1、紫外可見分光光度計的原理與使用方法目錄目錄 紫外可見分光光度計的原理 紫外可見分光光度計的組成結構 紫外可見分光光度計的操作步驟 紫外可見分光光度計的校準 紫外可見分光光度計的日常維護，保養 紫外可見分光光度計的常見故障排除 紫外可見分光光度計的紫外可見分光光度計的原理原理它是利用物質的分子或離子對某一波長范圍的光吸收作用，對物質進行定性分析，定量分析及結構分析，所依據的光譜是分子或離子吸收入射光中特定波長的光而產生的吸收光譜。按照所吸收光的波長區域不同，分為紫外分光光度法和可見光光度法，合稱為紫外-可見分光光度法紫外可見分光光度計的紫外可見分光光度計的特點特點1 與其它光譜分析方法相比，其儀

2、器設備和操作都比較簡單，費用少，分析書讀快。2 靈敏度高3 選擇性好4 精密度和準確度較高5 用途廣泛 紫外可見分光光度計的紫外可見分光光度計的組成結構組成結構光源單色器吸收池檢測器信號顯示系統 組組 成成 結結 構構光源：提供符合要求的入射光。要求：在整個紫外光區或可見光譜區可以發射連續光譜， 具有足夠的輻射強度、較好的穩定性、較長的使用壽命。紫外光源-氘燈(185-375 nm)可見光源-鎢燈(320-1000nm) 光光 源源q 單色器：將光源發射的復合光分解成連續光譜并可從中選出任一波長單色光的光學系統。q 棱鏡單色器 利用不同波長的光在棱鏡內折射率不同將復合光色散為單色光。q 光柵單

3、色器 一系列等寬、等距離的平行狹縫 以光的衍射現象和干涉現象為基礎（平面反射光柵和平面凹面光柵） 單單 色色 器器q 單色器主要由狹縫、色散元件和透鏡系統組成。 色散元件是棱鏡和反射光柵的組合 狹縫和透鏡系統控制光的方向q 吸收池：又叫比色皿，用于盛放待測溶液和決定透光液層 厚度的器件。q 主要有石英吸收池和玻璃吸收池兩種。q 在紫外區須采用石英吸收池，可見區一般用吸收玻璃池。吸吸 收收 池池q 主要規格0.5cm、1.0cm、2.0cm、3.0cm和5.0cm注意事項：手執兩側的毛面，盛放液體高度四分之三。q 檢測器：利用光電效應將透過吸收池的光信號變成可測的電信號。q 常用的檢測器有光電池

4、、光電管及光電倍增管。檢測器檢測器 光電池 光電管 光電倍增管 信號顯示器q 以檢流計或微安表指示儀表q 數字顯示和自動記錄型裝置 信號顯示系統信號顯示系統紫外可見分光光度計的操作步驟紫外可見分光光度計的操作步驟p 打開電源開關p 檢驗吸收池的成套性 （具體過程在后面內容中操作）p 選擇工作波長（按設定鍵，以及增加、減小按鈕，進行設定） p 潤洗比色皿，依次裝入參比溶液和測量溶液 p 參比溶液于光路中，透射比模式下同時調0和100%p 在吸光度模式下，測定測量溶液的吸光度 p 選擇測量方式（按方式鍵選擇透射比模式與吸光度模式） 同學們根據教師的要求用白紙片遮住光路，改變波長從750nm到400

5、nm，觀察白紙片中顏色的變化。 波長準確度的準確檢查譜釹濾光片吸收曲線苯蒸汽的吸收曲線紫外可見分光光度計的校準（一）紫外可見分光光度計的校準（一） 波長 /nm 溫度 /2352573133502518.213.751.322.9 的溶液的透射比%006000. 0722OCrKW以0.001mol.L-1HClO4為參比，以1cm的石英比色皿做吸收池，分別在235、257、313、350波長處測定相應溶液的透射比。紫外可見分光光度計的校準（二）紫外可見分光光度計的校準（二）透射比正確度的檢驗JJG178-96規定 ：石英吸收池：220nm、蒸餾水； 350nm、 K2Cr2O7 0.001mol.L-1HClO4溶液； 玻璃吸收池：600nm、蒸餾水；相對校正法：用一套比色皿裝待測試樣的溶劑，以其中一個為參比，測定其他吸收池的吸光度。 若吸光度為零，或相等，即可配對。若不相等，可選最小吸光度值的作參比，測定其它的吸光度，求修正值。紫外可見分光光度計的校準紫外可見分光光度計的校準( (三三) )吸收池成套性檢驗 q 對儀器工作環境的要求 穩固的工作臺 溫度、濕度合適 q 儀器保養和維護方法 儀器工作電源 光源使用注意事項 單色器使用注意事項 正確使用吸收池紫外可見分光光度