1、超聲波提取龍眼殼總黃酮及鑒別(一)    作者：黃鎖義， 劉海花， 黎海妮， 唐玉蓮， 張婧萱【關鍵詞】 超聲波提取；,龍眼殼；,總黃酮；,鑒別摘要：目的為充分利用龍眼殼植物資源，避免資源的浪費，探討龍眼殼中總黃酮的提取及鑒別方法。方法采用超聲波乙醇浸提法從龍眼殼中提取黃酮類物質，對所提取的黃酮類物質進行驗證，并用紫外分光光度法測定含量。結果測得樣品中總黃酮的含量C=1.204 mg/ml，回收率為98.29%，其純度和產率均較高。結論該方法采用全物理過程，無污染，是提取龍眼殼中黃酮類物質的有效途徑。關鍵詞：超聲波提取； 龍眼殼； 總黃酮； 鑒別Abst

2、ract：ObjectiveTo study the method for extraction and identification of total flavanone of longan shell. MethodsThe flavonoids were extracted by ethanol as the solvent from longan shell with ultrasonic wave. Spectrophotometry was used to determine the flavanone of longan shell. ResultsThe content of

3、the total flavanone of longan shell obtained by this method was C=1.204mg/ml and the rate of recovery was 98.29%. ConclusionThis text provides the extraction and purification methods to get the outcome and the purity of the flavanone is high. This method is a purely physical process and has no pollu

4、tion. It is an ideal way to extract the flavanone of longan shell.Key words：Ultrasonic wave treatment; Longan shell; Total flavanone; Identification 龍眼(Dimocarpus longan Lour)為無患子科龍眼屬常綠果樹，喬木。龍眼的果實俗名桂圓，又名龍目、比目、荔枝奴、益智、亞荔枝、圓眼、川彈子、驪珠、燕卵、蜜脾、鮫淚、木彈、繡木團等1,為我國著名的亞熱帶水果。龍眼原產于我國南部和越南北部的南亞熱帶區域，在我國已有2000多年栽培歷史，是重

5、要的南亞熱帶常綠長壽果樹，為四大嶺南佳果之一。龍眼果品暢銷海內外，在國際市場上享有較高的聲譽，我國龍眼栽培面積和產量均居世界首位。我國福建、廣東、廣西及臺灣等省是主產區，海南、云南、四川和貴州等省也有栽培。李時珍在本草綱目中說：“食品以荔枝為貴，而資益以龍眼為良。”龍眼的營養價值很高，是南方著名佳果之一。龍眼還是重要的藥材。蘇頌撰寫的圖經本草，說龍眼“甘平無毒，主治五臟邪氣，安志壓食，久服強魄聰明，輕身不老，通神明”。李時珍的本草綱目也說龍眼有“開胃健脾，補虛益智”的功效。龍眼肉可以治療虛勞羸弱，失眠鍵忘，驚悸怔忡，以及脾虛泄瀉，產后浮腫等癥。此外，龍眼殼、龍眼花和龍眼皮、根均可以作為配伍的中

6、藥2。龍眼殼因為得不到合理的利用,每年都有大量的龍眼殼白白地浪費。龍眼殼中含有大量的生物堿及其他中藥成分,對中藥事業的研究開發具有重要價值3。近年來，超聲技術應用于提取植物中的生物堿、苷類、生物活性物質、動物組織漿的毒質等研究已有報道4，5，表明其具有耗能低、效率高、不破壞有效成分的特點。很多研究表明，利用超聲波產生的強烈振動、高的加速度、強烈的空化效應、攪拌作用等，可加速植物材料中的有效成分進入溶劑，從而增加有效成分的提取率，縮短提取時間，并且還可避免高溫對提取成分的影響5。但超聲技術應用于提取龍眼殼中黃酮類物質的研究尚未見報道，本文用超聲波提取龍眼殼總黃酮及鑒別。現報道如下。1 儀器與試劑

7、1.1 儀器KQ5200DB型數控超聲波清洗器（昆山市超聲儀器有限公司）；UV755B紫外可見分光光度計（上海分析儀器總廠）；ZFI型三用紫外分析儀(上海顧村光電儀器廠)；SHBIII循環水式多用真空泵（鄭州長城科工貿有限公司）。1.2 試劑95%乙醇AR；亞硝酸鈉AR；硝酸鋁AR；氫氧化鈉AR；三氯化鋁AR；鹽酸AR；氨水AR；冰醋酸AR；醋酸乙酯AR；丁丁醇AR；鎂砂粉AR；乙酸鎂AR；蘆丁標準品（中國藥品生物制品檢定所）；新鮮龍眼殼采自廣西百色市。2 方法與結果2.1 總黃酮成分提取取新鮮龍眼殼，烘干，粉碎。稱取龍眼殼粉末約6 g，加80 ml 95%乙醇，超聲波提取2.5 h，抽濾。濾

8、渣再加80 ml 95 %乙醇，超聲波提取2.5 h，抽濾，合并兩次濾液，減壓回收乙醇至濾液僅剩57 ml為止，放置100 ml容量瓶中，用60%乙醇稀釋至刻度，得樣品液。2.2 測定方法依據以蘆丁為對照品測定龍眼殼中總黃酮的含量，加入鋁離子試劑，同時控制適宜pH值，使黃酮化合物與鋁鹽形成絡合物，在可見光區能獲得穩定的特征吸收峰。2.3 定量實驗總黃酮的含量測定2.3.1 波長的選擇 取樣品液適量，在0.30 ml 5%亞硝酸鈉溶液存在的堿性條件下，經硝酸鋁顯色后，以試劑為空白參比液在420700 nm波長范圍測定絡合物的吸光度，絡合物于510 nm波長處有最大吸收，故測定時選用此波長。2.3

9、.2 標準曲線的繪制 分別精密吸取蘆丁對照液（0.10 mg/ml）0.00，0.50，1.00，2.00，3.00，4.00，5.00 ml于10.00 ml容量瓶中，分別加入5%亞硝酸鈉溶液0.30 ml，搖勻，靜置6 min；再加10%硝酸鋁溶液0.30ml，搖勻，靜置6 min；再加4%氫氧化鈉溶液4.00 ml，用60%乙醇稀釋至刻度，搖勻，靜置12 min，以試劑作空白參比液，于510nm處測吸光度。吸光度測定結果如下表：表1 紫外可見分光光度計測定蘆丁（略）根據上表得回歸方程：A=6.967 1×103+8.418 1C，r=0.999 9。2.3.3 提取物含量的測定

10、精密吸取樣品液0.50 ml，置10.00 ml容量瓶，按標準曲線的制備方法測定吸光度A=0.500，根據回歸方程：A=-6.9671×103+8.4181C，計算樣品中總黃酮的含量C=1.204 mg/ml。2.3.4 回收實驗 精密量取樣品液1.00 ml，加入標準蘆丁對照品2.00 ml（0.10 mg/ml），同前樣品測定的操作方法測定吸光度，求出回收率為98.29%。2.4 定性實驗-總黃酮的鑒別2.4.1 顏色反應紫外光下呈色反應：取該樣品溶液點在濾紙上，在可見光下呈灰黃色，在紫外光下呈灰褐色并有熒光斑點。濃氨水反應：取該樣品溶液點在濾紙上，將濾紙在氨水上方熏0.5 mi

11、n，立即在紫外光下觀察，呈極明顯的黃褐色熒光斑點。三氯化鋁反應：取樣品溶液點在濾紙上，滴加三氯化鋁乙醇溶液，吹干。在可見光下呈灰黃色，在紫外光下呈黃色熒光斑點。乙酸鎂反應：取樣品溶液點在濾紙上，滴加1%乙酸鎂甲醇溶液，吹干，紫外光下呈黃色斑點。鹽酸鎂粉反應：取乙醇提取液1 ml于試管中加鎂粉，再加入濃鹽酸數滴（1次加入），在泡沫處呈紫紅色。2.4.2 紙層析取樣品溶液10l點在濾紙上。用正丁醇醋酸水=415（體積比）為展開劑，上行展開5 h，取出晾干。噴1%氯化鋁乙醇溶液。吹干后于紫外光下，可見熒光斑點。3 討論實驗結果表明，本實驗方法工藝簡單，回收率為98.29%，利用本文所提供的超聲波提取

12、、純化方法而得到的黃酮類物質其純度較高。超聲波可以強化乙醇浸提法，達到省時、高效、節能的目的，此方法采用全物理過程，無任何污染，是一條理想的提取黃酮類物質的途徑，具有廣闊的應用前景。黃酮類化合物是一大類天然產物，廣泛存在于植物界，是許多中草藥的有效成分。在自然界中最常見的是黃酮和黃酮醇，其它包括雙氫黃（醇）、異黃酮、雙黃酮、黃烷醇、查爾酮、橙酮、花色苷及新黃酮類等6。天然來源的生物黃酮分子量小，能被人體迅速吸收，能通過血腦屏障，能進入脂肪組織，進而體現出如下功能：消除疲勞、保護血管、防動脈硬化、擴張毛細血管、疏通微循環、抗脂肪氧化、抗衰老、活化大腦及其他臟器細胞的功能。黃酮類化合物具有抗癌、抗

13、腫瘤、抗心腦血管疾病、抗炎鎮痛、免疫調節、降血糖、治療骨質疏松、抑菌抗病毒、抗氧化、抗衰老、抗輻射等作用711。近年來，世界上掀起了植物藥開發的熱潮，植物藥以其天然低毒的特點倍受青睞，而黃酮類化合物以其廣譜的藥理作用引人矚目。本文實驗結果表明，龍眼殼中含有較為豐富的黃酮。因此，龍眼殼具有廣泛開發和利用價值，值得綜合利用和資源開發。參考文獻：1 蔡長河，唐小浪，張愛玉，等龍眼果肉的食療價值及其開發應用前景J.食品科學，2002，23(8)：3282 劉玉英.我國的龍眼J.中國土特產，2000，2：25.3 葉自行，許建楷龍眼高產技術問答M.廣州：廣東科技出版社，2001：56. 4 劉祥義. 超聲波提取元寶楓葉總黃酮方法研究J.云南化工，2003，30（1）：27.5 謝明杰，宋 明，鄒翠霞，等. 超聲波提取大豆異黃酮J.大豆科學，2004，23(1):75.6 夏杏洲，張 輝，魏傳晚.榕樹葉中黃酮類化合物的提取條件研究J.食品研究與開發，2002，23(5):35.7 華光軍，郭 勇.黃酮類化合物藥理研究進展J.廣東藥學，1999，9（4）：9