1、課題1 菊花的組織培養課題目標（一）知識與技能1、熟悉植物組織培養的基本過程2、理解細胞分化的概念及離體植物細胞的脫分化和再分化3、通過聯系農業生產實際，培養學生活學活用，理論聯系實際的能力   （二）過程與方法歸納MS培養基的配制方法，并設計表格比較微生物培養基與MS培養基的配方的異同。（三）情感、態度與價值觀 通過閱讀植物組織培養技術的發展史，課下查閱植物組織培養技術在生產實踐中應用的資料，關注學生科學態度的教育，拓展學生視野，感受科學技術在生產實踐中的重要價值。課題重點植物組織培養過程中使用的無菌技術課題難點 植物組織培養過程中使用的無菌技術教學方法 啟發式

2、教學教學工具 多媒體課件教學過程（一）引入新課上節課我們探討學習了如何從土壤中分離出尿素分解菌和纖維素分解微生物及其計數方法。這節課我們來學習研究植物的組織培養技術。（二）進行新課1基礎知識知識回顧：聯系“植物細胞工程”，回答下列問題：11具有某種生物全套遺傳信息的任何一個活細胞，都具有發育成完整個體的能力，即每個生物細胞都具有全能性。但在生物體的生長發育過程中并不表現出來，這是因為在特定的時間和空間條件下，通過基因的選擇性表達，構成不同組織和器官。12植物組織培養技術的應用有：實現優良品種的快速繁殖；培育脫毒作物；制作人工種子；培育作物新品種以及細胞產物的工廠化生產等。活動1：閱讀“植物組織

3、培養的基本過程”，討論并完成以下問題：13細胞分化：個體發育中細胞在形態、結構和生理功能上出現穩定性差異的過程。思考1細胞分化是一種持久性的變化，它有什么生理意義？使多細胞生物體中細胞結構和功能趨向專門化，有利于提高各種生理功能的效率。14愈傷組織是通過細胞分裂形成的，其細胞排列疏松而無規則，高度液泡化呈無定形狀態的薄壁細胞。思考2填表比較根尖分生組織和愈傷組織的異同：組織類型細胞來源細胞形態細胞結構細胞排列細胞去向根尖分生組織受精卵正方形無液泡緊密分化成多種細胞組織愈傷組織高度分化細胞無定形高度液泡化疏松再分化成新個體相同點都通過有絲分裂進行細胞增殖15植物組織培養的過程可簡單表示為：（脫分

4、化）離體細胞、組織、器官（又叫外植體）（再分化）愈傷組織（生長）胚狀體叢芽等新個體活動2：閱讀“影響植物組織培養的條件”，討論并完成以下問題：16材料：植物的種類、材料的年齡和保存時間的長短等都會影響實驗結果。菊花組織培養一般選擇未開化植物的莖上部新萌生的側枝作材料。思考3一般來說，容易進行無性繁殖的植物容易進行組織培養。思考4選取生長旺盛嫩枝進行組培的原因是嫩枝生理狀態好，容易誘導脫分化和再分化。17營養：常用的培養基是MS培養基，其中含有的大量元素是N、P、S、K、Ca、Mg，微量元素是Fe、Mn、B、Zn、Cu、Mo、Cl、Ni、I、Co，有機物有甘氨酸、煙酸、肌醇、維生素、蔗糖等。18

5、激素：在培養基中需要添加生長素和細胞分裂素等植物激素，其濃度、使用的先后順序、用量的比例等都影響結果。思考5填表：激素使用的先后順序及其用量比例對細胞分裂和分化的影響。生長素細胞分裂素比值與結果比值高時促根分化，抑芽形成比值低時促芽分化，抑根形成比值適中促進愈傷組織生長使用順序實驗結果先生長素，后細胞分裂素有利于分裂但不分化先細胞分裂素，后生長素細胞既分裂也分化同時使用分化頻率提高1.9環境條件：PH、溫度、光等環境條件。菊花組培所需PH為5.8，溫度為18-22，光照條件為每日用日光燈照射12小時。2實驗設計活動3：閱讀“制備MS固體培養基”，回答下列問題：2121配制各種母液：將各種成分按

6、配方比例配制成的濃縮液。使用時根據母液的濃縮倍數，計算用量，并加蒸餾水稀釋。22配制培養基：應加入的物質有瓊脂、蔗糖、大量元素、微量元素、有機物和植物激素的母液，并用蒸餾水定容到1000毫升。在菊花組織培養中，可以不添加植物激素，原因是菊花莖段組織培養比較容易。23滅菌：采取的滅菌方法是高壓蒸汽滅菌。思考6MS培養基中各種營養物質的作用是什么？肉湯培養基相比，MS培養基有哪些特點？大量元素和微量元素提供植物細胞所必需的無機鹽；蔗糖提供碳源，維持細胞滲透壓；甘氨酸、維生素等物質主要是為了滿足離體植物細胞在正常代謝途徑受到一定影響后所產生的特殊營養需求。微生物培養基以有機營養為主，MS培養基則需提

7、供大量無機營養。活動4：閱讀“外植體消毒”，填寫下列流程圖：旺盛嫩枝(流水)沖洗刷洗，沖洗20分鐘左右(無菌吸水紙)吸干表面水分(70的酒精)搖動2-3次6-7秒(無菌水)清洗(無菌吸水紙)吸干表面水分(氯化汞)溶液浸泡12分鐘(無菌水)清洗3次思考7在此消毒過程中，是不是強度越大越好，為什么？ 不是。對外植體進行表面消毒時，既要考慮到藥劑的消毒效果，又要考慮到植物的耐受力。3發酵操作活動5：閱讀“接種、培養、移栽和栽培”，填寫：31前期準備：用70的酒精消毒工作臺，點燃酒精燈。注意所有接種工作都必須在酒精燈旁進行，器械使用前后都要用火焰灼燒滅菌。32接種操作：接種過程中插入外植體時形態學上端

8、朝上，每個錐形瓶接種78個外植體。思考8外植體接種與細菌接種相似之處是操作步驟相同，而且都要求無菌操作。33培養過程應該放在無菌箱中進行，并定期進行消毒，保持適宜的溫度和光照。34移栽前應先打開培養瓶的封口膜，讓其在培養間生長幾日，然后用流水清洗根部培養基。然后將幼苗移植到消過毒的蛭石或珍珠巖等環境中生活一段時間，進行壯苗。最后進行露天栽培。思考9外植體在培養過程中可能會被污染，你認為造成污染的原因有哪些？外植體消毒不徹底；培養基滅菌不徹底；接種中被雜菌污染；錐形瓶密封性差等。（三）課堂總結、點評菊花的組織培養基本原理細胞的全能性基本過程脫分化愈傷組織再分化影響因素材料性質、營養物質、調節物質

9、、環境條件操作流程配制MS固體培養基外植體的消毒接種培養移栽栽培（四）實例探究例1 甘薯種植多年后易積累病毒而導致品種退化。目前生產上采用莖尖分生組織離體培養的方法快速繁殖脫毒的種苗，以保證該品種的品質和產量水平。這種通過分生組織離體培養獲得種苗的過程不涉及細胞的 A.有絲分裂B.分化C.減數分裂D.全能性解析：離體的植物器官、組織或細胞，在培養一段時間后，脫分化，通過細胞分裂，形成愈傷組織；脫分化的愈傷組織繼續培養，又可重新分化成根或芽等器官；再分化形成的試管苗，移栽到地里，可以發育成完整的植物體。由愈傷組織發育為完整的植物體體現了細胞的全能性。植物組織培養的過程是無性繁殖的過程，不涉及減數

10、分裂，減數分裂是生物在進行有性生殖的過程中的一種分裂方式。本題解決的關鍵是要了解植物的組織培養過程。答案：C例2植物細胞表現出全能性的必要條件是A.導入其他植物細胞的基因B.將成熟的細胞核移植到去核的卵細胞中C.用適當濃度的秋水仙素處理D.脫離母體后，給予適宜的營養和適宜的溫度等外界條件解析：植物細胞只有脫離了植物體，在一定的外部因素作用下，經過細胞分裂形成愈傷組織，才能表現出全能性，由愈傷組織細胞發育、分化出新的植物體。答案：D綜合應用例3、在離體的植物器官、組織或細胞脫分化形成愈傷組織的過程中，下列哪一項條件是不需要的A.消毒滅菌B.適宜的溫度C.充足的光照 D.適宜的養料和激素解析：離體

11、的植物器官、組織或細胞脫分化過程是在無菌條件下進行的，在愈傷組織形成過程中，需要適宜的溫度、一定的營養物質和植物激素的誘導，但不需要陽光。答案：C（五）鞏固練習1.植物組織培養技術的理論基礎之一是：A.植物細胞的完整性 B.植物細胞的多樣性 C.植物細胞的全能性 D.植物細胞雜交2.要大量繁殖用植物體細胞雜交方法獲得的植物，應該采用哪種繁殖方式？A.種子繁殖 B.分裂生殖 C.出芽生殖 D.營養生殖3.下列關于愈傷組織的說法中不正確的是A.愈傷組織的細胞能夠進行細胞分裂B.用葉培養形成的愈傷組織細胞能夠進行光合作用C.培養愈傷組織的培養基中應含有有機養料 D.人們可以從愈傷組織中提取所需物質4

12、.在一個多細胞生物體內，存在形態、結構和生理功能上具有穩定性差異的細胞，是因為 A.細胞失去全能性 B不同的細胞，基因是不同的C.不同細胞中基因選擇性表達的結果 D變異一般是不定向的5.細胞具有全能性的原因是 A.生物體細胞具有使后代細胞形成完整個體的潛能B.生物體的每一個細胞都具有全能性C.生物體的每一個細胞都含有個體發育的全部基因D.生物體的每一個細胞都是由受精卵發育來的6.植物組織培養過程中的脫分化是指 A.植物體的分生組織通過細胞分裂產生新細胞B.未成熟的種子經過處理培育出幼苗的過程C.植物的器官、組織或細胞，通過離體培養產生愈傷組織的過程D.取植物的枝芽培育成一株新植物的過程7.下列

13、植物細胞全能性最高的是 A.形成層細胞 B.韌皮部細胞 C.木質部細胞 D.葉肉細胞8植物組織培養是指A離體的植物器官或細胞培育成愈傷組織B愈傷組織培育成植株C離體的植物器官、組織或細胞培養成完整植物體D愈傷組織形成高度液泡化組織9某園藝場經過長期精心選育，培養出一株形態優美的蘭花，如果要保持母本的優良性狀，并盡快大規模繁殖，最適合的繁殖方式是（ ）A分裂生殖B有性生殖C孢子生殖D組織培養10胡蘿卜的韌皮部細胞通過組織培養，能發育成新的植株。下列有關的敘述中，不正確的是 （ ）A說明高度分化的植物細胞具有全能性 B植物細胞的全能性得以表達要離開母體C新植株的形成是細胞分裂和分化的結果 D高度分化的動物細胞也具有全能答案：15 CDBCC 610 CACDD課余作業1、為什么運用植物組織培養技術能把植物離體器官、組織或細胞培養成完整植株？2、植物組織培養與花藥培養技術有何相同點與不同點？教學體會課題背景介紹了植物細胞的全能性，說明離體的植物器官或組織在一定的條件下能夠發育成完整的植株。在教學過程中，教師可以從植物組織培養的發展歷史導入，激發學生的學習興趣。資料袋克隆羊多利2003年2月14日蘇格蘭羅斯林研究所證實世界上首只成年體細胞克隆動物多利已經死亡。多利的尸體將被制成標本，存放在蘇格蘭國家博物館。多利于1996年7月5日出生，于1997年2月23日被介紹給公眾，它是用一只