1、HLAG在子宮內膜異位癥中的表達及意義【摘要】 目的：研究人類白細胞抗原G(HLAG)在子宮內膜異位癥患者在位和異位內膜組織中的表達，探討HLAG分子在內異癥發生發展中的作用. 方法：采用鏈霉素抗生物素蛋白過氧化物酶（SP）法檢測子宮內膜異位癥患者19例在位子宮內膜和30例異位內膜中HLAG分子的表達水平, 以30例非子宮內膜異位癥患者的子宮內膜作為對照. 結果：內異癥在位子宮內膜和異位內膜HLAG的陽性表達率（42%，53%）均顯著性高于對照組正常子宮內膜（P<0.01），但在內異癥在位內膜和異位內膜之間HLAG的陽性表達率無顯著性差異（P>0.05）. 結論：異

2、常表達的HLAG分子可能在內異癥的發生發展過程中發揮著作用. 【關鍵詞】 人類白細胞抗原G； 子宮內膜異位癥； 免疫組織化學 0引言 子宮內膜異位癥(endometriosis,簡稱內異癥)是婦產科常見多發病，發病率達10%15%1，近年來有逐漸增高的趨勢. 已有研究表明，內異癥是一種免疫性疾病，其發生與機體的免疫應答系統密切相關. 人類白細胞抗原(HLA)是人類的主要組織相容性復合物，以往大多都是研究經典HLA分子與內異癥的相關性，而極少涉及非經典分子. HLAG分子屬于非經典的HLA類分子，它參與機體的免疫調節，主要表現為免疫抑制功能. 我們通過測定內異癥患者在位和異位內膜組織中HLAG分

3、子的表達，探討HLAG在子宮內膜異位癥發生發展中的作用. 1對象和方法 1.1對象 標本來源于200412/200510在我院經剖腹或腹腔鏡手術且病理檢查證實為卵巢子宮內膜異位囊腫的患者. 其中，異位內膜30例，年齡3751（43.5±4.9）歲，在位子宮內膜19例，年齡4051（45.3±4.2）歲. 對照組為30例非子宮內膜異位癥患者且經病理證實的正常子宮內膜，年齡3954（44.6±4.62）歲. 兩組患者均為湖北籍漢族女性，術前3 mo內均未患過感染性疾病，未用內異癥治療藥物或激素類藥物，未接受過免疫抑制劑治療. 生化及線攝片檢查均無肝炎、糖尿病、結核、腫

4、瘤或其他自身免疫性疾病. 兩組患者年齡差異無顯著性(P>0.05)， 無血緣關系.抗HLAG分子mAb（美國Alexis公司），SP超敏試劑盒（福州邁新生物試劑公司）. 1.2方法 1.2.1標本處理 標本經40 g/L甲醛固定，石蠟包埋，3 m厚連續切片，HE染色，做病理組織學檢查. 1.2.2免疫組化染色 采用SP法，主要步驟如下:常規處理后，加入第一抗體，即鼠抗人HLAG mAb，濕盒中4過夜；加入第二抗體，即生物素標記的羊抗鼠IgG，37濕盒中10 min；加入鏈霉菌抗生物素過氧化物酶，37濕盒中10 min；二氨基聯苯胺(DAB)顯色，常規脫水、透明、中性膠封固. 因H

5、LAG分子在組織分布上有一定的局限性，故選胎盤組織為陽性對照. 1.2.3染色結果判斷HLAG以子宮內膜細胞質或細胞膜出現棕黃色顆粒為陽性細胞，在400倍光鏡下至少觀察5個視野，陽性細胞5%定義為陽性，5%為陰性2. 統計學處理：采用統計學軟件SPSS 10.0進行分析. 各組之間率的比較采用2檢驗，以P<0.05為差異有顯著性. 2結果 SP法染色陽性產物為棕黃色，HLAG抗原陽性染色定位于細胞質內或細胞膜上. 對照組正常子宮內膜HLAG抗原的表達均呈陰性. 在內異癥組，有8例在位子宮內膜（圖1A）和16例異位內膜組織（圖1B）中的內膜細胞呈不同程度的陽性染色. 內異癥在位子宮

6、內膜HLAG抗原的陽性表達率（42%）顯著性高于對照組正常子宮內膜（P<0.01，表1）；內異癥異位子宮內膜HLAG抗原的陽性表達率（53%）顯著性高于對照組正常子宮內膜（P<0.01）；內異癥在位子宮內膜與異位子宮內膜HLAG抗原的陽性表達率無顯著性差異（P>0.05）. A：在位子宮內膜; B：異位子宮內膜.表1在位子宮內膜和異位子宮內膜及正常子宮內膜中HLAG抗（略） 3討論 HLAG分子主要表現免疫抑制功能，抑制NK細胞、部分T細胞的細胞溶解作用及誘導CD8+T細胞凋亡3；HLAG通過調節細胞因子的分泌，使Th1/Th2平衡移向Th2方向，引起

7、免疫抑制4. HLAG還可影響細胞因子的分泌，如IL10，IL13，TNF，IFN等5，致使細胞因子分泌紊亂也可能引起機體免疫耐受. 我們的研究發現：內異癥在位子宮內膜HLAG抗原的陽性表達率（42%）顯著性高于對照組正常子宮內膜. 因而推測當在位子宮內膜脫落異位到機體其他部位時，其早已異常表達的HLAG分子可能通過以上幾種途徑協助該內膜逃避機體的免疫監視，不被清除，并成功種植生長. 而對于沒有HLAG分子“保護”的正常子宮內膜異位后將會被機體的免疫系統所識別并清除. 這就可能解釋了為什么多數婦女有經血反流現象，但只有少數人發展成為內異癥. 由此可見內異癥患者在位子宮內膜是不同于正常子宮內膜的

8、，在位子宮內膜中異常表達的HLAG分子可能使其具有異位種植生長的潛能，對于內異癥的發生起到一定的作用. 我們還發現內異癥異位子宮內膜HLAG抗原的陽性表達率（53%）顯著性高于對照組正常子宮內膜. 此實驗結果與Barrier等6的最新研究結果是一致的. 但Hornung等7在內異癥患者異位內膜中并未檢測到HLAG分子的表達，這可能是由于研究對象的選擇和樣本量過小造成的差異. 內異癥異位內膜HLAG的陽性表達率略高于其在位內膜，推測可能在腹腔內某些細胞因子的作用下，使脫落后異位種植的內膜即異位內膜HLAG的表達得以上調. 也有相關研究已證實某些細胞因子如IFN和IL10可以刺激細胞表達HLAG8

9、-9. 而在位子宮內膜與異位子宮內膜HLAG抗原的陽性表達率無顯著性差異，說明在位內膜的異常可能才是導致內異癥發病的主要原因，也進一步論證了“在位內膜決定論”這一新學說. 有研究發現HLAG分子也異常表達于某些腫瘤細胞如腎細胞癌10和基皮細胞癌11，說明內異癥在其免疫發病機制上與腫瘤細胞的種植免疫可能相類似. 這可能也是內異癥表現的臨床生物學行為與惡性腫瘤相似的原因. 因此我們認為，HLAG分子的表達可能導致清除逆流子宮內膜碎片的能力下降，使子宮內膜細胞得以黏附、種植和生長，從而增加內異癥發生、發展的可能性. 【參考文獻】 1冷金華，郎景和. 腹腔鏡手術治療子宮內膜異位癥J. 中國實用婦科與產

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