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文檔簡介
1、實驗四斐林試劑法測定果品蔬菜中還原糖含量一、實驗目的:掌握園藝產品中糖的測定方法。二、實驗原理利用糖的還原性,與斐林試劑(氧化劑)中的二價銅離子還原為一價銅,進行氧化還原 反應,而進行測定。非還原糖必須轉化為還原糖,再進行測定。斐林試劑中酒石酸鉀鈉銅是一種氧化劑,反應的終點可用次甲基藍作指示劑,在堿性、沸 騰環境下還原呈無色。根據斐林試劑完全還原所需的還原糖量,計算出樣品還原糖量。三' 試劑與材料1、斐林試劑甲:69.3g CuSO 4.5H2O加水溶解并定容至1000ml ;乙:346g酒石酸鉀鈉+100gNaOH加水溶解并定容至1000ml ;2、1%次甲基藍,1g次甲基藍加水溶解
2、并定容至100ml,棕色瓶保存;3、0.2%標準葡萄糖,2g 105 C烘干到恒重的葡萄糖加水定容到1000ml ;4、堿式滴定管;5、電爐,各種玻璃器皿。四' 操作方法1、斐林試劑標定取甲液5ml加入5ml乙液中,置于250ml三角瓶中,加入水10ml ,從滴定管中加入0.2%的標準葡萄糖若干毫升(約23ml ) o (量控制在后滴定時消耗葡萄糖在電爐上加熱至沸,并保持微沸2分鐘,加2滴1%次甲基藍溶液,趁沸以每兩秒1滴的速度繼續滴加葡萄糖標準溶液,用0.2%標準葡萄糖滴定至藍色消失,有紅棕色沉淀,溶液清 亮為終點止。記錄耗用的葡萄糖量為Vo,必須在內完成。(注意:還原的次甲基藍易被
3、空氣中的氧氧化,恢復成原來的藍色,所以滴定過程中必 須保持溶液成沸騰狀態,并且避免滴定時間過長。)2、樣品滴定預備試驗同上法取斐林試劑,加10ml樣品液,搖勻于電爐上加熱至沸,保持微沸2分鐘,加2滴 1%次甲基藍,用0.2%葡萄糖滴定至藍色消失。記錄耗用的葡萄糖量為W。3、樣品滴定同上法吸取斐林試劑加10ml樣品液(預先稀釋),補加(Vo-V 1) ml水,并從滴定管 中預先加入(Vi-1) ml 0.2%葡萄糖,搖勻至電爐上加熱至沸,保持2min微沸,加入2滴 1%次甲基藍,繼續用葡萄糖滴定至藍色消失。記錄消耗的標準葡萄糖體積為V毫升。五' 結果計算還原糖含量(以葡萄糖計)(g/ml) Gvov) xQ.002 xi/io >n式中:Vo斐林試劑標定值,mlV樣品糖液測定值,ml0.002標準葡萄糖溶液濃度,g/mli0樣品糖液體積,mln樣品稀釋倍數六、思考題:1、還原糖測定方法有哪些?2、總結本實驗方法測定還原糖應注意哪些事項?學習課件
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