說明 NaOMe NaOAc NaOAc/H3BO3 Al

26、Cl3、AlCl3/HCl五、黃酮類化合物波譜解析（一）紫外光譜（UV） NaOMe NaOMe是個強堿，在一定程度上可使黃酮及黃酮醇上所有的Ar-OH解離。 因此，將使Band I及II向紅位移。1. Band I + 4060 nm 強度不不降有4-OH + 5060 nm 強度下下降無4-OH 有 3-OH 五、黃酮類化合物波譜解析（一）紫外光譜（UV） NaOMe 2. 立即測試光譜 = 5分鐘后測試光譜 （即：Band I 和 Band II 吸收譜不隨時間延長而衰退） 說明無 3,4-二-OH結構（free） （即無對堿敏感的取代圖式）3. 立即測試光譜 5分鐘后測試光譜 說明可能

27、存在 3,4-二-OH結構（free）注：對堿敏感的取代圖式 3,4- 3,3,4- 5,6,7- 5,7,8- 3,4,5- 等 五、黃酮類化合物波譜解析（一）紫外光譜（UV） NaOMe NaOAc NaOAc/H3BO3 AlCl3、AlCl3/HCl五、黃酮類化合物波譜解析（一）紫外光譜（UV） NaOAc NaOAc的堿性 H-6109876543210 ppmTMSH-8 H-6 五、黃酮類化合物波譜解析（二） 1H-NMRH-5 ppm 8.0 d, J= 9.0 Hz （C4羰基負屏蔽效應，使其在較低場； 與H-6鄰偶二重峰）H-6 ppm 6.77.1 dd, JH-5=9.

28、0 Hz JH-8=2.5 Hz （與H-5鄰偶；與H-8間偶）H-8 ppm 同H-6 d, J=2.5 Hz1. A環質子 (2) 7-羥基黃酮類OOHO685 五、黃酮類化合物波譜解析（二） 1H-NMR1. A環質子 (2) 7-羥基黃酮類OOHHOHH6857.90 8.207.70 7.906.70 7.006.30 6.406.70 7.106.40 6.50dddddddd黃酮、黃酮醇、異黃酮黃酮、黃酮醇、異黃酮二氫黃酮、二氫黃酮醇二氫黃酮、二氫黃酮醇 五、黃酮類化合物波譜解析（二） 1H-NMR 1. A環質子 2. B環質子 3. C環質子 4. 糖端基碳上的質子 5. 乙

29、酰氧基上的質子 6. 甲氧基上的質子 五、黃酮類化合物波譜解析（二） 1H-NMR2. B環質子 (1) 4-氧取代黃酮類化合物ORHHHH2356B7.10 8.106.50 7.10環對其的負屏蔽效應4-OR取代基的屏蔽作用COR2356BH-2 H-6H-3 H-5構成 AABB 系統AB偶合系統J 8.5 Hz 五、黃酮類化合物波譜解析（二） 1H-NMR2. B環質子 (2) 3,4-二氧取代黃酮及黃酮醇類化合物OROR2 5 6 H-5 H-2H-6dd,d,d,J = 8.5 Hz6.70 7.10J = 2.5 HzJ = 8.5 Hz7.20 7.90J = 2.5 Hz7.

30、20 7.90 五、黃酮類化合物波譜解析（二） 1H-NMR 依據H-2及H-6的化學位移，可以區別黃酮及黃酮醇的3,4-位上是 3-OH, 4-OMe 3-OMe, 4-OH。2. B環質子 (2) 3,4-二氧取代黃酮及黃酮醇類化合物二氧取代黃酮及黃酮醇類化合物 五、黃酮類化合物波譜解析（二） 1H-NMR2. B環質子 (2) 3,4-二氧取代黃酮及黃酮醇類化合物OOOHOHHHOOOHOHHHOHOOOHHHOHOMeOOOHOHHHO(-OH)(-OMe)7.30 7.50dd7.20 7.30 d(-OH)(-OMe)7.60 7.90dd7.50 7.70 d移低場移低場7.40

31、 7.60dd7.60 7.80 d移低場移低場7.30 7.70dd7.20 7.50 d糖 五、黃酮類化合物波譜解析（二） 1H-NMR2. B環質子 (3) 3,4-二氧取代異黃酮、二氫黃酮及二氫黃酮醇OOOROROOOROROOOROROHH-2、H-5及 H-6復雜的多重峰（多為兩組峰）6.70 7.10 五、黃酮類化合物波譜解析（二） 1H-NMRB環有3,4,5-三-OH時H-2及H-6 （2H，S，6.50 7.50）3-OH或5-OH甲基化或苷化 H-2及H-6 （2H，d，J 2.0 Hz）2. B環質子 (4) 3,4,5-三氧取代黃酮類化合物 五、黃酮類化合物波譜解析（

32、二） 1H-NMR 1. A環質子 2. B環質子 3. C環質子 4. 糖端基碳上的質子 5. 乙酰氧基上的質子 6. 甲氧基上的質子 五、黃酮類化合物波譜解析（二） 1H-NMR孤立芳氫的單峰信號易與之相混孤立芳氫的單峰信號易與之相混注意注意3. C環質子 (1) 黃酮類OOH6.30 ( s )3（尖銳的單峰）OOHORHROOROOHHROROOR 五、黃酮類化合物波譜解析（二） 1H-NMR3. C環質子 (2) 異黃酮類OOH7.60 7.80 (s) 五、黃酮類化合物波譜解析（二） 1H-NMR3. C環質子 (3) 二氫黃酮及二氫黃酮醇OOHHHH3H-2H-3J =17.0

33、Hz偕偶Jtrans= 11.0 HzJcix= 5.0 HzH-3J =17.0 Hz偕偶Jtrans= 11.0 HzJcix= 5.0 Hzdd,5.202.80dd,OOOHHHH3H-2H-3Jtrans= 11.0 HzJtrans= 11.0 Hz d,4.904.30d, 五、黃酮類化合物波譜解析（二） 1H-NMR3. C環質子 (4) 查耳酮及橙酮類OHH2345623456OCHO1234561234567H H- -H H- -d, J = 17.0 Hz6.70 7.407.30 7.70芐氫S,6.50 6.70 五、黃酮類化合物波譜解析（二） 1H-NMR 1.

34、A環質子 2. B環質子 3. C環質子 4. 糖端基碳上的質子 5. 乙酰氧基上的質子 6. 甲氧基上的質子 五、黃酮類化合物波譜解析（二） 1H-NMR黃酮苷類化合物上糖的質子信號（端基質子） 黃酮醇-3-O-葡萄糖苷 5.70 6.00 黃酮醇-3-O-鼠李糖苷 5.00 5.10 黃酮類 -7-O-葡萄糖苷 4.80 5.20 黃酮類-4-O-葡萄糖苷 黃酮類 -5-O-葡萄糖苷 黃酮類-6 及 8-C-糖苷4. 糖端基碳上的質子 五、黃酮類化合物波譜解析（二） 1H-NMR 1. A環質子 2. B環質子 3. C環質子 4. 糖端基碳上的質子 5. 乙酰氧基上的質子 6. 甲氧基上

35、的質子 五、黃酮類化合物波譜解析（二） 1H-NMR 有時將黃酮類化合物制備成乙酰化物后進行結構測定 乙酰氧基上的質子信號 1.65 2.10 根據質子數目判斷苷中結合糖的數目糖的數目 乙酰氧基上的質子信號 2.30 2.50 根據質子數目判斷 苷元上Ar-OH數目5. 乙酰氧基上的質子 五、黃酮類化合物波譜解析（二） 1H-NMR 1. A環質子 2. B環質子 3. C環質子 4. 糖端基碳上的質子 5. 乙酰氧基上的質子 6. 甲氧基上的質子 五、黃酮類化合物波譜解析（二） 1H-NMR 甲氧基質子信號一般在：ppm 3.50 4.10 可通過NOE核磁共振技術及二維技術確定基位置6.

36、甲氧基上的質子109876543210 ppmTMSH-8 H-6(5,7-二-OH)H-5H-8 H-6(7-OH)H-2,6H-3,5乙酰氧基上的質子脂肪族芳香族苷中糖端基質子甲氧基質子H-3黃酮異黃酮H-2 五、黃酮類化合物波譜解析 在黃酮類化合物結構分析中的應用 主要有： （一）紫外光譜（UV） （二）核磁共振1H-NMR （三）核磁共振13C-NMR （四）質譜（MS） 五、黃酮類化合物波譜解析（三） 13C-NMR1. 骨架類型的判斷2. 取代圖式的確定方法3. 氧糖苷中的連接位置4. 雙糖苷及低聚糖苷中苷鍵及 糖的連接順序13C-NMR在黃酮類化合物結構分析中的應用 五、黃酮類化

37、合物波譜解析（三） 13C-NMR 1. 骨架類型的判斷 根據中央三個碳信號的位置、裂分等，推斷其骨架類型。O200180160140120100806040黃酮類黃酮類異黃酮類異黃酮類黃酮醇類黃酮醇類橙酮類橙酮類查耳酮類查耳酮類二氫黃酮類二氫黃酮類二氫黃酮醇類二氫黃酮醇類C-2C-3sssssssdsssdddsdsddtd( C- )( C- ) 五、黃酮類化合物波譜解析（三） 13C-NMR1. 骨架類型的判斷2. 取代圖式的確定方法3. 氧糖苷中的連接位置4. 雙糖苷及低聚糖苷中苷鍵及 糖的連接順序13C-NMR在黃酮類化合物結構分析中的應用 五、黃酮類化合物波譜解析（三） 13C-N

38、MR黃酮（黃酮（flavone） 2. 取代圖式的確定方法 根據芳香碳的信號特征來確定取代圖式。OO126.3129.0131.6163.2131.8107.6178.4124.0125.7125.2133.7118.1156.3 五、黃酮類化合物波譜解析（三） 13C-NMR即：即： 2. 取代圖式的確定方法 A環上引入取代基影響A環位移效應。 B環上引入取代基位移效應影響到B環。 C-5引入-OH影響A環、C4、C2、C3OOOHRR 五、黃酮類化合物波譜解析（三） 13C-NMR 2. 取代圖式的確定方法取代圖式的確定方法 如： B環上引入取代基時的位移效應影響XZiZoZmZp-OH-

39、OCH3+ 26.6- 12.8+ 1.6- 7.1+ 31.4- 14.4+ 1.0- 7.8 五、黃酮類化合物波譜解析（三） 13C-NMR 2. 取代圖式的確定方法取代圖式的確定方法 5,7-二羥基黃酮中C-6、C-8信號特征： 通常5,7-二-OH化合物的C-6、C-8 90.0 100.0 在二氫黃酮中 C6 - C8 = 0.9 ppm 黃酮及黃酮醇中 C6 - C8 = 4.8 ppm如何判斷如何判斷C-6、C-8有無烷基或芳香基取代？有無烷基或芳香基取代？ 判斷C-6、C-8有無烷基或芳香基取代，可通過觀察化學位移值是否發生位移而確定。 五、黃酮類化合物波譜解析（三） 13C-

40、NMR1. 骨架類型的判斷2. 取代圖式的確定方法3. 氧糖苷中的連接位置4. 雙糖苷及低聚糖苷中苷鍵及 糖的連接順序13C-NMR在黃酮類化合物結構分析中的應用 五、黃酮類化合物波譜解析（三） 13C-NMR 3. 氧糖苷中的連接位置 （1）糖的苷化位移及端基碳的信號 酚性苷中，糖上端基碳的苷化位移約為: （2）苷元的苷化位移 通常，苷元糖苷化后直接相連碳原子向高場位移，其鄰位及對位碳原子則向低場位移，且對位碳原子的位移幅度大。 五、黃酮類化合物波譜解析（三） 13C-NMR 3. 氧糖苷中的連接位置氧糖苷中的連接位置 如：黃酮類化合物的苷化位移情況OOOOOOOOO+ 0.8- 1.4+

41、1.1+ 1.7+ 9.2- 2.1+1.5+ 0.4+ 1.0+ 1.1+ 0.7+ 1.5- 0.8- 0.3- 0.4+ 0.1+ 1.0+ 3.7+ 0.4+ 2.0- 1.2+ 1.47-O-糖3-O-糖4-O-葡萄糖 五、黃酮類化合物波譜解析（三） 13C-NMR1. 骨架類型的判斷骨架類型的判斷2. 取代圖式的確定方法取代圖式的確定方法3. 氧糖苷中的連接位置氧糖苷中的連接位置4. 雙糖苷及低聚糖苷中苷鍵及雙糖苷及低聚糖苷中苷鍵及 糖的連接順序糖的連接順序13C-NMR在黃酮類化合物結構分析中的應用在黃酮類化合物結構分析中的應用 五、黃酮類化合物波譜解析（三） 13C-NMR4.

42、 雙糖苷及低聚糖苷中苷鍵及糖的連接順序 （1）根據文獻報道的單糖及其甲基苷的數據 進行比較解析。 （2）依據苷化位移規律進行研判。如：蘆丁OMeOOOHOHOHOOHOO+ 5.8 ppm- 1.4 ppm 五、黃酮類化合物波譜解析（三） 13C-NMR1. 骨架類型的判斷2. 取代圖式的確定方法3. 氧糖苷中的連接位置4. 雙糖苷及低聚糖苷中苷鍵及 糖的連接順序13C-NMR在黃酮類化合物結構分析中的應用 五、黃酮類化合物波譜解析 在黃酮類化合物結構分析中的應用 主要有： （一）紫外光譜（UV） （二）核磁共振1H-NMR （三）核磁共振13C-NMR （四）質譜（MS） 五、黃酮類化合物波

43、譜解析（四） MS 大多黃酮苷元在電子轟擊質譜（EI-MS）中，可獲得分子離子峰（基峰）。（除極性強、難氣化及對熱不穩定的化合物 可制備成甲基化或三甲基硅烷化衍生物） 現在可應用FD-MS（場解析電離）、FAB-MS（快速原子轟擊電離）、ESI-MS（電噴霧電離）等軟電離質譜技術，可避免制備衍生物。質譜在黃酮類結構測定中的應用 五、黃酮類化合物波譜解析（四） MS途徑-II黃酮類化合物兩種基本裂解途徑途徑-I （RDA裂解）OOOCOC+.M+.AB+.A1B1+.+.+B+.OOOCCHOB2+M+.AB+.+B+ 五、黃酮類化合物波譜解析（四） MS黃酮類途徑 I 或 II 碎片進一步減-

44、CO離子黃酮醇途徑 II（主要）減 -CO離子 兩種基本裂解途徑是相互競爭，相互制約的。 途徑-I 與途徑-II得到的碎片離子的豐度互成反比。 即若一種途徑碎片離子豐度強，則另一種途徑碎片離子豐度就弱。 五、黃酮類化合物波譜解析 在黃酮類化合物結構分析中的應用 主要有： （一）紫外光譜（一）紫外光譜（UV） （二）核磁共振（二）核磁共振1H-NMR （三）核磁共振（三）核磁共振13C-NMR （四）質譜（四）質譜（MS）本 章 內 容一、定義一、定義二、分類二、分類三、理化性質與顏色反應三、理化性質與顏色反應四、提取與分離四、提取與分離五、黃酮類化合物波譜解析五、黃酮類化合物波譜解析六、生物活

45、性六、生物活性 六、黃酮類化合物生物活性（一）對心血管系統的作用蘆丁、橙皮苷、d-兒茶素，具有維生素P樣作用防治高血壓、動脈硬化的輔助治療劑（二）抗肝臟毒性作用水飛薊素、異水飛薊素等具強的保肝作用治療急、慢性肝炎、肝硬化等（三）抗炎作用羥乙基蘆丁、棉花皮苷 對胃潰瘍似有治療及預防作用 六、黃酮類化合物生物活性（四）雌性激素樣作用大豆素、染料木素等異黃酮類有雌性激素樣作用(可能由于結構相似的原故)（五）抗菌及抗病毒作用木犀草素、黃芩苷、黃芩素有一定程度的抗菌作用 槲皮素、桑色素、山奈酚具抗病毒作用（六）瀉下作用營實苷具致瀉作用（七）解痙作用異甘草素、大豆素 具類似罌粟堿解除平滑肌痙攣樣的作用本

46、章 內 容一、定義一、定義二、分類二、分類三、理化性質與顏色反應三、理化性質與顏色反應四、提取與分離四、提取與分離五、黃酮類化合物波譜解析五、黃酮類化合物波譜解析六、生物活性六、生物活性結構鑒定練習題結構鑒定練習題結構鑒定練習題 例 1從窄葉籃花中分離得到一黃色結晶（I），鹽酸鎂粉反應顯紅色，Molish反應陽性，FeCl3反應陽性，ZrOCl2反應呈黃色，但加入枸櫞酸后黃色褪去。IR Vmax (KBr)cm-1： 3520、3470、1660、1600、1510、1270、11001000、840。(I)的UV nm如下: 結構鑒定練習題 例 1 MeOH 252 267 (sh) 346

47、 NaOMe 261 399 (5分鐘無變化) AlCl3 272 426 AlCl3/HCl 260 274 357 385 NaOAc 254 400 NaOAc/H3BO3 256 378結構鑒定練習題 例 1 (I)的1H-NMR(DMSO-d6,TMS)ppm: 7.4（1H，d，J=8Hz） 6.9（1H，dd，J=8Hz，3Hz） 6.7（1H，d，J=3Hz） 6.6 （1H，d，J=2Hz） 6.4 （1H，d，J=2Hz） 6.38（1H，S） 5.05（1H，d，J=7Hz）其余略。結構鑒定練習題 例 1 (I)酸水解后檢出1M葡萄糖和甙元，甙元的分子式C15H10O6。

48、試回答下列各問: (1)該化合物為_ 根據_ (2)是否有C-3羥基_ 根據_ (3)甙鍵構型為_ 根據_ (4)是否有鄰二羥基_ 根據_ (5)寫出(I)的結構式，并在結構上注明質子的歸屬結構鑒定練習題 例 1解：黃色結晶(I) 鹽酸鎂粉反應顯紅色 Molish反應陽性 FeCl3反應陽性 ZrOCl2反應呈黃色，但加入枸櫞酸后黃色褪去。結構鑒定練習題 例 1IR Vmax (KBr)cm-1: 3520、347016601600、1510127011001000840-OH、-不飽和酮、-不飽和酮苯環苯環C-H-C-O-C- (13001050)苯苯核核上上有有兩兩個個相相鄰鄰H H（單單

49、強強峰峰）860800結構鑒定練習題 例 1 UV nm MeOH 252 267 (sh) 346Band I : 399 - 346 = 53 示示有有4 4 - -O OH H強強度度不不降降( 40 60 nm)50 60nm 強強度度下下降降 有有3 3- -O OH H，但但無無4 4 - -O OH HBand I : 黃酮類黃酮類黃酮醇黃酮醇黃酮醇黃酮醇(3-OR)(3-OH)304 350328 357352 385NaOMe 261 399 (5分鐘無變化)5分鐘無變化說明無堿敏感系統5分鐘無變化說明無堿敏感系統結構鑒定練習題 例 1 AlCl3 272 426 AlCl3

50、/HCl 260 274 357 385AlCl3 = AlCl3/HCl譜譜圖圖 可可能能有有鄰鄰二二酚酚羥羥基基30 40B B環環有有鄰鄰二二酚酚羥羥基基50 65A A、B B環環均均有有鄰鄰二二酚酚羥羥基基紫紫移移426 - 385 = 41B B環環有有鄰鄰二二酚酚羥羥基基MeOH = AlCl3/HCl可可能能有有3 3- -及及/ /或或5 5- -O OH H385 - 364 = 21 有有5 5- -O OH H結構鑒定練習題 例 1 UV nm NaOAc 254 400 Band I 40 65 有4-OH有4-OHBand II 5 20有7-OH有7-OHNaOA

51、c/H3BO3 256 378400 346 = 54有有4 4 - -O OH HB B環環有有鄰鄰二二酚酚羥羥基基378 - 346 = 32結構鑒定練習題 例 1根據化學反應、IR、UV光譜，得出如下結構式： OOOHOHOHOC15H10O5C15H10O6O無C3-OH（二氯氧鋯反應）無C3-OH（二氯氧鋯反應）A A環環無無鄰鄰二二酚酚羥羥基基NaOAc/H3BO3AlCl3、AlCl3/HCl結構鑒定練習題 例 1 (I)的1H-NMR(DMSO-d6,TMS)ppm:7.4（1H，d，J=8Hz）6.9（1H，dd，J=8Hz，3Hz）6.7（1H，d，J=3Hz）6.6 （1

52、H，d，J=2Hz）6.4 （1H，d，J=2Hz）6.38（1H，S）5.05（1H，d，J=7Hz）其余略。OOOHOHOH結構鑒定練習題 例 1 (I)的1H-NMR(DMSO-d6,TMS)ppm:7.4（1H，d，J=8Hz）6.9（1H，dd，J=8Hz，3Hz）6.7（1H，d，J=3Hz）6.6 （1H，d，J=2Hz）6.4 （1H，d，J=2Hz）6.38（1H，S）5.05（1H，d，J=7Hz）其余略。OOOHOHOH結構鑒定練習題 例 1 (I)的1H-NMR(DMSO-d6,TMS)ppm:7.4（1H，d，J=8Hz）6.9（1H，dd，J=8Hz，3Hz）6.7

53、（1H，d，J=3Hz）6.6 （1H，d，J=2Hz）6.4 （1H，d，J=2Hz）6.38（1H，S）5.05（1H，d，J=7Hz）其余略。OOOHOHOHHHH鄰偶鄰偶結構鑒定練習題 例 1 (I)的1H-NMR(DMSO-d6,TMS)ppm:7.4（1H，d，J=8Hz）6.9（1H，dd，J=8Hz，3Hz）6.7（1H，d，J=3Hz）6.6 （1H，d，J=2Hz）6.4 （1H，d，J=2Hz）6.38（1H，S）5.05（1H，d，J=7Hz）其余略。OOOHOHOHHHH間偶鄰偶結構鑒定練習題 例 1 (I)的1H-NMR(DMSO-d6,TMS)ppm:7.4（1H

54、，d，J=8Hz）6.9（1H，dd，J=8Hz，3Hz）6.7（1H，d，J=3Hz）6.6 （1H，d，J=2Hz）6.4 （1H，d，J=2Hz）6.38（1H，S）5.05（1H，d，J=7Hz）其余略。OOOHOHOHHHH7.46.76.9結構鑒定練習題 例 1 (I)的1H-NMR(DMSO-d6,TMS)ppm:7.4（1H，d，J=8Hz）6.9（1H，dd，J=8Hz，3Hz）6.7（1H，d，J=3Hz）6.6 （1H，d，J=2Hz）6.4 （1H，d，J=2Hz）6.38（1H，S）5.05（1H，d，J=7Hz）其余略。OOOHOHOHHHH7.46.76.9結構鑒

55、定練習題 例 1 (I)的1H-NMR(DMSO-d6,TMS)ppm:7.4（1H，d，J=8Hz）6.9（1H，dd，J=8Hz，3Hz）6.7（1H，d，J=3Hz）6.6 （1H，d，J=2Hz）6.4 （1H，d，J=2Hz）6.38（1H，S）5.05（1H，d，J=7Hz）其余略。OOOHOHOHHHHHH7.46.76.9結構鑒定練習題 例 1 (I)的1H-NMR(DMSO-d6,TMS)ppm:7.4（1H，d，J=8Hz）6.9（1H，dd，J=8Hz，3Hz）6.7（1H，d，J=3Hz）6.6 （1H，d，J=2Hz）6.4 （1H，d，J=2Hz）6.38（1H，S

56、）5.05（1H，d，J=7Hz）其余略。OOOHOHOHHHHHH7.46.76.96.66.4結構鑒定練習題 例 1 (I)的1H-NMR(DMSO-d6,TMS)ppm:7.4（1H，d，J=8Hz）6.9（1H，dd，J=8Hz，3Hz）6.7（1H，d，J=3Hz）6.6 （1H，d，J=2Hz）6.4 （1H，d，J=2Hz）6.38（1H，S）5.05（1H，d，J=7Hz）其余略。OOOHOHOHHHHHH7.46.76.96.66.4結構鑒定練習題 例 1 (I)的1H-NMR(DMSO-d6,TMS)ppm:7.4（1H，d，J=8Hz）6.9（1H，dd，J=8Hz，3H

57、z）6.7（1H，d，J=3Hz）6.6 （1H，d，J=2Hz）6.4 （1H，d，J=2Hz）6.38（1H，S）5.05（1H，d，J=7Hz）其余略。OOOHOHOHHHHHHH7.46.76.96.66.4結構鑒定練習題 例 1 (I)的1H-NMR(DMSO-d6,TMS)ppm:7.4（1H，d，J=8Hz）6.9（1H，dd，J=8Hz，3Hz）6.7（1H，d，J=3Hz）6.6 （1H，d，J=2Hz）6.4 （1H，d，J=2Hz）6.38（1H，S）5.05（1H，d，J=7Hz）OOOHOHOHHHHHHH7.46.76.96.66.4葡萄糖端基碳上氫葡萄糖端基碳上氫

58、結構鑒定練習題 例 1 (I)的1H-NMR(DMSO-d6,TMS)ppm:7.4（1H，d，J=8Hz）6.9（1H，dd，J=8Hz，3Hz）6.7（1H，d，J=3Hz）6.6 （1H，d，J=2Hz）6.4 （1H，d，J=2Hz）6.38（1H，S）5.05（1H，d，J=7Hz）OOOHOHOHHHHHHHO7.46.76.96.66.46.38葡萄糖端基碳上氫葡萄糖端基碳上氫結構鑒定練習題 例 1 OOOHOHOHHHHHHHO7.46.76.96.66.46.38O結構鑒定練習題 例 2化合物（A）為黃色粉末狀結晶，mp:229231，分子式為C21H20O12，HCl-Mg

59、粉反應呈陽性，2%ZrOCl2反應呈黃色，加檸檬酸后黃色褪去。酸水解檢出葡萄糖。該化合物紫外光譜數據如下所示：（UVMme a OxH nm)結構鑒定練習題 例 2 MeOH 257 269(sh) 299(sh) 342 NaOMe 272 327 409 AlCl3 275 305(sh) 331(sh) 438 AlCl3/HCl 268 299(sh) 366(sh) 405 NaOAc/H3BO3 262 298(sh) 397 NaOAc 274 324 380結構鑒定練習題 例 2該化合物1H-NMR(DMSO-d6)(ppm): 5.34（1H,d,J= 7Hz） 6.19（1

60、H,d,J= 2Hz） 6.93（1H,d,J= 2Hz） 6.83（1H,d,J= 9Hz） 7.56（1H,dd,J1= 9Hz,J2= 2Hz） 7.64（1H,d,J= 2Hz）結構鑒定練習題 例 2 1.試寫出該化合物的完整結構； 糖部分寫出Haworth結構； 2.寫出甙鍵的構型； 3.試歸屬氫信號。 （要求寫出推導過程）結構鑒定練習題 例 2 解： 黃色粉末狀結晶 mp:229231 分子式為C21H20O12 HCl-Mg粉反應呈陽性 2%ZrOCl2反應呈黃色，加檸檬酸后黃色褪去 酸水解檢出葡萄糖。結構鑒定練習題 例 2 MeOH 257 269(sh) 299(sh) 34