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1、實(shí)驗(yàn)二實(shí)驗(yàn)二 細(xì)菌涂(抹)片的制備和革蘭氏染色細(xì)菌涂(抹)片的制備和革蘭氏染色 目的要求:目的要求:1 1、掌握細(xì)菌抹片的制備方法和常用染色方法。、掌握細(xì)菌抹片的制備方法和常用染色方法。 2 2、認(rèn)識(shí)革蘭氏染色和抗酸性染色的反應(yīng)特、認(rèn)識(shí)革蘭氏染色和抗酸性染色的反應(yīng)特性。性。實(shí)驗(yàn)內(nèi)容:實(shí)驗(yàn)內(nèi)容:1 1、 細(xì)菌抹片的制備:細(xì)菌抹片的制備:l玻片準(zhǔn)備:透明、潔凈、無(wú)油漬。玻片準(zhǔn)備:透明、潔凈、無(wú)油漬。l抹片:液體材料、非液體材料、組織臟器材料的抹片方法講解、示范。抹片:液體材料、非液體材料、組織臟器材料的抹片方法講解、示范。l干燥固定:火焰固定和化學(xué)固定的示范。講解其目的及注意事項(xiàng)。干燥固定:火焰固
2、定和化學(xué)固定的示范。講解其目的及注意事項(xiàng)。2 2、 細(xì)菌涂片的制備:講解并示范涂片、干燥、固定的方法。細(xì)菌涂片的制備:講解并示范涂片、干燥、固定的方法。3 3、 細(xì)菌常用染色方法:細(xì)菌常用染色方法:革蘭氏染色法革蘭氏染色法實(shí)驗(yàn)二實(shí)驗(yàn)二 細(xì)菌涂(抹)片的制備和革蘭氏染色細(xì)菌涂(抹)片的制備和革蘭氏染色 細(xì)菌抹片細(xì)菌抹片 的制備的制備實(shí)驗(yàn)二:細(xì)菌涂片的制備和染色鏡檢實(shí)驗(yàn)二:細(xì)菌涂片的制備和染色鏡檢 革蘭氏染色法:革蘭氏染色法:1. 1. 制片:取待檢病料或細(xì)菌培養(yǎng)物常規(guī)抹(涂)片、干燥、制片:取待檢病料或細(xì)菌培養(yǎng)物常規(guī)抹(涂)片、干燥、固定。固定。 2. 2. 初染:滴加結(jié)晶紫,染色初染:滴加結(jié)晶
3、紫,染色1-21-2分鐘,水洗。分鐘,水洗。 3. 3. 媒染:用碘液沖去殘水,并用碘液覆蓋約媒染:用碘液沖去殘水,并用碘液覆蓋約1 1分鐘,水洗。分鐘,水洗。 4. 4. 脫色:用濾紙吸取或甩去載玻片上的殘水,將載玻片傾脫色:用濾紙吸取或甩去載玻片上的殘水,將載玻片傾斜,在白色背景下,用滴管流加斜,在白色背景下,用滴管流加95%95%乙醇脫色,直至流出的乙醇脫色,直至流出的乙醇無(wú)紫色時(shí)(乙醇無(wú)紫色時(shí)(20302030秒),立即水洗。秒),立即水洗。 5.5.復(fù)染:用復(fù)紅液復(fù)染約復(fù)染:用復(fù)紅液復(fù)染約2 2分鐘,水洗。分鐘,水洗。6. 6. 鏡檢:用濾紙吸水,干燥后,顯微鏡油鏡觀察。鏡檢:用濾紙吸水,干燥后,顯微鏡油鏡觀察。革蘭氏染色法過(guò)程示意圖革蘭氏染色法過(guò)程示意圖革蘭氏染革蘭氏染 色法動(dòng)畫(huà)色法動(dòng)畫(huà)革蘭氏革蘭氏 染染 色法色法革蘭氏染革蘭氏染 色法動(dòng)畫(huà)色法動(dòng)畫(huà)實(shí)驗(yàn)報(bào)告:實(shí)驗(yàn)報(bào)告:1 1、細(xì)菌抹片或涂片革蘭氏染色的顯微鏡觀察結(jié)果。、細(xì)菌抹片或涂片革蘭氏染色的顯微鏡觀察結(jié)果。2 2、革蘭氏染色法的具體程序和注意事項(xiàng)。、革蘭氏染色法的具體程序和注意事項(xiàng)。
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