1、    山東省1999年麻疹實驗室監測結果分析        摘要：山東省1999年共報告麻疹疑似病例1776例，采集血清標本861份，采集率為48.48。采用酶聯免疫吸附試驗（ELISA）捕獲法檢測麻疹、風疹IgM抗體，陽性率分別為59.12（509861）和10.34（89861），兩者全部陰性者占30.54（263861）。1337例麻疹暴發疑似病例，麻疹、風疹IgM抗體陽性率分別為58.81（327556）和14.57（81556）；439例散發疑似病例分別為59.6

2、7（182305）、2.62（8305）。首次在1例典型麻疹確診病例的咽拭子標本中分離到1株麻疹野病毒株。ELISA捕獲法檢測IgM抗體用于麻疹的血清學早期診斷敏感性較高，其結果與血清標本采集時間及麻疹疑似病例的最終分類有很大的關系。關鍵詞：麻疹IgM抗體；風疹IgM抗體；麻疹病毒中分類號：R511.1 文獻標識碼：A 文章編號：1006916X（2000）060348-03Analysis of Laboratory Surveillance for Suspected Measles Cases in Shandong Province in 1999WANG Chang-yin， XU

3、Qing， XU Ai-qiang(Shandong Provincial Epidemic Prevention Station，Shandong，Jinan 250014，China)Abstract：1，776 suspected measles cases were reported in Shandong Province in 1999.Among them，861（48.48） serum specimens were tested for measles and rubella IgM antibodies by Capture-IgM ELISA. The results s

4、howed that 59.12 cases （509861） were laboratory confirmed as measles and 10.34 （89/861） cases were confirmed as rubella。Of the 1，337（75.28） outbreak cases， 556（41.58） serum specimens showed 58.81 （327556） and 14.5（81556） positive to measles and rubella respectively.Of the 439（24.72） sporadic cases，3

5、05（69.48） serum specimens showed 59.67 and 2.62 positive to measles and rubella respectively.One measles wild type virus was isolated from a typical measles case. The capture-IgM ELISA is highly sensitive for early diagnosis of measles and rubella，the results are related to the time of sample collec

6、tion and the final classification of suspected measles cases.Key words：Measles IgM antibody； Rubella IgM antibody； Measles virus1999年，山東省17個市（地區，下同）麻疹實驗室監測網絡全面啟動。按山東省麻疹控制方案的要求，麻疹疑似病例早期血清學檢測和咽拭子采集工作由各市衛生防疫站麻疹實驗室承擔，并統一采用酶聯免疫吸附試驗（ELISA）捕獲法檢測血清IgM抗體，省衛生防疫站負責供應檢測試劑并對各市麻疹實驗室進行年度質量控制。為評價實驗室監測在麻疹控制中的作用，進一步完

7、善今后麻疹實驗室監測工作，我們對山東省1999年麻疹實驗室監測結果進行分析，現報告如下。材料與方法1標本采集由各市麻疹實驗室采集疑似病例的血清標本和咽拭子標本。血清標本在3天內完成檢測，及時報告結果并反饋省衛生防疫站；咽拭子盡快送省衛生防疫站麻疹實驗室，不能及時送檢時，30暫時存放市麻疹實驗室。2實驗方法血清學診斷采用國際通用的ELISA IgM抗體捕獲法，檢測試劑由上海榮盛生物技術有限公司提供，由省衛生防疫站統一發放。B95a細胞由中國預防醫學科學院病毒學研究所提供，用于咽拭子麻疹病毒分離。3判斷標準血清標本以酶標儀判定，用波長450nm測OD值，PN2.1為IgM抗體陽性；咽拭子以B95a

8、細胞呈融合病變為判斷依據。4結果分析所有資料錄入計算機，以Excel軟件進行分析。結果1標本采集及結果反饋情況1999年全省監測系統報告麻疹疑似病例1776例，采集血清標本861份，采集率為48.48。除棗莊、聊誠、臨沂、菏澤等市血清標本采集率低（30左右）外，其余市均較高（90）。全省3天內血清標本送檢率為82.03，檢測結果及時反饋率為99.77。共采集咽拭子標本65份，采集率為3.66。2IgM抗體檢測結果861例麻疹疑似病例血清標本中，麻疹IgM抗體陽性率為59.12（509861），風疹IgM抗體陽性率為10.34（89861），兩者全部陰性者占30.54（263861）。暴發的13

9、37例疑似病例中，采集血清標本556例，其中麻疹IgM抗體陽性率為58.81（327556），風疹IgM抗體陽性率為14.57（81556）；散發的439例病例中，采集血清標本305例，麻疹、風疹IgM抗體陽性率分別為59.67（182305）和2.62（8305）。經實驗室確診，我省的暴發病例中絕大部分為麻疹，但泰安、東營、棗莊、萊蕪等市有小范圍的風疹流行。3IgM抗體陽性率與采集血清標本時間的關系在所采集的861例血清標本中，對采集時間明確的646例疑似病例進行分析顯示，出疹后328天采集，血清IgM抗體檢出率為87.79；出疹后3天，IgM抗體檢出率為61.46；出疹后28天仍有78.5

10、0的血清標本檢出IgM抗體。如果將出疹后328天為合格采集，出疹后3天、28天為不合格采集（IgM抗體陽性率為62.25），兩者IgM抗體陽性率之間差異有極顯著的統計學意義（257.26，P0.01）（表1）。表1麻疹疑似病例IgM抗體陽性率與采集血清標本時間的關系采樣時間檢測數陽性數IgM抗體陽性率（）出疹后328天34430287.79出疹后3天28817761.46出疹后28天141178.57合計64649075.854咽拭子標本病毒分離及其與相應血清標本IgM抗體的關系在65份咽拭子標本中，僅對有明確采集時間的59份咽拭子標本進行分析。59份咽拭子標本中同時采集血清標本者30份，占5

11、0.85。其中血清學確診麻疹24例，IgM抗體陽性率為80.00（2430），分離麻疹病毒1株（暴發病例，出疹當天采樣，麻疹IgM抗體陽性、風疹IgM抗體陰性）。而另外29份病毒分離陰性的咽拭子標本，因未采集血清標本，無法進行血清學診斷（占49.15）。其中，暴發病例和散發病例的咽拭子中未采集血清標本者，分別占51.11（2345）和42.86（614）。另外，從咽拭子標本采集時間分析，咽拭子標本合格（出疹當天或出疹3天內）采集率僅為55.93（3359），亦直接影響麻疹病毒的分離結果（表2）。 表2咽拭子標本病毒分離情況與相應血清標本IgM抗體的關系咽拭子標本數 出疹后不同時間采集咽拭子數

12、麻疹病毒分離株 血清IgM抗體 0天 13天 4天陽性 陰性 未采樣暴發4542021119323散發140950536合計5942926124629討論 血清學檢測在麻疹的早期診斷和鑒別診斷中，具有靈敏性高、特異性強的特點，尤其在控制暴發疫情方面，起到很重要的作用13。1999年，山東省報告麻疹疑似病例1776例，采集血清標本861份，經實驗室血清學檢測，麻疹IgM抗體陽性率為59.12，風疹IgM抗體陽性率為10.34（部分市風疹流行）。全省3天內血清標本及時送檢率、結果反饋率均達到較高水平，說明我省市級麻疹實驗室的監測靈敏度逐步提高，在麻疹疫情控制方面能及時、準確的發揮作用。隨著控制麻疹

13、工作的進展，實驗室確診和排除病例應逐漸提高到較高的比例4。但從我省麻疹疑似病例分析，經實驗室確診的病例在所有疑似病例中所占比例仍較低，僅28.66。這一方面是由于血清標本采集率低，另一方面是血清標本的合格采集率低，對結果有一定影響。從血清IgM抗體檢測結果分析，ELISA捕獲法檢測IgM抗體有較高的靈敏性，出疹后328天采集，IgM抗體陽性率達87.79，但采集時間對其有一定影響。采集不合格標本所占比例的大小，影響IgM抗體陽性率的高低，并最終影響到麻疹病例的分類，尤其是散發病例。我省麻疹疑似病例的咽拭子標本采集率及合格采集率不高，麻疹病毒分離率低，僅為1.54（165），低于國內有關文獻的報

14、道5。其原因是多方面的：首先，與咽拭子標本的采集質量和采集時間有很大關系。因咽拭子標本的采集工作主要由縣級來完成，在采集方法上尚不規范，致使咽拭子標本的采集率低，質量不高，特別是部分咽拭子標本采集時間過晚，影響病毒的分離率。1999年，全省共采集咽拭子標本65份，在有明確采集時間的59份咽拭子標本中，在出疹當天或出疹3天內合格采集的咽拭子標本僅占55.93（3359），有44.07（2659）的咽拭子標本因采集時間過晚，錯過病毒分離的最佳時間。其次，由于采用無菌華氏管進行病毒分離，其細胞接種量少、接觸面過小等，估計對麻疹病毒的分離亦有較大影響，再加上咽拭子標本在保存、運送等環節方面的因素，都影

15、響了麻疹病毒的分離。另外，在所采集的咽拭子標本中，未采集血清標本的比例較高，對病毒分離陰性的標本來說，因缺乏血清學診斷聯系，給進一步明確診斷帶來困難。值得注意的是，在861例血清標本中，有263例其臨床癥狀為發熱、出疹，但麻疹、風疹IgM抗體全部陰性，占30.54。這是否為其它小DNA病毒引起的出疹性病例在其中（如B19病毒）？因本次未做相關實驗，不好定論。但因其臨床癥狀與輕型風疹極為相似，近年來已被引起重視。另外，不排除因采集血清標本時間過早，IgM抗體尚未出現而造成漏診的可能。從采集時間分析，出疹后3天采樣130例，占49.43（130263）。這些標本因未進行復檢，將有部分IgM抗體被漏

16、檢（出疹后3天采樣IgM抗體陽性率61.46），從而造成漏診。因此，為保證實驗結果的準確性，必須嚴格血清標本的采集，對于采集時間過早（3天內）而IgM抗體陰性者，必須復檢，有條件時可開展B19病毒檢測，以更好地指導麻疹的控制工作。綜上所述，實驗室監測在麻疹的控制工作中具有很重要的作用，但標本的采集質量對實驗結果有很大的影響，并最終影響麻疹病例的分類，因此，必須逐級加強對各專業人員在標本采集方面的培訓，提高標本采集的質量，保證實驗室檢測的準確性。基金項目：山東省衛生廳資助項目（9908）作者簡介：王常銀（1963），男，山東省濟寧市人，山東省衛生防疫站檢驗技師，主要從事計劃免疫針對疾病的病毒學、血清學實驗室研究工作。王常銀(山東省衛生防疫站，濟南250014)許青(山東省衛生防疫站，濟南250014)徐愛強(山東省衛生防疫站，濟南250014)王同展(山東省衛生防疫站，濟南250014)宋立志(山東省衛生防疫站，濟南250014)肖作奎(山東省衛生防疫站，濟南250014)張麗(山東省衛生防疫站，濟南250014)李漫時(山東省衛生防疫站，濟南250014)許文波(中國預防醫學科學院病毒學研究所，北京100050)參考文獻：1郭可謇，宋光運，張禮璧，等.應